邓虹珠；陈育尧；陈江华；肖炜
目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性.方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达.结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性.结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR.
作者：吴彬；刘晓力；宣文兰；冯茹；尹芳；周淑芸 刊期： 2002年第06期
目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法.方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG.建立检测充血性心力衰竭模型大鼠尿液AQP2的双抗体夹心ELISA法.结果双抗体夹心EUSA法成功建立,灵敏度为15.625 pmol/ml,批内及批间变异系数分别为4.65%和14.05%;用该法定量检测左冠状动脉结扎术后不同梗死面积充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2浓度,其结果与Westem blotting半定量检测结果一致.结论双抗体夹心EUSA法可以较好地定量检测充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2蛋白浓度,且较Western blotting更加简便易行,便于临床推广使用.
作者：卢武生；许顶立；殷晓燕；任昊；孟素荣 刊期： 2002年第06期
1 .临床资料患者男,19岁,突然意识不清5 min,于1995年10月9日入地方医院,头部CT示左颞顶叶占位病变,诊断为胶质瘤,行开颅手术,近全切除肿瘤,去骨瓣减压,病理报告结核瘤.术后抗结核治疗,痊愈出院.1996年10月因言语不清、右肢体无力、行走困难1月行复查,头部MRI示左颞顶叶巨大占位病灶,为肿物复发,收入我院.
作者：周青；周敬安；耿琪；刘策；王君 刊期： 2002年第06期
目的建立一种快速分离、纯化肿瘤组织癌细胞并提取微量RNA的方法.方法将肿瘤组织冰冻切片,快速染色,在镜下用显微操作仪从切片上分离癌巢,收集癌细胞,提取RNA并鉴定.结果冰冻切片染色清楚,癌巢分离准确,成功抽提到高质量的RNA.结论显微操作仪可以代替激光捕获显微切割仪进行特定细胞的分离,该方法可用来从少量组织的特定细胞中抽提RNA.
作者：江培洲；沈新明；黄华；石益民；姚开泰 刊期： 2002年第06期
三期皮肤梅毒可分为结节性梅毒疹及梅毒树胶肿[1].2001年7月我院收治了1例结节性梅毒疹病人,现报告如下.
作者：冀航；胡志奇；周再高 刊期： 2002年第06期
目的分析先天性右位心病理特征,探讨其诊断及外科治疗.方法总结32例右位心临床资料,对其主要的合并畸形、诊断方法及其中16例外科治疗效果进行比较和分析.结果13例镜面右位心中8例存在大动脉转位(TGA)、单心室、动脉共干等复杂畸形;右旋心以生理矫正型TGA多见(11/17),且多数伴有室间隔缺损和肺动脉狭窄(8/11);2例孤立右位心则为TGA和完全型房室管畸形并存.主要根据X线检查(胸腹平片、肺门断层片、高千伏胸片、超高速CT)、超声心动图、心导管检查明确诊断.手术方法主要有:Fontan类手术8例,解剖矫治术7例,剖胸探查1例.存活13例病人中8例为复杂畸形,5例行改良Fontan术或全腔肺动脉连接术.结论镜面右位心也可合并复杂心血管畸形,右旋心、孤立右位心的合并畸形有一定规律;X线检查对右位心的诊断、分型有重要帮助,而超声心动图、超高速CT则是明确心内畸形和手术条件的主要手段;Fontan类手术(改良Fontan或全腔肺动脉连接术)是治疗复杂先天性右位心较有前途的方法,但应严格把握手术指征.
作者：冀亚琦；孙培吾；胡佳心 刊期： 2002年第06期
目的探讨外源性补充抗氧化性维生素对骨髓移植病人抗氧化力及脂质过氧化的影响.方法将19名骨髓移植病人随机分为实验和对照组,实验组在预处理前给予维生素C(300mg/d)和维生素E(600mg/d),对照组不予补充,其余处理两者相同.测定移植前后两组病人的血浆总抗氧化力、丙二醛、全血谷胱甘肽过氧化物酶及红细胞超氧化物歧化酶水平.结果(1)移植前后实验组血浆总抗氧化力、谷胱甘肽过氧化物酶和红细胞超氧化物歧化酶值一直处于正常或正常值附近,对照组则低于正常值,两组相比有显著差异;(2)移植后实验组丙二醛值很快降至正常,对照组则一直处于较高水平,两组有显著差异.结论移植前外源性补充抗氧化性维生素可提高骨髓移植病人机体的抗氧化力,减少了脂质过氧化物的产生,有效缓解移植前大剂量放、化疗对病人机体造成的高氧化胁迫压力.
