学术投稿

基因芯片筛选大肠侧向发育型肿瘤相关基因的初步研究

王新颖;姜泊;赖卓胜;马文敏;耿焱

关键词:基因芯片, 侧向发育型肿瘤, 大肠, 基因, 差异表达
摘要:目的应用基因芯片初步筛选大肠侧向发育型肿瘤(LST)相关基因,为进一步研究大肠癌的发病机制提供新的思路和线索.方法抽提大肠侧向发育型肿瘤癌细胞株、SW480细胞株、LoVo细胞株的总RNA并纯化mRNA;将18 816种人类基因及LST片段PCR产物用Biorobotics公司的BG600点样仪点样于纤维膜上,制成基因芯片.将3个样品的mRNA分别逆转录合成探针并33P标记,同芯片杂交.严格洗片后Fuji film公司FLA 3000扫描仪扫描芯片信号图象,ArrayGauge1.0软件分析比较3种细胞株中差异表达基因.结果和结论在18 816种人类基因中存在着一系列LST同普通大肠癌细胞株之间的差异表达基因.在本研究中共有差异表达基因97个,其中共上调58个,共下调39个.表明其可能存在不同的肿瘤发生机制,故进一步研究其相关基因,在分子水平上阐明其发生机制及与大肠癌的关系具有重要意义.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 宫颈癌发病年龄与预后的关系(附93例分析)

    目的探讨宫颈癌发病年龄与临床预后的关系.方法回顾南方医院1997年1月~2002年12月收治的宫颈癌93例,分为年轻组(≤35岁)和中老年组(>35岁),进行临床分期、病理组织学、细胞分化等临床资料对比分析.结果两组患者在临床分期、组织学上有统计学差异.≤35岁组:≤Ⅱa期占82.61%,≥Ⅱb期占17.39%,磷癌占86.67%,腺癌占13.39%;而>35岁组:≤Ⅱa期占便51.43%,≥Ⅱb期占48.73%,磷癌占82.98%,腺癌占17.02%.细胞分化程度分析,≤35岁组和>35岁组经统计学处理无显著性差异.结论>35岁组宫颈癌患者具有临床期别较高、腺癌较多的不良预后因素.年轻宫颈癌患者预后较好.

    作者:周瑞丽;刘国炳 刊期: 2004年第09期

  • 珍珠层/聚乳酸重组人工骨修复动物骨干缺损的实验研究

    目的探讨珍珠层/聚乳酸重组人工骨(NPCB)在体内的生物相容性、降解情况及成骨特点,评价其性能,为进一步的应用提供实验依据.方法将NPCB随机植入成年新西兰白兔1.5 cm的桡骨缺损内,并设立不植入任何材料的空白对照,观察NPCB植入后动物的局部反应,检测动物术后1周、4周的血钙值,并与术前1天比较;于术后6、8、12、16周取材,作X线、骨矿含量、大体标本及组织形态学观察,分析不同时期组织反应、骨缺损修复及材料降解情况.结果NPCB植入后无明显的局部不良反应,术后1周、4周血钙值与术前1天相比无明显差异.植入NPCB的骨缺损内骨矿含量在6~12周时升高幅度明显高于空白对照组,但12周后植入NPCB的骨缺损内骨矿含量出现下降.X线检查、大体标本及组织形态学观察显示NPCB的成骨方式主要是骨传导成骨,至术后16周时骨缺损基本修复,NPCB与宿主骨结合紧密,而空白对照骨缺损断端仅有少量骨修复,形成骨不连.NPCB植入后即开始其降解过程,12周以后材料周围出现较多吞噬有材料颗粒的巨噬细胞和多核巨细胞,16周时仍有部分材料未降解吸收.结论NPCB具备良好的生物相容性和骨传导能力,可以在体内逐渐发生生物降解.

