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钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

迟德彪;雷林生;金宏;庞建新;蒋毅萍

关键词:钩吻, 钩吻素子, 凋亡, LoVo细胞
摘要:目的探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡.方法以Kou(50μmol/L)作用于LoVo细胞,经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态.结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高.经Kou作用后的肿瘤细胞,细胞周期状态发生明显变化,G0/G1期细胞从31.3%上升到42.3%,S期细胞从62.0%下降到38.7%.结论 Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且存在时间依赖关系,Kou可抑制细胞DNA的合成,阻止细胞由G1期向S期转化.
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  • EGFR反义RNA的转染对人类鼻咽癌CNE-2细胞EGFR的表达下调及恶性表型的抑制

    目的利用反义RNA抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应.方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选并分离阳性克隆,将两个EGFR反义cDNA转染的克隆细胞命名为CNE-2/AS4和CNE-2/AS8,而空载体转染的细胞命名为CNE-2/pLXSN.125I-EGF配体结合分析细胞膜上EGFR的表达,台盼蓝染色法测定细胞生长的改变,并用软琼脂集落形成实验检测细胞转化,后,将筛选的各组阳性克隆细胞分别注射入裸鼠皮下,不同时间观察肿瘤生长的抑制改变及肿瘤的转移状况.结果配体结合实验结果显示,两个选择的克隆CNE-2/AS4和CNE-2/AS8细胞表面EGFR的数量分别较未转染细胞CNE-2下降18%、45%,表明EGFR反义RNA的表达下调了细胞膜上EGFR的表达;同时,EGFR反义RNA表达的CNE-2细胞生长速率和软琼脂生长能力也较对照组细胞明显降低.注射入裸鼠皮下后,EGFR反义RNA表达的阳性克隆细胞表现出肿瘤生长减慢,淋巴结和肺转移能力也明显降低.结论这些实验结果提示EGFR反义cDNA转染的CNE-2细胞能下调EGFR的过量表达并部分抑制鼻咽癌的恶性表型,这为进一步阐明EGFR在鼻咽癌的发生、演化中的功能作用提供了有用的工具.

    作者:邓凡;王瑜;曾方银;邹志鹏;白晓春;陆地;柯志勇;罗深秋 刊期: 2003年第09期

  • 川芎嗪及复方丹参注射液辅助治疗妊娠高血压综合征60例临床分析

    目的比较川芎嗪注射液及复方丹参注射液在辅助治疗妊娠高血压综合征(PIH)中的作用,探讨两药在改善微循环及胎儿宫内缺氧方面的差异,进一步指导临床用药.方法选取2001年6月~2002年6月在我院住院治疗的60例PIH患者,平均分为2组,在有效镇静、解痉、降压、低流量吸氧等治疗的基础上,分别给予静脉滴注川芎嗪注射液及复方丹参注射液治疗1个疗程.结果川芎嗪组抑制纤溶、改善微循环的效果显著;复方丹参组主要降低血液粘稠度、降低胆固醇及血酯.结论川芎嗪及复方丹参对PIH有肯定的治疗作用,由于两药的临床作用不同,需有针对性用药.

    作者:王雪峰;赵苗青 刊期: 2003年第09期

  • 右胸前外侧小切口与胸部正中切口行房间隔缺损修补术的对比研究

    目的比较房间隔缺损修补术的经右胸前外侧小切口与胸部正中切口两种术式的效果.方法经右胸前外侧小切口心脏不停跳下修补房间隔缺损82例,其中合并中、重度肺动脉高压10例,部分型肺静脉畸形引流3例;经胸部正中切口心脏停跳下修补房间隔缺损67例,其中合并中、重度肺动脉高压11例,部分型肺静脉畸形引流5例.观察比较2组患者的体外循环(CPB)时间、重症监护(ICU)时间、术后呼吸机辅助时间、住院天数、术后引流量、切口长度等指标.结果 2组均无手术死亡.右胸前外侧小切口手术方式的CPB时间(35.2±14.1)min、机械通气时间(6.5±2.5)h、术后住院时间(7.4±1.2)d和切口长度(6.5±0.9)cm均明显小于胸部正中切口手术方式的CPB时间(42.7±11.8)min、机械通气时间(7.9±3.8)h、住院时间(9.0±2.9)d和切口长度(15.9±1.7)cm(P<0.01),前者术后引流量(237.6±172.5)ml小于后者术后引流量(304.3±192.4)ml(P<0.05).ICU时间分别为(35.1±16.2)h和(32.3±24.1)h,无显著性差异(P>0.05).结论右胸前外侧小切口心脏不停跳房间隔缺损修补术,畸形矫正效果满意,可靠安全,手术创伤小,术后住院时间短,操作简单,美容效果好,可取代常规胸部正中切口矫治房间隔缺损及其合并部分型肺静脉畸形引流.

