学术投稿

一种大批量制备眼镜蛇毒金属蛋白酶natrahagin的方法

朱正光;吴曙光

关键词:眼镜蛇毒, 纤维蛋白原溶解酶, 血小板膜糖蛋白Ib
摘要:目的建立从中华眼镜蛇毒(Naja naja atra)中大批量分离、纯化natrahagin的方法.方法与结果 10 g眼镜蛇毒经超滤去除小分子组分后,再经Heparin-Sehparose CL-6B亲和层析及Sephadex G-1 50分子筛层析,获得91 mg natrahagin,产率为0.91%;SDS-PAGE显示natrahagin呈单一区带,相对分子质量约47 100,并具有水解纤维蛋白原和血小板膜糖蛋白Ib(Platelet membrane glycoprotein Ib.GPIb).结论此实验成功建立的从中华眼镜蛇毒中大批量制备natrahagin的方法具有高效、简便的特点.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 免疫吸附清除循环肿瘤坏死因子对内毒素休克兔肝脏改变的影响

    目的应用抗肿瘤坏死因子(TNF)单克隆抗体(McAb)免疫吸附方法清除循环TNF,观察其对内毒素休克兔肝脏改变的影响.方法以致死剂量内毒素(8×109CFU/kg)制成内毒素休克兔模型后分为对照组(n=7)及免疫吸附组(n=10).注射内毒素1 h后开始体外循环免疫吸附,监测平均动脉压(MAP),观察两组循环血TNF及丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)水平.于6 h后活杀动物,留取肝脏行组织病理检查.结果 (1)免疫吸附组90 min后MAP开始回升[(11.6±1.4)kPa],此后一直明显高于[(9 2±2.0)kPa]对照组(P<0.05);(2)免疫吸附组2 h的TNF活性[(43.6±10.4)×103U/L]较对照组[(1448.6±226 9)×10U/L]明显降低(P<(0 05).(3)免疫吸附组血清ALT、AST水平较对照组降低(P<0.05).(4)免疫吸附组肝脏病理损害程度较对照组明显减轻.结论抗TNF McAb特异性免疫吸附方法,能有效清除循环TNF,减轻肝脏的病理损害程度.

    作者:林跃萍;张训;侯凡凡 刊期: 1999年第06期

  • 卡维地洛人体药代动力学及生物利用度研究

    目的测定卡维地洛(carvedilo1)志愿受试者体内的药代动力学,并与国外标准品地拉特润(dilatrend)对照,评价其相对生物利用度.方法 10名健康男性志愿受试者,年龄(39±9)岁,随机交叉服用卡维地洛或地拉特润40 mg,HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度,并进行药代动力学参数计算和模型拟合.结果 10名受试者6名符合一房室模型,另4名符合二房室模型.卡维地洛的药代动力学主要参数:一房室者达峰时间Tmax(1.7±0.4)h、大血药浓度Cmax(75±32)m/L、曲线下面积AUC(314±122)mg/L@h、半衰期t1/2(1.7±0.8)h、清除速率CL(141±43)L/h;二房室者各值相应为(1.0±0.4)h、(113±89)mg/L、(337±85)mg/L@h、(7.9±5.6)h、(111±23)L/h.与地拉特润相比,两种制剂的药代动力学参数无显著差异

    作者:张嘉杰;余传林;徐伟;徐继红;刘叔文;陈卫民;吴曙光 刊期: 1999年第06期

  • 恒河猴自体静脉内皮细胞种植ePTFE人工血管后置换髂总动脉的实验研究

    15只恒河猴随机分为2组:实验组10例,其人工血管均经自体静脉内皮细胞种植;对照组5例,其人工血管均未经任何处理.实验组、对照组手术方法相同.将长6 cm、直径3 mm ePTFE(膨体聚四氟乙烯)人工血管近端与腹主动脉行端-侧吻合、远端与髂总动脉行端-端吻合.术后当日、1周及4周,所有恒河猴均行静脉法数字减影造影术,术后4周行彩色B型超声波检查,然后取出所有对照组及9例实验组恒河猴腹腔内之人工血管,标本送光镜、扫描电镜及透射电镜检查.结果表明,术后4周,对照组人工血管均不通畅,而实验组有8条人工血管通畅良好.B超见全部对照组及1例实验组人工血管腔内形成血栓,实验组8条通畅之人工血管均保持较高的血流量.扫描电镜见实验组全部人工血管腔内均有一层完整融合的内皮细胞单层,而对照组人工血管腔内未见有内皮细胞.

