目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法.方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG.建立检测充血性心力衰竭模型大鼠尿液AQP2的双抗体夹心ELISA法.结果双抗体夹心EUSA法成功建立,灵敏度为15.625 pmol/ml,批内及批间变异系数分别为4.65%和14.05%;用该法定量检测左冠状动脉结扎术后不同梗死面积充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2浓度,其结果与Westem blotting半定量检测结果一致.结论双抗体夹心EUSA法可以较好地定量检测充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2蛋白浓度,且较Western blotting更加简便易行,便于临床推广使用.
作者：卢武生；许顶立；殷晓燕；任昊；孟素荣 刊期： 2002年第06期
目的建立一种快速分离、纯化肿瘤组织癌细胞并提取微量RNA的方法.方法将肿瘤组织冰冻切片,快速染色,在镜下用显微操作仪从切片上分离癌巢,收集癌细胞,提取RNA并鉴定.结果冰冻切片染色清楚,癌巢分离准确,成功抽提到高质量的RNA.结论显微操作仪可以代替激光捕获显微切割仪进行特定细胞的分离,该方法可用来从少量组织的特定细胞中抽提RNA.
作者：江培洲；沈新明；黄华；石益民；姚开泰 刊期： 2002年第06期
综述人尾加压素Ⅱ及其受体结构、分布以及对心血管的生物学效应.
作者：钟萍；李志梁；唐朝枢 刊期： 2002年第06期
目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)中化疗药物剂量对肝细胞癌(HCC)患者T细胞亚群的影响.方法36例不能手术切除的HCC患者随机分成A、B两组,分别行选择性TACE.A组(n=18)给予小剂量化疗药物:肿瘤直径小于5 cm者给予丝裂霉素(MMC)2～4 mg;在5～8 cm之间者给予MMC4～6 mg及表阿霉素(EPI)10 mg;大于8 cm者给予MMC6～8 mg、EPI 10 mg及卡铂(CBP)100mg.B组(n=18)给予常规剂量化疗药物(MMC 10 mg、CBP300 mg及EPI 40mg).术前和术后1周用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群(包括CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD45+、CD4+CD29+、CD8+CD28+、CD8+CD28-).结果治疗前两组间各细胞亚群均无显著差异;A组患者治疗后CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD29+、CD8+CD28-无显著变化,但CD4+CD45+显著下降(P<0.05),CD8+CD28+明显增高(P<0.001);B组CD4+、CD4+CD29+和CD4+/CD8+比值显著下降(P<0.05),CD8+、CD8+CD28-显著增高(P<0.05).结论常规剂量化疗药物TACE可明显抑制细胞免疫功能,而小剂量化疗药物TACE可以提高患者细胞免疫功能.
作者：卢伟；李彦豪；何晓峰；陈勇；曾庆乐；裘玉容 刊期： 2002年第06期
目的筛选乙型肝炎病毒(HBV)感染者转录后调节序列中与干扰素α治疗应答有关的差异位点.方法采用PCR反应产物直接测序法,对31例HBV感染者血清中HBVDNA上的转录后调节序列(HPRE)片段扩增后测序,与GenBank中来源于欧美人群的乙型肝炎序列进行比较,并结合临床资料进行分析.结果在中国慢性HBV感染者HPRE的β2区,存在3个位点变化,分别为ntl 504(T→C),占75.0%;ntl 508(C→T),占57.1%,C→G,占10.7%;nt1509(C→T),占60.7%.而在欧美HBV感染者的HBV DNA序列中均不存在上述位点变化.HPRE位点差异的发生率与HBVDNA水平未见明显相关.结论不同种族HBV感染者转录后调节序列的差异可能与干扰素α治疗的应答性有关.
作者：邢同京；骆抗先；侯金林 刊期： 2002年第06期
作者： 刊期： 2002年第06期
目的观察钙拮抗剂尼莫地平对重型颅脑损伤患者脑血流动力学参数(CVDI)的影响和指导尼莫地平的临床应用.方法选择80例重型颅脑损伤患者,按照完全随机设计分为2组.常规治疗组接受开颅手术、止血、脱水、抗炎、激素等综合治疗;尼莫地平治疗组在常规治疗的同时,加用尼莫地平治疗,连续用药达伤后30 d.采用CVA LH-450型脑血流动力学检测仪观察伤侧颈动脉血流平均速度(Vmean)、平均血流量(Qmean)、脑血管阻力和动态血管阻力.结果严重脑外伤后Vmean、Qmean明显下降,脑血管阻力与动态血管阻力明显升高.尼莫地平治疗组的上述指标均比常规治疗组有提前改善,两组有显著差异(P〈0.01).而且尼莫地平治疗组的预后明显好于常规治疗组.结论尼莫地平具有改善重型颅脑损伤患者脑血液循环及预后的作用.
