学术投稿

基因测序“鸟枪法”

关键词:基因测序
摘要:
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 自发性食管破裂的诊断和治疗

    目的通过对15例自发性食管破裂的分析,探讨其诊断和治疗的规则.方法15例中行手术治疗11例,非手术治疗4例.结果11例痊愈,4例死亡,治愈率73%.结论早期诊断和积极手术是成功治疗自发性食管破裂的关键,对延误诊断的病例,仍应适当放宽手术适应证.

    作者:蔡开灿;王文林;杨锡耀 刊期: 2002年第04期

  • 乙型肝炎病毒宫内传播的分型

    目的研究乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)分型在乙肝病毒宫内传播的特点.方法对广州市三家医院的135例HBsAg孕产妇及其139例新生儿外周血及部分婴儿随访标本,巢式PCR扩增HBV S区基因部分片段,限制性核酸内切酶酶切PCR产物,比较酶切片段长度多态性(RFLP),以确定HBv基因型.直接测序并与Genebank相应序列比较.结果7例新生儿发生HBV的宫内传播,阳性率为7/139(5.0%),PCR-RFLP方法检测到B、C型各3/7例,D基因型1/7例.宫内传播过程中母婴HBV的基因型保持一致.S基因直接分型与上述结果一致.该7组母婴均无乙肝临床症状与体征.结论广州地区母婴宫内传播HBV以C、B基因型为主,宫内传播过程中及免疫压力下HBV-DNA发生碱基突变,但未发生在限制性内切酶的酶切位点上,尚不能由HBv基因分型对HBv感染儿的预后进行推测.

    作者:郭培奋;钟梅;侯金林 刊期: 2002年第04期

  • 米非司酮对卵巢癌细胞的增敏作用及其机制的研究

    目的研究米非司酮对卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP的增敏作用及其作用机制.方法用卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP和敏感细胞系COC1为实验对象,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测米非司酮对COC1/DDP细胞的增敏作用,流式细胞仪检测米非司酮对凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达的影响.结果 1.25 μmol/L的米非司酮能够增强COC1/DDP对顺铂的敏感性,并使Bcl-2的阳性率从(23.80±0.44)%下降至(19.40±0.69)%(P=0.000),Bax从(12.75±0.25)%上升至(25.60±0.88)%(P=0.000),其逆转作用有剂量依赖性.结论米非司酮逆转卵巢癌COC1/DDP细胞对顺铂的耐药可能与下调Bc1-2的表达、上调Bax的表达、降低Bcl-2/Bax的比率有关.

    作者:秦棠妮;王丽莉 刊期: 2002年第04期

  • 三种新抗癌疫苗靶基因

    作者: 刊期: 2002年第04期

  • 6815例腰椎间盘突出症的手术治疗

    目的探讨腰椎间盘突出症的手术治疗方法.方法采用脊神经后支阻滞麻醉屈曲位经椎板间隙侧方入路椎间盘摘除术、双开窗扩大减压治疗中央宽基底型椎间盘突出钙化、小切口开窗潜行减压髓核摘除术等三种方法共治疗腰椎间盘突出症6 815例.结果6 815例患者中5 324例经过半年至14年(平均6.3年)随访,优4 260例(80.02%)、良855例(16.06%)、进步209例(3.92%),优良率达96.08%.随访中X线检查显示手术后相应椎间隙不同程度的变窄,未见腰椎失稳和腰椎滑脱.结论采用的三种方法与传统术式比较创伤小,可大限度地保留腰椎后部结构的完整性,且手术时间短、康复快.