    作者:潘明新;王晓阳;何红兵;潘玉先;杨继震 刊期: 1999年第06期

  • 体内、体外产生的小鼠桑葚胚玻璃化冻存后的发育能力

    目的探讨体内、体外产生的小鼠桑葚胚玻璃化冻存后的发育能力.方法体内、体外产生的小鼠桑葚胚分别被含有乙烯甘醇、Ficoll和蔗糖的玻璃化溶液处理后冻存.结果体内产生的小鼠桑葚胚单纯暴露于玻璃化溶液中,而未冻存时其发育到胚泡期的百分率为97.3%(一步法)和98.4%(二步法),与对照组(98.1%)均无显著差异(P>0.05),体外产生的小鼠桑葚胚单纯被玻璃化溶液处理后发育到胚泡期的百分率分别为81.8%(一步法)、82.4%(二步法)和83.6%(对照组),三者之间无显著差异(P>0.05).但是,体外产生的小鼠桑葚胚经玻璃化冻存融解后,发育到胚泡期的百分率为70.6%(一步法)、81.3%(二步法)和83.6%(对照组),一步法玻璃化组明显低于二步法玻璃化组和对照组(P<0 05),而在体内产生的小鼠桑葚胚玻璃化冻存融解后,发育到胚泡期的百分率为93%(一步法)和95.7%(二步法),二者之间无显著差异( P>0.05).所有玻璃化冻存的小鼠桑葚胚融解后,显微镜下观察均未见透明带破裂.结论体内、体外产生小鼠桑葚胚胎经玻璃化冻存融解后,可保持较高的存活率和发育能力,二步法玻璃化更适合冻存体外产生的小鼠桑葚胚.

    作者:全松;山野修司;青野敏博 刊期: 1999年第06期

  • 心肌细胞肌浆网Ca2+-ATPase与心肌功能的调控

    心肌的损伤及心功能的异常都伴随着Ca2+代谢的严重障碍,而心肌细胞肌浆网(Sarcoplasmic reticulum,SR)及其Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPaSe)是调节钙代谢重要的物质,了解SR、Ca2+-ATPase的结构、功能及其编码基因的表达与心肌功能的关系,对调控心功能具有重要意义.

    作者:陈群清;孙耀昌 刊期: 1999年第06期

  • 用HPLC 检测大鼠肠系膜离体血管网灌流液中胰岛素样物质

    目的探讨血管自分泌或旁分泌功能.方法将大鼠的肠系膜血管网分离并进行体外灌流,用高效液相色谱法(highperformance liquid chronatograpjy,HPLC)分析测定SD大鼠肠系膜血管网灌注液中是否具有胰岛素样物质分泌.结果大鼠肠系膜血管网具有合成分泌类胰岛素样物质的功能.结论建立了HPLC分析检测类胰岛素的方法,提示该方法准确快速,仪器检测灵敏度高,分析重现性好,回收率高.

    作者:赵清;叶绿;王泽仿;杨德立;张永生;周峻岭 刊期: 1999年第06期

  • 动态血压监测评价卡维地洛的降压作用

    目的应用动态血压监测法,评价卡维地洛对原发性高血压患者的疗效.方法 20例WHOⅠ~Ⅱ期原发性高血压患者,经安慰剂洗脱2周后,口服卡维地洛4周,剂量为20~40 mg/d,一次服.治疗前后用动态血压监测仪(Spacelab 90207型)各测1次动态血压,并计算谷/峰(T/P)比值.结果卡维地洛主要降低白天血压,收缩压(SBP)和舒张压(DBP)分别下降8 2%和8.5%.对夜间血压降压作用不明显,清晨血压基本回复治疗前水平.卡维地洛给药后心率减慢,降低幅度也是白天大于夜间.20例病例中,有效病例9例,SBP和DBP的T/P比值分别为61.3%和39.8%,未达到美国食品与药品管理局(FDA)对每日一次给药的降压药规定的T/P比值标准.结论卡维地洛能有效地控制白天血压,但在清晨降压作用不明显.建议给药剂量好每日两次,每次10~20 mg.

    作者:徐继红;陈卫民;余传林;刘叔文;徐伟;张嘉杰;吴曙光 刊期: 1999年第06期

  • 细胞周期素D1与癌症

    许多恶性肿瘤染色体畸变时,位于Hq1 3的CCNDl基因扩增和过量表达.例如副甲状腺瘤的倒位、B细胞恶性肿瘤的易位、头颈鳞癌和乳腺癌的基因扩增、卵巢癌和结直肠癌不扩增基因的过量表达、两种肺癌和两种食道癌基因表达不同改变等.CCNDl基因编码细胞周期素Dl是候选的多能癌基因,与肿瘤的发生和进展相关.

