学术投稿

非放射性杂交标记系统

吴锦雅;周宏伟

关键词:非放射性, 生物素, 地高辛, 荧光素
摘要:非放射性杂交标记分子的出现极大地促进了杂交技术的推广应用,对整个分子生物学都有深远的影响。本文介绍非放标记系统种类(半抗原类、荧光色素类及酶类)各自的原理及优缺点,并比较对其在原位杂交中的应用。
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

    目的探讨大鼠脊髓损伤后诱导型NOS(iNOS)基因表达变化规律。方法参考Nystrom方法建立的大鼠脊髓压迫伤模型,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织iNOS mRNA的表达情况。结果正常脊髓组织内未见iNOS mRNA表达,脊髓压迫伤后iNOS mRNA开始表达并逐渐增强,伤后24 h达到高峰。结论 iNOS未参与脊髓组织正常生理调节,脊髓损伤后iNOS mRNA开始表达并逐渐增强,提示iNOS参与了继发性脊髓损伤过程。

    作者:刘成龙;靳安民;周初松;闵少雄;姚伟涛 刊期: 2001年第05期

  • 肺性脑病呼吸道感染的诊治

    肺性脑病是慢性肺原性心脏病的严重并发症,是死亡的主要原因之一。而急性呼吸道感染常常是肺心病并发肺性脑病的主要诱因。所以积极有效地控制感染在预防和抢救肺性脑病方面起着重要作用。

    作者:刘爱华;罗雅玲 刊期: 2001年第05期

  • 磺胺嘧啶银均匀微晶胶原蛋白烧伤膜的制备及其质量控制

    目的制备磺胺嘧啶银均匀微晶胶原蛋白烧伤膜,测定磺胺嘧啶银均匀微晶胶原蛋白烧伤膜的含量。方法应用交联剂法制备磺胺嘧啶银均匀微晶胶原蛋白烧伤膜,用分光光度法测定磺胺嘧啶银均匀微晶胶原蛋白烧伤膜含量。结果该法得到乳白色半透明、光滑、具有弹性的凝胶膜状物,检测线性范围为4.1~14.2 mg/L,r=0.9999,磺胺嘧啶银方法回收率为(100.30±0.01)%、磺胺嘧啶银均匀微晶方法回收率为(100.44±0.09)%;日内RSD为(1.13±0.63)%、日间RSD为(1.63±0.33)%。结论用交联剂法制备胶原蛋白膜具有简便,便于铸型,成膜性好等优点,可用于SD-Ag胶原蛋白烧伤膜的质量控制。

    作者:腊蕾;蒋雪涛;霍启录 刊期: 2001年第05期

  • 特异性靶向嵌合疫苗研究进展

    特异性靶向嵌合疫苗,是用基因工程技术将抗原多肽或蛋白质分子与一些结合APC表面受体的分子融合,通过APC表面受体与配体相互作用,使抗原特异性靶向APC,提高APC对有效剂量抗原摄取和加工处理,从而增强免疫应答反应。

    作者:车小燕;黄颉 刊期: 2001年第05期

  • 外周血T淋巴细胞激活与哮喘发病的关系

    目的探讨外周血T淋巴细胞激活释放的细胞因子在哮喘发病中的作用。方法采用酶联免疫法检测30例哮喘患者及20名健康人血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、白细胞介素(IL)-4、IL-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果哮喘患者血清sIL-2R、IL-4、IL-5及TNF-α浓度均明显高于正常对照组。经糖皮质激素治疗后sIL-2R、IL-4、IL-5和TNF-α浓度显著下降。结论 T淋巴细胞激活释放的细胞因子在哮喘发病中起重要作用,糖皮质激素抗气道炎症作用,可能是通过抑制T淋巴细胞活化,减少细胞因子释放来实现的。

