学术投稿

抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

朱平;唐磊;赵善超;卢晓;候凡凡;富宁

关键词:RAGE胞外段, 单克隆抗体, 远隔表位
摘要:目的制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体.方法用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23~342)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和两次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.结果和结论获得两株杂交瘤细胞B2.2和E10,其分泌单抗的亚型均为IgG2b.经ELISA、Western blot和流式细胞仪鉴定,证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE,且两株抗体识别的位点为远隔表位,所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE.这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 肺炎链球菌触发肺Ⅱ型上皮细胞微丝肌动蛋白重排的钙信号转导机制

    目的通过体外实验研究肺炎链球菌(S.pn)是否可通过肺型上皮细胞(A549)钙信号转导途径触发微丝肌动蛋白(F-actin)细胞骨架重排,进而导致S.pn对A549细胞的侵袭.方法采用F-actin特异性FITC-phalloidin荧光染料,观察S.pn作用A549细胞前后F-actin细胞骨架重排情况,以重排百分率表示:用F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D预处理A549细胞,观察S.pn对A549细胞的侵袭;使用Ca2+信号转导抑制剂dantrolene预处理A549细胞,观察其与F-actin细胞骨架重排百分率间是否存在剂量依赖关系;用Fura-2/AM荧光探针负载A549细胞后测定S.pn粘附A549细胞30、60、90 min的胞内[Ca2+].结果S.pn作用A549细胞后,经FITC-phalloidin荧光染色,F-actin细胞骨架呈黄绿色块状聚集;F-actin细胞骨架重排抑制剂细胞松弛素D可明显降低S.pn对A549细胞的侵袭,在其浓度为0.25μg/ml时,未得到可测的细菌数;Ca2+信号转导抑制剂可部分抑制A549细胞F-actin细胞骨架重排,且与F-actin细胞骨架重排百分率间存在量效关系;S.pn粘附A549细胞30、60、90 min后的胞内[Ca2+]i高于对照[(187.4±173 nmol/L)],并达到饱和,分别为(487.5±38.1)、(548.2±35.6)和(557.2±47.5)nmol/L.结论S.pn可通过Ca2+细胞信号转导途径触发A549细胞F-actin细胞骨架重排,进而导致S.pn侵袭A549细胞.

    作者:徐邦牢;尹一兵 刊期: 2004年第02期

  • 成年大鼠纹状体神经干细胞的体外培养及分化

    目的探讨成年大鼠纹状体神经干细胞多向分化的可能性.方法分离成年大鼠纹状体神经干细胞,单克隆连续传代培养并诱导分化,将分化产物进行免疫细胞化学染色及RT-PCR检测分析.结果无血清单克隆培养时期可见大量的细胞团出现,以血清诱导分化后出现多种细胞类型,免疫细胞染色发现分化细胞中有Nestin阳性、NSE阳性、GFAP阳性细胞,RT-PCR法分析mRNA水平有脑因子-1、γ-氨基丁酸α-受体γ-亚单位、酪氨酸羟化酶及色氨酸羟化酶等基因的表达.结论成年大鼠纹状体内分离出的干细胞样细胞具有自我增殖和多向分化潜能.