    作者:陈汉源 刊期: 1999年第06期

  • 谈整体护理质量评估指标的导向性

    随着社会的发展和现代医学模式的转变,社会对医疗和护理的需求逐步提高,以病人为中心的整体护理模式取代了功能型护理模式.整体护理注重的是护理质量,倡导的是健康教育和心理护理.整体护理的实施,必须有质量评估指标来体现其与功能制护理模式的不同,在质量评估过程中,通过科学地设立评估指标体系及各种指标的内涵和标准,使评估有重点、有目的、有组织的进行,并对获得的信息进行科学的分析与综合.整体护理的核心是以病人为中心,护士应用护理程序为病人实施全身心护理,护理质量的评估要围绕这个中心拟定评估标准,并在实施中不断完善,从根本上改变以往功能制护理质量检查的原则与方法.本文介绍整体护理质量评估体系各项评估因素的确定及其导向性.

    作者:周宗芳;周佳;刘雪琴 刊期: 1999年第06期

  • 大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Jak1的表达

    目的探讨Jak基因在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的表达及其在缺血性神经细胞损伤中的可能作用.方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的模型,用免疫组化方法观察Jak1蛋白在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后不同时间点脑组织中的表达.结果脑缺血再灌注损伤后12 h在栓塞侧梗死区神经元可见少量Jak1蛋白阳性表达,24 h达高峰.梗死周边区表达显著,表达持续时间达1周.结论 Jak1在脑缺血后表达增加,表明JakI可能参与了脑缺血神经细胞损伤与修复的病理过程.

    作者:谢惠芳;刘振华;田时雨 刊期: 1999年第06期

  • 康复医学住院医师临床培训方案的探讨

    康复医学涉及临床医学各个学科,但并非临床医疗的延续和重复,它从人的整体功能出发,不仅关心躯体的病变,也涉及心理、社会、经济等方面的影响因素.除应用一般的医疗技术外,主要采用专门技术进行综合治疗,促进功能恢复.这些决定了康复医师培训须具有自身的特点.康复医学住院医师培训在继续医学教育中占重要位置但尚处于探索阶段.本文就康复医学住院医师临床培训的原则和实施方案探讨如下.

    作者:张建宏;范建中 刊期: 1999年第06期

  • 有创血压的临床监测及护理

    监测有创血压的目的在于连续、实时、准确了解病血压变化,并通过及时调整药物或非药物治疗手段,使病人维持能保证生命器官的灌注的血压、脉压及平均动脉压.我科自1978年开始心脏手术,一直于术中和术后监测有创血压,在监测过程中可通过动脉置管采血做血气分析和其他检查,避免了术中、术后多次采血,反复穿刺,既减少了护理工作量,又减轻了患者的痛苦.

    作者:项小军;成艳君 刊期: 1999年第06期

  • 抑肽酶对犬体外循环过程中血小板保护作用的实验研究

    目的探讨体外循环(CPB)心脏手术中大剂量抑肽酶保护血小板的作用及机制.方法实验犬随机分组,实验组给予大剂量抑肽酶,对照组给予等量生理盐水.检测血小板计数、血小板聚集率、血浆血栓烷B2、血小板活化标记蛋白-140分子数、血小板膜糖蛋白Ib.结果大剂量抑肽酶可降低CPB过程中血浆血栓烷B,含量和血小板活化标记蛋白-140分子数,保护血小板膜糖蛋白I b,但不影响血小板计数和ADP诱导的血小板聚集率.结论大剂量抑肽酶可能从以下两方面保护血小板功能:(1)抑制纤维蛋白溶解酶,保护血小板膜糖蛋白I b,保护血小板粘附功能.(2)抑制血小板内花生四烯酸转化为血栓烷A,,减少血小板活化,从而保护血小板结构及功能的完整性.

    作者:钱希明;李中学;冯树声;王庆深;蒙华 刊期: 1999年第06期

  • 一种大批量制备眼镜蛇毒金属蛋白酶natrahagin的方法

    目的建立从中华眼镜蛇毒(Naja naja atra)中大批量分离、纯化natrahagin的方法.方法与结果 10 g眼镜蛇毒经超滤去除小分子组分后,再经Heparin-Sehparose CL-6B亲和层析及Sephadex G-1 50分子筛层析,获得91 mg natrahagin,产率为0.91%;SDS-PAGE显示natrahagin呈单一区带,相对分子质量约47 100,并具有水解纤维蛋白原和血小板膜糖蛋白Ib(Platelet membrane glycoprotein Ib.GPIb).结论此实验成功建立的从中华眼镜蛇毒中大批量制备natrahagin的方法具有高效、简便的特点.

