学术投稿

内含子和5'非翻译区对人血小板生成素基因表达的影响

宁云山;李妍;周明乾;李明;曾溢滔;王小宁

关键词:血小板生成素, 内含子, 基因表达
摘要:目的观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5'非翻译区对TPO表达的影响.方法分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量.结果在转染48 h后,各类TPO重组质粒在cos-1细胞中表达顺序为:TPOintron v>TPOcDNA>△TPOintronI>TPO intron l>TPO gDNA.结论在TPO基因组中,后一个内含子可显著提高TPO的表达水平,表明其可能含有特殊的增强序列;同时进一步证实,在TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达的结构元件,造成TPO基因组在细胞中不表达或低水平表达.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 转染人pIgR的小鼠鼻咽上皮细胞在EBV感染前后基因表达谱差异

    目的应用cDNA阵列技术研究转染人多聚免疫球蛋白受体(hpIgR)的二亚硝基哌嗪(n,n'-dinitrosoperazine,DNP)转化的小鼠鼻咽上皮(TMNE)细胞系在EBV感染前后基因表达谱差异,探索EBV在鼻咽癌发病过程中的作用及鼻咽癌的发病机制.方法提取转染hpIgR的TMNE细胞在EBV感染前后的总RNA,逆转录成α-32p-dATP标记的cDNA探针,与AtlasTM mouse cancerarray1.2阵列膜进行杂交.利用AtlasImageTM软件分析基因表达差异.结果共有25个基因表达水平发生了改变,有23个基因表达上调,2个基因表达下调.结论EBV感染可使转染细胞的多个基因表达发生改变,这些基因可能与鼻咽癌的发生、发展有关.

    作者:王爽;吕丽春;李虹;江培洲;姚开泰 刊期: 2004年第09期

  • 保和丸剂型改革的提取工艺优化

    目的对传统中药保和丸剂型改革的提取工艺进行研究.方法以保和丸中主要成分总黄酮保留率和药效学试验结果为指标,考察不同提取工艺路线的合理性.结果处方中含挥发性成分药材经二氧化碳超临界萃取后,萃取药渣再与其余药材合并水提的工艺路线,总黄酮的提取率和药效佳.该提取工艺所得剂型在小鼠小肠炭末推进与胃排空等药效学指标上,均优于保和丸.结论超临界二氧化碳萃取和水提相结合的工艺路线,可作为保和丸剂型改革的提取工艺.

    作者:于红宇;刘中秋;姚育法 刊期: 2004年第09期

  • ZD1839治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

    目的观察ZD1839治疗晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副作用.方法以一定的标准选取32例晚期非小细胞肺癌病人,口服ZD1839治疗,90 d后观察其疗效及毒副反应.结果完全缓解(CR)0%,部分缓解(PR)18.75%,稳定(SD)37.50%,疾病控制率(CR+PR+SD)56.25%.毒副作用中,出现痤疮样皮疹10例(31.25%),腹泻6例(18.75%),转氨酶升高4例(12.50%),恶心、呕吐5例(15.63%),未发现间质性肺炎病例.结论ZD1839是一种新药,其疾病控制率和毒副作用对于肺癌患者来说是可以接受的,在治疗肺癌方面具有良好的前景.

    作者:张琳 刊期: 2004年第09期

  • 放大内镜及实体镜检查结肠肿瘤性病变(附139例报告)

    目的探讨如何通过放大内镜观察到的大肠粘膜腺管开口类型发现早期大肠癌及癌前病变.方法2001年8月~2002年2月结肠镜检查139例大肠病变,采用内镜下粘膜染色技术,结合放大内镜、实体显微镜观察腺管开口分型(pit分型)并与病理诊断对照,pit分型采用工藤分型.结果139例患者中发现大肠息肉124例,进展期癌9例,侧向发育型肿瘤(LST)型病变5例,ⅡC病变1例.LST直径10~50 mm,其中ⅢL型1个,Ⅳ型4个.本组放大内镜与病理、实体镜诊断符合率较高.结论大肠腺管开口对于判断肿瘤性、非肿瘤性病变以及早期大肠癌具有重要意义,如发现有V型腺管开口时则高度提示早期癌的可能.

    作者:韩宇晶;赖卓胜;王亚东;姜泊 刊期: 2004年第09期

  • DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法的选择

    目的比较4种聚丙烯酰胺凝胶银染方法,为初次使用者选择方法时提供参考.方法用24 mer的引物作为上样样本,分别采用氨水法、低浓度硝酸银法、0.1%及0.2%硝酸银法染色.后2种配合不同的显色剂显色.结果前2种未显色,0.1%及0.2%硝酸银可显色.结论0.2%的硝酸银与氢氧化钠显色剂相结合具有高的灵敏度;0.2%的硝酸银与碳酸钠显色剂相结合具有佳的显像效果.