    作者:刘金标;廉维;陈建庭;金大地;权毅;潘显明 刊期: 2004年第09期

  • 两株诺瓦克样病毒新亚型的鉴定

    目的对在广州检出的人类杯状病毒(HuCVs)毒株进行分子生物学鉴定,以确定其是否为新亚型.方法选择检出的HuCVs进行克隆、转化和序列分析,使用PHYLIP进行核酸序列同源性比较,经Treeview1.5绘制进化树.结果206份病毒性腹泻标本检出HuCVs18份,检出率为8.74%(18/206),经序列分析证实均为NVs GⅡ毒株.任选其中6株进行PCR产物的克隆和测序,与GenBank中的参考株比较并绘制遗传进化树,其中HuCV/NVGⅡ003/2003/CHN(32282)、HuCV/NVGⅡ004/2003/CHN(32283)与基因文库中病毒的高同源性分别为83%和87%.结论广州存在其他国家或地区没有报道过的诺瓦克样病毒新亚型毒株.

    作者:戴迎春;聂军;刘翼;李志峰;白杨;李建栋;俞守义;江熙 刊期: 2004年第09期

  • 应用Super SMART cDNA合成技术扩增哮喘嗜酸性粒细胞总RNA

    目的应用Super SMART cDNA合成技术从嗜酸细胞微量总RNA扩增大量双链cDNA.方法利用Percoll密度梯度离心分离哮喘病人血嗜酸性粒细胞,用Trizol试剂盒提取细胞总RNA,利用Super SMART cDNA合成技术合成cDNA第1链及优化扩增第2链.通过梯度电泳鉴定cDNA产品质量,通过对获得的cDNA定量来评估扩增效能.结果从20 ng总RNA成功扩增出双链cDNA 7.155μg,电泳结果显示cDNA质量及纯度较高.结论Super Smart cDNA合成技术可实现从微量总RNA高效扩增高质量的cDNA,为进一步从基因水平研究哮喘机制奠定了基础.

    作者:赵海金;蔡绍曦;邹飞;佟万成;万为人 刊期: 2004年第09期

  • B超诊断双侧甲状旁腺腺瘤1例

    甲状旁腺机能亢进的病人大部分有甲状旁腺腺瘤,但95%发生在一侧,双侧同时发生甲状旁腺腺瘤者较为少见.1临床资料患者男,52岁,因无明显诱因感全身乏力、行走乏累、上楼时更加明显,左足底疼痛、以足底骨部位明显、碰到硬物时加重而来院就诊.查体未发现颈部包块,实验室检查:血钙增高,血磷降低,甲状旁腺激素明显增高.

    作者:王春美;郑晓娴 刊期: 2004年第09期

  • 腹腔镜在宫外孕合并宫内孕治疗中的应用(附5例报告)

    目的探讨微创技术中的腹腔镜手术在治疗宫外孕合并宫内孕中的价值.方法对应用电视腹腔镜技术切除异位妊娠组织或患侧输卵管的宫外孕合并宫内孕的5例患者的临床资料进行总结.结果腹腔镜下均成功切除了异位妊娠病灶或患侧输卵管,宫内妊娠得以继续.结论腹腔镜手术治疗宫外孕合并宫内孕是一种安全可行的治疗方法,具有损伤小、恢复快、对宫内妊娠干扰小等优点.

    作者:张广亮;黄琦丽;邢福祺 刊期: 2004年第09期

  • TP方案治疗难治性晚期食管鳞癌的临床观察

    目的观察国产紫杉醇(TAX)联合顺铂(PDD)组成的TP方案治疗难治性晚期食管癌的疗效及其不良反应.方法64例经PF方案化疗2周期后无效的难治性Ⅳ期食管鳞癌患者,应用TP方案化疗,即紫杉醇175 mg/m2,静脉恒速滴注3 h,d1;顺铂30 mg/d,静脉滴注,避光,d2~6;28 d为1个周期,连用3个周期后评价近期疗效及不良反应.结果全组64例患者共完成TP方案化疗192周期,均可评价疗效,共获得CR 9例、PR 29例、SD 12例、PD 14例,客观有效率为59.4%,中位缓解期为4.8个月,中位TTP为4.4个月,中位生存期为9.8个月(4~28个月).主要不良反应为骨髓抑制.结论TP方案治疗难治性晚期食管鳞癌近期疗效肯定,不良反应可以耐受,值得临床进一步研究.