    作者:朱正光;吴曙光 刊期: 1999年第06期

  • 子宫切除术后阴道菌群生态学特征

    目的了解子宫全切术后阴道酸碱度及菌群变化,并提出有效的治疗措施,以提高病人术后生活质量.方法分别观察子宫全切术后未发生阴道炎、发生念珠菌性阴道炎及正常近龄妇女3组各30例,测定pH值并以阴道分泌物快速涂片法进行阴道菌群分析.结果子宫全切除术后阴道pH值为3.4~5.0,念珠菌性阴道炎发生率高于正常人群.结论子宫全切术后阴道偏酸,pH值低于对照组,易发生念珠菌阴道炎性菌群失调症,但多为Ⅰ~Ⅱ度可逆性失调.治疗以氟康唑胶囊350 mg分3日口服效佳.

    作者:韩献平;曲玉蓉;张秀荣;孙勇;张淑华;潘令嘉 刊期: 1999年第06期

  • 慢性乙型肝炎患者PBMC内IL4与IFN-γ mRNA的表达

    目的阐明Th1/Th2类细胞因子与慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的相关性以及这些细胞因子作为慢性乙型肝炎炎症活动调节剂的作用.方法用RT-PCR法检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)内白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)mRNA的表达.结果在静息期,无明显的IL-4及IFN-γ mRNA的表达,在活动期IFN-γ的表达率(100%)明显高于恢复期(50%)(P<0.05):相反,在恢复期IL-4 mRNA的表达率(87.5%o)明显高于活动期(12.5%)(P<0.05).结论在慢性乙型肝炎发病机理中,在mRNA水平,IFN-γ作为正向免疫调节性细胞因子,而IL-4作为免疫抑制性细胞因子发挥作用,结果证实Th1细胞因子上调、Th2细胞因子下调慢性乙型肝炎肝脏炎症.

    作者:姜荣龙;郭亚兵;富宁;冯筱榕;卢桥生;侯金林;章廉;骆抗先 刊期: 1999年第06期

  • 慢性粒细胞白血病p53及p21蛋白表达及其意义

    对30例慢性粒细胞白血病(CML)患者阿霉素诱导前后的p53及p21蛋白进行免疫组化染色分析,发现7例在阿霉素诱导前即有p53蛋白高表达,多为CML进展期患者,其中6例对应的p21蛋白在阿霉素诱导前后均为弱表达或不表达.1例慢性期患者p53及p21在阿霉素诱导前后均无表达.此7例患者预后差.

    作者:毕丹;周淑芸;蔡俊杰;曾益新 刊期: 1999年第06期

  • 迟发性外伤性颅内血肿40例报告

    迟发性外伤性颅内血肿若诊治不及时,常导致严重后果.现将1985年1月至1997年12月经证实的40例迟发性外伤性颅内血肿诊治体会报告如下.

    作者:李光;彭玉平;王国超;于志强 刊期: 1999年第06期

  • NO前体-左旋精氨酸相关肽对大鼠血小板聚集、血栓形成及血浆NO、cGMP、PGI2的影响

    目的观察左旋精氨酸相关肽(L-ArgX)对大鼠血小板聚集、血栓形成及血浆一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)和前列环素(PGI2)的影响.方法24只SD雄性大鼠随机分为2组,分别灌服L-ArgX 61.4mg/kg@b@w及对同体积空白对照液,每日1次,共8 d.8 d后观察大鼠血小板聚集(比浊法)、血栓形成(丝线法)及血浆NO、cGMP、PGI2浓度的变化(分光光度法和放免法).结果 L-ArgX可显著抑制大鼠血小板聚集率及血栓形成,使血浆NO、cGMP浓度升高,血浆PGI2浓度有升高趋势,但与对照组相比无统计学差异.结论 L-ArgX可抑制血小板聚集,其作用机制可能由一氧化氮-环磷酸鸟苷代谢通路(NO-cGMP pathway)所介导,此外尚可能有其它作用机制参与.L-ArgX可视为一种NO前体,具有抗凝血作用.

    作者:周忠江;叶海燕;吴赛珠;孟素荣 刊期: 1999年第06期

  • 基因重组人睫状神经营养因子单克隆抗体的制备及初步鉴定

    目的制备基因重组人睫状神经营养因子(rhCNTTF)单克隆抗体.方法利用rhCNTF免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠NS-1骨髓瘤细胞融合,制备3株抗r hCNT的单克隆抗体,分别命名为CA2、CA6和BB11.结果三株抗体类型均为IgG2a,免疫印迹试验证明为特异性抗CNTF的单克隆抗体:抗体相加试验表明三株单抗是针对CNTF两个不同的抗原决定簇..

    作者:张亚莉;苏瑾;车小燕;林来兴妹;周俊岭;赵青;王小宁 刊期: 1999年第06期

南方医科大学学报杂志

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