学术投稿

Alu-PCR联合荧光原位杂交技术鉴定bcr基因相关YAC克隆

刘晓力;郑维扬;刘孟珉;宋兰林;杜庆锋;周淑芸

关键词:聚合酶链反应, 荧光原位杂交, 酵母人工染色体, bcr基因, 慢性髓细胞白血病
摘要:目的制备慢性髓细胞性白血病(CML)bcr基因重排的DNA探针。方法应用Alu-PCR和荧光原位杂交(FISH)技术,对3个酵母人工染色体(YAC)候选克隆进行鉴定,制备DNA探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓细胞性白血病患者骨髓细胞筛选。结果确定了YAC 765E3为非嵌合体,定位于染色体22q11 bcr基因区域,而且可在Ph染色体阳性细胞中易位至9q34。探针特异性杂交效率达95%。结论 FISH技术是染色体、染色体畸变鉴定和染色体上特殊序列定位的重要检测方法。联合应用Alu-PCR技术特异性扩增载体YAC中人类基因组来源的DNA制备探针,为慢性髓细胞白血病的诊断和监测微小残留病提供了一个新的手段。
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 肺减容术并发多脏器功能不全综合征救治成功4例报告

    肺减容术(LVRS)是目前治疗慢性阻塞性肺气肿(COPD)的主要方法。1996年以来,我科行LVRS共15例,4例并发多脏器功能不全综合征(MODS),均救治成功,现报告如下。

    作者:黄志勇;陈钢;邹小明;王武军 刊期: 2001年第05期

  • 某些抗生素药物与磷酸二酯酶抑制剂临床联合用药与配伍中的几个问题

    列举了大环内酯和喹诺酮类药物与茶碱联合用药的毒性反应病例,分析其药理作用机制,提醒联合用药时剂量控制与茶碱血药浓度的严密监控,另外对红霉素与葡萄糖注射液配伍的正确方法及使用剂量与滴注速度提出建议。

    作者:陈建海;李华康;陈志良 刊期: 2001年第05期

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    作者:丘玉昌;朱正光;徐继红;徐伟;吴曙光 刊期: 2001年第05期

  • 同种异体原位心脏移植术体外循环特点(附1例报告)

    目的探讨心脏移植术体外循环心肌保护、血液成分保护及预防排斥反应,体外循环技巧等同题。方法对体外循环下同种异体原位心脏移植患者的临床资料进行分析。结果采用标准法该例患者进行原位心脏移植,供心热缺血时间为0 min,冷缺血时间为70min,总体外循环时间为123 min,升主动脉阻断时间73 min。患者已存活250d。术后患者无排斥反应、感染、心及肝肾功能不全等并发症。结论良好的心肌保护、血液成分保护、体外循环过程预防排斥反应及完善的体外循环操作技巧是心脏移植成功的关键。

    作者:邹小明;刘亚湘;黄志勇;王武军 刊期: 2001年第05期

  • K562细胞7种珠蛋白基因 mRNA水平的研究

    目的研究K562细胞α、β、Gγ、Aγ、ζ、ε、δ珠蛋白基因mRNA水平。方法采用RT-PCR在相同条件下同时扩增成功7种珠蛋白mRNA,比较K562细胞内各珠蛋白mRNA水平。结果α基因簇中α-mRNA水平明显高于ζ-mRNA,B基因簇mRNA表达水平依次为Gγ、Aγ、ε、δ,K562细胞不表达B-珠蛋白mRNA。结论转录后水平的调控可能在k562细胞α基因簇的表达中起重要作用,B基因簇各珠蛋白mRNA水平和蛋白质水平基本相符。

    作者:刘志杰;钱新华;李西平;姚英民 刊期: 2001年第05期

  • 正电子显像剂18F-FDG的制备与质量控制

    目的研究正电子断层显像剂2-18F-2-脱氧-D-葡萄糖(18F-FDG)的制备与质量控制。方法采用回旋加速器,通过18O(p,n)18F核反应和亲核取代反应制备18F-FDG。对制备的18F-FDG进行质量控制研究。结果放射化学产率约为54%,用TLC法和HPLC法测定化学纯度均大于99%,放化纯度均大于95%,18F-FDG各项质量控制指标符合药典要求。结论制备的18F-FDG适用于临床PET。

