石孟云;谢惠芳;魏继鹏
目的观察过氧化氢酶(CAT)对SW480细胞线粒体形态、细胞凋亡的影响及细胞内核转录因子(NF)κB表达的变化.方法用脂多糖(LPS)刺激SW-480细胞,再用过氧化氢酶预孵育和治疗;应用透射电镜观察各组细胞内线粒体形态和细胞凋亡的变化;采用免疫组织化学方法检测细胞内NF-κB的表达水平.结果经过过氧化氢酶预孵后,细胞凋亡明显减少,线粒体损伤减轻,同时NF-κB的表达较LPS组和治疗组明显降低(P<0.01),但较正常对照组仍明显增加.结论CAT对SW480细胞的致炎因子刺激后的应激反应有保护作用,能减少细胞的凋亡和线粒体的损伤,这一作用可能与NF-κB的激活有关.
作者:王群英;王继德;钟世顺;王亚东;孙勇;李良仁;张亚历 刊期: 2004年第12期
目的探讨结直肠癌组织中凋亡抑制因子survivin的表达及其与各临床病理因素的关系,评价survivin在结直肠癌预后判断中的价值.方法应用组织芯片结合免疫组织化学SABC法,检测126例早期结直肠癌组织中survivin的表达情况,回顾性分析survivin与各临床病理因素及预后之间的关系.结果根据免疫组化染色强度和分级结果,所有病例被分为survivin高表达组和低表达组.其中高表达组有26例(26/126,20.6%),低表达组有100例(100/126,79.4%).survivin在结直肠癌中表达情况与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、浸润深度、淋巴是否转移、Dukes分期均无显著相关.然而,高表达的survivin与肿瘤复发、特别是血行转移显著相关(P<0.05).Survivin高表达组和低表达组的生存率用Kaplan-Meier方法评估,并用log-ranktest进行比较,两组之间生存率具有显著差异(P<0.05).多因素分析结果显示,在潜在的预后因素中(年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、淋巴是否转移、Dukes分期、survivin表达),survivin表达和Dukes分期被认为是结直肠癌根治术后独立预后因素.结论Survivin的表达与结直肠癌的术后复发相关:结直肠癌术后复发率在survivin高表达组明显高于survivin低表达组,是与预后相关的独立危险因子.应用组织芯片高效检测临床组织样本具有快速、方便、经济、准确的优点.
作者:姚红兵;吴爱国;黄宗海 刊期: 2004年第12期
目的研究补肾中药对人成骨细胞增殖、分化、钙摄取和矿化能力的影响.方法用酶消化法从成人髂骨松质骨,分离人成骨细胞,以细胞形态学、碱性磷酸酶染色和体外成骨能力的检测鉴定成骨细胞.在成骨细胞培养液内分别加入含有高、中、低不同浓度的补肾中药鼠血清,以正常鼠血清作为对照.培养30 min后,进行成骨细胞胞内钙离子变化的检测;培养3 d后,用流式细胞仪检测成骨细胞增殖、分化情况;培养28 d后,进行Von-Kossa染色,观察成骨细胞钙化结节的形成情况.结果与对照组相比,培养30min后,高、中、低3种浓度的补肾中药血清均能提高成骨细胞钙离子摄取能力;培养3 d后,中药组处于增殖期的成骨细胞明显升高,和对照组相比具有明显的统计学差异.培养28 d后,中药组成骨细胞钙化结节形成的数量也相对增多,其中,高浓度补肾中药血清处理组的钙化结节的数量与对照组相比有明显增加(P<0.05).结论补肾中药血清能提高成骨细胞钙离子摄取能力,刺激成骨细胞增殖分化,增加成骨细胞钙化结节的形成.
作者:李娟;吴伟康;孙炜;余克强 刊期: 2004年第12期
目的研究湿热环境对辐射损伤动物骨髓和脾脏的影响.方法将实验动物分为室温组和湿热环境组,两组小鼠首先分别给予6.5Gyγ射线一次全身均匀照射,然后室温组立即置于室温环境中,湿热环境组则先接受湿热环境作用1 h,再置于室温环境中.照后1、3、5、9、15 d,分别取两组小鼠的骨髓和脾脏,获取骨髓有核细胞(BMC)数、骨髓细胞DNA、脾/体质量比实验指标.结果湿热环境作用组小鼠和室温组小鼠相比,BMC、骨髓细胞DNA及脾/体质量比指标下降.结论湿热环境加重辐射损伤动物骨髓和脾脏的损伤.