    作者:王彦惠;刘亚杰;卢洪流;刘振华;姜晓丹;徐如祥;周振军;邹雨汐;陈一招 刊期: 2004年第02期

  • 湿热环境下Ⅱ度烫伤大鼠施行冷却疗法后体核温度的改变

    目的观察在湿热环境下大鼠浅Ⅱ度烫伤创面即刻施行冷疗后体核温度的变化,同时评价冷疗敷料方法的降温效果.方法24只Wistar大鼠随机分成4组,即常温常湿对照组、常温常湿冷疗组、湿热对照组和湿热冷疗组,每组6只.制作浅Ⅱ度烫伤模型后分别采取不同的干预条件,常温组的实验环境条件为干球温度(Tdb)(2633±1.29)℃、相对湿度(rh)(71.05±4.57)%,高对组和高冷组的实验环境条件为Tdb(3533±035)℃、rh(70.81±138)%,常对组和高对组不给予冷疗降温,常冷组和高冷组给予腹部冷疗敷料降温.暴露时间均为120min.监测直肠温度(Tr),每20min记录1次.结果4组组内7个时间水平之间、时间水平组间及不同组间比较,湿热环境下大鼠Tr显著增高(P<0.001);冷疗组与对照组相比,Tr均有显著性降低(P<0.001),且环境温度和冷疗对Tr变化影响有交互作用(P=0.003).随时间变化,Tr的变化趋势为常对组Tr缓慢下降、常冷组Tr有高低波动、湿热两组的Tr逐渐增加,Tr差值随时间逐渐增大.结论湿热复合因素使烫伤大鼠的Tr逐渐增高;腹部冷疗敷料降温方法能有效降低大鼠的Tr,阻止热损伤的进程,实验证明腹部冷疗敷料降温是降低体温的较好方法.

    作者:李亚洁;张立颖;罗炳德;李亦蕾;林妮 刊期: 2004年第02期

  • 膀胱原发性粘液腺癌1例报告

    原发于膀胱的粘液腺癌十分少见,现将我科近期诊治的1例报告如下.1 临床资料患者男,49岁.排尿困难,肉眼血尿,少尿伴颜面浮肿、呕吐2月余.病人入院前1个月在外院检查发现:血尿素氮47.51 mmol/L,血肌酐1 429μmol/L,B超示双输尿管全程扩张并双肾积液,膀胱内异常回声.在外院行经皮双肾穿刺造瘘术,术后肾功能有所恢复.入院查体:双肾区、输尿管区无叩痛、压痛.膀胱镜检查见肿物边界不规整,基底广,触之易出血,前列腺尿道部、膀胱三角区均可见肿物,无法找到双侧输尿管口.胸片未发现明显异常.检验:血尿素氮12.1 mmol/L、血肌酐301 μmol/L、前列腺特异性抗原(PSA)0.87ng/ml、胃肠癌相关抗原(CA-199)0.08 U/ml、血清癌胚抗原(CEA)1.8μg/L、甲胎蛋白(AFP)13 μg/L.

    作者:张鹏;郑少斌;刘成山;张辉见 刊期: 2004年第02期

  • 利多卡因对脑肿瘤患者麻醉诱导时脑氧供需平衡和血液动力学的影响

    目的研究全麻诱导中利多卡因对幕上肿瘤患者气管插管时脑氧供需平衡、能量代谢和血液动力学的影响.方法将24例幕上肿瘤患者随机分为利多卡因组(A组,n=12)和空白对照组(B组,n=12).在麻醉诱导前和气管插管即刻采取颈内静脉球部静脉血和桡动脉血,进行血气分析、乳酸和血糖测定.结果A、B两组气管插管时较插管前脑氧摄取率、静动脉乳酸含量差下降;颈内静脉球部氧饱和度、动脉氧饱和度、动脉氧分压、颈内静脉球部氧分压、颈内静脉球部氧含量升高.组间比较血气指标在插管时-诱导前的变化仅颈内静脉球部氧分压有统计学意义.诱导期间A组血液动力学变化小于B组.结论(1)利多卡因对幕上肿瘤患者麻醉诱导时脑氧供需平衡的变化无明显影响:(2)利多卡因能有效抑制脑肿瘤患者诱导时气管插管时血液动力学反应.

    作者:李申一;徐世元;叶小平;许睿;余楠;许平;侯景利 刊期: 2004年第02期

  • 吲哚美辛抑制结肠癌移植瘤生长和微血管形成的实验研究

    目的研究非甾体抗炎药吲哚美辛对人结肠癌HCT116移植瘤生长和微血管形成的影响.方法建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型.随机分组:治疗组喂服吲哚美辛(3mg·kg-1·d-1),对照组给予相应体积溶剂(0.2%二甲亚砜-生理盐水溶液).4周后处死动物,采用免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD)及肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,鼠抗人CD34标记微血管.结果治疗组与对照组皮下移植瘤体积分别为(458.89±32.07)mm3和(828.21±31.59)mm3(P<0.05),治疗组肿瘤生长受到明显抑制;瘤组织中MVD分别为19.50±5.32和37.40±4.93(P<0.001),VEGF的表达强度分别为1.19±0.17和1.90±0.48(P<0.01),MVD与VEGF变化呈正相关(r1=0.714,P<0.05).实验结束时未见明显毒性反应.结论吲哚美辛能通过抑制肿瘤微血管形成发挥抗瘤作用,其机制可能与抑制VEGF的表达有关.