    作者:李西平;钱新华;姚英民;刘志杰;刘阳 刊期: 2004年第09期

  • 基因芯片筛选大肠侧向发育型肿瘤相关基因的初步研究

    目的应用基因芯片初步筛选大肠侧向发育型肿瘤(LST)相关基因,为进一步研究大肠癌的发病机制提供新的思路和线索.方法抽提大肠侧向发育型肿瘤癌细胞株、SW480细胞株、LoVo细胞株的总RNA并纯化mRNA;将18 816种人类基因及LST片段PCR产物用Biorobotics公司的BG600点样仪点样于纤维膜上,制成基因芯片.将3个样品的mRNA分别逆转录合成探针并33P标记,同芯片杂交.严格洗片后Fuji film公司FLA 3000扫描仪扫描芯片信号图象,ArrayGauge1.0软件分析比较3种细胞株中差异表达基因.结果和结论在18 816种人类基因中存在着一系列LST同普通大肠癌细胞株之间的差异表达基因.在本研究中共有差异表达基因97个,其中共上调58个,共下调39个.表明其可能存在不同的肿瘤发生机制,故进一步研究其相关基因,在分子水平上阐明其发生机制及与大肠癌的关系具有重要意义.

    作者:王新颖;姜泊;赖卓胜;马文敏;耿焱 刊期: 2004年第09期

  • 急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗对QT离散度的影响

    目的探讨经皮冠状动脉介入治疗对急性心肌梗死QT离散度的影响及其临床意义.方法回顾性分析资料较完整的急性心肌梗死紧急冠脉介入治疗患者138例,测算术前和术后第1天心电图QT间期、QT离散度、心率校正QT间期和心率校正QT离散度.病例分心肌梗死发病6 h内(72例)和6 h以上(66例)两组.结果两组QT间期和心率校正QT间期术后与术前相比均无显著性差异,但术后QT离散度和心率校正QT离散度较术前显著减小(P<0.01),且发病6 h内组显著小于发病6h以上组(P<0.05);两组住院期间死亡率分别为4.2%和7.6%(P=0.394).结论成功的介入治疗能显著减小心肌梗死患者的QT离散度,介入治疗施行越早则减小QT离散度的效果越好.

    作者:贝春花;罗义;李广镰;潘宜智;曾冲 刊期: 2004年第09期

  • 珍珠层/聚乳酸重组人工骨修复动物骨干缺损的实验研究

    目的探讨珍珠层/聚乳酸重组人工骨(NPCB)在体内的生物相容性、降解情况及成骨特点,评价其性能,为进一步的应用提供实验依据.方法将NPCB随机植入成年新西兰白兔1.5 cm的桡骨缺损内,并设立不植入任何材料的空白对照,观察NPCB植入后动物的局部反应,检测动物术后1周、4周的血钙值,并与术前1天比较;于术后6、8、12、16周取材,作X线、骨矿含量、大体标本及组织形态学观察,分析不同时期组织反应、骨缺损修复及材料降解情况.结果NPCB植入后无明显的局部不良反应,术后1周、4周血钙值与术前1天相比无明显差异.植入NPCB的骨缺损内骨矿含量在6~12周时升高幅度明显高于空白对照组,但12周后植入NPCB的骨缺损内骨矿含量出现下降.X线检查、大体标本及组织形态学观察显示NPCB的成骨方式主要是骨传导成骨,至术后16周时骨缺损基本修复,NPCB与宿主骨结合紧密,而空白对照骨缺损断端仅有少量骨修复,形成骨不连.NPCB植入后即开始其降解过程,12周以后材料周围出现较多吞噬有材料颗粒的巨噬细胞和多核巨细胞,16周时仍有部分材料未降解吸收.结论NPCB具备良好的生物相容性和骨传导能力,可以在体内逐渐发生生物降解.

    作者:刘金标;廉维;陈建庭;金大地;权毅;潘显明 刊期: 2004年第09期

  • 胼周胼缘动脉起始部双动脉瘤1例

    颅内动脉瘤以单发多见,多发性颅内动脉瘤常发生在多个动脉上,而在1个动脉分叉部同时发生2个动脉瘤尚未见报道.近我科收治1例胼周胼缘动脉起始部双动脉瘤患者,报告如下.