    作者:靳安民;张辉;刘成龙 刊期: 2002年第04期

  • 幽门螺杆菌对蒙古沙土鼠胃上皮细胞增殖的影响

    目的在幽门螺杆菌(H.pylori)长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型基础上,探讨H.pytori感染诱致胃癌发生的可能机制.方法采用H.pylori国际标准菌株NCTC11637灌喂蒙古沙土鼠,建立H.pylori长期感染动物模型;用免疫组化及原位杂交方法检测H.pylori感染致胃上皮细胞增殖的改变.结果成功建立了H.pytori长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型,其胃粘膜的组织学变化显示,H.pylori感染可致正常胃粘膜发生慢性胃炎→胃萎缩→胃上皮肠化生→胃上皮异型增生的发展过程.H.pylori感染能引起胃窦上皮细胞增殖增加(P<0.05),随着H.pylori感染时间的延长,表皮生长因子(epidermal growthfactor,EGF)mRNA及表皮生长因子受体(epidermal growthfactor receptor,EGFR)mRNA的阳性信号表达呈逐渐增加的趋势(P<0.05).结论 H.pylori定植致胃窦上皮细胞增殖的异常,对正常胃窦粘膜向不典型增生进展的过程起重要作用;EGF及EGFR在mRNA水平的异常表达可能是H.pylori定植致胃窦上皮细胞增殖异常的重要原因.

    作者:姚永莉;徐波;宋于刚;张万岱;张亚历;张振书 刊期: 2002年第04期

  • DNA直接感染细胞核的新技术

    作者: 刊期: 2002年第04期

  • 基因测序“鸟枪法”

    作者: 刊期: 2002年第04期

  • 新型单纯疱疹病毒防止癌细胞扩散

    作者: 刊期: 2002年第04期

  • 脂质体介导a1,4-Gal T反义寡核苷酸对人脑胶质瘤细胞系SWO-38的作用

    目的研究α1,4半乳糖糖基转移酶(α1,4Gal T)基因反义寡核苷酸(antisense oligonuc1eotide,ASO)对脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞的增值与凋亡的影响和与Fas表达的关系.方法采用脂质体介导的基因转染方法将α1,4Gal T基因ASO转入SWO-38细胞中.应用RT-PCR检测对α1,4Gal T mRNA表达的影响,克隆形成试验检测对细胞增值的作用,流式细胞术(FCM)和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的发生,FACS检测凋亡相关蛋白Fas表达的变化.结果脂质体介导的ASO转染后,经RT-PCR检测证实α1,4GalTmRNA基因的表达下降;克隆形成试验显示细胞生长明显受到抑制(P<0.01);DNA电泳图像呈凋亡表现;FCM检测表明,导入α1,4Gal T基因ASO的SWO-38细胞的凋亡明显增加(P<0.01);Fas蛋白表达水平明显下降(P<0.01).结论α1,4GalT基因ASO可诱导脑胶质瘤细胞系SWO-38细胞凋亡发生,其机制可能与fas基因调控有关.

    作者:郑刚;张积仁;刘发全;饶智国;王雄文;张新宇 刊期: 2002年第04期

  • 纹状体边缘区的结构和功能研究进展

    作者于1987年在纹状体内发现一个新区,根据其部位命名为边缘区.十余年来我们对边缘区的结构和功能进行了系统的研究.边缘区的结构跟纹状体其余部位不同,功能主要与学习记忆有关.边缘区的研究已经得到了国内外学者的确认.对边缘区进一步的深入研究,将对提高人们的智力、防治老年性痴呆症等智力障碍性疾病等方面有重要的理论和实践意义.

    作者:包新民;舒斯云 刊期: 2002年第04期

  • 手托法预防剖宫产儿早期胃食管返流误吸的临床观察

    目的探讨手托法在预防剖宫产儿早期胃食管返流误吸(GER-A)的临床作用.方法针对导致剖宫产儿胃食管返流误吸的主要原因,根据溺水救治原理,对496例择期剖宫产儿采取促使胃食管、气管内容物排空的手托法.结果所有处理后的新生儿无GER-A发生,无其他并发症发生.结论表明手托法能够有效地促使胃食管及气管中的内容物排出,有效地防止GER-A的发生,同时能够随时进行Apgar评分,安全易行.

