学术投稿

改良的胶原酶滑膜细胞分离培养法

彭卫华;侯凡凡;蒋建平;张训

关键词:细胞培养, 滑膜细胞, 胶原酶
摘要:目的探讨一种改良的滑膜细胞培养法.方法修剪、收集关节滑膜层,依次以胶原酶、0.2%胰蛋白酶、0.2%胰蛋白酶-0.02%EDTANa2消化,100目筛网过滤,D-hanks液洗网后培养,行显微镜、电镜、ABC法免疫组化鉴定.结果培养的细胞具有成纤维细胞样形态和特征,免疫组化染色示vimentin阳性、CD68阴性,纯度达98%以上,符合B型滑膜细胞特点.结论改良的胶原酶消化法是一种有效的滑膜细胞培养方法.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 异体手移植术及其免疫抑制治疗(附2例报告)

    目的探讨异体手移植术及免疫抑制治疗的效果.方法术前2 d受者开始服用免疫抑制剂霉酚酸酯(MMF)、他莫克司(FK506)、泼尼松(Pred),术中甲泼尼龙(MP)1.5 g冲击,术后第1天甲泼尼龙1.0 g冲击,并开始应用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)100 mg/d×10 d,术后12 h口服FK506、MMF、Pred,观察移植肢体血液循环温度、排斥情况,同时监测FK506血浓度及免疫学指标.结果术前、术中及术后应用免疫抑制剂后未见异体手排斥现象.2例移植手血循环良好,皮肤切口顺利愈合,术后10 d拆线.Tinel征检查显示神经生长速度较快,术后半年移植手功能良好,感觉已恢复至手指末节,可以持物,肌电图显示鱼际肌已见动作电位.1例应用FK506后出现血糖升高,应用胰岛素治疗后血糖降至正常.结论良好的组织配型、免疫抑制剂的合理应用可以预防异体手移植的超急性、加速及急性排斥反应的发生.

    作者:于立新;裴国献;顾立强;朱立军 刊期: 2000年第05期

  • 系统性红斑狼疮患者C4零基因对C4含量的影响

    目的分析系统性红斑狼疮中C4零基因对SLE患者血清中补体C4含量的影响.方法采用国际参考实验室的方法及计算机凝胶图像光密度分析系统检测45例广东籍汉族人SLE患者,同时用单向免疫扩散法检测这些患者血清中补体C4含量.结果含 C4零基因的SLE患者血清中C4含量低于不含 C4零基因患者的C4含量(P < 0.05).结论 C4零基因的存在可引起SLE患者血清中补体C4含量下降.

    作者:张宏宇;王宗发;陈仁馨 刊期: 2000年第05期

  • 卡维地洛的稳定性研究

    目的观察卡维地洛(carvedilol)原料及片剂在各种条件下的稳定性.方法将原料与片剂置于不同影响因素(强光、高温、高湿、空气暴露)、加速试验和室温留样考察等条件下,定期检测其各项指标并对实验前后的样品进行了红外光谱鉴定.结果卡维地洛原料及片剂各项指标考察结果无明显变化,强光照射引起卡维地洛轻微变黄,结论卡维地洛原料及片剂稳定性良好.

    作者:徐继红;陈卫民;刘叔文 刊期: 2000年第05期

  • 外伤性左主支气管完全断裂吻合成功1例报告

    1 临床资料患者,男,20岁,因左胸部外伤2 h急诊收治入本院.查体:左胸部轻度肿胀隆起,呼吸音减弱,无皮下气肿及反常呼吸,胸片示左2、3、4肋骨骨折,左侧液气胸,左肺压缩95%,纵隔向健侧移位.

    作者:朱平;陈坤棠 刊期: 2000年第05期

  • p53、bcl-2及bax基因在非何杰金氏恶性淋巴瘤中的表达及意义

    目的探讨凋亡调控基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达及其与非何杰金氏恶性淋巴瘤(NHL)恶性程度之间的关系.方法运用免疫组化方法检测了62例NHL的凋亡调控基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达状态.结果 p53及Bcl-2蛋白的表达率、表达强度及阳性细胞密度均随NHL恶性程度的发展而逐渐增高,低度恶性组明显低于中度及高度恶性组(P<0.01),而中度及高度恶性组之间则无显著差异(P>0.05);与此相反,Bax蛋白在低度恶性组的表达水平明显高于中度及高度恶性组(P<0.01).结论细胞凋亡调控异常在NHL的发生与发展中可能起重要作用,它们的表达状态和NHL的恶性程度密切相关.