作者:郑莉;周美娟;丁振华 刊期: 2004年第12期
目的从人血浆中分离纯化甘露聚糖结合凝集素(MBL)和MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP).方法用非活化Sepharose 4B两步亲和层析纯化MBL-MASP复合物,再以Sephacryl S-300柱凝胶过滤将MBL和MASP分离.在纯化MBL-MASP复合物的整个过程中,除凝胶过滤缓冲液外,均加入丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲磺酰氟(PMSF)和金属蛋白酶抑制剂1,10-邻二氮杂菲(1,10-phenanthroline),并控制温度在4℃.结果获得高度纯化的MBL和酶原形式的MASP.SDS-PAGE和Western blotting表明所纯化的MBL相对分子质量为28000和32000肽链构成的功能性多聚体;配体结合测定和酵母菌凝集试验证实所纯化的MBL具有生物学活性.结论建立了一种比较简便的同时分离纯化MBL和MASP酶原的方法.
作者:陈月;张丽芸;陈政良 刊期: 2004年第12期
目的探讨腺病毒介导血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动的CDglyTK融合基因体系对人乳腺癌细胞株MCF-7及血管内皮细胞(ECV304)选择性杀伤作用.方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的MCF-7、ECV304细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药5-FC和/或GCV,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应.并通过流式细胞仪检测前药对瘤细胞周期的影响.结果所得病毒滴度为2.0×1012pfu/ml.3种细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当感染复数(MOI)为200时,所有细胞株均达约100%感染.以MOI为100的重组体分别感染各细胞株表现出对前药的不同敏感性:表达KDR的MCF-7细胞和ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,二者敏感性差异无显著性意义(P=1.00);与前2者相比,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P<0.001).CDglyTK融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P<0.001).将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应.流式细胞术检测表明该体系抑制MCF-7细胞DNA的合成,表现为G1期细胞比率增多及S期细胞减少(P<0.001).结论KDR基因启动子调控的CDglyTK融合基因体系可选择性杀伤乳腺癌MCF-7细胞及血管内皮细胞.
作者:苏国强;黄宗海;刘志锋;郭爱华;俞金龙;厉周;宋彗娟 刊期: 2004年第12期
目的探讨Fas/FasL、颗粒酶B与口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)中的细胞凋亡及与OLP病变发生发展的关系.方法采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组化技术检测50例(20例糜烂萎缩型,30例非糜烂型)OLP及10例正常口腔黏膜中Fas、FasL及颗粒酶B的表达及细胞凋亡情况.结果OLP上皮细胞的凋亡指数(95.32±28.99)比正常对照组(42.52±0.05)高(P<0.05),且OLP中凋亡上皮细胞多位于基底层或基底上层,而正常对照组的凋亡上皮细胞多位于表层及棘层.OLP固有层淋巴细胞的凋亡指数(35.12±9.89)则低于正常组(61.58±0.10)(P<0.05).OLP固有层FasL及颗粒酶B的阳性率分别为68%、68%,均高于正常对照组(P<0.05),其中糜烂萎缩型OLP固有层中淋巴细胞FasL及颗粒酶B的表达均明显高于非糜烂型OLP(P<0.05).结论口腔扁平苔藓中同时存在角质细胞的凋亡增加及淋巴细胞凋亡的减少,Fas/FasL及颗粒酶B可能与这种凋亡的异常相关,且FasL及颗粒酶B的高表达与OLP病情发展有密切关系.
作者:沈丽佳;阮萍;谢方方;赵彤 刊期: 2004年第12期
目的探讨肾移植患者下肢深静脉血栓的成因及防治.方法总结分析作者医院肾移植术后发生下肢深静脉血栓的38例患者的发病原因、诊断依据、预防措施及治疗效果.结果依据病史、超声确诊的38例患者经及时的治疗,在3~20 d(平均6 d)内,患肢肿胀基本消退,彩色多普勒超声复查示广泛侧枝循环建立.结论肾移植患者有引发下肢深静脉血栓的较多危险因素,彩色多普勒超声是佳诊断措施,规范及时的抗凝、祛聚、溶栓治疗可取得满意效果.对高危患者可采取一定的预防措施.
