目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较.方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法.由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏性.应用F-PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本,以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司的LCx试剂盒检测作为对照.结果设计合成了TB F-PCR诊断试剂盒.检测阳性率49.1%,灵敏性89.2%,特异性98.8%,符合率93.6%.结论F-PCR在灵敏性上显著优于培养法和涂片法,与LCx试剂盒检测无显著差异.F-PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义.
作者：程钢；何蕴韶；周新宇；邓文国；李虎 刊期： 2002年第06期
目的克隆我国重要蚊媒的防御素基因并对其序列进行分析.方法分别提取埃及伊蚊、白纹伊蚊、致乏库蚊、中华按蚊的基因组DNA和总RNA.根据国外已发表的防御索基因序列设计、合成引物,进行PCR和RT-PCR.结果分别从埃及伊蚊、白纹伊蚊、中华按蚊基因组DNA中扩增出预期片段,将片段切胶纯化后进行序列分析并与已发表的防御素基因比较,显示埃及伊蚊和白纹伊蚊的扩增片段与已发表的防御素基因序列有很高的同源性,而中华按蚊的扩增片段则与已发表的防御素基因序列的同源性较低,且不具备特征性的6个半胱氨酸序列.结论克隆出埃及伊蚊和自纹伊蚊的防御素基因,蚊虫防御素基因的同源性高低与其遗传分类距离有一定的平行关系.
作者：支国舟；陈晓光；周晓红；彭鸿娟；林立丰；易建荣；江静娴；张淑萍 刊期： 2002年第06期
1.临床资料患者男,38岁,因左膝下肿块近20年、反复疼痛5年于2001年10月9日入院.开始发现时左膝下肿块只有小手指甲大小,无不适感觉,5年前开始在左膝活动较多后感觉疼痛,近2.年来可见肿块逐渐增大、疼痛程度加重并常伴有局部肿胀.
作者：徐波；张耀旋 刊期： 2002年第06期
目的构建凝血栓蛋白-1I重复序列真核表达载体.方法采用RT-PCR技术,从人胎儿肺组织中扩增凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定及测序.结果获得了预期的扩增产物——凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,测序结果经GenBank分析,一致性为99%.结论成功构建了PcDNA3.1+/TSP-1 I型重复序列真核表达载体.
作者：李小卫；刘伊丽；吴平生；周忠江 刊期： 2002年第06期
作者： 刊期： 2002年第06期
目的建立合适的同种异体肢体移植动物模式,研究X线照射供体对异体肢体移植的影响.方法Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者.按供者是否进行一次性X线照射(5 Gy)预处理将受者分为非照射组与照射组.切除SD大鼠的相应肢体,将Wistar大鼠的肢体移植给SD大鼠.术后长效青霉素抗炎治疗,观察宿主及移植物的变化情况.结果共进行大鼠异体肢体移植16例(非照射组与照射组各8例),非照射组成功6例,移植肢体存活时间为(12.0+2.4)d;照射组成功7例,移植肢体成活时间为(24.7±8.1)d,两组移植物的存活时间有显著差异(P〈0.05).结论X线照射供体可明显延长移植物的存活时间,对急性排斥反应有显著的防治作用.
作者：马忠立；裴国献；朱立军；石玉生；陈龙华；张敬良；王珂；陈滨；魏宽海 刊期： 2002年第06期
从小续命汤方的起源、组方的机制、临床以及实验研究等多方面评价小续命汤在脑卒中治疗中的地位.
作者：朱心红；陈素云；高天明 刊期： 2002年第06期
目的分析先天性右位心病理特征,探讨其诊断及外科治疗.方法总结32例右位心临床资料,对其主要的合并畸形、诊断方法及其中16例外科治疗效果进行比较和分析.结果13例镜面右位心中8例存在大动脉转位(TGA)、单心室、动脉共干等复杂畸形;右旋心以生理矫正型TGA多见(11/17),且多数伴有室间隔缺损和肺动脉狭窄(8/11);2例孤立右位心则为TGA和完全型房室管畸形并存.主要根据X线检查(胸腹平片、肺门断层片、高千伏胸片、超高速CT)、超声心动图、心导管检查明确诊断.手术方法主要有:Fontan类手术8例,解剖矫治术7例,剖胸探查1例.存活13例病人中8例为复杂畸形,5例行改良Fontan术或全腔肺动脉连接术.结论镜面右位心也可合并复杂心血管畸形,右旋心、孤立右位心的合并畸形有一定规律;X线检查对右位心的诊断、分型有重要帮助,而超声心动图、超高速CT则是明确心内畸形和手术条件的主要手段;Fontan类手术(改良Fontan或全腔肺动脉连接术)是治疗复杂先天性右位心较有前途的方法,但应严格把握手术指征.