    作者:王立生;赵俊生;潘令嘉;孙勇;张亚历;周殿元 刊期: 2000年第05期

  • 肝叶切除治疗肝内胆管结石23例临床分析

    目的总结肝叶切除治疗肝内胆管结石的临床疗效.方法对1990年2月~1998年12月我院收治的23例肝内胆管结石行肝叶切除的临床资料进行回顾性分析.结果本组行左肝外叶切除15例、左半肝切除2例、右肝前叶切除3例、右后叶切除1例、左肝外叶和右肝前叶联合切除2例.术后肝衰死亡1例、随访21例、失访1例,除胆管癌的1例术后2年复发死亡外,其余20例随访8个月至9年无结石复发.结论肝叶切除术是治疗肝内胆管结石较理想的有效手术方式.

    作者:吴彩新;李树鉴;朱法清;李泰辉;黄虹 刊期: 2000年第05期

  • 重型颅脑外伤后迁延性昏迷病人的脑电图波型与预后

    目的探讨重型颅脑外伤后迁延性昏迷病人的脑电图(EEG)波型与预后的关系.方法动态观察与分析了23例重型颅脑外伤后迁延性昏迷病人的EEG波型.结果本组中A、B和C型各2例;D型1例;E和F型各6例;G型4例.结论 A、B、C、D和G型5种EEG昏迷波型对重型颅脑外伤后迁延性昏迷病人的早期预测有参考价值,而E和F波型对早期预测不能确定,取决于脑部结构损伤的严重程度和治疗等因素.

    作者:康维礼;洪军;王升旭;贺旭 刊期: 2000年第05期

  • 依托咪酯在心脏瓣膜手术中的应用及对血流动力学的影响

    目的研究依托咪酯及安定-依托咪酯对预备行心脏瓣膜置换术的风湿性心脏病患者的麻醉诱导过程及其对血流动力学的影响.方法将21例风湿性心脏病患者随机分为A、B两组,分别采用依托咪酯(A组,n=10)和安定-依托咪酯(B组,n=11)对其诱导麻醉,Swan-Ganz导管技术监测血流动力学.结果诱导后,A组所有病人均出现明显的肌阵挛或抽搐样反应,B组无上述反应发生;两组右房压(RAP)、肺毛细血管嵌压、平均肺动脉压、心率、肺循环器质阻力指数、肺循环阻力指数(PTRI)、肺血管阻力指数及体循环阻力指数(SVRI)等均无变化,但两组的心脏指数、每搏指数(SI)、左心功指数、左心每搏功指数、右心每搏功指数及右心功指数均明显减低(P<0.05).气管插管后两组的SI仍明显减低,RAP、PTRI和SVRI明显增高(P<0.05).结论依托咪酯诱导麻醉对风湿性心脏病患者的血流动力学影响轻微,但对气管插管刺激引发的应激反应抑制不够理想;预先给予安定可消除依托咪酯诱发的肌阵挛和抽搐样反应.

    作者:梁启波;招伟贤;陈立学;肖广均 刊期: 2000年第05期

  • 乳腺定位表达载体在小鼠乳腺中的活性检测

    目的检测乳腺定位表达载体在动物乳腺中的表达活力.方法与结果将乳腺定位表达载体乳清酸蛋白-人组织型纤溶酶原激活剂(WAP-tPA)通过乳腺导管直接注入妊娠后期小鼠的乳腺中,待小鼠产子、泌乳后,检测出小鼠乳汁中tPA的表达量为80 ng/ml.结论此方法可以作为从动物整体水平上检测乳腺定位表达载体表达效力的一种简便而有效的方法.

    作者:黄伟民;赖良学;乔桂林;岳军明;安靓;王凯;付殿国;殷震;李进 刊期: 2000年第05期

  • 90锶/90钇敷贴器治疗瘢痕疙瘩43例报告

    1998年1月~1999年6月我院使用90锶/90钇敷贴器治疗瘢痕疙瘩43例,治愈18例(41.8%),有效和显效21例(48%),无效4例(9.3%).我们认为,使用90锶/90钇敷贴器是治疗该疾病较好的办法.影响治疗效果及复发的因素有:有明显家族史;有既往注射激素或放疗后复发史者;未能按医嘱完成放疗量或每次放疗间隔时间过长是为重要的影响因素.