作者:于立新;李川江;邓文锋 刊期: 2004年第12期
多数颅内动脉瘤直径为6~15 mm,可在常规麻醉方法下行夹闭术,少数颅内动脉瘤当瘤体直径大于15 mm时,重要结构被其遮盖,影响视野和手术操作,易引起动脉瘤破裂出血导致死亡.国外已开展深低温停循环辅助下行此类手术,本院99年来行3例深体温停循环下颅内巨大基底动脉瘤夹闭术,现报告如下.
作者:李宝伟;米卫东 刊期: 2004年第12期
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及nm23-H1基因在青年女性乳腺癌组织中的表达及其与预后间的关系.方法应用免疫组化方法检测48例青年女性、30例绝经后乳腺癌组织及10例乳腺纤维腺瘤组织中VEGF及nm23-H1基因的表达情况,分析他们之间及其与临床病理指标之间的关系,并随访患者5年生存率.结果青年组较绝经组患者淋巴转移率高(P<0.01);青年组与绝经组患者组织中,VEGF及nm23-H1的表达差异皆有显著性意义(P<0.01);青年组、绝经组以及乳腺纤维腺瘤组,两者表达差异也有显著性意义(P<0.01,P<0.01);各组中腋窝淋巴结转移者和未转移者VEGF及nm23-H1的表达差异均有显著性意义(P<0.01);各组中VEGF及nm23-H1的表达与组织分化程度无关(P>0.05);青年乳腺癌组织中VEGF与nm23-H1基因表达成负相关(P<0.01),随访发现:青年乳腺癌患者nm23-H1阳性者5年生存率显著高于p53阳性者生存率(P<0.05).结论VEGF及nm23-H1基因的表达状况标志着青年乳腺癌恶性侵袭程度,因而二者可作为青年乳腺癌患者极有价值的生物学预后指标.
作者:黄宗海;苏国强;毛乾国;王庆志;厉周;俞金龙;范应方 刊期: 2004年第12期
目的检测杀伤免疫球蛋白样受体(KIR)基因在广东汉族人群中的分布.方法对96例广东汉族以SSP法检测其KIR表型,统计不同KIR基因在人群中的表现频率,并与白种人、北印度人、日本人比较.结果不同KIR的表现表率分别为:2DL1(0.85)、2DL2(0.12)、2DL3(0.58)、2DL4(1)、2DL5(0.24)、3DL1(0.96)、3DL2(1)、3DL3(1)、2DP1(0.97)、2DP2(0.98)、2DS1(0.10)、2DS2(0.30)、2DS3(0.02)、2DS4(0.28)、1D(0.65)、2DS5(0.19)、3DS1(0.23).比较同一HLA配体相应的KIR,抑制性KIR频率均高于活化性KIR.与白种人和北印度人相比,除KIR2DS4外,广东汉族人群的活化性KIR频率均较低.结论不同KIR基因在广东汉族人中有不同的表达频率.与其他人种比较,KIR基因的分布有着明显的种族差异.
作者:尹晓林;郭坤元;马红京;尚振川;肖露露;叶欣;赵阳 刊期: 2004年第12期
目的研究阿霉素碘油乳(AD-E)经肝动脉栓塞后的靶向特征及体内药代动力学过程.方法经犬肝动脉注入AD-E,用高效液相色谱(HPLC)荧光检测外周静脉血和肝栓塞部位组织中阿霉素药物浓度,并与阿霉素溶液给药组对照.结果AD-E组外周静脉阿霉素血药浓度显著低于阿霉素组,其T1/2β为阿霉素组的1.51倍.给药后10、24和48 h,AD-E组肝组织中阿霉素浓度分别为阿霉素组的5.42、3.33、和2.38倍.结论AD-E肝动脉栓塞给药明显改变阿霉素犬体内的药代动力学过程及肝组织靶向定位特征.