    作者:冯文峰;黄胜平;漆松涛 刊期: 2004年第09期

  • 应用Super SMART cDNA合成技术扩增哮喘嗜酸性粒细胞总RNA

    目的应用Super SMART cDNA合成技术从嗜酸细胞微量总RNA扩增大量双链cDNA.方法利用Percoll密度梯度离心分离哮喘病人血嗜酸性粒细胞,用Trizol试剂盒提取细胞总RNA,利用Super SMART cDNA合成技术合成cDNA第1链及优化扩增第2链.通过梯度电泳鉴定cDNA产品质量,通过对获得的cDNA定量来评估扩增效能.结果从20 ng总RNA成功扩增出双链cDNA 7.155μg,电泳结果显示cDNA质量及纯度较高.结论Super Smart cDNA合成技术可实现从微量总RNA高效扩增高质量的cDNA,为进一步从基因水平研究哮喘机制奠定了基础.

    作者:赵海金;蔡绍曦;邹飞;佟万成;万为人 刊期: 2004年第09期

  • 球海绵体悬吊术治疗男性尿道括约肌损伤后尿失禁

    目的探讨球海绵体悬吊术治疗男性尿道括约肌损伤后尿失禁的效果.方法用球海绵体悬吊术治疗男性尿道括约肌损伤后真性尿失禁患者18例,总结、分析其临床效果.结果术后随访1~34月,16例患者能完全自控排尿,2例患者尿失禁明显改善.结论球海绵体悬吊术是治疗男性尿道括约肌损伤后尿失禁的有效方法.

    作者:李传印;周兴 刊期: 2004年第09期

  • 宫颈癌发病年龄与预后的关系(附93例分析)

    目的探讨宫颈癌发病年龄与临床预后的关系.方法回顾南方医院1997年1月~2002年12月收治的宫颈癌93例,分为年轻组(≤35岁)和中老年组(>35岁),进行临床分期、病理组织学、细胞分化等临床资料对比分析.结果两组患者在临床分期、组织学上有统计学差异.≤35岁组:≤Ⅱa期占82.61%,≥Ⅱb期占17.39%,磷癌占86.67%,腺癌占13.39%;而>35岁组:≤Ⅱa期占便51.43%,≥Ⅱb期占48.73%,磷癌占82.98%,腺癌占17.02%.细胞分化程度分析,≤35岁组和>35岁组经统计学处理无显著性差异.结论>35岁组宫颈癌患者具有临床期别较高、腺癌较多的不良预后因素.年轻宫颈癌患者预后较好.

    作者:周瑞丽;刘国炳 刊期: 2004年第09期

  • 紫河车体外对黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

    目的观察中药紫河车对黑素细胞和酪氨酸酶的影响.方法采用MTT法测定黑素细胞增殖情况,Hunt法测定黑素合成,以蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性.结果(1)紫河车对黑素细胞具有增殖作用,其佳增殖浓度为0.1g/L(P<0.01);(2)紫河车可增强黑素合成能力,其佳增强能力为0.1g/L(P<0.01);(3)紫河车对酪氨酸酶亦具有激活作用,其佳激活浓度为1g/L(P<0.01).结论紫河车能激活黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性.

    作者:杨柳;邓燕 刊期: 2004年第09期

  • 胃窦部异位胰腺1例报告

    异位胰腺多见于上消化道,但异位至胃窦致术前误诊为胃窦肿瘤者少见.我科近期收治1例胃窦部异位胰腺,现报告如下.

    作者:韩景龙;黎镭;吴承堂 刊期: 2004年第09期

  • 星形胶质细胞条件培养液对tbOOH致PC12 细胞凋亡的抑制作用

    目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物thOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响.方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流式细胞术测定细胞凋亡率的变化;用巴比妥酸法评估细胞内丙二醛含量的变化.结果tbOOH可诱导PC12细胞凋亡,而星形胶质细胞条件培养液可降低其凋亡;同时,巴比妥酸法显示星形胶质细胞条件培养液可显著性降低PC12细胞丙二醛含量(P<0.05).结论星形胶质细胞条件培养液有提高PC12细胞抗氧化能力,可抑制活性氧tbOOH诱导的神经细胞凋亡.

    作者:莫永炎;邢飞跃;张宝;陈瑗;姜勇 刊期: 2004年第09期

  • 鼻内镜手术中鼻甲及上颌窦口不同处理的疗效比较

    目的观察鼻内镜手术中不同的中鼻甲及上颌窦口处理方式对远期疗效的影响.方法对391例慢性鼻窦炎鼻息肉患者进行内镜鼻窦手术,术后随访0.5~2.5年.结果治愈328例(83.9%),好转53例(13.6%),无效10例(2.6%),总有效率97.5%.术后并发症主要为鼻腔粘连.结论鼻内镜术中鼻甲及上颌窦口的正确处理、术后综合治疗能提高治愈率,减少并发症.

