学术投稿

针对人蛋白激酶CK2α亚基的shRNA表达质粒的构建与鉴定

朱汝森;刘新光;梁念慈

关键词:蛋白激酶CK2, RNA干扰(RNAi), 短发夹状RNA(shRNA), 基因测序, 转染
摘要:目的:构建针对人蛋白激酶CK2α亚基的shRNA表达质粒.方法:以mU6pro为载体,化学合成shRNA表达模板,并定向克隆到载体的U6启动子下游,琼脂糖凝胶电泳法筛选阳性克隆,基因测序法检测插入模板序列的正确性.结果:获得了正确的重组质粒,插入的转录模板序列完全正确.结论:成功构建了针对人蛋白激酶CK2α亚基的RNAi体系.
广东医科大学学报杂志相关文献
  • 神经生长因子诱导PC12细胞对细胞周期的影响

    目的:观察神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞周期的变化,以建立体外神经元样细胞周期的研究模型.方法:用流式细胞仪检测不同质量浓度NGF诱导及50μg/L NGF诱导不同天数PC12细胞的细胞周期.结果:(1)不同质量浓度NGF诱导PC12细胞7d,细胞百分比G0/G1期升高,S和G2/M期降低,25,50,100μg/L NGF诱导组与阴性对照组,50与25,100μg/L NGF诱导组比较,差异有显著性(P<0.01或P<0.05);(2)50μg/L NGF诱导PC12细胞不同天数的细胞百分比,G0/G1期从诱导第1天始升高,至7d达到高,9d又有下降,S期从诱导第1天开始降低,至7d低,9d又有上升,诱导1,3,5,7,9d与基础组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);G2/M期从诱导3d降低,至7d降至低,9d又有升高,诱导3,5,7,9d与基础组比较,P<0.01.G0/G1期、S期、G2/M期细胞百分比,诱导9d与诱导7d比较,差异有显著性(P均<0.01).结论:未经NGF诱导的PC12细胞具有有丝分裂能力,经NGF诱导的PC12细胞逐渐减少增殖,大部分细胞停滞在G0/G1期,趋向于神经元样分化,50μg/L NGF诱导7d的PC12细胞可用于神经元样细胞周期模型的实验研究.

    作者:梅寒芳;谢朝阳;祝其锋 刊期: 2006年第05期

  • 冠心病患者血小板活化指标和血小板参数的检测及临床意义

    目的:观察冠心病患者血小板活化指标和血小板四项参数的变化.方法:检测68例冠心病患者(冠心病组)和50例健康者(对照组)血小板粘附和聚集功能及血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)等4项参数, 采用玻璃球法检测血小板粘附功能, 采用比浊法检测聚集功能,应用血细胞分析仪检测血小板4项参数.结果:冠心病组血小板粘附率和聚集率分别为(47.32±3.21)% 、(66.24±4.16)%,均高于对照组的(40.68±3.07)% 、(57.37±3.88)%, P<0.01;且血小板参数中PLT和PCT显著性降低,而MPV和PDW则显著性升高(P<0.01).结论:冠心病患者血小板减少而活性增加,血小板活化在冠心病发病过程中起着重要的作用.

    作者:杜雪霞 刊期: 2006年第05期

  • 三九舒血宁(银杏叶)注射液治疗急性脑梗死的临床观察

    目的:观察三九舒血宁(银杏叶)注射液治疗急性脑梗死的疗效与安全性.方法:438例急性脑梗死患者随机分为治疗组(n=220)和对照组(n=218).治疗组予生理盐水250mL+三九舒血宁(银杏叶)注射液12mL静脉滴注,1次/d,连用15d;对照组予低分子右旋糖酐注射液500mL+复方丹参注射液12mL静脉滴注,1次/d,连用15d.根据入院当日和治疗15d后神经功能缺损评分的减少、血液流变学及脑梗死灶的变化,并结合患者的生活能力进行评定疗效.结果:治疗组与对照组的临床疗效差异有统计学意义(Hc=22.49,P<0.01);两组治疗前后的全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数、甘油三酯、胆固醇、纤维蛋白原、脑梗死灶体积差异均有统计学意义(P<0.01),治疗后治疗组的指标优于对照组(P均<0.01).治疗组无不良反应发生,对照组出现过敏性皮疹3例.结论:三九舒血宁(银杏叶)注射液治疗急性脑梗死疗效显著、安全.