    作者:乔晨晖;阎保君;张新;赵高峰;张伟华;史昌平 刊期: 2003年第09期

  • 氯沙坦和福辛普利联合应用治疗早期糖尿病肾病的临床疗效观察

    目的观察氯沙坦和福辛普利联合应用对早期糖尿病肾病的保护作用.方法将57例早期2型糖尿病肾病病人随机分为A、B、C 3组.A组给予氯沙坦50 mg和福辛普利10 mg,B组给予氯沙坦50~100mg,C组给予福辛普利10~20mg.观察治疗6个月前后各组患者的血压、24h尿蛋白排泄率(UAER)、血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)、血糖、血脂及血清胰岛素变化.结果单独用氯沙坦或福辛普利和联合应用两药均可明显降低血压、减少UAER、降低SCr和BUN水平(P≤0.05或P<0.01).尽管各组间对比无显著性差异,但就降压和降低UAER、SCr和BUN的数据看,以联合应用组幅度大.各组治疗前后血清胰岛素均有明显降低(P<0.01),而血糖、血脂无显著性变化(P>0.05).结论氯沙坦联合福辛普利治疗早期糖尿病肾病,较单独应用这两种药物能更有效地降低血压、减少UAER、降低SCr和BUN水平,阻止或延缓早期糖尿病肾病的发展;也可能通过降低血清胰岛素,改善代谢而达到对早期糖尿病肾病的保护作用,而不影响血糖、血脂的代谢.

    作者:黄远航;王海涛;朱起之;张虹;沈文;王寅 刊期: 2003年第09期

  • 缺氧/复氧对兔肾动脉内皮依赖性舒张功能的影响

    目的探讨缺氧/复氧对肾动脉内皮依赖性一氧化氮(NO)和内皮衍性超极化因子(EDHF)途径舒张功能的影响.方法采用器官槽法,以兔肾动脉环为研究对象,首先抑制PGI2舒张途径,然后再分别抑制NO和EDHF舒张途径,对给与血管环以缺氧/复氧处理,观察缺氧/复氧分别对NO和EDHF舒张途径的影响.结果缺氧/复氧使NO途径的内皮依赖性舒张功能减退,而缺氧/复氧对EDHF途径的内皮依赖性舒张功能无变化.结论缺氧/复氧导致兔肾血管内皮衍性NO途径的舒张损伤,而对EDHF途径的舒张无影响.

    作者:丰贵文;于立新;龙村 刊期: 2003年第09期

  • 鼻内窥镜经前颅底进行前颅窝手术的探讨(附1例报告)

    目的探讨鼻内窥镜下经前颅底进行前颅窝手术的可能性.方法总结、分析鼻内窥镜下取出插入前颅窝6.5 cm的塑料筷子残段并同时进行前颅底修补手术的病例.结果鼻内窥镜下取出前颅窝筷子残段并同时进行前颅底修补手术十分成功,术后患儿完全康复.结论鼻内窥镜下经前颅底进行前颅窝内接近前颅底的异物取出的手术是完全可行的.

    作者:谢南屏 刊期: 2003年第09期

  • 均匀设计与正交设计在钩吻生物总碱提取工艺筛选研究中的应用

    目的优选简便高效的钩吻生物总碱的提取工艺,考察不同提取条件下的提取率.方法分别用均匀设计和正交设计两种方法对钩吻生物总碱的提取工艺中溶剂种类、提取系统中固液比例和回流时间3个因素进行优选.结果两种方法的结果均为采用氯仿作为溶剂、固液比例为1.0:7.5、回流时间3h×3,所得总碱含量高.结论正交设计与均匀设计试验所得结果相近,结论基本一致.