作者：周雄鄂；王向宇；徐如祥；王清华；柯以铨；杨志林 刊期： 2002年第06期
目的收集K562细胞表达谱芯片的基因片段.方法培养K562细胞,抽提其mRNA,反转录为cDNA,应用限制性显示PCR技术(RD-PCR)分离K562细胞不同组别的产物片段,分别行PCR扩增.结果制备了可用于基因芯片制作的基因探针片段.结论RD-PCR方法适合于基因芯片探针的收集.
作者：毛向明；马文丽；姜立；郑文岭 刊期： 2002年第06期
目的建立合适的同种异体肢体移植动物模式,研究X线照射供体对异体肢体移植的影响.方法Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者.按供者是否进行一次性X线照射(5 Gy)预处理将受者分为非照射组与照射组.切除SD大鼠的相应肢体,将Wistar大鼠的肢体移植给SD大鼠.术后长效青霉素抗炎治疗,观察宿主及移植物的变化情况.结果共进行大鼠异体肢体移植16例(非照射组与照射组各8例),非照射组成功6例,移植肢体存活时间为(12.0+2.4)d;照射组成功7例,移植肢体成活时间为(24.7±8.1)d,两组移植物的存活时间有显著差异(P〈0.05).结论X线照射供体可明显延长移植物的存活时间,对急性排斥反应有显著的防治作用.
作者：马忠立；裴国献；朱立军；石玉生；陈龙华；张敬良；王珂；陈滨；魏宽海 刊期： 2002年第06期
目的探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响.方法25只成年SD雌性大鼠,随机分为Sham组(假手术组)、OVX组(单纯去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+补充雌激素组)、OVX+P组(去卵巢+补充孕激素组)、OVX+E+P组(去卵巢+补充雌、孕激素组),每组5只.喂养3个半月后处死,取肝脏检测1,25-二羟维生素D3受体mRNA.结果与去卵巢组比较:(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间;(3)孕激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调.结论雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体的表达.
作者：周筠；叶仁清；蔡德鸿；张桦 刊期： 2002年第06期
目的研究辅酶I(NADH)对体外培养正常肝细胞系L02缺血再灌注损伤模型的保护作用.方法实验分组:(1)正常对照组(control组);(2)缺血再灌注损伤组(I/R组),即用模拟缺氧液及复氧液处理;(3)NADH+缺血再灌注损伤组(NADH+I/R组),即先加NADH(终浓度为400μ/ml)后再进行缺血再灌注处理.流式细胞术观察细胞处理后1、6、12、18、24 h凋亡率及12 h时p16、p21、p53和Bc1-2蛋白表达.透射电镜观察细胞超微结构.结果NADH可明显抑制缺血再灌注损伤诱导的肝细胞凋亡,并且能够上调Bc1-2蛋白表达,下调p53、p16、p21蛋白表达,差异显著(P〈0.01);透射电镜下可见典型的细胞凋亡特征.结论NADH对缺血再灌注损伤的L02肝细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与通过调节Bc1-2家族蛋白及p16、p21、p53蛋白有关.
作者：徐小平；李开宗；窦科峰；刘发全；张积仁 刊期： 2002年第06期
目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较.方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法.由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏性.应用F-PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本,以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司的LCx试剂盒检测作为对照.结果设计合成了TB F-PCR诊断试剂盒.检测阳性率49.1%,灵敏性89.2%,特异性98.8%,符合率93.6%.结论F-PCR在灵敏性上显著优于培养法和涂片法,与LCx试剂盒检测无显著差异.F-PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义.