    作者:凌亚兴;王志海;陈文荣;陈湛愔 刊期: 2006年第05期

  • 定期监测B型利钠肽在慢性心力衰竭患者社区卫生管理中的应用

    目的:了解定期监测B型利钠肽(BNP)在社区慢性心力衰竭患者卫生管理中的作用.方法:按一定标准筛选81慢性心力衰竭患者,随机分为观察组与对照组两组,观察组41例,对照组40例.两组均每月随诊1次.对照组依据症状、体征调整治疗方案.观察组患者每月检测BNP 1次,然后重点强化健康教育,并及时调整治疗方案.两组均观察1a,对比两组的再住院及病死人数.结果:观察组再住院人数为 9 人 ,对照组再住院人数为 25 人;观察组1a内死亡人数2人,对照组死亡人数9人 .两组的再住院人数及死亡人数差异有统计学意义(P<0.01或0.05).结论:监测社区中慢性心力衰竭患者的BNP,根据BNP指导慢性心力衰竭患者的健康教育和及时调整方案,能降低心力衰竭患者的病死率和再住院率.

    作者:梁红生;杜剑峰;李康福 刊期: 2006年第05期

  • 反应停联合三氧化二砷治疗多发性骨髓瘤的临床观察

    目的:观察反应停联合三氧化二砷治疗多发性骨髓瘤的疗效及不良反应.方法:19例多发性骨髓瘤患者,应用反应停起始剂量100mg/d,睡前顿服,每周增加100 mg/d,直至400 mg/d,分早晚服用,同时给予三氧化二砷注射液10 mg/d加入5%葡萄糖 500 mL静滴,持续4 h,用4~6周为1疗程.结果:部分缓解10例(52.6%),进步4例(21.1%),无效5例(26.3%),总有效率73.7%,无不能耐受的毒副作用.结论:反应停联合三氧化二砷治疗多发性骨髓瘤具有疗效较高、副作用少、耐受性好等优点,值得临床深入研究和推广应用.

    作者:观美华;黄妙儿;钟灼;刘鹏;王飞;马永华 刊期: 2006年第05期

  • 产时处理不当致直肠阴道瘘3例的护理

    直肠阴道瘘是指直肠与阴道之间的病理性通道,又称粪瘘,多与产科分娩损伤、手术创伤、炎症性损伤有关,由于有粪便不断从阴道流出及阴道不能控制的排气,常常使患者苦不堪言,在精神和肉体上都造成了极大的痛苦[1].我科自2002年1月至2005年12月收治因产时处理不当致直肠阴道瘘的患者3例,现将护理体会报道如下.

    作者:李瑶玲 刊期: 2006年第05期

  • 白内障囊外摘除与超声乳化吸出术后的角膜地形图分析

    目的:观察白内障囊外摘除(ECCE)与超声乳化吸出(Phaco)及人工晶体植入术后角膜形态改变及手术散光的差异.方法:对40例42只眼门诊老年性白内障随机分为ECCE组(22只眼)与Phaco组(20只眼),用角膜地形图仪记录术前及术后术后1周、1个月、3个月角膜地形图的变化.结果:ECCE组术后地形图均为不对称领结形,纵向占86%;Phaco组图形基本无变化者占80%.ECCE组和Phaco组术后手术源性散光同时期比较有明显差异(P<0.01).两组术后同时期的裸眼视力比较差异也有统计学意义(P<0.01).ECCE组有3例顺规性散光≥2.50D,拆线后散光和视力明显好转.结论:Phaco术后手术源性散光小且视力恢复快,值得推广;ECCE术后顺规性散光可通过拆线来调整.