    作者:池淑丰;杨晓林;路绍杰 刊期: 2000年第05期

  • 骨髓基质细胞与玻璃陶瓷复合培养体内成骨的实验研究

    目的观察骨髓基质细胞(BMSC)与钙磷陶瓷(BGC)复合后形成骨组织的生物学机制,为形成组织工程化新生骨组织提供理论依据.方法将BMSC与BGC复合植入动物体内后进行大体观察、组织学染色,观察其成骨过程.结果一定浓度的BMSC与BGC复合植入动物体内可产生成熟新生骨组织,其成骨过程与局部血运、材料孔隙、孔径有关.结论利用组织工程学方法可以形成新生骨组织,为进一步研究组织工程化新生组织的体内移植手段和方法提供了新的思路和可能.

    作者:金丹;裴国献;王前 刊期: 2000年第05期

  • 肾上腺神经节瘤5例报告

    肾上腺神经节瘤是一种较罕见的良性肿瘤.我院于1992~1999年间收治5例,现报告如下.

    作者:齐桓;郑少斌 刊期: 2000年第05期

  • 氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡及其分子学机制研究

    目的研究氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的机制.方法采用电镜观察、Hoechst33342染色、Western blotting 印迹分析法研究Ox-LDL诱导VSMCs凋亡的效应及其分子学机制.结果 Ox-LDL作用VSMCs 24 h后,电镜下VSMCs出现凋亡的形态学特征:细胞核固缩、凋亡小体形成;Hoechest33342染色可见,凋亡的细胞核或细胞质内出现浓染致密的块状或颗粒状荧光;Western blotting结果显示,p53蛋白含量升高,而Bcl-2蛋白含量降低.结论 Ox-LDL 能诱导大鼠VSMCs 凋亡,并呈现一定的浓度和时间依赖关系;p53和bcl-2基因在Ox-LDL诱导的VSMCs凋亡中可能发挥重要的调控作用.

    作者:彭刚艺;凌文华 刊期: 2000年第05期

  • 喉癌端粒酶活性表达的临床意义

    目的探讨端粒酶活性在喉癌发病机制中的作用和临床意义.方法采用端粒重复序列扩增法(TRAP)对80例喉部组织标本(32例喉癌、24例手术安全缘组织、24例喉部正常粘膜)进行端粒酶活性检测.结果喉癌及手术安全缘组织端粒酶阳性率分别为93.8%、16.7%,而24例正常喉粘膜均未检测到端粒酶活性.喉癌端粒酶活性表达与年龄、性别、癌组织分化程度、淋巴结转移及临床分期均无明显相关性(P>0.05).结论端粒酶活性表达在喉癌发病机制中可能起着重要作用,并有可能成为喉癌的组织特异性标志物.

    作者:彭宏;杨光彩;王希军 刊期: 2000年第05期

  • 加强学术会议管理,提高学术会议效果

    学术会议是学术交流的一种重要形式.随着医学科学的迅速发展,国内外学术交流日益活跃,各种学术会议数量猛增,为广大科技工作者提供了广阔的交流空间,同时,也对医学科研工作起到了较大的促进作用.但是,少数学术会议举办过程中出现了管理不规范、重效益不重学术、重关系不重水平的现象,一定程度上影响了学术会议的实际效果,造成人力、财力、时间等有效资源的浪费.针对这些问题,如何加强管理,确保效果和学术水平,使医院在这方面投入产生佳效益,是各医院亟待研究解决的问题.