作者:王新亚;杨莉;陈业豪 刊期: 2004年第12期
目的研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌CaSKi细胞增殖和侵袭能力的影响.方法以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导入CaSKi细胞,分别为CaSKi-R和CaSKi-P.观察细胞的生长状态,测定CaSKi,CaSKi-R和CaSKi-P 3种细胞的生长曲线、软琼脂克隆形成率、细胞侵袭力实验、裸鼠体内致瘤性,以及RT-PCR检测细胞中COX-2、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,同时,免疫组化检测3种细胞COX-2、VEGF抗原表达,分析特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌CaSKi细胞增殖和侵袭力的影响.结果CaSKi、CaSKi-P细胞生长速率、软琼脂克隆形成率、致瘤性和侵袭力相近,而CaSKi-R细胞的细胞生长速率、软琼脂克隆形成率、致瘤性和侵袭力与以上两种细胞相比却明显降低.RT-PCR检测CaSKi-R细胞的COX-2、VEGF表达水平也低于CaSKi、CaSKi-P细胞的表达.细胞免疫组化测定CaSKi、CaSKi-P和CaSKi-R细胞都有COX-2、VEGF抗原表达,而CaSKi-R细胞的抗原染色程度较弱.结论特异性抗HPV16E6核酶的导入降低了宫颈癌CaSKi细胞的增殖和侵袭表型,可能与宫颈癌CaSKi细胞内COX-2、VEGF的表达水平降低有关.
作者:刘柯;王莉丽;孙芳;郑燕芳;张积仁 刊期: 2004年第12期
目的探讨新辅助化疗对乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HER-2表达的影响.方法2001年8月~2003年12月共有92例手术的乳腺癌患者进入本研究,其中新辅助化疗者59例作为化疗组,未行新辅助化疗者33例作为对照组.分析并比较两组患者术前活检标本和术后大体标本瘤组织中ER、PR和HER-2表达和表达状态变化的差别.结果化疗组术后有37.29%(22/59)患者的ER表达出现量变,对照组为15.15%(5/33),两组比较有显著性差异(P<0.05);两组ER状态改变无显著差异.化疗组术后有23.73%(14/59)患者的PR表达出现量变,但与对照组比较无显著性差异.化疗组术后有13.56%(8/59)患者HER-2表达出现变化,但与对照组比较无显著性差异.结论新辅助化疗能使部分乳腺癌组织中ER表达发生量变,但很少影响ER状态,而新辅助化疗对乳腺癌PR和HER-2表达无影响.
作者:赵健;吴一龙;王远东;赵光日;王建 刊期: 2004年第12期
目的探讨内皮素和降钙素基因相关肽在实验性孕兔肺栓塞模型血清中含量的变化.方法实验组17只孕兔采用白体血凝块经股静脉注入右心房内,造成肺栓塞模型,对照组10只孕兔注入生理盐水.分别于注栓前、注栓后0、2、4、8h测定血清中内皮素和降钙素基因相关肽含量.结果实验组全部有肺栓塞的病理改变,发生率为100%,实验组的血120浆中内皮素于栓塞后即刻增高至栓塞后6 h,降钙素基因相关肽注栓后即刻降低,注栓后4 h增高并持续至栓塞后8 h,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05).结论内皮素和降钙素基因相关肽在实验性孕兔肺栓塞时血清含量会发生显著变化.
作者:钟梅;崔宝奎;余艳红;黄莉萍;刘宝瑛;宋天蓉 刊期: 2004年第12期
目的评价连续性肾脏替代疗法(CRRT)治疗重症急性肾功能衰竭(ARF)的临床应用价值及影响预后的因素.方法回顾分析CRRT治疗(CRRT组)的116例重症ARF患者的临床特点、疾病严重程度及其预后,并与同期行间歇性血液透析(IHD)治疗(IHD组)的102例重症ARF患者相对照.结果(1)CRRT组患者的平均APACHEⅡ评分为27.0±7.5,其中≥29分56例(48%),24~29分36例(31%),<24分24例(21%);而IHD组患者的平均APACHEⅡ评分为21.9±5.2,其中≥29分0例(0%),24~29分44例(43%),<24分58例(57%).CRRT组平均APACHEⅡ评分显著高于IHD组(t=4.769,P=0.000),提示CRRT治疗的患者多为病情危重的重症病例.(2)CRRT组患者治疗后的存活率为37%(43/116),而IHD组为48%(49/102),两组比较无显著性差异(x2=2.678,P=0.101 8);若仅选取APACHEⅡ评分≥24分的危重病人进行比较显示:CRRT组的存活率24%(22/92)显著高于IHD治疗组的9%(4/44)(X2=4.229,P=0.039 7),提示对危重ARF患者,CRRT效果优于传统IHD.(3)对CRRT存活与死亡亚组患者的一般临床资料、疾病的严重程度(用APACHEⅡ评分表示)等因素进行统计学分析,结果显示死亡亚组患者的年龄、病情严重程度以及需要使用机械通气和升压药的百分率明显高于存活亚组(P<0.05).结论(1)CRRT是治疗重症AFR的有效方法之一,特别是对病情危重的ARF患者,疗效明显优于IHD;(2)CRRT治疗重症ARF患者的预后受患者年龄、疾病严重程度的影响;(3)是否需要使用升压药和机械通气等对CRRT治疗患者的预后具有一定的预测作用.
