蚊防御素基因的克隆及序列分析

原位逆转录PCR检测千细胞因子mRNA在白血病细胞的表达

目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性.方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达.结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性.结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR.

作者：吴彬；刘晓力；宣文兰；冯茹；尹芳；周淑芸 刊期： 2002年第06期

腰椎椎体后缘离断症7例报告

报道7例腰椎椎体后缘离断症患者的临床表现、影像学检查、手术治疗及结果等,并对该症的发病机制、病理改变与临床表现、诊断与治疗等进行讨论.

作者：齐秋长；朱立新；贺文；覃承诃；王立君；杨俊；汪枚初；韩赛平；彭勇 刊期： 2002年第06期

HBV转录后调节序列中与干扰素α应答有关位点的初步鉴定与分析

目的筛选乙型肝炎病毒(HBV)感染者转录后调节序列中与干扰素α治疗应答有关的差异位点.方法采用PCR反应产物直接测序法,对31例HBV感染者血清中HBVDNA上的转录后调节序列(HPRE)片段扩增后测序,与GenBank中来源于欧美人群的乙型肝炎序列进行比较,并结合临床资料进行分析.结果在中国慢性HBV感染者HPRE的β2区,存在3个位点变化,分别为ntl 504(T→C),占75.0%;ntl 508(C→T),占57.1%,C→G,占10.7%;nt1509(C→T),占60.7%.而在欧美HBV感染者的HBV DNA序列中均不存在上述位点变化.HPRE位点差异的发生率与HBVDNA水平未见明显相关.结论不同种族HBV感染者转录后调节序列的差异可能与干扰素α治疗的应答性有关.

作者：邢同京；骆抗先；侯金林 刊期： 2002年第06期

X线照射对同种异体肢体移植排斥反应的影响

目的建立合适的同种异体肢体移植动物模式,研究X线照射供体对异体肢体移植的影响.方法Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者.按供者是否进行一次性X线照射(5 Gy)预处理将受者分为非照射组与照射组.切除SD大鼠的相应肢体,将Wistar大鼠的肢体移植给SD大鼠.术后长效青霉素抗炎治疗,观察宿主及移植物的变化情况.结果共进行大鼠异体肢体移植16例(非照射组与照射组各8例),非照射组成功6例,移植肢体存活时间为(12.0+2.4)d;照射组成功7例,移植肢体成活时间为(24.7±8.1)d,两组移植物的存活时间有显著差异(P〈0.05).结论X线照射供体可明显延长移植物的存活时间,对急性排斥反应有显著的防治作用.

作者：马忠立；裴国献；朱立军；石玉生；陈龙华；张敬良；王珂；陈滨；魏宽海 刊期： 2002年第06期

特异性核酶对宫颈癌细胞系CaSKi增殖与凋亡的影响

目的研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响.方法设计特异性切割HPV16E6基因的核酶,构建抗HPV16E6核酶的真核表达质粒.以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导人CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞.点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern blotting检测CaSKi、CaSKi-R、CaSKi-P 3种细胞中E6基因的表达.测定3种细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率,并以皮下接种法检测细胞在裸鼠体内的成瘤能力.流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,并测定c-myc、bcl-2、P53、fas、PCNA、C-erbB-2等基因的表达.结果点杂交证实该核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern blotting证实CaSKi-R中表达E6较CaSKi-P、CaSKi明显降低.与CaSKi细胞相比,CaSKi-R细胞生长速度、软琼脂克隆形成率明显降低,在裸鼠体内的致癌能力下降,凋亡率明显增高,出现凋亡峰,S期、G2M期细胞百分率下降;而CaSKi-P细胞无此改变.CaSKi-R细胞表达HPV16E6、C-myc、BcI-2、PCNA、C-erbB-2蛋白明显减少,而p53表达明显增高;CaSKi和CaSKi-R细胞中Fas蛋白的表达相近.CaSKi-P细胞中各基因的表达与CaSKi细胞无显著差异.结论抗HPV16E6核酶的导入能阻碍宫颈癌细胞增殖,诱导其凋亡,其原因可能在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内一系列基因表达的改变.

作者：郑燕芳；饶智国；张积仁 刊期： 2002年第06期

转录因子Sp1和Sp3对Jurkat T细胞端粒酶活性的调节作用

目的探讨转录因子Sp1、Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)的调节作用.方法用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入Jurkat T细胞,用Westem blotting方法检测蛋白表达水平;用端粒酶PCR-ELSA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度;用RT-PCR方法检测hTERTmRNA水平.结果Sp1、Sp3载体转化36 h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59.6%(P〈0.01)和36.8%(P〈0.05);随着Sp1表达水平的增加,端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加,增加率分别为38.5%(P〈0.05)和25.4%(P〈0.05).而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响.结论转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性,Sp3无此作用.

作者：庞建新；程希远；吴曙光 刊期： 2002年第06期

人尾加压素Ⅱ的心血管调节作用

综述人尾加压素Ⅱ及其受体结构、分布以及对心血管的生物学效应.

作者：钟萍；李志梁；唐朝枢 刊期： 2002年第06期

应用RD-PCR方法制备K562细胞表达谱芯片基因探针

目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段.方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增.结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段.结论RD-PCR方法适合于基因芯片探针的收集.

作者：毛向明；马文丽；姜立；郑文岭 刊期： 2002年第06期

副溶血性弧茵耐热直接相关溶血素基因的克隆与序列分析

目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5α.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础.