    作者:关勋强;许寅超;冯常森 刊期: 2000年第05期

  • 三种反义c-myc RNA的瞬时表达对血管平滑肌细胞的体外生物学效应的影响

    目的了解癌基因c-myc分子中各个区域的作用,找出佳的反义封闭靶区,为c-myc表达增高相关疾病的基因治疗提供依据.方法系统地构建了人类3种反义c-myc重组逆转录病毒表达载体(aM1、aM2和aM3),分别载有c-myc第1、2和3外显子的反义片段,经脂质体转染大鼠主动脉平滑肌细胞,并于转染后48 h采用流式细胞仪对细胞进行瞬时表达检测.结果与对照组相比,aM2使c-myc表达量减少了37.6%,aM1为对照组的98.8%,而aM3却使c-myc表达增高21.7%;与此同时,aM1和aM2组增殖细胞核抗原(PCNA)表达分别下降了36.0%和30.9%,而aM3组PCNA表达增高.DNA分析则表明3种载体均使处于G0/G1期的细胞比例略为增高(aM2>aM1>aM3),S 期比例略下降(aM1>aM2>aM3),但尚未有DNA合成量的明显改变.结论反义基因的导入在瞬时表达时可影响细胞中靶蛋白及其他生长相关蛋白的表达,但对细胞周期和DNA合成的影响尚小.

    作者:曾嵘;刘小蓉;李进;戴云;安靓 刊期: 2000年第05期

  • CT机机械参数的测量方法与分析

    目的分析测量CT机部分机械参数的原理与方法.方法利用Catphan体模对10台CT机的定位光精度、诊视床运动精度和层厚进行测试,并分析了影响测量结果的因素.结果 10台设备中有2台设备的机械参数不符合要求.结论 (1)利用斜线的投影值来测量机械参数是一种简单有效的测量方法;(2)必须定期对CT机的各项机械参数进行测试以确保其稳定性.

    作者:余晓锷;冯晓刚;洪德明;康立丽 刊期: 2000年第05期

  • p53 cDNA突变和突变型p53蛋白表达与大肠癌预后的关系

    目的探讨p53基因cDNA突变和突变型p53基因蛋白表达与大肠腺癌预后的关系.方法 RT-PCR-SSCP检测大肠腺癌组织p53基因cDNA突变,PAb240单抗免疫组化检测大肠腺癌组织突变型p53基因蛋白表达,比较两者与大肠腺癌预后的关系.结果 100例大肠腺癌中,p53基因cDNA突变51例(51%),突变型p53基因蛋白高表达76例(76%),两者同步阳性49例;p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白高表达相关,有显著统计学差异(P<0.01);与Dukes分期无关(P>0.05).从Kaplan-Meier 生存曲线和log-rank 分析结果看,突变型p53基因蛋白高表达与大肠腺癌预后无显著统计学差异(P=0.72);p53基因cDNA突变与大肠腺癌预后有关,统计学差异明显 (P=0.03).结论 p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白高表达密切相关.高频率p53基因cDNA突变直接反映大肠腺癌预后差.突变型p53基因高表达则可能受多因素影响,不能直接反映大肠腺癌预后.

    作者:季晨阳;季丹;DR Smith;HS Goh 刊期: 2000年第05期

  • 交界区病变对预测球囊扩张术后二尖瓣储备功能的意义

    目的探讨交界区病变对预测球囊扩张术后二尖瓣储备功能的意义.方法本研究采用交界区钙化与否作为预测球囊扩张术后二尖瓣口储备功能的单独指标,并与Wilkins法作比较.结果交界区钙化组球囊扩张术后其二尖瓣口面积较非钙化组小,其二尖瓣储备功能明显较交界区非钙化组差.结论本研究进一步证明,交界区的病理改变能较好地预测二尖瓣球囊扩张(PBMV)的效果;检测交界区钙化与否方法简便,重复性好,是检测PBMV后二尖瓣储备功能的良好单独预测指标.

    作者:刘春;傅向阳;吕俊豪;严子才;赵霞 刊期: 2000年第05期

  • 安普索口服液与片剂的药代动力学参数比较

    目的测定8名健康志愿者单剂量口服30 ml乐舒痰口服液(含安普索3 mg/ml)或90 mg安普索片剂后的血药浓度变化情况.方法采用反相高效液相色谱法.结果安普索在体内的转运和分布呈一房室模型,口服液与片剂的Tmax分别为(1.95±0.66)和(2.03±0.98)h,Cmax分别为(161.7±39.3)和(166.9±35.5) ng/ml,t1/2分别为(5.89±1.48)和(5.32±1.57)h,AUC分别为(1 699.9±252.0)和(1637.7±262.4) ng h/ml.经统计学检验,差异均无显著性(P>0.05).口服液与片剂的相对生物利用度为104.6%.结论两药剂是生物等效制剂.

    作者:宋维舒;程远远 刊期: 2000年第05期

南方医科大学学报杂志

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