    作者:张兰兰;黄昌全;张忠义;林敬明 刊期: 2003年第09期

  • 慢性肾炎患者血清TIMP-1浓度的变化及氯沙坦治疗对TIMP-1浓度的影响

    目的探讨慢性肾炎患者血清金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)浓度的变化及意义,并观察氯沙坦治疗对TIMP-1浓度的影响.方法以酶联免疫吸附试验检测45例慢性肾炎患者及10例健康志愿者血清TIMP-1浓度,分析其与肾组织纤维化程度的相关性;并将慢性肾炎患者分为2组,治疗组25例,在常规治疗的基础上加用氯沙坦,对照组20例,单用常规治疗,观察治疗前后血清TIMP-1浓度的变化,进行对照分析.结果 慢性肾炎患者血清TIMP-1浓度较正常显著增高;血清TIM-1浓度与肾组织纤维化程度呈正相关.氯沙坦治疗组在改善肾功能、降低尿蛋白及血清TIMP-1浓度方面明显好于对照组.结论血清TIMP-1浓度可反映慢性肾炎患者肾脏纤维化程度,氯沙坦治疗能显著降低慢性肾炎患者血清TIMP-1浓度,提示氯沙坦可通过调节金属蛋白酶活性,从而减缓肾脏纤维化.

    作者:汤珣 刊期: 2003年第09期

  • 钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的实验研究

    目的探讨钩吻素子(Kou)体外能否诱导LoVo细胞凋亡.方法以Kou(50μmol/L)作用于LoVo细胞,经光镜、电镜和荧光显微镜观察细胞凋亡情况,并用流式细胞仪检测细胞增殖周期状态.结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察均证实Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且凋亡百分率随Kou作用时间的延长而升高.经Kou作用后的肿瘤细胞,细胞周期状态发生明显变化,G0/G1期细胞从31.3%上升到42.3%,S期细胞从62.0%下降到38.7%.结论 Kou可诱导LoVo细胞凋亡,且存在时间依赖关系,Kou可抑制细胞DNA的合成,阻止细胞由G1期向S期转化.

    作者:迟德彪;雷林生;金宏;庞建新;蒋毅萍 刊期: 2003年第09期

  • 缬沙坦治疗肾性高血压64例临床观察

    目的观察缬沙坦对慢性肾病继发性高血压的治疗作用.方法对64例肾性高血压患者应用缬沙坦治疗8周,观测治疗前后的血压及血钾、钠、氯、24h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、血促红细胞生成素(Epo)等的变化.结果应用缬沙坦8周后,血钾、钠、氯、24 h时尿蛋白定量、BUN、SCr、Epo无明显变化(P>0.05);24 h尿蛋白定量减少(P<0.05).结论缬沙坦在治疗慢性肾病继发性高血压的过程中对血钾、钠、氯、BUN、SCr及Epo无明显影响,使24 h尿蛋白定量明显减少.

    作者:何淑贤;孙升云;凌汉新 刊期: 2003年第09期

  • 中环、指中节逆行C型皮瓣修复拇、食指末节脱套伤

    C型皮瓣是目前修复手指末节脱套伤的一种较为先进的方法.我院1999年5月~2002年9月应用中指、环指中节逆行C型皮瓣修复拇指、食指末节脱套伤9例,所有皮瓣均成活,外形满意.此方法易行、简便,术后断蒂早.但范围局限,感觉较差,对供指外观有一定影响.

    作者:张兴阳;王甲汉 刊期: 2003年第09期

  • 人发角蛋白神经导管诱导兔胫神经修复时NGF和p75的表达及分布

    目的研究人发角蛋白(HHK)神经导管诱导兔胫神经缺损再生修复时神经生长因子(NGF)及其低亲和受体p75的表达及分布.方法取正常胫神经、缝线连接的胫神经和HHK导管桥接的胫神经术后不同时期的切口部位及相邻组织制作石蜡切片,用免疫组化法对切片进行染色.结果正常胫神经组织中无NGF阳性染色.术后76d,HHK周围的新生组织中NGF免疫组化染色表现为强阳性,而缝线周围的组织中无阳性着色.术后100d,与正常胫神经组织无显著差异.正常胫神经组织中无p75阳性染色.术后76 d,导管组HHK周围较成熟的神经组织中p75免疫组化染色为弱阳性,而新生组织中为强阳性.术后100d,导管组的p75免疫组化染色与正常神经组织无显著差别.结论 HHK及其降解产物能诱导NGF和p75的产生,为神经再生创造良好的微环境;而缝线无此诱导作用.在新生神经组织中NGF和p75含量多,较成熟的神经组织中含量少.

