学术投稿

三种反义c-myc RNA的瞬时表达对血管平滑肌细胞的体外生物学效应的影响

曾嵘;刘小蓉;李进;戴云;安靓

关键词:反义RNA, 基因转染, 血管平滑肌细胞
摘要:目的了解癌基因c-myc分子中各个区域的作用,找出佳的反义封闭靶区,为c-myc表达增高相关疾病的基因治疗提供依据.方法系统地构建了人类3种反义c-myc重组逆转录病毒表达载体(aM1、aM2和aM3),分别载有c-myc第1、2和3外显子的反义片段,经脂质体转染大鼠主动脉平滑肌细胞,并于转染后48 h采用流式细胞仪对细胞进行瞬时表达检测.结果与对照组相比,aM2使c-myc表达量减少了37.6%,aM1为对照组的98.8%,而aM3却使c-myc表达增高21.7%;与此同时,aM1和aM2组增殖细胞核抗原(PCNA)表达分别下降了36.0%和30.9%,而aM3组PCNA表达增高.DNA分析则表明3种载体均使处于G0/G1期的细胞比例略为增高(aM2>aM1>aM3),S 期比例略下降(aM1>aM2>aM3),但尚未有DNA合成量的明显改变.结论反义基因的导入在瞬时表达时可影响细胞中靶蛋白及其他生长相关蛋白的表达,但对细胞周期和DNA合成的影响尚小.
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  • 深海鱼油丸降低总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值1例报告

    深海鱼油丸是纯天然制剂,含多元不饱和脂肪酸二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexenoic acid,DHA),可用于预防高血压病和高血脂病.关于深海鱼油丸降血脂作用的报道很多,但关于其对总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(Total Chole-stero /Hight density lipoprotein cholestero,TC/HDLC)这一致动脉硬化因子的影响尚未见报道.

    作者:关英 刊期: 2000年第05期

  • 氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡及其分子学机制研究

    目的研究氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的机制.方法采用电镜观察、Hoechst33342染色、Western blotting 印迹分析法研究Ox-LDL诱导VSMCs凋亡的效应及其分子学机制.结果 Ox-LDL作用VSMCs 24 h后,电镜下VSMCs出现凋亡的形态学特征:细胞核固缩、凋亡小体形成;Hoechest33342染色可见,凋亡的细胞核或细胞质内出现浓染致密的块状或颗粒状荧光;Western blotting结果显示,p53蛋白含量升高,而Bcl-2蛋白含量降低.结论 Ox-LDL 能诱导大鼠VSMCs 凋亡,并呈现一定的浓度和时间依赖关系;p53和bcl-2基因在Ox-LDL诱导的VSMCs凋亡中可能发挥重要的调控作用.

    作者:彭刚艺;凌文华 刊期: 2000年第05期

  • p53、bcl-2及bax基因在非何杰金氏恶性淋巴瘤中的表达及意义

    目的探讨凋亡调控基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达及其与非何杰金氏恶性淋巴瘤(NHL)恶性程度之间的关系.方法运用免疫组化方法检测了62例NHL的凋亡调控基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达状态.结果 p53及Bcl-2蛋白的表达率、表达强度及阳性细胞密度均随NHL恶性程度的发展而逐渐增高,低度恶性组明显低于中度及高度恶性组(P<0.01),而中度及高度恶性组之间则无显著差异(P>0.05);与此相反,Bax蛋白在低度恶性组的表达水平明显高于中度及高度恶性组(P<0.01).结论细胞凋亡调控异常在NHL的发生与发展中可能起重要作用,它们的表达状态和NHL的恶性程度密切相关.

