学术投稿

三种反义c-myc RNA的瞬时表达对血管平滑肌细胞的体外生物学效应的影响

曾嵘;刘小蓉;李进;戴云;安靓

关键词:反义RNA, 基因转染, 血管平滑肌细胞
摘要:目的了解癌基因c-myc分子中各个区域的作用,找出佳的反义封闭靶区,为c-myc表达增高相关疾病的基因治疗提供依据.方法系统地构建了人类3种反义c-myc重组逆转录病毒表达载体(aM1、aM2和aM3),分别载有c-myc第1、2和3外显子的反义片段,经脂质体转染大鼠主动脉平滑肌细胞,并于转染后48 h采用流式细胞仪对细胞进行瞬时表达检测.结果与对照组相比,aM2使c-myc表达量减少了37.6%,aM1为对照组的98.8%,而aM3却使c-myc表达增高21.7%;与此同时,aM1和aM2组增殖细胞核抗原(PCNA)表达分别下降了36.0%和30.9%,而aM3组PCNA表达增高.DNA分析则表明3种载体均使处于G0/G1期的细胞比例略为增高(aM2>aM1>aM3),S 期比例略下降(aM1>aM2>aM3),但尚未有DNA合成量的明显改变.结论反义基因的导入在瞬时表达时可影响细胞中靶蛋白及其他生长相关蛋白的表达,但对细胞周期和DNA合成的影响尚小.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡及其分子学机制研究

    目的研究氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的机制.方法采用电镜观察、Hoechst33342染色、Western blotting 印迹分析法研究Ox-LDL诱导VSMCs凋亡的效应及其分子学机制.结果 Ox-LDL作用VSMCs 24 h后,电镜下VSMCs出现凋亡的形态学特征:细胞核固缩、凋亡小体形成;Hoechest33342染色可见,凋亡的细胞核或细胞质内出现浓染致密的块状或颗粒状荧光;Western blotting结果显示,p53蛋白含量升高,而Bcl-2蛋白含量降低.结论 Ox-LDL 能诱导大鼠VSMCs 凋亡,并呈现一定的浓度和时间依赖关系;p53和bcl-2基因在Ox-LDL诱导的VSMCs凋亡中可能发挥重要的调控作用.

    作者:彭刚艺;凌文华 刊期: 2000年第05期

  • 培哚普利对冠心病合并轻度充血性心力衰竭患者心率变异性和心功能的影响

    目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)培哚普利对充血性心力衰竭(CHF)患者心脏自主神经活动的影响及其与心功能的关系.方法对30例冠心病合并轻度CHF患者,采用单盲、随机、安慰剂平行对照法进行分组,并前瞻性观察经培哚普利治疗8、16 周后,其心率变异性(HRV)和心功能的变化.结果经培哚普利治疗8 周时,与对照组比较,左心室收缩功能无显著变化,而HRV已有显著升高,尤以反映迷走神经张力的指标为著,如rMSSD从(30±17)ms升高至(35±13) ms(P<0.01)、pNN50从(8±5)%提高至(11±6)%(P<0.01)、HF从(9±2)ms升高至(14±3)ms(P<0.01);而反映交感神经与迷走神经活动均衡性的指标LH/HF从1.5±0.2下降至1.2±0.4 (P<0.05) .培哚普利治疗16 周时,随着左心室收缩功能的改善,HRV进一步升高.结论研究表明,ACEI可提高CHF患者心脏迷走神经张力,降低交感神经张力,其早期效应不依赖于心功能的改善,提示应用ACEI治疗CHF,有可能减少心律失常性死亡.

    作者:刘品明;许兆忠;韩碧银;吕俊豪;傅向阳 刊期: 2000年第05期

  • 改良的胶原酶滑膜细胞分离培养法

    目的探讨一种改良的滑膜细胞培养法.方法修剪、收集关节滑膜层,依次以胶原酶、0.2%胰蛋白酶、0.2%胰蛋白酶-0.02%EDTANa2消化,100目筛网过滤,D-hanks液洗网后培养,行显微镜、电镜、ABC法免疫组化鉴定.结果培养的细胞具有成纤维细胞样形态和特征,免疫组化染色示vimentin阳性、CD68阴性,纯度达98%以上,符合B型滑膜细胞特点.结论改良的胶原酶消化法是一种有效的滑膜细胞培养方法.