    作者:申玉梅 刊期: 2004年第09期

  • 中国广东汉族人C4、Bf多态性及其补体单倍型研究

    目的探讨广东汉族人G4、Bf遗传多态性及其构成的补体单倍型频率.方法用琼脂糖高压电泳及免疫固定的方法对广东正常汉族家系144条染色体作了属于HLA-Ⅲ的Bf、C4A、C4B的遗传多态性及其构成的补体单倍型检测与分析.结果共发现13个补体单倍型,居前4位者为S32、S31、S42、F42,其中有4个单体型呈高度连锁不平衡.表型以BFS(0、8542)、C4A3(0、7291)、C4A4(0、2188)、C4B2(0、5937)、C4B1(0、3542)常见.结论广东汉族C4、Bf多态性及其构成的补体单倍型有自己的遗传背景.

    作者:杨利平;温秀清;关艳冰;徐娟;姜晓丹;赵修竹 刊期: 2004年第09期

  • 紫杉醇和吉西他滨对激素非依赖性前列腺癌的作用

    目的观察紫杉醇(PA)协同吉西他滨(GE)对前列腺癌细胞系PC-3的体内外作用,并探讨其可能约作用机制.方法应用光镜形态学、噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了10-6、10-7、10-8 mol/L浓度PA和10-7、10-8、10-9mo1/L浓度GE在体外单药或协同对前列腺癌细胞系PC-3的作用、对细胞DNA含量及cyclinD1表达的影响.观察PC-3细胞荷瘤裸鼠单独及协同使用PA和GE前后的体质量、肿瘤质量、血清PSA和肿瘤PSA免疫组化的变化.结果10-8mol/L以上浓度GE作用48 h,可增强10-7mol/L以上浓度PA对前列腺癌PC-3细胞系的生长抑制[抑制率≥(50.8±4.2)%,P<0.05],增强诱导凋亡作用[凋亡率≥(22.9±2.3)%,P<0.05],下调Cyclin D1的表达[表达率≤(9.6±1.6)%],与阳性对照组cyclinD1表达率(25.5±4.1)%相比差异有显著性(P<0.01).GE使PA所致的G2/M期细胞周期阻滞比例由(70.3±9.7)%减至(38.2±4.2)%,部分地逆转了其G2/M期细胞周期阻滞(P<0.01).协同治疗前后裸鼠体质量无明显变化,但肿瘤质量(3.2.±0.5 g)、血清PSA[(51±14)ng/ml]和肿瘤PSA免疫组化的表达率[(30±3.7)%]在协同治疗组显著低于其他组(P<0.05或0.01).结论PA和GE可以在体内外协同增强对前列腺癌细胞系PC-3的生长抑制和诱导凋亡作用,显示了PA和GE协同用于治疗激素非依赖性前列腺癌的可能性,并部分地解释了其作用机制.

    作者:孙明;杨宇如;李虹;陈一戎;王志平;卢一平;魏强;岳中瑾 刊期: 2004年第09期

  • 脑室-腹腔分流术后并发症分析

    目的探讨脑室-腹腔分流术后并发症的诊治经验.方法回顾性分析125例脑室-腹腔分流术后并发症诊治经过.结果125例患者术后并发症发生率为36.8%(46/125),其中分流管梗阻24例、感染9例、颅内血肿4例、腹部并发症5例,其他4例.结论脑室-腹腔分流术并发症的发生,除与患者身体状况和疾病的性质有关外,主要与医源性因素有关,对并发症以及引起的原因分析与讨论有助其预防.

    作者:陈国明;蔡涛 刊期: 2004年第09期

  • 新生鼠下丘脑结节乳头核组胺能神经细胞的原代培养

    目的探讨新生鼠下丘脑结节乳头核(TM)组胺能神经细胞的体外培养方法.方法从新生鼠(24 h内)下丘脑后部分离出TM神经细胞,采用含有B27的Neurobasal Medium培养液进行体外原代培养.应用免疫细胞化学染色对培养的细胞进行鉴定.结果从新生鼠下丘脑中分离的TM神经细胞,在本实验条件下生长良好.原代培养7~9 d的神经细胞在形态上趋向成熟.免疫细胞化学染色结果表明培养的神经细胞呈组胺免疫反应阳性,为组胺能神经细胞.结论新生鼠下丘脑TM神经细胞可进行体外原代培养,它可作为研究中枢组胺神经系统的体外细胞模型.

    作者:莫志贤;梁荣能;翁建霖 刊期: 2004年第09期

南方医科大学学报杂志

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