    作者:王立生;赵俊生;潘令嘉;孙勇;张亚历;周殿元 刊期: 2000年第05期

  • 凋亡相关基因bcl-2、bax、Fas及FasL在乙型肝炎病毒相关性肝癌组织中的表达

    目的探讨原发性肝癌中乙型肝炎病毒感染与凋亡基因bcl-2、bax、Fas及FasL表达的关系.方法采用免疫组化技术分析40例原发肝细胞癌组织中乙肝病毒表面抗原(HBsAg) 阳性组和HBsAg阴性组bcl-2、bax、Fas及FasL的表达.结果癌组织中HBsAg阳性率为30%(12/40),癌旁组织中HBsAg阳性率为62.5%(25/40).12例HBsAg阳性的癌组织中bcl-2和bax的阳性率比值为1:1.5(2/12: 3/12),28例HBsAg阴性的癌组织中bcl-2和bax阳性率比值为1:1.25(4/28: 5/28);25例HBsAg阳性和15例HBsAg阴性的癌旁肝细胞中bcl-2和bax的阳性率比值分别为1:3.2 (5/25:16/25) 和1:3(3/15: 9/15).12例HBsAg阳性和28例HBsAg阴性的肝癌中Fas 和FasL阳性例数分别为6、5和1、1;25例HBsAg阳性和15例HBsAg阴性的癌旁肝细胞Fas和FasL阳性例数分别为17、5和4、3.两组间比较均有明显差异(P<0.05).结论肝癌组织中HBV感染与bcl-2和bax阳性表达比率无明显关系,而与Fas和FasL的表达有关.

    作者:郭琳琅;郭颖;曹长安 刊期: 2000年第05期

  • 应用彩色多谱勒超声心动图监测心脏移植术后排斥反应

    目的评价超声心动图在监测心脏移植术后急性排斥反应中的作用.方法采用Accuson型彩色多谱勒超声心动图诊断仪,应用M型超声观察室壁厚度及活动度、有无心包积液;应用B型超声观察各房室腔大小;用脉冲多谱勒频谱测E峰峰值流速、A峰峰值流速及E/A值,连续观察120 d后行心内膜心肌活检(EMB).结果超声心动图连续监测4个半月未发现排斥反应征象,心脏结构、功能正常.结论动态应用超声心动图监测心脏移植后早期急性排斥反应的发生具有安全、迅速、无创、无并发症的优点,同EMB相比有明显优越性.

    作者:邹小明;张振;王武军 刊期: 2000年第05期

  • 肾上腺神经节瘤5例报告

    肾上腺神经节瘤是一种较罕见的良性肿瘤.我院于1992~1999年间收治5例,现报告如下.

    作者:齐桓;郑少斌 刊期: 2000年第05期

  • 外伤性左主支气管完全断裂吻合成功1例报告

    1 临床资料患者,男,20岁,因左胸部外伤2 h急诊收治入本院.查体:左胸部轻度肿胀隆起,呼吸音减弱,无皮下气肿及反常呼吸,胸片示左2、3、4肋骨骨折,左侧液气胸,左肺压缩95%,纵隔向健侧移位.

    作者:朱平;陈坤棠 刊期: 2000年第05期

  • 骨髓基质细胞与玻璃陶瓷复合培养体内成骨的实验研究

    目的观察骨髓基质细胞(BMSC)与钙磷陶瓷(BGC)复合后形成骨组织的生物学机制,为形成组织工程化新生骨组织提供理论依据.方法将BMSC与BGC复合植入动物体内后进行大体观察、组织学染色,观察其成骨过程.结果一定浓度的BMSC与BGC复合植入动物体内可产生成熟新生骨组织,其成骨过程与局部血运、材料孔隙、孔径有关.结论利用组织工程学方法可以形成新生骨组织,为进一步研究组织工程化新生组织的体内移植手段和方法提供了新的思路和可能.

    作者:金丹;裴国献;王前 刊期: 2000年第05期

  • 安普索口服液与片剂的药代动力学参数比较

    目的测定8名健康志愿者单剂量口服30 ml乐舒痰口服液(含安普索3 mg/ml)或90 mg安普索片剂后的血药浓度变化情况.方法采用反相高效液相色谱法.结果安普索在体内的转运和分布呈一房室模型,口服液与片剂的Tmax分别为(1.95±0.66)和(2.03±0.98)h,Cmax分别为(161.7±39.3)和(166.9±35.5) ng/ml,t1/2分别为(5.89±1.48)和(5.32±1.57)h,AUC分别为(1 699.9±252.0)和(1637.7±262.4) ng h/ml.经统计学检验,差异均无显著性(P>0.05).口服液与片剂的相对生物利用度为104.6%.结论两药剂是生物等效制剂.