    作者:彭卫华;侯凡凡;蒋建平;张训 刊期: 2000年第05期

  • 重型颅脑外伤后迁延性昏迷病人的脑电图波型与预后

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    作者:康维礼;洪军;王升旭;贺旭 刊期: 2000年第05期

  • 异体手移植术及其免疫抑制治疗(附2例报告)

    目的探讨异体手移植术及免疫抑制治疗的效果.方法术前2 d受者开始服用免疫抑制剂霉酚酸酯(MMF)、他莫克司(FK506)、泼尼松(Pred),术中甲泼尼龙(MP)1.5 g冲击,术后第1天甲泼尼龙1.0 g冲击,并开始应用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)100 mg/d×10 d,术后12 h口服FK506、MMF、Pred,观察移植肢体血液循环温度、排斥情况,同时监测FK506血浓度及免疫学指标.结果术前、术中及术后应用免疫抑制剂后未见异体手排斥现象.2例移植手血循环良好,皮肤切口顺利愈合,术后10 d拆线.Tinel征检查显示神经生长速度较快,术后半年移植手功能良好,感觉已恢复至手指末节,可以持物,肌电图显示鱼际肌已见动作电位.1例应用FK506后出现血糖升高,应用胰岛素治疗后血糖降至正常.结论良好的组织配型、免疫抑制剂的合理应用可以预防异体手移植的超急性、加速及急性排斥反应的发生.

    作者:于立新;裴国献;顾立强;朱立军 刊期: 2000年第05期

  • 恶性胸膜间皮瘤患者胸水摄取99mTc-MDP 1例报告

    1 临床资料患者,女性,27岁,因右胸部疼痛、气促4月入本院.入院前于当地医院摄X线胸片提示大量胸水,抽胸水3次,并于胸腔内注入顺氯氨铂、丝裂霉素C等化疗药物.

    作者:范义湘;彭武和;石卫民;李贵平 刊期: 2000年第05期

  • 纳络酮治疗急性脑梗死疗效评价

    对本科收治的80例急性脑梗死患者进行纳络酮治疗的疗效观察,发现该药疗效好、起效快、安全性高,认为值得临床推广使用.

    作者:刘凌;黄翠瑶;周惠英 刊期: 2000年第05期

  • 聚乳酸对体外培养的骨髓基质细胞生物学行为的影响

    目的检测聚乳酸(PLA)对骨髓基质细胞(BMSC)体外成骨的过程及其生物学行为的影响.方法将BMSC传代细胞分别与PLA进行复合培养,观察细胞生长及其与生物材料附着情况,检测BMSC的增殖能力、蛋白含量及碱性磷酸酶(ALP)含量.结果 BMSC可以在PLA表面贴附,PLA对BMSc的增殖及功能表现无明显影响.结论PLA的生物相容性良好,有望作为BMSc的载体用于骨组织工程研究.

    作者:金丹;裴国献;王前;卢则俭 刊期: 2000年第05期

  • 上唇植皮术中人中沟及人中嵴的成形

    目的为了避免上唇植皮术中忽略术后正常的上唇美感问题, 对人中沟和人中嵴成形术进行探讨.方法本组采用了两种方法进行人中成形,一是人中沟区域皮下组织中间切开向两侧反折形成人中嵴,然后在其上植皮.第二种是切除病灶时在植皮创面上保留少许条状疤痕组织,形成人中沟和人中嵴的差别.结果 36例术后满意率为83.3%.结论在面部整形术中应重视此项工作.

    作者:胡志奇;罗锦辉;时安平;黎小间 刊期: 2000年第05期

  • 乳腺定位表达载体在小鼠乳腺中的活性检测

    目的检测乳腺定位表达载体在动物乳腺中的表达活力.方法与结果将乳腺定位表达载体乳清酸蛋白-人组织型纤溶酶原激活剂(WAP-tPA)通过乳腺导管直接注入妊娠后期小鼠的乳腺中,待小鼠产子、泌乳后,检测出小鼠乳汁中tPA的表达量为80 ng/ml.结论此方法可以作为从动物整体水平上检测乳腺定位表达载体表达效力的一种简便而有效的方法.