作者：程钢；何蕴韶；周新宇；邓文国；李虎 刊期： 2002年第06期
目的研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响.方法设计特异性切割HPV16E6基因的核酶,构建抗HPV16E6核酶的真核表达质粒.以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导人CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞.点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern blotting检测CaSKi、CaSKi-R、CaSKi-P 3种细胞中E6基因的表达.测定3种细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率,并以皮下接种法检测细胞在裸鼠体内的成瘤能力.流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,并测定c-myc、bcl-2、P53、fas、PCNA、C-erbB-2等基因的表达.结果点杂交证实该核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern blotting证实CaSKi-R中表达E6较CaSKi-P、CaSKi明显降低.与CaSKi细胞相比,CaSKi-R细胞生长速度、软琼脂克隆形成率明显降低,在裸鼠体内的致癌能力下降,凋亡率明显增高,出现凋亡峰,S期、G2M期细胞百分率下降;而CaSKi-P细胞无此改变.CaSKi-R细胞表达HPV16E6、C-myc、BcI-2、PCNA、C-erbB-2蛋白明显减少,而p53表达明显增高;CaSKi和CaSKi-R细胞中Fas蛋白的表达相近.CaSKi-P细胞中各基因的表达与CaSKi细胞无显著差异.结论抗HPV16E6核酶的导入能阻碍宫颈癌细胞增殖,诱导其凋亡,其原因可能在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内一系列基因表达的改变.
作者：郑燕芳；饶智国；张积仁 刊期： 2002年第06期
作者： 刊期： 2002年第06期
目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性.方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达.结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性.结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR.
作者：吴彬；刘晓力；宣文兰；冯茹；尹芳；周淑芸 刊期： 2002年第06期
作者： 刊期： 2002年第06期
1.临床资料患者男,30岁,因车祸导致右大腿外伤后肿痛、畸形并活动障碍6h入院.入院检查:一般情况良好,右大腿轻度肿胀,压痛,存在反常活动和骨摩擦音,右下肢感觉正常,右足和右足各足趾背伸和跖屈肌力正常.X线显示右股骨中下段粉碎性骨折.经术前准备后,急诊于伤后8 h在硬膜外麻醉下行右股骨骨折切开复位钢板内固定术.
作者：钟润泉；马伯俊；曾宪明 刊期： 2002年第06期
目的构建凝血栓蛋白-1I重复序列真核表达载体.方法采用RT-PCR技术,从人胎儿肺组织中扩增凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定及测序.结果获得了预期的扩增产物——凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,测序结果经GenBank分析,一致性为99%.结论成功构建了PcDNA3.1+/TSP-1 I型重复序列真核表达载体.
作者：李小卫；刘伊丽；吴平生；周忠江 刊期： 2002年第06期
1 .临床资料患者男,19岁,突然意识不清5 min,于1995年10月9日入地方医院,头部CT示左颞顶叶占位病变,诊断为胶质瘤,行开颅手术,近全切除肿瘤,去骨瓣减压,病理报告结核瘤.术后抗结核治疗,痊愈出院.1996年10月因言语不清、右肢体无力、行走困难1月行复查,头部MRI示左颞顶叶巨大占位病灶,为肿物复发,收入我院.
作者：周青；周敬安；耿琪；刘策；王君 刊期： 2002年第06期
目的观察都梁软胶囊和都梁丸的镇痛作用、对血瘀动物模型血流动力学的影响及毒性作用.方法在小鼠热板和扭体反应模型上,观察用药后舔足潜伏期和扭体数的改变;采用LG-R80全自动血液粘度测试仪测定血瘀大鼠模型全血、血浆的粘度变化;并行急性毒性及长期毒性观察.结果都梁丸5 g/kg@kg.w.及都梁软胶囊10、5、3 g/kg@b.w.均能减少醋酸致小鼠扭体次数,并延长小鼠舔足潜伏期.服用都梁软胶囊0.5 h后即可出现止痛作用,而都梁丸则在服用1 h后才能观察到止痛作用.都梁软胶囊和都梁丸均能降低血瘀大鼠的全血粘度及红细胞压积;急性毒性及长期毒性实验未发现药物毒性反应.结论无论是胶囊还是丸剂均有明显的止痛、降低血瘀大鼠的全血粘度及红细胞压积作用,但都梁软胶囊在止痛方面起效快,且临床应用有效、安全.
作者：邓虹珠；陈育尧；陈江华；肖炜 刊期： 2002年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