    作者:邓火金;陈晶 刊期: 2001年第05期

  • 重组人肝细胞生长因子的纯化及鉴定

    目的对重组人肝细胞生长因子(Recombinant human hepatocyte growth facor, rhHGF)进行初步纯化及鉴定。方法培养上清液经过离心、超滤,在FPLC系统上经肝素亲和层析分离纯化,用ELISA法检测、收集rhHGF。SDS-PAGE电泳鉴定纯度和相对分子质量,大鼠原代肝细胞培养法检测rhHGF的生物学活性。结果 rhHGF主要在0.9~1.3 mol/L NaCl范围内被洗脱,由约62 000和34000两个亚基组成,明显促进大鼠肝细胞DNA合成。结论经肝素亲和层析分离,从表达rhHGF的CHO细胞培养上清液中纯化出有活性的rhHGF。

    作者:丘玉昌;朱正光;徐继红;徐伟;吴曙光 刊期: 2001年第05期

  • 系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞分泌IL-12的水平及其临床意义

    目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞(PBMC)分泌IL-12的水平,探讨其与SLE活动性的关系。方法体外培养PBMC,予脂多糖(LPS)刺激后用夹心ELISA法检测其上清中的IL-12水平,用系统性红斑狼疮疾病活动性指数(SLEDAI)估计SLE的病情活动性。结果 SLE患者PBMC分泌IL-12水平[(645.05±13.85)pg/ml]较正常对照[(657.96±6.91)pg/ml]低(t=3.695,P=0.01),且与SLEDAI呈负相关(r=-0.873,tr=8.205,P<0.01)。结论 SLE患者存在IL-12水平的异常,且IL-12水平可作为评价SLE患者病情活动性大小的一个有效指标。

    作者:张红娟;王宗发;彭学标 刊期: 2001年第05期

  • 非放射性杂交标记系统

    非放射性杂交标记分子的出现极大地促进了杂交技术的推广应用,对整个分子生物学都有深远的影响。本文介绍非放标记系统种类(半抗原类、荧光色素类及酶类)各自的原理及优缺点,并比较对其在原位杂交中的应用。

    作者:吴锦雅;周宏伟 刊期: 2001年第05期

  • Internet上的消化医学资源

    目的精选Internet上可资利用的消化医学资源,指导消化医学工作者及患者利用。方法从多种途径搜集Internet上消化医学及相关站点的网址,按一定标准对所有站点进行筛选和评价。结果搜集到1000多个网址,经筛选后收录了68个实用的站点或网页,按不同标准归类后列出。结论Internet上存在着极其丰富的消化医学资源,但要及时、准确、全面地开发利用,尚需医学情报工作者和Internet用户共同努力。

    作者:杨金星;王征爱 刊期: 2001年第05期

  • 白细胞介素12 mRNA在慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞中的表达

    目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞(PBMC)中IL-12 mRNA的表达水平,了解其对乙型肝炎病毒和宿主作用的影响。方法临床51例慢性乙型肝炎患者和13例正常对照者,采用RT-PCR法扩增IL-12mRNA,以β肌动蛋白(β-actin)的表达作为内参照,比较IL-12 mRNA的表达水平。结果慢性乙型肝炎感染者活动期外周血单个核细胞中IL-12 mRNA表达明显高于正常对照组(F=11.7,P<0.01)。慢性乙型肝炎患者IL-12 mRNA的表达水平与其肝组织病理的炎症程度有关,中、重度炎症者IL-12 P40表达高于轻度炎症者。结论在慢性乙型肝炎病程发展过程中诱导了一个病毒特异性的TH细胞活动,而IL-12是建立宿主免疫反应、控制乙型肝炎病毒复制的一个重要因子。

    作者:张明霞;章廉;文维群;胡章勇;骆抗先 刊期: 2001年第05期

  • 左旋门冬酰胺酶致中毒性脑病1例

    1 临床资料 患者,男,21岁,因牙龈出血伴双下肢瘀点2d入住我科,经骨髓穿刺检查确诊为急性淋巴细胞白血病(L3型),予以VDLP方案诱导达完全缓解,并经中剂量阿糖胞苷加威猛巩固治疗一疗程后出院。出院后不久即出现双下肢乏力,双膝关节酸痛,再次入住我科。入院时体查:体温37.4℃,呼吸20次/min,脉搏84次/min,血压16/12kPa,慢性病容,轻度贫血貌,全身皮肤未见出血点,浅表淋巴结未触及肿大,颈软,心肺无异常,腹软,肝右锁骨中线肋缘下3cm,质软,无压痛,脾脏左肋下2cm,无触痛。病理反射未引出。入院查血常规:WBC 5.0×109L,HGB 101 g/L,PLT 2.8×1011/L。