    作者:杨义明;张水兰;宋华勇;李旭 刊期: 2004年第09期

  • 基于Intel RNG的真随机数生成器研究

    目的构建基于特定Intel芯片组中random number generator(RNG)单元的真随机数生成器.方法在Intel 815E芯片组的个人电脑上安装Intel Security Driver(ISD)后,使用Microsoff Visual C++6编程,通过寄存器读取的方式获取RNG中的随机数.结果生成的500个随机数通过的NIST FIPS 140-1和x2拟合优度检验(α=0.05),表明本方法所生成的随机数满足独立性和分布均匀性的要求.生成7500个随机数经域值变换后与随机数表中的同等数目的随机数进行了统计学比较,结果显示前者的均值偏移、SD,SE和CV均小于后者.结论基于IntelRNG的真随机数生成器可以生成满足独立性和分布均匀性的真随机数,生成的随机数效果与随机数表中的随机数没有显著性区别.但是基于IntelRNG的真随机数生成器能解决使用随机数表获取随机数中可能存在的问题,具有较好的普遍性和实用性.

    作者:黄枫;申洪 刊期: 2004年第09期

  • 保和丸剂型改革的提取工艺优化

    目的对传统中药保和丸剂型改革的提取工艺进行研究.方法以保和丸中主要成分总黄酮保留率和药效学试验结果为指标,考察不同提取工艺路线的合理性.结果处方中含挥发性成分药材经二氧化碳超临界萃取后,萃取药渣再与其余药材合并水提的工艺路线,总黄酮的提取率和药效佳.该提取工艺所得剂型在小鼠小肠炭末推进与胃排空等药效学指标上,均优于保和丸.结论超临界二氧化碳萃取和水提相结合的工艺路线,可作为保和丸剂型改革的提取工艺.

    作者:于红宇;刘中秋;姚育法 刊期: 2004年第09期

  • 小剂量G-CSF联合GM-CSF动员外周血CD34+细胞

    目的探讨小剂量粒单巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员外周血干细胞的效率.方法20例成人恶性血液病按统计学配对方法等分为2组.非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)患者化疗方案为环磷酰胺2.0 g/d,静脉滴注,第1~2天,足叶乙甙0.2 g/d,静脉滴注,第1~3天;急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者用阿糖胞苷2.0g/d,静脉滴注,第1~3天,足叶乙甙用法同NHL.当白细胞低于1.0×109/L时研究组10例应用GM-CSF2.5 μg/d·kg ·b.w.联合G-CSF 2.5 μg/d·kg·b.w.;对照组单用G-CSF 5 μg/d·b.w.,全部皮下注射5~6d.白细胞5.0×109/L以上时应用CS-3000 pluse分离外周血单个核细胞,流式细胞术计数CD34+细胞.结果产品细胞分类计数单个核细胞占95%~99%,在研究组CD34+细胞平均采集9.4(8.4~10.2)×106/kg·.w.,CFU-GM 42.4(21.9~72.8)×104/kg·b.w.,对照组平均采集CD34+细胞4.8(4.1~8.3)×106/kg·b.w.,CFU-GM 28.1(7.1~60.2)x104/kg·b.w.,2组差异显著(P<0.05).副作用2组相似.结论恶性血液病患者化疗后应用G-CSF联合GM-CSF动员CD34+细胞的效果优于单用G-CSF.