    作者:翁孟诗;李秋仪;江波;高慕洁;苏多 刊期: 2006年第05期

  • 97例脑肿瘤患者的视觉保持测验评估指标分析

    目的:分析脑肿瘤患者的视觉保持测验(VRT)评估指标特点,寻找其规律性.方法:对97例脑肿瘤患者进行VRT测试,并与同期入院的相同年龄、性别、文化程度的脑梗死患者和健康体检人群作比较.结果:与健康体检组比较,脑肿瘤和脑梗死患者的VRT 错误总分[(9.54±3.65)和(13.55±4.61)]明显增高,VRT正确总分[(4.25±1.73)和(2.39±0.56)]明显降低;同时脑肿瘤患者的VRT 错误总分又显著低于脑梗死患者,VRT正确总分则显著高于脑梗死组(P均<0.05或<0.01).左、右半球脑肿瘤患者的VRT 错误总分和VRT正确总分接近(P均>0.05);错误分项指标组间比较中,除了右半球组位置错误明显高于左半球组外(P<0.05),其余各项VRT测试指标均无明显差别.顶叶脑肿瘤患者的VRT 错误总分明显高于非顶叶脑肿瘤患者,VRT正确总分明显低于非顶叶患者(P均<0.01);错误分项指标组间比较中,顶叶组患者的遗漏错误和大小错误等指标明显高于非顶叶脑肿瘤患者(P<0.01).大、小病灶组脑肿瘤患者VRT 错误总分和正确总分接近(P均>0.05);错误分项指标组间比较中,除大病灶组遗漏错误明显高于小病灶组(P<0.01),其余各项VRT测试指标均无明显区别(P均>0.05).结论:脑肿瘤患者可伴有视觉记忆和视觉认知能力改变,其特征与病灶位于顶叶有一定相关性.

    作者:郑斌;彭彪;罗冬冬;陈凡凡 刊期: 2006年第05期

  • 110例经会阴B超宫颈评分与分娩启动的关系

    目的:了解经会阴B超宫颈成熟度评分与头位分娩启动的关系.方法:通过经会阴B超观测110例单胎、头位、初产孕妇宫颈长度、内口扩张程度、羊膜囊嵌入宫内口程度(HM),对其宫颈成熟度评分,与其临产时间及分娩方式相结合分析.结果:随宫颈长度、内口扩张及HM评分增加, 宫颈成熟度增加, 临产时间逐渐缩短.宫颈成熟度评分0~4分组(38例)、5~8分组(36例)、≥9分组(36例)手术产率各为78.94%(30/38)、55.55%(20/36)及27.78%(11/36),0~4分组与≥9分组相比剖宫产率差异有统计学意义(P<0.01).结论:经会阴B超进行宫颈成熟度的评分,对临产时间及分娩方式有一定提示作用,是一种客观准确、简便安全的检查方法.

    作者:冯娟;王瑶;王海燕 刊期: 2006年第05期

  • 后腹腔镜手术治疗肾上腺肿瘤15例

    目的:了解后腹腔镜手术治疗肾上腺肿瘤的疗效.方法:经后腰入路腹腔镜治疗肾上腺肿瘤15例.结果:14例手术成功,无严重并发症,手术时间为60~170 min,平均80 min;术中出血50~250 mL,平均70 mL.患者术后1d即可下床活动及恢复进食,住院5~12 d,平均7 d.1例中转开放手术,7d拆线出院.结论:后腹腔镜手术治疗肾上腺疾病微创、安全有效,是肾上腺疾病手术的首选方法.

    作者:吴保忠;单炽昌;杨帝宽;冯钢;张勇强;刘明建;张启飞 刊期: 2006年第05期

  • 放射性核素骨显像联合PSA、FPSA检测对前列腺癌骨转移诊断的临床意义

    目的:探讨核素骨显像与前列腺特异性抗原(PSA和FPSA)对前列腺癌骨转移随访的临床意义.方法:对87例前列腺癌患者静脉注射99Tcm-MDP 925~1110 MBq行SPECT全身骨显像和PSA、FPSA的检测,观察全身骨骼放射性分布情况并与实验室检查对比分析.结果:骨显像发现54例骨转移瘤,阳性率62.1%.在接受2~6次骨显像随访的前列腺癌患者中,第1、2、3次被确诊为骨转移癌分别为28例(32.2%)、14例(16.1%)、9例(10.4%);第4~6次被确诊骨转移癌各有1例(1.1%).前列腺癌骨转移组的PSA和FPSA均明显高于非骨转移组、治疗随访组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.001).结论:前列腺癌在行骨显像随访时,联合检测PSA、FPSA对前列腺癌骨转移的预后评估有互补作用.

    作者:黄红;周仲佑 刊期: 2006年第05期

  • 血清β-HCG对异位妊娠保守性治疗效果判定的价值及其相关因素分析

    目的:探讨血清β-HCG在输卵管妊娠保守性治疗后疗效观察的价值及其相关因素.方法:回顾性分析保守性治疗输卵管妊娠145例,其中药物治疗组62例(A组),单纯保守性手术38例(B组),保守性手术加术中输卵管局部注射甲氨蝶呤(MTX)10mg 45例(C组).治疗后定期监测血清β-HCG变化并分析相关因素.结果:A组中保守治疗成功58例,4例保守治疗失败改手术治疗;B组36例治疗成功,2例发生持续异位妊娠;C组45例均治疗成功.C组术后血清β-HCG下降至正常时间明显短于A组和B组(P<0.01),B组则短于A组(P<0.01).治疗前血清β-HCG浓度高者,行保守性手术(B、C组)治疗后降至正常所需时间长,但在A组中无明显相关性;各组停经天数、包块大小、腹腔内积血量均与治疗后血清β-HCG降至正常的时间无明显相关性.结论:连续监测血清-β HCG对异位妊娠保守性治疗后疗效观察及预防持续异位妊娠极为重要.手术中采用输卵管局部注射MTX可缩短术后血清β-HCG恢复至正常的时间.