    作者:胡庆柳;朴英杰;邹飞 刊期: 2003年第09期

  • 难治性急性髓系白血病预后因素分析

    目的分析难治性急性髓系白血病(AML)的预后因素,为难治性AML治疗方案的选择提供理论基础.方法选取接受了2个标准DA方案诱导治疗的48例复发性难治性AML患者,分析患者年龄、性别、对标准诱导治疗的反应,遗传学异常、骨髓中白血病细胞比例、外周血情况、髓外浸润以及乳酸脱氢酶(LDH)等因素对患者生存期的影响.结果 经Cox回归分析显示,患者在标准诱导治疗后达到完全缓解、缓解期大于6个月、有较好预后的细胞遗传学异常、骨髓白血病细胞比例小于50%、无严重贫血、无肝脾肿大和中枢神经系统白血病、血清LDH小于360 U/L者预后较好;而年龄、性别、外周血白细胞总数以及淋巴结肿大对患者生存期无明显影响.结论对于有较好预后因素的AML患者应给予积极的治疗,争取较长的持续缓解期;对于预后差的病例应尽快予以异基因骨髓移植.

    作者:张青;冯茹;刘启发;刘晓力;徐冰;郑维扬;孟凡义;周淑芸 刊期: 2003年第09期

  • 原发性肝癌MnDPDP增强MRI四种GRE序列的比较研究

    目的评价4种GRE序列在原发性肝癌锰福地吡三钠(MnDPDP)增强MRI检查中的价值.方法对13例原发性肝癌患者进行常规平扫和MnDPDP增强扫描.平扫序列为T1WFLASH、压脂FLASH、同相位与反相位FLASH,以及T2WTSE,静脉滴注MnDPDP后30min开始增强扫描,并进行24h延迟成像,采用与平扫相同的T1W序列.计算肝脏及病灶信噪比(SNR)及病灶与肝脏的对比噪声比(CNR).结果 4种GRE序列成像SNR和CNR无显著性差异(P>0.05),但反相位能检出常规FLASH和同相位无法显示的肝癌脂肪变性.结论同反相位序列可反映肝癌脂肪变性特征,检查简便,在对肝癌患者进行MnDPDP增强MRI检查时建议常规采用.

    作者:郭涛;张雪林;昌仁民;张玉忠 刊期: 2003年第09期

  • 复合人工骨与自体骨移植近期融合效果比较研究

    目的评价复合人工骨材料珊瑚羟基磷灰石-重组人骨形态形成蛋白-几丁糖(coralline hydroxyapatite composite,CHC)做为自体骨移植替代物在手术后10周的融合效果.方法按序贯实验设计方法设计试验,分别以CHC和自体骨应用于骨不连、脊柱融合病例的治疗,于术后10周行X光检查,并按照Lane-Sandhu评分法中骨形成的评定标准来确定愈合情况,以愈合情况为观察指标,选定α=0.05、β=0.05、γ=FS/SF=2进行统计分析.结果去除观察结果相同的2对至第13对时,曲线与上界相交,停止试验.结论从CHC做为骨移植替代物手术后10周的骨融合情况来讲,CHC比自体骨融合效果好.

    作者:张余;尹庆水;李兆麟;徐国洲;黄华扬;张宏斌 刊期: 2003年第09期

  • 猪脱细胞真皮与自体刃厚皮复合移植的临床应用

    目的观察深度烧伤和瘢痕切除创面进行猪脱细胞真皮与自体刃厚皮一步法与两步法复合移植的临床效果.方法 2000年4月~2002年12月间用猪脱细胞真皮与自体刃厚皮复合移植修复深度烧伤创面或瘢痕切除创面16例,对一步移植法和两步移植法进行比较.结果一步移植法中,4例植皮完全成活,3例植皮95%以上成活,1例植皮80%成活;两步移植法中,5例植皮完全成活,3例植皮95%以上成活.均无1例补植皮.随访6个月~2年,一步和两步移植法中的复合移植皮肤外观、质地基本接近正常皮肤,瘢痕增生不明显.结论猪脱细胞真皮与自体刃厚皮复合移植是深度烧伤创面、瘢痕切除创面的良好修复材料,一步移植法可行、简便、实用.