    作者:高晓;唐刚华;王明芳;吴湖炳;李志;黄祖汉 刊期: 2001年第05期

  • 医院信息网络系统的建设

    简要介绍驻香港部队医院信息网络系统的建设规划及布局。

    作者:王永龙;周泽学 刊期: 2001年第05期

  • 左旋门冬酰胺酶致中毒性脑病1例

    1 临床资料 患者,男,21岁,因牙龈出血伴双下肢瘀点2d入住我科,经骨髓穿刺检查确诊为急性淋巴细胞白血病(L3型),予以VDLP方案诱导达完全缓解,并经中剂量阿糖胞苷加威猛巩固治疗一疗程后出院。出院后不久即出现双下肢乏力,双膝关节酸痛,再次入住我科。入院时体查:体温37.4℃,呼吸20次/min,脉搏84次/min,血压16/12kPa,慢性病容,轻度贫血貌,全身皮肤未见出血点,浅表淋巴结未触及肿大,颈软,心肺无异常,腹软,肝右锁骨中线肋缘下3cm,质软,无压痛,脾脏左肋下2cm,无触痛。病理反射未引出。入院查血常规:WBC 5.0×109L,HGB 101 g/L,PLT 2.8×1011/L。

    作者:李秋平;吴秉毅 刊期: 2001年第05期

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    特异性靶向嵌合疫苗,是用基因工程技术将抗原多肽或蛋白质分子与一些结合APC表面受体的分子融合,通过APC表面受体与配体相互作用,使抗原特异性靶向APC,提高APC对有效剂量抗原摄取和加工处理,从而增强免疫应答反应。

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    目的探讨患者意识消失时的异丙酚血药浓度与给药速度的关系。方法ASAI~Ⅱ级无心、脑、肝、肾功能异常的择期手术患者21例,随机分为A、B、C组,静脉注射异丙酚,速度分别为6、9、12mg·kg1·h-1,持续30~35 min。给药后于不同时点同步采取桡动脉及颈内静脉球部血样,以高效液相色谱-荧光法检测异丙酚的血药浓度。结果A、B、C组患者意识消失时的异丙酚用量分别为1.15、1.10和1.20mg/kg·b.w.,无统计学差异,而平均诱导时间分别为697、441和313 s,差异显著(P<0.05)。意识消失时平均动脉血药浓度(Ca)分别为1.64、2.24和2.78mg/L,统计学差异显著(P<0.01);平均颈内静脉球部血药浓度(Cijbv)分别为1.18、1.40和1.69mg/L,仅A、C组间有统计学差异(P<0.05)。从开始输注到意识消失时A、B、C组的动静脉血药浓度-时间曲线下面积(AUCa-v)分别为4.56、4.64和4.23 mg·L-1·min-1,无显著性差异。结论意识消失时的动脉和静脉血药浓度与给药速度有关;非稳态条件下异丙酚的靶血浆浓度并不能预测患者意识消失。

    作者:盖成林;古妙宁;林春水;欧阳铭文;王玉珍;周俊岭;安胜利 刊期: 2001年第05期

  • 阿霉素肾病大鼠外周血白细胞及肾脏糖皮质激素受体的变化

    目的为弄清大鼠肾小球肾炎时外周血白细胞糖皮质激素受体(GR)与肾脏受体的变化的关系。方法通过静脉注射阿霉素复制大鼠微小病变型肾小球肾病模型,用放射配体结合法测定外周血白细胞GR及肾脏GR的变化。结果外周血白细胞GR显著降低,而肾胞浆GR无明显变化,两者无明显相关性。

    作者:乐颖影;李晓文 刊期: 2001年第05期

  • 42例中老年人全口牙列缺失牙科种植体修复治疗

    回顾了1993年3月至1999年5月进行的中老年种植义齿修复治疗42例,探讨了中老年的口腔特点,全口种植牙的手术方案设计,术中注意事项及并发症的预防等问题。

    作者:张丽萍;王鸿;孙小平;李新华;才晓慧 刊期: 2001年第05期

  • 外周血T淋巴细胞激活与哮喘发病的关系

    目的探讨外周血T淋巴细胞激活释放的细胞因子在哮喘发病中的作用。方法采用酶联免疫法检测30例哮喘患者及20名健康人血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、白细胞介素(IL)-4、IL-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果哮喘患者血清sIL-2R、IL-4、IL-5及TNF-α浓度均明显高于正常对照组。经糖皮质激素治疗后sIL-2R、IL-4、IL-5和TNF-α浓度显著下降。结论 T淋巴细胞激活释放的细胞因子在哮喘发病中起重要作用,糖皮质激素抗气道炎症作用,可能是通过抑制T淋巴细胞活化,减少细胞因子释放来实现的。

    作者:邓火金;陈晶 刊期: 2001年第05期

  • 212例2型糖尿病合并高血压临床情况分析

    现将我院近2年212例糖尿病(DM)中合并高血压(HBP)的临床情况总结如下:1临床资料1.1 对象 1999年1月至2000年12月在我院内分泌科住院的2型DM患者212例,其中男性121例,女性91例。按不同年龄段分成5组。DM的诊断按1999年WHO制定的DM诊断标准。HBP的诊断按1999年2月WHO/ISAHBP治疗指南制定的标准。