    作者:郭会平;李晖;郭靖;李彦文 刊期: 2002年第04期

  • 群体反应性抗体技术及HLA配型在1700例肾移植中的应用研究

    目的探讨群体反应性抗体(panel reactive antibody,PRA)、HLA配型技术对肾移植近远期的效果.方法对拟行肾移植的患者运用PRA检测、HLA组织配型,要求HLA抗原3~6个位点相合,PRA阳性(20%以上)给予3~5次血浆置换,共1 700例作为第一组,未采用PRA、HLA组织配型的423例患者为第二组.观察两组肾移植术后免疫指标变化,近期急性排斥反应发生率以及HLA-A、B、DR位点对长期存活的影响.结果第一组肾移植术后环孢素A(cyclosporineA,CsA)用量减至5~7mg@kg-1@d-1,移植肾功能恢复时间2~16d,平均5 d,均未发生超急性排斥反应,发生急性排斥反应252例(14.8%),1年人/肾存活率高达98.6%/96.7%,3年人/肾存活率93.1%/87.3%,5年人/肾存活率88.1%/83.6%.第二组肾移植术后CsA用量8~12mg@kg-1@d-1,移植肾功能恢复时间4~30d,平均13 d,发生超急性排斥反应者9例(2.1%),急性排斥反应198例(46.8%),1年人/肾存活率86.7%/76.3%,3年人/肾存活率72.5%/67.9%,5年人/肾存活率69.5%/59.3%.结论PRA阴性加良好的HLA配型可杜绝超急性排斥反应的发生,降低急性排斥反应发生率,提高人/肾长期存活率.

    作者:于立新;姚冰;叶桂荣;杜传福;邓文锋;徐健;马俊杰;付绍杰;萧露露 刊期: 2002年第04期

  • TNP-470对大鼠血管平滑肌细胞生长的抑制作用及细胞周期的影响

    目的研究TNP470对血管平滑肌细胞生长的影响.方法采用MTT法检测TNP-470对体外培养的SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测TNP-470对细胞周期分布及其相关蛋白CDK4、CyclinD1和p27表达的影响.结果 TNP-470对血管平滑肌细胞生长具有抑制作用,IC50约为23.3μg/L.TNP-470处理组细胞S期比率[(15.43±5.16)%]和G2/M期比率[(9.49±2.70)%]明显低于对照组[(22.29±6.80)%、(16.51±8.61)%,P<0.05,P<0.05];而G0/G1期则相反,G0/G1期比率[(75.14±6.62)%]显著高于对照组[(60.38±7.23)%,P<0.001];处理组PI(23.76±7.92)明显小于对照组(39.62±7.23,P<0.001).TNP-470处理组CyclinDl蛋白(27.93±4.22)和CDK4蛋白(51.80±6.65)表达明显低于对照组82.13±3.28、59.65±7.34,P<0.05、P<0.05);但p27蛋白(51.27±3.75)表达较对照组(39.62±7.23)显著增多(P<0.001).结论 TNP-470通过细胞周期阻滞作用抑制血管平滑肌细胞的生长,该抑制作用与TNP-470影响VSMCs中CyclinDl、CDK4和p27蛋白的表达有关.

    作者:范应方;黄宗海;聂晶 刊期: 2002年第04期

  • 端粒缩短在鼻咽癌发病作用中的研究

    目的探讨端粒缩短在鼻咽癌发病中的作用.方法采用Southern杂交测定了42例鼻咽癌组织及对照组中的平均端粒长度(Mean telomere lengths,MTL).结果在鼻咽癌组织中,MTL为(4.5±2.3)kb,明显比癌旁组织(14.6±2.8)kb和慢性鼻咽炎组(15.8±3.1)kb缩短.结论端粒长度改变与包括鼻咽癌在内的人体恶性肿瘤的发病可能有密切关系.