    作者:何国;林新华;钟泉 刊期: 2003年第09期

  • 放射性肺损伤的中医药防治方法探讨

    目的探讨中医药对放射性肺损伤的防治方法.方法根据放射性肺损伤的发生发展规律、临床症状、辅助检查、病理特点等对其进行归纳分类,分为隐匿期、急性期、发展期3期,分别予以益气养阴、润肺止咳,清热解毒、宣肺化痰,益气活血、补肾纳肺等对症治疗.结果分期后临床中、西医师均能比较容易掌握放射性肺损伤中医药防治的时机和方法,能及时、适当地给予中医药辅助治疗;配合中药治疗急性放射性肺炎、放射性食管炎、白细胞减少、半年复发转移的发生率降低,患者精神、食欲、睡眠等均优于对照组,患者生活质量提高.结论本方法简单、实用,打破了西医不能辨证论治的惯例,适合于在临床推广.

    作者:蔡红兵;罗荣城 刊期: 2003年第09期

  • 肺炎患者血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能力、丙二醛的测定

    目的探讨血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)的测定在肺炎诊断和治疗中的意义.方法 68例肺炎患者按类型分为急性肺炎组、慢性支气管炎合并肺部感染组和急性支气管肺炎组.采用比色法分别测定各组肺炎患者和76例正常人对照组的血清SOD、GSH-Px、T-AOC及MDA浓度.结果 3组肺炎患者血清SOD、GSH-Px及MDA的浓度均明显高于正常对照组,而T-AOC则明显低于正常对照组(P<0.05或P<0.01).另外,各肺炎组间也存在显著性差异(P<0.01).结论血清SOD、GSH-Px、T-AOC及MDA的测定有助于对肺炎患者的诊断及康复治疗.

    作者:李国富;何一凡;黄木荣;郭洁莲;吴清坛;陈顺金 刊期: 2003年第09期

  • 幽门螺杆菌重组粘附素的安全性、免疫原性和生物学活性的体外评价

    目的通过体外实验确定重组粘附素(rBabA)的安全性、免疫原性及粘附作用,探讨rBabA在幽门螺杆菌(Hp)疫苗应用中的可行性.方法二苯胺法测定rBabA致T细胞凋亡率,ELISA法测定Hp感染者血清中抗rBabA抗体,MTT法测定T细胞对rBabA的增殖反应,光镜计数法研究rBabA对Hp与胃癌细胞粘附的影响.结果体外安全性实验表明rBabA无明显致BabA抗体阴性者T细胞凋亡的作用,而且可刺激rBabA抗体阳性者T细胞的增殖;ELISA法共检测了38份Hp感染患者血清,rBabA抗体阳性率为18.4%.rBabA能部分阻断Hp与胃癌细胞系的粘附.结论研究表明rBabA是安全的、具有免疫原性的Hp菌体成分,既可以刺激体液免疫,又能够提高细胞免疫,有望成为针对BabA2基因阳性Hp菌株疫苗研制中一种有效的新抗原.

    作者:白杨;陈烨;林焕建;王继德;唱韶红;周殿元;张亚历 刊期: 2003年第09期

  • 人脑胶质瘤组织全长cDNA文库的快速构建与鉴定

    目的采用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术,快速构建高质量的人脑胶质瘤组织全长cDNA文库.方法提取多份人脑胶质瘤组织标本的总RNA,混合后处理得到纯化的mRNA,利用CDSⅢ/3'PCR引物(含SfiⅠB酶切位点)反转录,用SMARTⅣOligo(dT)(含SfiⅠA酶切位点)作为mRNA5'端延伸出去的模板,合成多出一段SMARTⅣOligo(dT)互补序列的cDNA第一链,进而以此序列为引物合成全长的双链cDNA.双链cDNA经SliⅠ(A&B)酶切后克隆入经SfiⅠ酶切的λTriplEx2载体,再经噬菌体包装蛋白包装成为cDNA文库.结果获得2.4×106个重组子,重组率达100%,文库扩增后,滴度达4.5×109pfu/ml,插入cDNA平均长度为1.2kb.结论成功构建高质量的人脑胶质瘤组织全长cDNA文库,为进一步筛选、克隆人脑胶质瘤抑癌基因及特异性表达基因奠定基础.

    作者:涂艳阳;徐如祥;杨志林;姜晓丹;吴曙光;陈一招;蔡颖谦;杜谋选;高杨 刊期: 2003年第09期

南方医科大学学报杂志

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