    作者:宋维舒;程远远 刊期: 2000年第05期

  • 依托咪酯在心脏瓣膜手术中的应用及对血流动力学的影响

    目的研究依托咪酯及安定-依托咪酯对预备行心脏瓣膜置换术的风湿性心脏病患者的麻醉诱导过程及其对血流动力学的影响.方法将21例风湿性心脏病患者随机分为A、B两组,分别采用依托咪酯(A组,n=10)和安定-依托咪酯(B组,n=11)对其诱导麻醉,Swan-Ganz导管技术监测血流动力学.结果诱导后,A组所有病人均出现明显的肌阵挛或抽搐样反应,B组无上述反应发生;两组右房压(RAP)、肺毛细血管嵌压、平均肺动脉压、心率、肺循环器质阻力指数、肺循环阻力指数(PTRI)、肺血管阻力指数及体循环阻力指数(SVRI)等均无变化,但两组的心脏指数、每搏指数(SI)、左心功指数、左心每搏功指数、右心每搏功指数及右心功指数均明显减低(P<0.05).气管插管后两组的SI仍明显减低,RAP、PTRI和SVRI明显增高(P<0.05).结论依托咪酯诱导麻醉对风湿性心脏病患者的血流动力学影响轻微,但对气管插管刺激引发的应激反应抑制不够理想;预先给予安定可消除依托咪酯诱发的肌阵挛和抽搐样反应.

    作者:梁启波;招伟贤;陈立学;肖广均 刊期: 2000年第05期

  • 分子蒸馏及其应用

    简要介绍分子蒸馏的原理、特点、影响分子蒸馏速度的因素及分子蒸馏的应用.

    作者:张忠义;雷正杰;王鹏;叶海英 刊期: 2000年第05期

  • 肝叶切除治疗肝内胆管结石23例临床分析

    目的总结肝叶切除治疗肝内胆管结石的临床疗效.方法对1990年2月~1998年12月我院收治的23例肝内胆管结石行肝叶切除的临床资料进行回顾性分析.结果本组行左肝外叶切除15例、左半肝切除2例、右肝前叶切除3例、右后叶切除1例、左肝外叶和右肝前叶联合切除2例.术后肝衰死亡1例、随访21例、失访1例,除胆管癌的1例术后2年复发死亡外,其余20例随访8个月至9年无结石复发.结论肝叶切除术是治疗肝内胆管结石较理想的有效手术方式.

    作者:吴彩新;李树鉴;朱法清;李泰辉;黄虹 刊期: 2000年第05期

  • 培哚普利对冠心病合并轻度充血性心力衰竭患者心率变异性和心功能的影响

    目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)培哚普利对充血性心力衰竭(CHF)患者心脏自主神经活动的影响及其与心功能的关系.方法对30例冠心病合并轻度CHF患者,采用单盲、随机、安慰剂平行对照法进行分组,并前瞻性观察经培哚普利治疗8、16 周后,其心率变异性(HRV)和心功能的变化.结果经培哚普利治疗8 周时,与对照组比较,左心室收缩功能无显著变化,而HRV已有显著升高,尤以反映迷走神经张力的指标为著,如rMSSD从(30±17)ms升高至(35±13) ms(P<0.01)、pNN50从(8±5)%提高至(11±6)%(P<0.01)、HF从(9±2)ms升高至(14±3)ms(P<0.01);而反映交感神经与迷走神经活动均衡性的指标LH/HF从1.5±0.2下降至1.2±0.4 (P<0.05) .培哚普利治疗16 周时,随着左心室收缩功能的改善,HRV进一步升高.结论研究表明,ACEI可提高CHF患者心脏迷走神经张力,降低交感神经张力,其早期效应不依赖于心功能的改善,提示应用ACEI治疗CHF,有可能减少心律失常性死亡.

    作者:刘品明;许兆忠;韩碧银;吕俊豪;傅向阳 刊期: 2000年第05期

  • 恶性胸膜间皮瘤患者胸水摄取99mTc-MDP 1例报告

    1 临床资料患者,女性,27岁,因右胸部疼痛、气促4月入本院.入院前于当地医院摄X线胸片提示大量胸水,抽胸水3次,并于胸腔内注入顺氯氨铂、丝裂霉素C等化疗药物.

    作者:范义湘;彭武和;石卫民;李贵平 刊期: 2000年第05期

  • 交界区病变对预测球囊扩张术后二尖瓣储备功能的意义

    目的探讨交界区病变对预测球囊扩张术后二尖瓣储备功能的意义.方法本研究采用交界区钙化与否作为预测球囊扩张术后二尖瓣口储备功能的单独指标,并与Wilkins法作比较.结果交界区钙化组球囊扩张术后其二尖瓣口面积较非钙化组小,其二尖瓣储备功能明显较交界区非钙化组差.结论本研究进一步证明,交界区的病理改变能较好地预测二尖瓣球囊扩张(PBMV)的效果;检测交界区钙化与否方法简便,重复性好,是检测PBMV后二尖瓣储备功能的良好单独预测指标.