    作者:王红梅;张桂英 刊期: 2004年第02期

  • 聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球的制备与表征

    目的制备聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)磁性纳米球.方法乳化聚合法制备磁性纳米球的悬浮液,光子相关光谱仪和透射电镜测定磁性纳米球的粒径及其分布;紫外分光光度法测定磁性纳米球中Fe含量.结果获得了水溶性正癸酸稳定的Fe3O4磁流体的粒径及其分布,以及载体浓度与稳定剂浓度对磁性纳米球粒径及其分布的影响.结论首次在pH=6.3~6.4条件下用乳化聚合法制备了PBCA磁性纳米球的稳定悬浮液.

    作者:任非;陈建海;姜耀东;陈志良 刊期: 2004年第02期

  • 抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

    目的制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体.方法用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23~342)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和两次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.结果和结论获得两株杂交瘤细胞B2.2和E10,其分泌单抗的亚型均为IgG2b.经ELISA、Western blot和流式细胞仪鉴定,证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE,且两株抗体识别的位点为远隔表位,所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE.这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具.

    作者:朱平;唐磊;赵善超;卢晓;候凡凡;富宁 刊期: 2004年第02期

  • 结肠造瘘与埋植式药泵治疗晚期直肠癌

    我科自1993年以来收治直肠癌患者68例,其中手术中探见肿瘤局部已广泛浸润且难以根治切除但无远处转移晚期直肠癌13例,采用结肠造瘘与埋植式药泵综合治疗,收到较好临床疗效,现报告如下.

    作者:邓群峰;肖建秋;许辉;刘训;李轶辉 刊期: 2004年第02期

  • 高血压对冠状动脉形态的影响(附203例报告)

    目的初步探讨高血压病人冠状动脉造影血管形态特点.方法选取1999年11月~2001年11月在我院怀疑为冠心病的203例病人(男159例、女44例,年龄29~75岁),详细询问病史、症状以及进行冠状动脉造影,并分为高血压组与血压正常组进行比较.结果高血压组患者血管弯曲数为5.7±1.2,血压正常组为3.1±0.8,两者比较有明显差异(P<0.01).同时高血压组病人分叉部位病变占本组病变的34.5%,而血压正常组病人分叉部位病变仅占本组病变的23.1%,两者比较有明显差异(P<0.01).结论高血压病人冠状动脉有弯曲较多及分叉病变较多的特点.

    作者:杨希立;陈军;周颖玲;黄文晖;罗建方;李光 刊期: 2004年第02期

  • 异体手移植术后ATG治疗过程中T淋巴细胞亚群的监测(附3例报告)

    目的探讨异体手移植中使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)治疗时T淋巴细胞亚群监测对于指导药物用量、减少并发症和减少治疗费用的意义.方法通过流式细胞仪测定我院完成的3例异体手移植患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD28、CD4/CD8)的变化.结果使用ATG治疗期间CD3、CD4、CD8均明显下降,3例患者无明显差异;ATG治疗后外周血中淋巴细胞长期持续改变.结论通过T淋巴细胞亚群的监测了解患者应用ATG后免疫状态,有利于调整ATG用量,预防并发症的发生.

    作者:相大勇;裴国献;裘宇容;顾立强;朱立军;王刚 刊期: 2004年第02期

  • 国际肿瘤分类编码质量的相关研究

    目的探讨提高国际疾病分类(ICD)中原发恶性肿瘤编码质量的方法及其可行性和必要性.方法分析26 922例肿瘤诊断中肿瘤部位编码(C码)与肿瘤形态学编码(M码)的编配情况,发现错误,找出原因.结果在检索结果中,有5 329例错误的C码与M码的编配,占全部编码的19.79%,成因复杂.结论现行的编码操作方式有待改进,且在目前的技术条件下,完全有可能找到更科学的ICD肿瘤编码的计算机录入方式.