    作者:李秋平;吴秉毅 刊期: 2001年第05期

  • 阿霉素肾病大鼠外周血白细胞及肾脏糖皮质激素受体的变化

    目的为弄清大鼠肾小球肾炎时外周血白细胞糖皮质激素受体(GR)与肾脏受体的变化的关系。方法通过静脉注射阿霉素复制大鼠微小病变型肾小球肾病模型,用放射配体结合法测定外周血白细胞GR及肾脏GR的变化。结果外周血白细胞GR显著降低,而肾胞浆GR无明显变化,两者无明显相关性。

    作者:乐颖影;李晓文 刊期: 2001年第05期

  • 热化疗联合5-Fu诱导大肠癌细胞凋亡和bcl-2表达

    目的研究热化疗诱导大肠癌(LoVo)细胞凋亡及其与bcl-2基因表达的关系,探讨热化疗治疗大肠癌的机制。方法应用热疗联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)在不同药物浓度、时间和温度条件下诱导LoVo细胞株凋亡,以流式细胞仪检测其凋亡率及bcl-2基因的表达。结果随着药物浓度的升高、作用时间的延长,细胞凋亡率增加;在相同时间和浓度条件下,热疗联合5-Fu的凋亡率与单纯化疗组、单纯热疗组相当;随着药物浓度的升高,bcl-2的表达下调;各处理组与对照组比较均差异显著(P<0.05);但热化疗使bcl-2表达下调的程度与单纯热疗及单纯化疗相当;高温也可以使bcl-2的表达下调。结论热化疗、单纯化疗及单纯热疗均能诱导LoVo细胞凋亡且可使bcl-2基因表达下调;热疗联合5-Fu在诱导凋亡及下调bcl-2基因表达方面无协同作用。

    作者:侯宝华;卿三华;张成德;董凤英;黄祥成 刊期: 2001年第05期

  • 5例心内直视手术中心肺再次转流原因分析

    近年来,随着心血管外科术前诊断、手术技能整体水平的提高以及体外循环、心肌保护技术的不断完善,因心内畸形矫正不彻底,心肌收缩功能恢复不全等原因导致的心肺再次转流发生率明显下降,但因术中操作不当所致的再次转流却仍有发生,必须引起人们的重视[1]。作者就5例术中意外情况进行分析,旨在减少手术并发症,提高手术治疗效果。

    作者:朱平;冯树生 刊期: 2001年第05期

  • 国产左心声学造影剂与Albunex的药代动力学对比研究

    目的评价国产左心声学造影剂5%声振白蛋白溶液在声学造影效果及安全性方面与国外同类产品Albunex有无不同。方法两种造影剂均设置为高、低剂量组(0.08ml/kg、0.22ml/kg),经小猎犬外周静脉注射,注射顺序以随机方法分配。共观察6条犬在造影剂注射前后左室声学显影效果及造影剂对犬血流动力学变化的影响。结果两种造影剂在低剂量时左室显影率均为83.3%,高剂量时均为100%。左室内膜节段增强效果、左室显影持续时间均随造影剂剂量增加而增加(P<0.05);但两种造影剂同剂量之间比较无差别(P>0.05)。造影剂的肺转运时间与造影剂剂量高低无关。两种造影剂对实验犬血流动力学及心电图均无影响。结论国产左心声学造影剂5%声振自蛋白溶液的超声造影效果及对犬血流动力学的影响均与国外同类产品Albunex相似。