    作者:孟凡义;徐兵;孙竞;杨艺;牛京娜 刊期: 2004年第09期

  • 紫杉醇和吉西他滨对激素非依赖性前列腺癌的作用

    目的观察紫杉醇(PA)协同吉西他滨(GE)对前列腺癌细胞系PC-3的体内外作用,并探讨其可能约作用机制.方法应用光镜形态学、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了10-6、10-7、10-8 mol/L浓度PA和10-7、10-8、10-9mo1/L浓度GE在体外单药或协同对前列腺癌细胞系PC-3的作用、对细胞DNA含量及cyclinD1表达的影响.观察PC-3细胞荷瘤裸鼠单独及协同使用PA和GE前后的体质量、肿瘤质量、血清PSA和肿瘤PSA免疫组化的变化.结果10-8mol/L以上浓度GE作用48 h,可增强10-7mol/L以上浓度PA对前列腺癌PC-3细胞系的生长抑制[抑制率≥(50.8±4.2)%,P<0.05],增强诱导凋亡作用[凋亡率≥(22.9±2.3)%,P<0.05],下调Cyclin D1的表达[表达率≤(9.6±1.6)%],与阳性对照组cyclinD1表达率(25.5±4.1)%相比差异有显著性(P<0.01).GE使PA所致的G2/M期细胞周期阻滞比例由(70.3±9.7)%减至(38.2±4.2)%,部分地逆转了其G2/M期细胞周期阻滞(P<0.01).协同治疗前后裸鼠体质量无明显变化,但肿瘤质量(3.2.±0.5 g)、血清PSA[(51±14)ng/ml]和肿瘤PSA免疫组化的表达率[(30±3.7)%]在协同治疗组显著低于其他组(P<0.05或0.01).结论PA和GE可以在体内外协同增强对前列腺癌细胞系PC-3的生长抑制和诱导凋亡作用,显示了PA和GE协同用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性,并部分地解释了其作用机制.

    作者:孙明;杨宇如;李虹;陈一戎;王志平;卢一平;魏强;岳中瑾 刊期: 2004年第09期

  • 急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗对QT离散度的影响

    目的探讨经皮冠状动脉介入治疗对急性心肌梗死QT离散度的影响及其临床意义.方法回顾性分析资料较完整的急性心肌梗死紧急冠脉介入治疗患者138例,测算术前和术后第1天心电图QT间期、QT离散度、心率校正QT间期和心率校正QT离散度.病例分心肌梗死发病6 h内(72例)和6 h以上(66例)两组.结果两组QT间期和心率校正QT间期术后与术前相比均无显著性差异,但术后QT离散度和心率校正QT离散度较术前显著减小(P<0.01),且发病6 h内组显著小于发病6h以上组(P<0.05);两组住院期间死亡率分别为4.2%和7.6%(P=0.394).结论成功的介入治疗能显著减小心肌梗死患者的QT离散度,介入治疗施行越早则减小QT离散度的效果越好.

    作者:贝春花;罗义;李广镰;潘宜智;曾冲 刊期: 2004年第09期

  • 内含子和5'非翻译区对人血小板生成素基因表达的影响

    目的观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5'非翻译区对TPO表达的影响.方法分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量.结果在转染48 h后,各类TPO重组质粒在cos-1细胞中表达顺序为:TPOintron v>TPOcDNA>△TPOintronI>TPO intron l>TPO gDNA.结论在TPO基因组中,后一个内含子可显著提高TPO的表达水平,表明其可能含有特殊的增强序列;同时进一步证实,在TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达的结构元件,造成TPO基因组在细胞中不表达或低水平表达.

    作者:宁云山;李妍;周明乾;李明;曾溢滔;王小宁 刊期: 2004年第09期

  • 精子基因表达谱研究初探

    目的应用限制性显示技术,收集正常成年男性的精子基因表达谱探针,制备相应的精子表达谱芯片,以对成年男性正常精子的基因表达情况有一全面、系统的了解.方法提取成年男性正常精子的总RNA,逆转录为cDNA,经限制性内切酶酶切、加接头、PCR扩增、转化、克隆、鉴定等操作,收集成年男性正常精子的基因表达谱探针,制备相应的精子表达谱芯片,并进行初步的杂交分析.结果收集了1 859个基因片段,取其中368个基因探针制备芯片,进行了小量初试.结论证实在精子中有大量基因表达;提示我们自行制备的精子基因表达谱探针也具有较好的特异性和可信性.

    作者:毛向明;马文丽;冯春琼;邹亚光;郑文岭 刊期: 2004年第09期

  • 动静脉内瘘缝合术的改进

    目的探讨连续锁边缝合法吻合不同部位动静脉内瘘的临床效果.方法对160例慢性肾功能衰竭患者,分别在其不同的部位,采用连续锁边缝合法施行了动静脉内瘘吻合术.结果缩短了血管吻合时间,提高了一次性吻合成功率和手术成功率,减少了并发症,获得了满意的临床效果.结论连续锁边缝合法是一种良好的动静脉内瘘缝合技术,适应于不同部位的内瘘吻合,特别适于血管条件差的患者.