    作者:黄伟民;赖良学;乔桂林;岳军明;安靓;王凯;付殿国;殷震;李进 刊期: 2000年第05期

  • 交界区病变对预测球囊扩张术后二尖瓣储备功能的意义

    目的探讨交界区病变对预测球囊扩张术后二尖瓣储备功能的意义.方法本研究采用交界区钙化与否作为预测球囊扩张术后二尖瓣口储备功能的单独指标,并与Wilkins法作比较.结果交界区钙化组球囊扩张术后其二尖瓣口面积较非钙化组小,其二尖瓣储备功能明显较交界区非钙化组差.结论本研究进一步证明,交界区的病理改变能较好地预测二尖瓣球囊扩张(PBMV)的效果;检测交界区钙化与否方法简便,重复性好,是检测PBMV后二尖瓣储备功能的良好单独预测指标.

    作者:刘春;傅向阳;吕俊豪;严子才;赵霞 刊期: 2000年第05期

  • 早期气管切开术对多脏器功能不全综合征的防治

    目的探讨早期气管切开对胸部外科多脏器功能不全综合征(MODS)的防治作用.方法以我科收治的30例MODS患者为研究对象,对其中11例行气管切开的病例进行回顾性分析.结果 11例气管切开患者,全部并发下呼吸道感染,死亡6例,死亡率54.5%,存活5例者均以肺部为原发病变.未行气管切开者发生感染12例,死亡9例,死亡率75%.结论早期气管切开可提高以肺部为原发病变MODS患者的生存率,但可增加感染率.

    作者:黄志勇;王武军;邹小明 刊期: 2000年第05期

  • 我校与江南生物科技有限公司合作开展地中海贫血基因芯片项目研究

    作者: 刊期: 2000年第05期

  • p53、bcl-2及bax基因在非何杰金氏恶性淋巴瘤中的表达及意义

    目的探讨凋亡调控基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达及其与非何杰金氏恶性淋巴瘤(NHL)恶性程度之间的关系.方法运用免疫组化方法检测了62例NHL的凋亡调控基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达状态.结果 p53及Bcl-2蛋白的表达率、表达强度及阳性细胞密度均随NHL恶性程度的发展而逐渐增高,低度恶性组明显低于中度及高度恶性组(P<0.01),而中度及高度恶性组之间则无显著差异(P>0.05);与此相反,Bax蛋白在低度恶性组的表达水平明显高于中度及高度恶性组(P<0.01).结论细胞凋亡调控异常在NHL的发生与发展中可能起重要作用,它们的表达状态和NHL的恶性程度密切相关.

    作者:王立生;赵俊生;潘令嘉;孙勇;张亚历;周殿元 刊期: 2000年第05期

  • 阵发性睡眠性血红蛋白尿合并妊娠高血压综合征、左心衰剖宫产麻醉处理1例报告

    阵发性睡眠性血红蛋白尿(Paroxysmal nocturnal nemoglobinuria, PNH)是一种获得性慢性溶血性疾病.由于红细胞的内在缺陷,对活化补体的敏感性增加,导致慢性血管内溶血,以夜间发作、早晨血红蛋白尿为特征.有报道[1]PNH病人妊娠时死胎发生率为47%,母亲死亡率为15%.现将1例PNH伴妊娠高血压综合征、左心衰病人剖宫产麻醉处理报告如下.

    作者:周健;杨欢 刊期: 2000年第05期

  • 三种反义c-myc RNA的瞬时表达对血管平滑肌细胞的体外生物学效应的影响

    目的了解癌基因c-myc分子中各个区域的作用,找出佳的反义封闭靶区,为c-myc表达增高相关疾病的基因治疗提供依据.方法系统地构建了人类3种反义c-myc重组逆转录病毒表达载体(aM1、aM2和aM3),分别载有c-myc第1、2和3外显子的反义片段,经脂质体转染大鼠主动脉平滑肌细胞,并于转染后48 h采用流式细胞仪对细胞进行瞬时表达检测.结果与对照组相比,aM2使c-myc表达量减少了37.6%,aM1为对照组的98.8%,而aM3却使c-myc表达增高21.7%;与此同时,aM1和aM2组增殖细胞核抗原(PCNA)表达分别下降了36.0%和30.9%,而aM3组PCNA表达增高.DNA分析则表明3种载体均使处于G0/G1期的细胞比例略为增高(aM2>aM1>aM3),S 期比例略下降(aM1>aM2>aM3),但尚未有DNA合成量的明显改变.结论反义基因的导入在瞬时表达时可影响细胞中靶蛋白及其他生长相关蛋白的表达,但对细胞周期和DNA合成的影响尚小.