    作者:李蕊;郝珍;刘克新 刊期: 2004年第02期

  • 血液净化对慢性肾功能衰竭患者全段甲状旁腺激素的影响

    目的研究血液灌流和/或血液透析对慢性肾功能衰竭(CRF)患者全段甲状旁腺激素(iPTH)的影响.方法用放射免疫测定法检测40例规律血液透析患者治疗前后iPTH水平.结果血液灌流和/或血液透析后iPTH水平均降低,但血液灌流组降低幅度大于血液透析组(P=0.031).结论血液灌流加血液透析能比单纯血液透析更有效地降低CRF患者iPTH水平.

    作者:刘俊;刘志强;陶惠琴 刊期: 2004年第02期

  • 经动脉栓塞治疗鼻咽颌面部大出血的临床应用

    目的回顾性分析经动脉栓塞治疗鼻咽颌面部大出血的疗效和安全性.方法鼻咽颌面部大出血42例,均经股动脉插管入颈内动脉造影.根据造影情况和临床出血部位,应用明胶海绵颗粒、PVA颗粒和弹簧圈等栓塞材料,分别行颈外动脉、颌内动脉、面动脉、枕动脉、蝶腭动脉、咽升动脉栓塞.结果42例患者均成功完成栓塞,一次栓塞止血成功率100%.随访3~12月,无复发,未出现严重并发症.结论经动脉栓塞治疗鼻咽颌面部大出血是一种安全、有效的治疗方法.

    作者:商健彪;李彦豪;陈勇;何晓峰;曾庆乐;王江云 刊期: 2004年第02期

  • 腹腔镜胃垂直间隔捆扎术治疗重度肥胖

    目的探讨腹腔镜胃垂直间隔捆扎术治疗重度肥胖的临床应用价值.方法回顾分析4例腹腔镜胃垂直间隔捆扎术,比较手术前后体质量等临床变化情况.结果成功完成4例腹腔镜胃垂直间隔捆扎术,无中转开腹,平均手术时间210min,术后恢复顺利,无并发症.术后随访24个月,体质量减轻超过了超重部分的50%.结论腹腔镜胃垂直间隔捆扎术治疗重度肥胖有效.

    作者:胡友主;王存川;陈鋆;徐以浩 刊期: 2004年第02期

  • 高温高湿环境下猫颅脑火器伤后细菌生长特点

    目的研究高温高湿环境下猫颅脑火器伤后创面及周围组织细菌生长特点.方法杂种猫23只随机分为常温枪伤对照组(伤后立即取材,A组)、常温枪伤组(伤后6 h取材,B组)、高温高湿枪伤组(伤后6 h取材,C组)和空白对照组(D组),分别取创面及周围组织进行细菌培养并计数.结果A、B、C组其创面组织、伤道壁5 mm内组织、伤道壁5~10mm内组织细菌含量无统计学差异(P>0.05),各组内随着离伤道距离的增加细菌含量减少(P<0.01).3组创面组织、伤道壁5mm内组织细菌含量与D组比较差异显著(P<0.01).结论高温高湿环境对颅脑火器伤6 h内的细菌生长情况无显著影响,颅脑火器伤后6 h内细菌繁殖未进入高速增长期,进行清创仍是安全的.

    作者:郭燕舞;朱红胜;徐如祥 刊期: 2004年第02期

  • 基于模糊聚类优化的序列图像快速分形压缩

    针对传统序列图像分形压缩算法编码时间过长的问题,提出了一种基于模糊聚类优化(OFC)的快速算法,它是一种基于单帧的序列图像帧间分形压缩算法.首先使用LBG(Linde-Buzo-Gray)方法对序列图像组成的搜索空间样本集进行初始化,然后将OFC方法应用于对样本集的软分类,匹配时通过用类内搜索取代全局搜索,将分形编码过程聚焦在有效的局部范围内,从而减少了匹配次数,降低编码时间.由于OFC算法是一种软分类方法,样本集类别数的确定即终聚类方案是取样本集所有可能的分割中对应于目标函数小者的分割,所以它不但是基于全局优的聚类方法,避免了基于局部优LBG算法中的某些误判,而且有效抑制了传统硬分类方法中类别数需预先指定的人为干扰因素,使恢复图像的质量能够得到更有效保证.相同运算环境下的仿真实验结果说明,在不影响信噪比和压缩比的前提下,与传统序列图像分形压缩算法相比,OFC算法编码速度可提高约5倍,证明了本算法的优越性.