    作者:文忠;肖健云;郭梦和 刊期: 2002年第04期

  • 衰老和DNA损坏

    作者: 刊期: 2002年第04期

  • 逆转录病毒介导人重组骨形态发生蛋白基因转染骨骼肌卫星细胞mRNA的表达

    目的探讨逆转录病毒介导重组人骨形态发生蛋白7(recombinant human bone morphogenetic protein7,rhBMP7)基因转染骨骼肌卫星细胞的可行性及目的基因的表达情况.方法体外获取和培养大鼠骨骼肌卫星细胞,构建rhBMP7逆转录病毒载体,利用脂质体介导的基因转移技术转染包装细胞PT67,经G418筛选后,制备含目的基因的重组逆转录病毒液,病毒液感染骨骼肌卫星细胞,使用RT-PCR方法检测rhBMP7 mRNA的表达情况.结果成功地构建了逆转录病毒真核表达载体,逆转录病毒介导rhBM7基因转染的骨骼肌卫星细胞能有效地表达外源性rhBMP7的mRNA.结论采用逆转录病毒介导的方法可将rhBMP7转染至骨骼肌卫星细胞中,目的基因可在mRNA水平有效表达.

    作者:魏宽海;金丹;裴国献;王珂;陈滨;马忠立;胡罢生 刊期: 2002年第04期

  • 携带mIL-12基因的增殖腺病毒在鼻咽癌细胞中增殖及mIL-12高效表达

    目的联合选择性增殖腺病毒溶肿瘤细胞和小鼠白细胞介素12(mouse intedeukin-12,mIL12)免疫治疗的作用,提高对肿瘤细胞的杀伤作用.方法用携带mIL12的选择性增殖腺病毒CNHK200-mIL12转染鼻咽癌细胞株CNE3和915,测定其在鼻咽癌细胞株中的增殖能力和mIL12的表达水平.结果 CNHK200-mIL12转染鼻咽癌细胞后,免疫组化染色显示大部分细胞腺病毒六联体蛋白(hexon)阳性,用流式细胞仪检测,转染24h后CNE3和915细胞的阳性率分别比0 h增高39%和4%,转染72 h后,病毒增殖超过1 000倍,增殖能力同m1520相似,并能高水平表达mIL12,在1×104个CNE3和915细胞中分别达到(84.5±4.6)和(75.6±3.4)ng/105空斑形成单位(plaque forming unit, PFU).结论携带mIL12的CNHK200在P53缺陷的鼻咽癌细胞中增殖,并且高效表达mIL12,为进一步研究体内外对肿瘤杀伤作用奠定基础.

    作者:聂飚;钱其军;车小燕;薛惠斌;岑信棠 刊期: 2002年第04期

  • 麻醉性镇痛药使用情况调查

    目的评估我院麻醉性镇痛药的使用情况.方法对我院门诊2000年麻醉性镇痛药全年处方进行统计分析,以药物利用指数(drugutilizationindex,DUI)作为分析判断指标.结果使用麻醉性镇痛药共6种,主要用于肾(胆)绞痛、癌痛、镇咳,DUI显示无明显滥用现象.结论本院使用麻醉性镇痛药基本合理.

    作者:郑萍;胡敏燕;张庆;付春梅 刊期: 2002年第04期

  • 乙型肝炎病毒核心启动子缺失变异对病毒抗原表达的影响

    目的为研究乙型肝炎病毒(HBV)核心启动子(CP)20/2l bp部分缺失(nt 1 748/1 747至nt 1 767)及同时存在的A1 896点变异对病毒抗原表达的影响.方法利用前期构建的HBV全基因的重组载体转染HepG2细胞后,对病毒抗原进行EUSA检测及Western-blotting分析.结果变异株分泌到细胞外的HBsAg、HBeAg及细胞内的HBcAg表达量较野毒株均明显减少.结论 HBV CP 20/21 bp部分缺失株及同时存在的A1 896点变异株的病毒抗原表达较野毒株显著下降.

    作者:彭劼;骆抗先;侯金林;郭亚兵;王战会 刊期: 2002年第04期

南方医科大学学报杂志

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