作者：苏建新；聂军；吴振龙 刊期： 2002年第06期

皮肤细胞感应温度的基因

作者： 刊期： 2002年第06期

胫骨粗隆和髌韧带侵润性痛风结节1例报告

1.临床资料患者男,38岁,因左膝下肿块近20年、反复疼痛5年于2001年10月9日入院.开始发现时左膝下肿块只有小手指甲大小,无不适感觉,5年前开始在左膝活动较多后感觉疼痛,近2.年来可见肿块逐渐增大、疼痛程度加重并常伴有局部肿胀.

作者：徐波；张耀旋 刊期： 2002年第06期

海马、边缘区及相关脑区基因表达差异显示分析的初步研究

目的观察海马、边缘区及相关脑区的基因表达谱是否存在差异,期望寻找到海马、边缘区的特异基因.方法从引产胎儿胎脑中准确取出海马、杏仁核、边缘区和尾壳核.用mRNA差异显示技术分析上述脑区的基因表达差异,并对海马的一个差异片段进行了克隆、测序.结果4个脑区相比,海马、边缘区各发现2个差异片段,海马的一个差异片段长度为277bp,序列与编号为AC0049人类克隆序列完全同源.结论海马、边缘区等不同脑区间基因表达存在差异.

作者：宁群；舒斯云；包新民 刊期： 2002年第06期

蚊防御素基因的克隆及序列分析

目的克隆我国重要蚊媒的防御素基因并对其序列进行分析.方法分别提取埃及伊蚊、白纹伊蚊、致乏库蚊、中华按蚊的基因组DNA和总RNA.根据国外已发表的防御索基因序列设计、合成引物,进行PCR和RT-PCR.结果分别从埃及伊蚊、白纹伊蚊、中华按蚊基因组DNA中扩增出预期片段,将片段切胶纯化后进行序列分析并与已发表的防御素基因比较,显示埃及伊蚊和白纹伊蚊的扩增片段与已发表的防御素基因序列有很高的同源性,而中华按蚊的扩增片段则与已发表的防御素基因序列的同源性较低,且不具备特征性的6个半胱氨酸序列.结论克隆出埃及伊蚊和自纹伊蚊的防御素基因,蚊虫防御素基因的同源性高低与其遗传分类距离有一定的平行关系.

作者：支国舟；陈晓光；周晓红；彭鸿娟；林立丰；易建荣；江静娴；张淑萍 刊期： 2002年第06期

我国科学家成功繁殖克隆兔

作者： 刊期： 2002年第06期

脑曲霉菌性肉芽肿误诊为结核瘤1例报告

1 .临床资料患者男,19岁,突然意识不清5 min,于1995年10月9日入地方医院,头部CT示左颞顶叶占位病变,诊断为胶质瘤,行开颅手术,近全切除肿瘤,去骨瓣减压,病理报告结核瘤.术后抗结核治疗,痊愈出院.1996年10月因言语不清、右肢体无力、行走困难1月行复查,头部MRI示左颞顶叶巨大占位病灶,为肿物复发,收入我院.

作者：周青；周敬安；耿琪；刘策；王君 刊期： 2002年第06期

我国科学家获得肺癌血清标志蛋白分子

作者： 刊期： 2002年第06期

胶原涂层煅烧骨-成骨细胞复合物的体内成骨作用

目的观察胶原涂层煅烧骨-成骨细胞复合物植人体内后成骨性能,探讨治疗骨缺损的新方法.方法以牛松质骨制成煅烧骨(TBC),并涂以胶原制成胶原涂层煅烧骨(TBCc),培养兔骨膜成骨细胞(POB),构建复合物TBCc-POB;将该复合物移植到BALB/c裸小鼠背部右侧皮下,4周取材;同时将该复合物植入兔背部右侧肌袋内,8周取材.两种动物均在对侧相应部位植入单纯TBCc作为对照,并在相应时间内取组织块常规处理后光镜、电镜观察.结果植入材料在皮下及肌袋处均有成骨细胞大量生长、增殖,并有软骨组织、骨组织形成,而对照组则没有.结论将TBCc-POB材料植入体内后,成骨细胞能够存活并产生软骨组织和骨组织.

作者：顾为望；许永华；曹宏卿；张保东；卢开柏 刊期： 2002年第06期

结节性梅毒疹1例报告

三期皮肤梅毒可分为结节性梅毒疹及梅毒树胶肿[1].2001年7月我院收治了1例结节性梅毒疹病人,现报告如下.

作者：冀航；胡志奇；周再高 刊期： 2002年第06期

凝血栓蛋白-1I型重复序列真核表达载体的构建

目的构建凝血栓蛋白-1I重复序列真核表达载体.方法采用RT-PCR技术,从人胎儿肺组织中扩增凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定及测序.结果获得了预期的扩增产物——凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,测序结果经GenBank分析,一致性为99%.结论成功构建了PcDNA3.1+/TSP-1 I型重复序列真核表达载体.

作者：李小卫；刘伊丽；吴平生；周忠江 刊期： 2002年第06期

医学科技论文英文摘要的时态、语态和人称

作者总结了医学科技论文英文摘要中各部分时态选择的一般原则,同时探讨了语态和人称的使用方法.

作者：王征爱；宋建武 刊期： 2002年第06期