作者：冀亚琦；孙培吾；胡佳心 刊期： 2002年第06期
作者： 刊期： 2002年第06期
目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性.方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达.结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性.结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR.
作者：吴彬；刘晓力；宣文兰；冯茹；尹芳；周淑芸 刊期： 2002年第06期
目的研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响.方法设计特异性切割HPV16E6基因的核酶,构建抗HPV16E6核酶的真核表达质粒.以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导人CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞.点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern blotting检测CaSKi、CaSKi-R、CaSKi-P 3种细胞中E6基因的表达.测定3种细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率,并以皮下接种法检测细胞在裸鼠体内的成瘤能力.流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,并测定c-myc、bcl-2、P53、fas、PCNA、C-erbB-2等基因的表达.结果点杂交证实该核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern blotting证实CaSKi-R中表达E6较CaSKi-P、CaSKi明显降低.与CaSKi细胞相比,CaSKi-R细胞生长速度、软琼脂克隆形成率明显降低,在裸鼠体内的致癌能力下降,凋亡率明显增高,出现凋亡峰,S期、G2M期细胞百分率下降;而CaSKi-P细胞无此改变.CaSKi-R细胞表达HPV16E6、C-myc、BcI-2、PCNA、C-erbB-2蛋白明显减少,而p53表达明显增高;CaSKi和CaSKi-R细胞中Fas蛋白的表达相近.CaSKi-P细胞中各基因的表达与CaSKi细胞无显著差异.结论抗HPV16E6核酶的导入能阻碍宫颈癌细胞增殖,诱导其凋亡,其原因可能在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内一系列基因表达的改变.
作者：郑燕芳；饶智国；张积仁 刊期： 2002年第06期
目的探讨精氨酸增强的胃肠外营养对结直肠癌患者术后的免疫功能的影响.方法随机选择在南方医院普外科住院治疗的40例结直肠癌患者,术后分别接受常规肠外营养支持或精氨酸增强的肠外营养支持(20g/d)1周,检测及分析术前、术后不同时期的免疫功能(包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2R、NK、C3、C4、CH50、IgG、IgA、IgM等指标).结果结直肠患者入院时均有明显的免疫抑制,精氨酸增强的肠外营养支持组患者的免疫功能(CD4+、CD4+/CD8+、NK、IL2R)在术后第4天、第7天与对照组相比有明显改善(P<0.05).结论精氨酸能改善大肠癌患者术后的免疫功能,增进肠外营养的效果.
作者：宋京翔；卿三华；黄祥成；齐德林 刊期： 2002年第06期
目的研究辅酶I(NADH)对体外培养正常肝细胞系L02缺血再灌注损伤模型的保护作用.方法实验分组:(1)正常对照组(control组);(2)缺血再灌注损伤组(I/R组),即用模拟缺氧液及复氧液处理;(3)NADH+缺血再灌注损伤组(NADH+I/R组),即先加NADH(终浓度为400μ/ml)后再进行缺血再灌注处理.流式细胞术观察细胞处理后1、6、12、18、24 h凋亡率及12 h时p16、p21、p53和Bc1-2蛋白表达.透射电镜观察细胞超微结构.结果NADH可明显抑制缺血再灌注损伤诱导的肝细胞凋亡,并且能够上调Bc1-2蛋白表达,下调p53、p16、p21蛋白表达,差异显著(P〈0.01);透射电镜下可见典型的细胞凋亡特征.结论NADH对缺血再灌注损伤的L02肝细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与通过调节Bc1-2家族蛋白及p16、p21、p53蛋白有关.
作者：徐小平；李开宗；窦科峰；刘发全；张积仁 刊期： 2002年第06期
目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)中化疗药物剂量对肝细胞癌(HCC)患者T细胞亚群的影响.方法36例不能手术切除的HCC患者随机分成A、B两组,分别行选择性TACE.A组(n=18)给予小剂量化疗药物:肿瘤直径小于5 cm者给予丝裂霉素(MMC)2～4 mg;在5～8 cm之间者给予MMC4～6 mg及表阿霉素(EPI)10 mg;大于8 cm者给予MMC6～8 mg、EPI 10 mg及卡铂(CBP)100mg.B组(n=18)给予常规剂量化疗药物(MMC 10 mg、CBP300 mg及EPI 40mg).术前和术后1周用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群(包括CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD45+、CD4+CD29+、CD8+CD28+、CD8+CD28-).结果治疗前两组间各细胞亚群均无显著差异;A组患者治疗后CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD29+、CD8+CD28-无显著变化,但CD4+CD45+显著下降(P<0.05),CD8+CD28+明显增高(P<0.001);B组CD4+、CD4+CD29+和CD4+/CD8+比值显著下降(P<0.05),CD8+、CD8+CD28-显著增高(P<0.05).结论常规剂量化疗药物TACE可明显抑制细胞免疫功能,而小剂量化疗药物TACE可以提高患者细胞免疫功能.