    作者:刘春;傅向阳;吕俊豪;严子才;赵霞 刊期: 2000年第05期

  • 血管内皮生长因子在人卵巢和子宫内膜上的表达

    目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在人卵巢、子宫内膜中的表达及其在月经周期中的变化规律.方法收集人正常卵巢、子宫内膜组织标本各20例,采用免疫组织化学方法检测VEGF的表达.结果 (1) 卵巢VEGF表达定位于颗粒细胞胞浆及胞膜,卵泡膜细胞也有少量分泌,卵泡液呈阳性表达;原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡表达依次增强,三者之间表达强度有显著性差异(P<0.001).(2) 子宫内膜VEGF表达定位于腔上皮及腺上皮,在增生中后期及分泌早期表达逐渐增强,分泌中期为表达高峰,与其他各时期比表达强度有显著性差异(P<0.001).结论 (1) VEGF随卵泡生长表达逐渐增强,与卵母细胞成熟同步,提示VEGF可能通过旁分泌作用促进卵泡的生长发育.(2)VEGF在子宫内膜腔上皮和腺上皮局部表达,随月经周期发生规律性改变,分泌中期表达强,提示VEGF可能参与胚胎着床过程.

    作者:邢福祺;梁卫华;陈士岭 刊期: 2000年第05期

  • 三种反义c-myc RNA的瞬时表达对血管平滑肌细胞的体外生物学效应的影响

    目的了解癌基因c-myc分子中各个区域的作用,找出佳的反义封闭靶区,为c-myc表达增高相关疾病的基因治疗提供依据.方法系统地构建了人类3种反义c-myc重组逆转录病毒表达载体(aM1、aM2和aM3),分别载有c-myc第1、2和3外显子的反义片段,经脂质体转染大鼠主动脉平滑肌细胞,并于转染后48 h采用流式细胞仪对细胞进行瞬时表达检测.结果与对照组相比,aM2使c-myc表达量减少了37.6%,aM1为对照组的98.8%,而aM3却使c-myc表达增高21.7%;与此同时,aM1和aM2组增殖细胞核抗原(PCNA)表达分别下降了36.0%和30.9%,而aM3组PCNA表达增高.DNA分析则表明3种载体均使处于G0/G1期的细胞比例略为增高(aM2>aM1>aM3),S 期比例略下降(aM1>aM2>aM3),但尚未有DNA合成量的明显改变.结论反义基因的导入在瞬时表达时可影响细胞中靶蛋白及其他生长相关蛋白的表达,但对细胞周期和DNA合成的影响尚小.

    作者:曾嵘;刘小蓉;李进;戴云;安靓 刊期: 2000年第05期

  • 临床疗效研究的方法学设计要点

    目的探讨临床研究中的方法学设计要点.方法对部分临床研究的方法学设计进行举例分析. 结果与结论临床治疗方案的选择及疗效的研究有赖于严谨、科学的方法学设计.

    作者:李家红;段咏慧 刊期: 2000年第05期

  • 乳腺定位表达载体在小鼠乳腺中的活性检测

    目的检测乳腺定位表达载体在动物乳腺中的表达活力.方法与结果将乳腺定位表达载体乳清酸蛋白-人组织型纤溶酶原激活剂(WAP-tPA)通过乳腺导管直接注入妊娠后期小鼠的乳腺中,待小鼠产子、泌乳后,检测出小鼠乳汁中tPA的表达量为80 ng/ml.结论此方法可以作为从动物整体水平上检测乳腺定位表达载体表达效力的一种简便而有效的方法.

    作者:黄伟民;赖良学;乔桂林;岳军明;安靓;王凯;付殿国;殷震;李进 刊期: 2000年第05期

  • 晶体过敏性葡萄膜炎的病理学观察

    目的观察晶体过敏性葡萄膜炎(PU)的发病情况及病理学改变.方法选用新西兰大白兔制作PU动物模型,观察PU发生情况及其病理学变化.结果与结论 PU发生率为70.27%,主要表现为虹膜睫状体血管扩张充血,浆细胞、淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞在该处浸润,早期有嗜酸性粒细胞浸润的非肉芽肿性炎症,无结节样结构,也无组织坏死增生;少量眼则表现为以虹膜睫状体部分组织出血坏死为特征的Arthus型炎症.均符合免疫复合物型炎症的病理改变.

    作者:陆晓和;俞琼;柯晓云;徐宁 刊期: 2000年第05期

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