    作者:查道刚;刘伊丽;郑燕列;谢志泉;陈树元;金伟军 刊期: 2001年第05期

  • 风湿性二尖瓣病变成形术后心脏及瓣膜功能随访

    目的评价风湿性二尖瓣病变成形术(MVP)后心脏及瓣膜功能,总结风湿性MVP的经验。方法 1995年9月至1997年12月,我院施行风湿性MVP 30例。回顾性分析其术前、术后3~6月、术后9~12月的Doppler心脏彩色超声检查结果及心功能情况。结果随访一年无死亡。术后3~6月、术后9~12月心功能Ⅰ~Ⅱ级比率分别为87%、94%。术后3~6月、术后9~12月超声检查结果显示二尖瓣口面积、二尖瓣返流量、左心室舒张末期内径较术前明显改善。再次手术2例,分别为术后残留重度关闭不全,重度狭窄病人。残留中度返流4例。结论风湿性MVP后1年内心功能及瓣膜功能有明显改善,但仍有少数患者疗效差。二尖瓣前瓣病变严重者,术后残留瓣膜功能障碍发生率高;风湿活动明显者,术后瓣膜风湿病变仍可进行性发展,再手术率高,施行成形术应慎重。

    作者:钱希明;闫玉生;童健;朱平;冯树生;蒙华 刊期: 2001年第05期

  • 角膜塑形技术对角膜的不良影响

    目的分析角膜塑形技术(OK镜)对角膜形态、结构和功能的不良影响,探讨其产生的原因及处理措施。方法对252例(483只眼)近视患者进行过夜配戴OK镜治疗,观察其对角膜形态、结构和功能的不良影响。结果 OK镜对角膜的不良影响包括:角膜上皮损伤371眼(76.81%);角膜溃疡7眼(1.45%);角膜变性10眼(2.07%);角膜知觉缺失18眼(3.73%);角膜变形323眼(66.81%)。结论在OK镜治疗近视中,角膜上皮损伤、角膜缺氧、OK镜片的污染、镜片移位等可导致角膜形态、结构和功能的改变。

    作者:汤明芳;史永胜;黄发明;冯建宇 刊期: 2001年第05期

  • 艾滋病患者感染马尔尼菲青霉菌1例报告

    马尔尼菲青霉病(Penicilliosis marneffei, PSM)是由马尔尼菲青霉菌(Penicillium marneffei, PM)感染所引起的一种深部真菌病。自1988年以来,国外相继报导了数例艾滋病患者感染该菌,国内文献尚未见报道。2000年2月我院收治了1名艾滋病患者,从3次血培养中均分离出PM,现报告如下。

    作者:王露霞;徐德兴;刘海英;罗春梅;刘刃 刊期: 2001年第05期

  • 全膝关节置换术后持续被动运动的临床应用研究

    目的评价全膝关节置换术后持续被动运动(CPM)的临床应用价值。方法将19例患者共24个全膝置换关节随机分成两组。CPM治疗组14个膝关节于术后第3天开始治疗。非CPM治疗组10个膝关节作为对照。结果两周后CPM治疗组膝关节主动屈曲度平均达到94.62度,比对照组大23.37度。结论全膝关节置换术后CPM治疗,可使膝关节屈伸功能明显提高。

    作者:徐波;史占军;金大地;景宗森;陈祥匀;冯岚 刊期: 2001年第05期

  • Alu-PCR联合荧光原位杂交技术鉴定bcr基因相关YAC克隆

    目的制备慢性髓细胞性白血病(CML)bcr基因重排的DNA探针。方法应用Alu-PCR和荧光原位杂交(FISH)技术,对3个酵母人工染色体(YAC)候选克隆进行鉴定,制备DNA探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓细胞性白血病患者骨髓细胞筛选。结果确定了YAC 765E3为非嵌合体,定位于染色体22q11 bcr基因区域,而且可在Ph染色体阳性细胞中易位至9q34。探针特异性杂交效率达95%。结论 FISH技术是染色体、染色体畸变鉴定和染色体上特殊序列定位的重要检测方法。联合应用Alu-PCR技术特异性扩增载体YAC中人类基因组来源的DNA制备探针,为慢性髓细胞白血病的诊断和监测微小残留病提供了一个新的手段。

    作者:刘晓力;郑维扬;刘孟珉;宋兰林;杜庆锋;周淑芸 刊期: 2001年第05期

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