    作者:梁斌;袁静;冯前进;陈武凡 刊期: 2004年第02期

  • 口服霍乱疫苗O139 rBS-WC后肠道菌群的改变

    目的观察国产冻干O139 rBS-WC口服霍乱疫苗对健康受试者肠道菌群的影响.方法利用直接快速涂片法分别于服苗前、服苗后2周末、服苗后3个月末收集受试者的粪便,检查粪便的细菌分布特点.结果共检查了458份粪便标本,服苗后细菌总数、G+b、G+c、G-c呈下降趋势,而G-b呈显著的增高趋势;口服疫苗后各免疫组之间及与安慰剂组比较,以G+b及G-c变化明显,其中0、14、28 d各服1粒O139 rBS-WC疫苗的免疫组与其他各组间的差异较大;各免疫组在不同采样时间,肠道菌群值有不同的改变,以G-b表现明显.不同性别的受试者在服苗后,G+b、G-b、G-c占总菌群数比值的改变有统计差异.结论冻干口服O139霍乱rBS-WC疫苗对受试者的肠道菌群有一定的影响.

    作者:吴辉绪;陈清;李建栋;黄秀芬 刊期: 2004年第02期

  • 腹部大器官联合移植的临床研究

    目的探讨腹部大器官联合移植治疗腹部多器官功能衰竭的效果.方法2例Ⅰ型糖尿病并发尿毒症患者施行改良式胰液肠腔引流胰、十二指肠及肾一期联合移植,1例高龄酒精性肝硬化终末期并慢性肾功能不全尿毒症患者施行一期肝肾联合移植,1例慢性乙型病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝细胞癌合并胰岛素依赖型糖尿病患者施行同期原位肝-异位胰十二指肠联合移植,观察其临床疗效.结果2例胰肾联合移植患者术后第5天肾功能恢复正常,术后第10天停用胰岛素,2例均分别于术后20、22d出现消化道出血,经止血治疗后痊愈;肝肾联合移植患者术后第3天移植肝肾功能正常,术后第10天移植肝发生急性排斥反应,抗排斥治疗后逆转;肝胰联合移植患者术后第5天停用胰岛素,移植肝功能恢复正常.4例患者分别随访29、26、9、6月,移植物功能均正常.结论腹部大器官联合移植是腹部多器官功能衰竭的有效治疗方法,肝胰联合移植可减少胰腺的排斥反应,促进移植肝功能恢复.

    作者:于立新;刘小友;徐健;邓文锋;叶桂荣;付绍杰;杜传福;马俊杰 刊期: 2004年第02期

  • 赛尼哌结合抗胸腺细胞球蛋白免疫诱导在心脏移植中应用的临床经验(附8例报告)

    目的总结本组8例心脏移植受者应用免疫诱导方案治疗的临床经验.方法8例终末期扩张型心肌病患者接受同种异体原位心脏移植术,免疫诱导采用术前12 h内及术后第14天2剂赛尼哌1.0 mg/kg(抗白介素-2受体抗体)结合术后前5 d 5剂抗胸腺细胞球蛋白(ATG)100 mg/d的方法,免疫抑制维持治疗采用环孢素A(或他克莫司)+骁悉(或硫唑嘌呤)+泼尼松三联方案.结果全组无死亡,移植后早期心内膜心肌活检无明显急性排斥反应,无移植物功能不全,无明显急性肾功能不全;3例发生机会性感染,1例远期发生急性排斥反应.结论心脏移植围术期采用2剂赛尼哌结合5剂ATG进行免疫诱导治疗方案能有效预防移植心脏急性排斥反应和减少器官功能损害,但可能增加感染的发生率.

    作者:黄雪珊;陈道中;陈良万;李增棋;廖崇先 刊期: 2004年第02期

南方医科大学学报杂志

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主管:广东省教育厅

主办:南方医科大学