    作者:丰贵文;赵显国 刊期: 2004年第09期

  • 新生大鼠磷脂酶C-γ1 mRNA的表达变化

    目的探讨新生大鼠早期各主要脏器磷脂酶C-γ1(PLCγ1,基因为PLCG1)的mRNA表达状况.方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析大鼠出生后1、3、5、7 d及2、3、5周等7个时期肝、肺、肾和脑等4种脏器共28例样本的PLCG1的表达变化,以看家基因磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)为内参照,同步逆转录PLCG1特异性片段和内参片段,以二者积分吸光度比值作为PLCG1 mRNA的相对表达量.结果肝、肺、肾和脑4种脏器组织PLCG1在出生后早期的不同时期均有较强表达,并且各时期之间的表达有显著性差异(P均<0.01),第1天肝脏组织中PLCG1几乎没有表达,第7天脑组织的表达高;而在同一时期4种不同的组织间PLCG1的表达也有显著性差异(P均<0.01).结论同种脏器组织在不同的发育时期及在同一时期不同脏器组织之间PLCG1的差异性表达提示,PLCG1可能参与了大鼠早期生长发育过程中细胞的增殖与分化.

    作者:刘忠英;罗深秋;邓凡;赵永忠;李西平 刊期: 2004年第09期

  • 星形胶质细胞条件培养液对tbOOH致PC12 细胞凋亡的抑制作用

    目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物thOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响.方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流式细胞术测定细胞凋亡率的变化;用巴比妥酸法评估细胞内丙二醛含量的变化.结果tbOOH可诱导PC12细胞凋亡,而星形胶质细胞条件培养液可降低其凋亡;同时,巴比妥酸法显示星形胶质细胞条件培养液可显著性降低PC12细胞丙二醛含量(P<0.05).结论星形胶质细胞条件培养液有提高PC12细胞抗氧化能力,可抑制活性氧tbOOH诱导的神经细胞凋亡.

    作者:莫永炎;邢飞跃;张宝;陈瑗;姜勇 刊期: 2004年第09期

  • 重症产后尿潴留1例报告

    产后尿潴留如能及时得当处理,甚至可不必留置尿管.本例患者因未能早期诊断,延误了治疗,致使患者膀胱功能恢复困难,反复留置尿管长达50d之久,应引起医务人员警惕.

    作者:苏桂栋;宋天蓉;万淑梅;张莉英;余艳红 刊期: 2004年第09期

  • 非高血压左心室肥厚患者血清胰岛素水平的变化

    目的探讨非高血压左心室肥厚(LVH)与血清胰岛素水平变化的关系.方法测定42例非高血压LVH患者的血清胰岛素、血糖和空腹血脂水平;用超声测定并计算心脏左室质量(LVM)和左室质量指数(LVMI),并按心脏超声测定分为非高血压LVH和左室正常组.结果LVH组的空腹血甘油三酯和胰岛素分别高于左室正常组,而胰岛素抵抗指数(HOMA法)高于左室正常组.直线相关分析显示非高血压LVH组HOMA指数与LVM、LVMI正相关(r=0.38、P<0.01及r=0.29、P<0.01).结论非高血压LVH患者的高胰岛素血症与LVH有密切相关,高胰岛素血症可能参与非高血压LVH的发生和发展.

    作者:王旭开;杨成明;王燕;王红勇;付春江;方玉强;石伟彬;张晔;杜文华;李陶 刊期: 2004年第09期

  • ZD1839治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

    目的观察ZD1839治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副作用.方法以一定的标准选取32例晚期非小细胞肺癌病人,口服ZD1839治疗,90 d后观察其疗效及毒副反应.结果完全缓解(CR)0%,部分缓解(PR)18.75%,稳定(SD)37.50%,疾病控制率(CR+PR+SD)56.25%.毒副作用中,出现痤疮样皮疹10例(31.25%),腹泻6例(18.75%),转氨酶升高4例(12.50%),恶心、呕吐5例(15.63%),未发现间质性肺炎病例.结论ZD1839是一种新药,其疾病控制率和毒副作用对于肺癌患者来说是可以接受的,在治疗肺癌方面具有良好的前景.

    作者:张琳 刊期: 2004年第09期

南方医科大学学报杂志

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