作者：卢伟；李彦豪；何晓峰；陈勇；曾庆乐；裘玉容 刊期： 2002年第06期
目的建立较为稳定的定量检测尿液水通道蛋白-2(AQP2)的酶联免疫吸附测定(ELISA)法.方法人工合成AQP2蛋白C-末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段,并与KLH联接,制备兔抗AQP2多肽片段的多克隆抗体,用辣根过氧化物酶标记部分抗AQP2抗体IgG.建立检测充血性心力衰竭模型大鼠尿液AQP2的双抗体夹心ELISA法.结果双抗体夹心EUSA法成功建立,灵敏度为15.625 pmol/ml,批内及批间变异系数分别为4.65%和14.05%;用该法定量检测左冠状动脉结扎术后不同梗死面积充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2浓度,其结果与Westem blotting半定量检测结果一致.结论双抗体夹心EUSA法可以较好地定量检测充血性心力衰竭模型大鼠的尿AQP2蛋白浓度,且较Western blotting更加简便易行,便于临床推广使用.
作者：卢武生；许顶立；殷晓燕；任昊；孟素荣 刊期： 2002年第06期
1 .临床资料患者男,19岁,突然意识不清5 min,于1995年10月9日入地方医院,头部CT示左颞顶叶占位病变,诊断为胶质瘤,行开颅手术,近全切除肿瘤,去骨瓣减压,病理报告结核瘤.术后抗结核治疗,痊愈出院.1996年10月因言语不清、右肢体无力、行走困难1月行复查,头部MRI示左颞顶叶巨大占位病灶,为肿物复发,收入我院.
作者：周青；周敬安；耿琪；刘策；王君 刊期： 2002年第06期
目的建立一种快速分离、纯化肿瘤组织癌细胞并提取微量RNA的方法.方法将肿瘤组织冰冻切片,快速染色,在镜下用显微操作仪从切片上分离癌巢,收集癌细胞,提取RNA并鉴定.结果冰冻切片染色清楚,癌巢分离准确,成功抽提到高质量的RNA.结论显微操作仪可以代替激光捕获显微切割仪进行特定细胞的分离,该方法可用来从少量组织的特定细胞中抽提RNA.
作者：江培洲；沈新明；黄华；石益民；姚开泰 刊期： 2002年第06期
1.临床资料患者男,30岁,因车祸导致右大腿外伤后肿痛、畸形并活动障碍6h入院.入院检查:一般情况良好,右大腿轻度肿胀,压痛,存在反常活动和骨摩擦音,右下肢感觉正常,右足和右足各足趾背伸和跖屈肌力正常.X线显示右股骨中下段粉碎性骨折.经术前准备后,急诊于伤后8 h在硬膜外麻醉下行右股骨骨折切开复位钢板内固定术.
作者：钟润泉；马伯俊；曾宪明 刊期： 2002年第06期
目的探讨颅咽管瘤影像学特点,重点讨论垂体柄的影像学表现及其在手术中的意义.方法对63例经手术治疗颅咽管瘤的影像学及手术资料进行分析.结果影像学上垂体柄发现率9.5%(6/63),27.0%(17/63)的病人可根据三脑室底受压移位的方向初步判断垂体柄的走向,均经手术证实.垂体柄术中发现率52.4%(33/63).肿瘤中心大块钙化可能影响手术全切除;影像学上肿瘤后上部条索状强化预示着瘤壁对下丘脑的浸润性生长.结论根据影像学判断垂体柄的位置和走行、肿瘤钙化特点、肿瘤后部与下丘脑结构间的关系对手术切除颅咽管瘤至关重要.
作者：漆松涛；潘军 刊期： 2002年第06期
报道7例鼻咽、鼻腔外扩展的鼻咽纤维血管瘤的诊治体会,探讨范围广泛的巨大鼻咽纤维血管瘤的手术径路、手术方法和注意事项.
作者：郭梦和；李永贺；黄以乐 刊期： 2002年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