    作者:曾嵘;刘小蓉;李进;戴云;安靓 刊期: 2000年第05期

  • 慢性乙型肝炎患者血清sCD14的水平与肠源性内毒素血症的关系

    目的探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清中sCD14的水平与继发肠源性内毒素血症的关系.方法以ELISA法检测60例慢乙肝患者血清sCD14和TNF-a水平,同时,应用基质显色法定量检测了患者血浆内毒素水平并将三者与对照组进行比较.结果轻度慢乙肝(A组)患者血清sCD14水平与对照组无显著差异(P>0.05),中度慢乙肝(B组)和重度慢乙肝(C组)sCD14水平均显著高于对照组(P<0.01);慢乙肝继发肠源性内毒素血症者血清中sCD14s为(4.8±2.3)mg/ml,而无继发肠源性内毒素血症者其sCD14为(2.9±1.9)mg/ml,两者之间有显著差异 ( P<0.01).A组患者血清中sCD14水平为(3.0±1.7)mg/ml,而TNF-a为(4.69±2.75)ng/ml,两者之间无显著相关性(γ= 0.76,P>0.05);而B组和C组其sCD14水平分别为(5.2±2.1)mg/ml和(6.9±3.4)mg/ml,TNF-a分别为(9.48±6.15)ng/ml和(14.23±8.29)ng/ml,B组、C组的sCD14水平分别与自身组TNF-a有显著相关性(γ=0.87,P<0.01;γ=0.91,P<0.01).结论慢乙肝继发肠源性内毒素血症者sCD14水平显著升高,说明sCD14水平可显著提高慢乙肝患者对内毒素的敏感性,LPS与sCD14结合,诱导单核-巨噬细胞产生TNF-a,从而损伤肝细胞.

    作者:郑瑞丹;饶日春;徐忠玉;杨铮 刊期: 2000年第05期

  • 同种异体心脏移植长期存活(附1例报告)

    目的介绍我院首例同种异体原位心脏移植术的围手术期处理及排斥反应监测、治疗经验.方法切取供体(24岁男性脑死亡者)心脏并原位移植给受体(43岁女性终末期扩张性心肌病患者),并在术后进行严格的监护治疗和随防.供心手术历时50 min,移植心脏热缺血时间为0 min,冷缺血时间为70 min;受体手术历时290 min,体外循环总时间123 min,主动脉阻断73 min.术后采用FK 506,骁悉及泼尼松行免疫抑制治疗,同时用彩色多普勒超声心动图监测排斥反应.结果患者现已健康生存160 d,心、肝、肾功能正常.结论心脏移植是治疗终末期心脏病的有效方法,术后处理是确保心脏移植成功的关键.

    作者:邹小明;王武军;张振 刊期: 2000年第05期

  • 成功救护肾移植术后昏迷病人3例报告

    成功救护3例肾移植术后7~90 d内发生多种严重并发症致昏迷的患者,随访2年5个月人肾存活均正常.护理体会:(1)护理人员要具备较熟练的心肺复苏技术及应急能力,能较早地发现心衰、呼吸障碍的体征,为医生及时抢救赢得时间;(2) 密切病情观察,严格正规操作,保持呼吸道通畅,保证氧供;(3)基础护理到位;(4) 管理好输液管道,注意观察移植肾功能,保证药物输入及液体进出平衡.⑸严格药物管理.

    作者:叶桂荣 刊期: 2000年第05期

  • 聚能刀治疗肝脏肿瘤的近期疗效观察

    目的观察聚能刀治疗肝脏恶性肿瘤的近期疗效.方法在B超引导下,以聚能刀治疗肝脏肿瘤病人36例(共42个瘤灶).结果 88.6%的病人腹痛明显缓解,83.9%的病人食欲改善;正电子发射型计算机断层图像(PET)检查示所有病例治疗区域可见放射性缺损,提示论治疗区域肿瘤组织灭活,未见严重并发症.结论以聚能刀治疗肝脏肿瘤安全、有效,PET检查评价其疗效有独特作用.

    作者:廖旺军;罗荣城;康世均;王传斌;罗宇玲;张鸣江 刊期: 2000年第05期

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