作者：林劲秋 刊期： 2002年第06期
目的构建凝血栓蛋白-1I重复序列真核表达载体.方法采用RT-PCR技术,从人胎儿肺组织中扩增凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定及测序.结果获得了预期的扩增产物——凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,测序结果经GenBank分析,一致性为99%.结论成功构建了PcDNA3.1+/TSP-1 I型重复序列真核表达载体.
作者：李小卫；刘伊丽；吴平生；周忠江 刊期： 2002年第06期
目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)中化疗药物剂量对肝细胞癌(HCC)患者T细胞亚群的影响.方法36例不能手术切除的HCC患者随机分成A、B两组,分别行选择性TACE.A组(n=18)给予小剂量化疗药物:肿瘤直径小于5 cm者给予丝裂霉素(MMC)2～4 mg;在5～8 cm之间者给予MMC4～6 mg及表阿霉素(EPI)10 mg;大于8 cm者给予MMC6～8 mg、EPI 10 mg及卡铂(CBP)100mg.B组(n=18)给予常规剂量化疗药物(MMC 10 mg、CBP300 mg及EPI 40mg).术前和术后1周用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群(包括CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD45+、CD4+CD29+、CD8+CD28+、CD8+CD28-).结果治疗前两组间各细胞亚群均无显著差异;A组患者治疗后CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD29+、CD8+CD28-无显著变化,但CD4+CD45+显著下降(P<0.05),CD8+CD28+明显增高(P<0.001);B组CD4+、CD4+CD29+和CD4+/CD8+比值显著下降(P<0.05),CD8+、CD8+CD28-显著增高(P<0.05).结论常规剂量化疗药物TACE可明显抑制细胞免疫功能,而小剂量化疗药物TACE可以提高患者细胞免疫功能.
作者：卢伟；李彦豪；何晓峰；陈勇；曾庆乐；裘玉容 刊期： 2002年第06期
目的提出一种医学图像中值滤波算法,以改进经典中值滤波存在的不足.方法将模式识别中的ISODATA聚类引入到中值滤波算法中,将分类的结果作为参数来确定如何进行中值滤波,以及是否需要进行中值滤波处理.结果本算法能够滤除严重的脉冲噪声干扰,同时保持图像细节.结论本算法跟经典中值滤波算法相比,提高了信噪比,增强了图像质量.
作者：席卫文；周猛 刊期： 2002年第06期
目的探讨颅咽管瘤影像学特点,重点讨论垂体柄的影像学表现及其在手术中的意义.方法对63例经手术治疗颅咽管瘤的影像学及手术资料进行分析.结果影像学上垂体柄发现率9.5%(6/63),27.0%(17/63)的病人可根据三脑室底受压移位的方向初步判断垂体柄的走向,均经手术证实.垂体柄术中发现率52.4%(33/63).肿瘤中心大块钙化可能影响手术全切除;影像学上肿瘤后上部条索状强化预示着瘤壁对下丘脑的浸润性生长.结论根据影像学判断垂体柄的位置和走行、肿瘤钙化特点、肿瘤后部与下丘脑结构间的关系对手术切除颅咽管瘤至关重要.
作者：漆松涛；潘军 刊期： 2002年第06期
目的研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响.方法设计特异性切割HPV16E6基因的核酶,构建抗HPV16E6核酶的真核表达质粒.以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导人CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞.点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern blotting检测CaSKi、CaSKi-R、CaSKi-P 3种细胞中E6基因的表达.测定3种细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率,并以皮下接种法检测细胞在裸鼠体内的成瘤能力.流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,并测定c-myc、bcl-2、P53、fas、PCNA、C-erbB-2等基因的表达.结果点杂交证实该核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern blotting证实CaSKi-R中表达E6较CaSKi-P、CaSKi明显降低.与CaSKi细胞相比,CaSKi-R细胞生长速度、软琼脂克隆形成率明显降低,在裸鼠体内的致癌能力下降,凋亡率明显增高,出现凋亡峰,S期、G2M期细胞百分率下降;而CaSKi-P细胞无此改变.CaSKi-R细胞表达HPV16E6、C-myc、BcI-2、PCNA、C-erbB-2蛋白明显减少,而p53表达明显增高;CaSKi和CaSKi-R细胞中Fas蛋白的表达相近.CaSKi-P细胞中各基因的表达与CaSKi细胞无显著差异.结论抗HPV16E6核酶的导入能阻碍宫颈癌细胞增殖,诱导其凋亡,其原因可能在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内一系列基因表达的改变.