    作者:郭秋琼;高飞雁 刊期: 2006年第05期

  • 166例婴儿黄疸的病因分析

    目的:分析婴儿黄疸的病因.方法:对166例婴儿黄疸的临床资料进行回顾性分析.结果:本组婴儿黄疸的病因以巨细胞病毒(CMV)肝炎59例(35.5%)居首位,其次为婴儿肝炎综合征37例(22.3%),第3位为先天性胆管闭锁共19例(11.4%),其他病因亦可见.结论:无论何种原因应尽早诊断、及早治疗;明确病因对指导治疗、防病情恶化有重大意义.

    作者:谢思华;马华梅 刊期: 2006年第05期

  • 乙型肝炎患者血清甲胎蛋白水平的检测及其临床意义

    目的:探讨乙型肝炎患者血清甲胎蛋白(AFP)的水平及其临床意义.方法:对130例乙型肝炎患者进行AFP、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷胺酰转肽酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP)的水平检测;比较AFP阳性患者(>20ng/mL为阳性)与AFP阴性患者的肝功能损害程度,并追踪观察AFP阳性者的AFP变化与肝功能及HBV DNA之间的关系.结果:130例乙型肝炎患者中血清AFP阴性者73例,血清AFP阳性者57例, AFP阳性者的AST、ALP、GGT较AFP阴性者高(P<0.01或<0.05).28/31例(90.3%)AFP阳性者的DNA阳性.49/57例(85.9%)AFP阳性者的AFP呈短期一过性升高,随着肝功能的恢复,AFP逐渐恢复正常;另有8例AFP持续升高超过90d,其中3例经病理组织学证实演变为肝癌.结论:对AFP异常的乙肝患者,应动态监测其AFP的变化.

    作者:黄湘宁 刊期: 2006年第05期

  • 我校2004年教职工健康体检结果分析

    目的:了解我校教职工的健康状况.方法:将本校792名参加体检的教职工,分40岁以下、40~60岁和60岁以上3个年龄组,检查不同的项目,40岁以上者检查腹部B超、血脂、空腹血糖、肝功能、乙肝两对半、A-FP、胸透、心电图等.40岁以下者不做B超(肝、胆、肾等疾患可疑者除外),其他项目同40岁以上.结果:792人中检出异常者404人,检出率为51.0%;检出疾患55种,前3位为前列腺肥大、血脂异常和子宫附件疾病.异常者男性218人,患病率44.8%(218/487),其中有109例患有2种以上疾病;女性186人,患病率为61.0%(186/305),其中有53人同时患2种以上疾病.40岁以下组的患病率为37.7%(61/162),40~60岁组的患病率为59.0%(242/410),60岁以上组的患病率为 45.9%(101/220),40~60岁组与40岁以下组和60岁以上组比较,差异有统计学意义(P<0.01).404例体检异常者中,不同性别间的血脂、心电图、肝功能异常的检出率,差异有统计学意义(P<0.01或<0.05).结论:高校要重视教职工的医疗预防保健工作,提高教职工的健康水平.

    作者:黄吉堂 刊期: 2006年第05期

  • 脑卒中致残患者心理康复护理的实施

    目的:了解支持性心理治疗和代币疗法对脑卒中患者心理康复的作用.方法:回顾性分析78例脑卒中致残患者的临床资料,根据心理调整的5个阶段,采用支持性心理治疗和代币疗法,并辅以社会支持对患者进行心理康复.结果:给予患者支持性心理治疗和代币疗法及社会支持后,患者能较快消除非理性信念,本组78例中基本痊愈10例,肢体肌力均有不同程度好转68例,无死亡病例.出院前后HRSD量表评分均有明显下降.结论:针对脑卒中患者心理调整的5个阶段,采用支持性心理治疗和代币法,同时辅以社会支持,有利于患者的康复.