作者:邵咏红;黄英伟;孔耀中;周立新;林敏娃;肖观清 刊期: 2004年第12期
目的观察糖尿病大鼠肾组织膜3型基质金属蛋白酶(MT3-MMP)及组织2型金属蛋白酶抑制物(TIMP2)mRNA表达的变化及氯沙坦对它们的影响.方法建立糖尿病大鼠模型并将之分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、糖尿病+氯沙坦组(C组).饲养18周后取出肾脏以RT-PCR法检测MT3-MMP、TIMP2及TGF-β1 mRNA的表达,电镜观察大鼠肾小球基底膜厚度及系膜基质密度(系膜基质面积/系膜面积),收集24 h尿检测尿白蛋白.结果B组大鼠肾组织MT3-MMP mRNA、TIMP2 mRNA和TGFβ1 mRNA表达以及均显著高于A组,C组显著低于B组,但与A组无显著差异.B组尿白蛋白、基底膜厚度及系膜基质密度显著高于A组,C组均显著低于B组.P<0.05.结论氯沙坦治疗可延缓糖尿病肾病的发生,并可抑制糖尿病大鼠肾组织MT3-MMP及TIMP2 mRNA表达.
作者:宛霞;黄湖辉;李劲高 刊期: 2004年第12期
目的探讨彩色多普超声心动图在川崎病心脏病变中的应用价值.方法彩色多普超声心动图检查58例川崎病患儿,测量冠状动脉直径,测量房室大小,计算心功能(EF%),观察各瓣膜有否返流及心包有无积液.结果58例川崎病患儿中发生心脏异常改变有31例(53.45%),冠状动脉病变28例,其中单纯左冠状动脉主干病变17例,右冠状动脉主干3例,左右冠状动脉同时累及8例,2例发生冠状动脉瘤,左室增大9例,右室增大6例,全心增大4例,二尖瓣关闭不全18例,三尖瓣关闭不全16例,心包积液13例,2例有短期内心功能减低.结论彩色多普勒超声心动图能动态观察冠状动脉的病理改变、进展及估计预后,是无创评价和随访川崎病心脏改变的具价值的应用工具.
作者:龙振荣;刘卓华;李彬 刊期: 2004年第12期
目的探讨胰岛素对血小板膜P-选择素表达的影响.方法建议全血血小板膜P-选择素表达的流式细胞术(FCM)测定方法,观察健康青年人胰岛素在静止和活化状态下对血小板膜P-选择素表达的影响.结果胰岛素对正常人静息血小板膜P-选择素表达无明显影响;而显著抑制凝血酶、胶原活化的血小板膜P-选择素的上调表达,且该效应呈剂量和时间依赖性.结论胰岛素可抑制活化血小板膜P-选择素的表达.
作者:彭必友;周艳;董为人;汪吉仪;薛耀明;蔡德鸿 刊期: 2004年第12期
1临床资料患者男,77岁.40 d前无明显诱因出现左下腹隐痛,不向他处放射.在当地医院给予消炎及止痛药治疗后疼痛缓解,随后出现气泡尿、尿液混浊,在当地医院检查发现低钾、低蛋白血症,给予支持疗法并考虑膀胱结肠瘘,行逆行膀胱造影,但未发现有造影剂外溢.1周前每日下午畏寒发热,高体温38℃,逐转入我院治疗.
作者:周华;张鹏 刊期: 2004年第12期