作者：郑燕芳；饶智国；张积仁 刊期： 2002年第06期
1.临床资料患者男,38岁,因左膝下肿块近20年、反复疼痛5年于2001年10月9日入院.开始发现时左膝下肿块只有小手指甲大小,无不适感觉,5年前开始在左膝活动较多后感觉疼痛,近2.年来可见肿块逐渐增大、疼痛程度加重并常伴有局部肿胀.
作者：徐波；张耀旋 刊期： 2002年第06期
目的探讨转录因子Sp1、Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)的调节作用.方法用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入Jurkat T细胞,用Westem blotting方法检测蛋白表达水平;用端粒酶PCR-ELSA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度;用RT-PCR方法检测hTERTmRNA水平.结果Sp1、Sp3载体转化36 h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59.6%(P〈0.01)和36.8%(P〈0.05);随着Sp1表达水平的增加,端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加,增加率分别为38.5%(P〈0.05)和25.4%(P〈0.05).而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响.结论转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性,Sp3无此作用.
作者：庞建新；程希远；吴曙光 刊期： 2002年第06期
目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段.方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增.结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段.结论RD-PCR方法适合于基因芯片探针的收集.
作者：毛向明；马文丽；姜立；郑文岭 刊期： 2002年第06期
目的克隆我国重要蚊媒的防御素基因并对其序列进行分析.方法分别提取埃及伊蚊、白纹伊蚊、致乏库蚊、中华按蚊的基因组DNA和总RNA.根据国外已发表的防御索基因序列设计、合成引物,进行PCR和RT-PCR.结果分别从埃及伊蚊、白纹伊蚊、中华按蚊基因组DNA中扩增出预期片段,将片段切胶纯化后进行序列分析并与已发表的防御素基因比较,显示埃及伊蚊和白纹伊蚊的扩增片段与已发表的防御素基因序列有很高的同源性,而中华按蚊的扩增片段则与已发表的防御素基因序列的同源性较低,且不具备特征性的6个半胱氨酸序列.结论克隆出埃及伊蚊和自纹伊蚊的防御素基因,蚊虫防御素基因的同源性高低与其遗传分类距离有一定的平行关系.
作者：支国舟；陈晓光；周晓红；彭鸿娟；林立丰；易建荣；江静娴；张淑萍 刊期： 2002年第06期
目的探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响.方法25只成年SD雌性大鼠,随机分为Sham组(假手术组)、OVX组(单纯去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+补充雌激素组)、OVX+P组(去卵巢+补充孕激素组)、OVX+E+P组(去卵巢+补充雌、孕激素组),每组5只.喂养3个半月后处死,取肝脏检测1,25-二羟维生素D3受体mRNA.结果与去卵巢组比较:(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间;(3)孕激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调.结论雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体的表达.
作者：周筠；叶仁清；蔡德鸿；张桦 刊期： 2002年第06期
报道7例腰椎椎体后缘离断症患者的临床表现、影像学检查、手术治疗及结果等,并对该症的发病机制、病理改变与临床表现、诊断与治疗等进行讨论.
作者：齐秋长；朱立新；贺文；覃承诃；王立君；杨俊；汪枚初；韩赛平；彭勇 刊期： 2002年第06期
目的观察胶原涂层煅烧骨-成骨细胞复合物植人体内后成骨性能,探讨治疗骨缺损的新方法.方法以牛松质骨制成煅烧骨(TBC),并涂以胶原制成胶原涂层煅烧骨(TBCc),培养兔骨膜成骨细胞(POB),构建复合物TBCc-POB;将该复合物移植到BALB/c裸小鼠背部右侧皮下,4周取材;同时将该复合物植入兔背部右侧肌袋内,8周取材.两种动物均在对侧相应部位植入单纯TBCc作为对照,并在相应时间内取组织块常规处理后光镜、电镜观察.结果植入材料在皮下及肌袋处均有成骨细胞大量生长、增殖,并有软骨组织、骨组织形成,而对照组则没有.结论将TBCc-POB材料植入体内后,成骨细胞能够存活并产生软骨组织和骨组织.
作者：顾为望；许永华；曹宏卿；张保东；卢开柏 刊期： 2002年第06期
目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5α.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础.
作者：苏建新；聂军；吴振龙 刊期： 2002年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