    作者:郑旭初 刊期: 2006年第05期

  • CK19、PCNA和P53在甲状腺病变中的表达

    目的:了解CK19、PCNA、P53在甲状腺病变中的表达及其诊断意义.方法:采用免疫组化SP法检测60例甲状腺病变(甲状腺乳头状癌36例,结节性甲状腺肿乳头状增生14例,甲状腺瘤10例)中CK19、PCNA、P53蛋白的表达.结果:CK19在36例甲状腺乳头状癌中呈阳性表达,多为强阳性;14例结节性甲状腺肿乳头状增生中3例阳性,呈小灶性阳性,阳性表达者为伴有真乳头的乳头状增生;10例甲状腺瘤中4例阳性,呈小灶性阳性和点状阳性表达,阳性表达者为增生活跃的小滤泡腺瘤和不典型腺瘤.36例甲状腺乳头状癌中30例PCNA阳性, 多为中等或强阳性表达, 14例结节性甲状腺肿中4例PCNA阳性, 10例甲状腺腺瘤中3例PCNA阳性,多为弱阳性, PCNA在甲状腺乳头状癌阳性表达比结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤高,差异有统计学意义(P<0.01).36例甲状腺乳头状癌中15例P53阳性,多为弱阳性表达,在结节性甲状腺肿和甲状腺瘤中P53均呈阴性表达,经两两比较的z检验,三种病变中的P53表达差异无显著性(P>0.05).结论:局灶性CK19阳性可见于良性病变,弥漫性阳性是甲状腺乳头状癌的特征,有助于隐匿性乳头状癌与良性结节的鉴别诊断和甲状腺组织内是否存在微小转移灶的判断.PCNA对甲状腺病变的鉴别诊断起参考作用,P53在甲状腺病变的鉴别诊断中意义不大.

    作者:吴俊辉;温文;关弘;昝沁 刊期: 2006年第05期

  • 深圳市罗湖区围产儿出生缺陷监测干预的效果分析

    目的:调查深圳市罗湖区出生缺陷发生情况,了解其相关危险因素,对近3年综合干预措施的效果进行评估,为预防决策提供依据.方法:将2000-2002年(未实行出生缺陷综合干预措施,为无干预组)与2003-2005年(期间采取出生缺陷综合干预措施,为干预组)围产儿出生缺陷情况进行比较,对2003-2005年干预效果进行评估.结果:罗湖区近6年共有围产儿44503例,发生出生缺陷657人,无干预组的缺陷发生率为1.53%,干预组为1.43%;通过综合干预措施,危险因素暴露率较干预前明显减少(P<0.001),常住人口出生缺陷发生率显著下降(P<0.05),且出生缺陷的顺位发生了变化,以先天性心脏病居首位.结论:罗湖区出生缺陷发生率较高,是引起围产儿死亡的首位原因,采取综合干预措施可达到降低出生缺陷发生率的目的.

    作者:刘保华;陈晓红;曾红燕;周丽萍;刘晓芬 刊期: 2006年第05期

  • 脊髓损伤的治疗现状及研究进展

    脊髓损伤(SCI)是人类致残率高的疾患之一.脊髓损伤平面愈高,患者丧失的功能愈多,脊髓圆锥损伤可致骶区感觉功能丧失,排尿排便功能障碍.更高位的脊髓损伤可直接导致损伤平面以下的感觉、运动功能丧失及排尿排便功能障碍.由于脊髓损伤后断裂的轴突不能再生,目前对SCI的治疗仍是当今一大医学难题.本文就SCI治疗及相关基础研究作一综述.

    作者:曾伟锋;汤少明;罗少军 刊期: 2006年第05期

  • 血液灌流抢救50例药物或毒物重度中毒的施护

    目的:总结血液灌流(HP)技术抢救重度药物和毒物中毒患者的护理策略.方法:灌流器选用一次性使用炭肾(YTS-200型)对50例药、毒物重度中毒患者除进行常规内科治疗外分别给予血液灌流,灌流过程中密切观察患者的生命体征及尿量的变化,及时处理各种并发症,防止不良反应的发生.结果:50例中,除2例死亡外,其余48例抢救成功治愈出院,治愈率达96%.无1例出现并发症.结论:加强血液灌流的各项护理是血液灌流得以顺利进行的保证.

    作者:肖生翠;梁燕平 刊期: 2006年第05期

广东医科大学学报杂志

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主管:广东省教育厅

主办:广东医科大学