    作者:高方;陈国威;周琳;薛耀明 刊期: 2001年第05期

  • Alu-PCR联合荧光原位杂交技术鉴定bcr基因相关YAC克隆

    目的制备慢性髓细胞性白血病(CML)bcr基因重排的DNA探针。方法应用Alu-PCR和荧光原位杂交(FISH)技术,对3个酵母人工染色体(YAC)候选克隆进行鉴定,制备DNA探针,并经正常人外周血淋巴细胞和慢性髓细胞性白血病患者骨髓细胞筛选。结果确定了YAC 765E3为非嵌合体,定位于染色体22q11 bcr基因区域,而且可在Ph染色体阳性细胞中易位至9q34。探针特异性杂交效率达95%。结论 FISH技术是染色体、染色体畸变鉴定和染色体上特殊序列定位的重要检测方法。联合应用Alu-PCR技术特异性扩增载体YAC中人类基因组来源的DNA制备探针,为慢性髓细胞白血病的诊断和监测微小残留病提供了一个新的手段。

    作者:刘晓力;郑维扬;刘孟珉;宋兰林;杜庆锋;周淑芸 刊期: 2001年第05期

  • 全膝关节置换术后持续被动运动的临床应用研究

    目的评价全膝关节置换术后持续被动运动(CPM)的临床应用价值。方法将19例患者共24个全膝置换关节随机分成两组。CPM治疗组14个膝关节于术后第3天开始治疗。非CPM治疗组10个膝关节作为对照。结果两周后CPM治疗组膝关节主动屈曲度平均达到94.62度,比对照组大23.37度。结论全膝关节置换术后CPM治疗,可使膝关节屈伸功能明显提高。

    作者:徐波;史占军;金大地;景宗森;陈祥匀;冯岚 刊期: 2001年第05期

  • 应用体外冲击波急诊治疗足跟骨刺1例报告

    1 临床资料 患者,男,72岁。患跟痛症10余年,平时足跟部疼痛,行走困难。症状加重时需扶墙或用足尖行走,呈跛行步态。近来病情恶化,出现持续刺痛,无法行走,只能坐轮椅活动,疼痛处以康宁克通A或醋酸泼尼松多次封闭无效后来我院急诊科就诊。检查:一般情况好。X线跟骨侧位片示跟骨结节下面长有一大小为0.5cm×1.0cm的鱼钩状骨刺,其形状比一年前更长、更尖锐,被确诊为足跟骨刺合并跖筋膜炎急性发作。治疗情况:由于患者年龄较大,不愿接受其它疗法,故用我院西门子碎石机Lithostar在门诊行体外冲击波治疗。

    作者:刘成山;江建明 刊期: 2001年第05期

  • 眩晕患者的脑电图与脑干听觉诱发电位的分析

    目的了解眩晕患者的脑电图(EEG)及脑干听觉诱发电位(BAEP)的变化。方法从1998年1月至12月对所有就诊的眩晕患者进行EEG及BAEP对照检查。结果 EEG异常率较低,仅5.5%,而BAEP异常率达79%年龄小的患者主要异常表现为I波延长,可能系前庭神经局部供血不足所致。而年龄大于45岁的患者主要异常表现为Ⅲ~Ⅴ/Ⅰ~Ⅲ>1,可能系颈椎病或动脉硬化等原因引起椎动脉供血不足所致。结论眩晕是神经科一种常见症状,可由多种原因引起,EEG检测的异常率较低。而BAEP反映第八脑神经和脑干听觉通路的活动,凡是累及听觉通路的任一病变或损伤都可出现异常。

    作者:林丽珍;黄涛;侯先男 刊期: 2001年第05期

  • 雄激素变化与衰老

    概述雄激素随年龄的变化及雄激素替代治疗的利弊。

    作者:吕红松;吴赛珠 刊期: 2001年第05期

  • 猫胰岛细胞的分离纯化和培养

    目的建立猫胰岛细胞分离纯化和体外培养的方法。方法在自制玻棒持续振荡下常规分离胰岛细胞,进行单层细胞培养和组织块培养。采用差速贴壁法、碘乙酸法、消化时间差法去除培养中的成纤维细胞。动态收集单层细胞培养液,分别用放射免疫法和比色法检测胰岛素和淀粉酶含量。光镜下观察5~30d细胞生长情况。分别对培养第5、15、21天的细胞进行葡萄糖负荷试验、组织块培养的细胞进行透射电镜检查。结果猫胰岛细胞在体外培养可保持良好的生物学活性3周或3周以上(组织培养)。结论在国内首次建立的猫体外胰岛细胞培养方法可行可靠,体外培养第7~25 d的细胞形态和功能良好,是进行实验研究的极好材料。

    作者:沈洁;薛耀明;金春华 刊期: 2001年第05期

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