张美品；孟珩；何娜；高曲文；秦兵；陈勇军；石奕武；陈亮；易咏红；廖卫平；黎冰梅
目的：通过体外RNAi干扰技术靶向抑制原癌基因Bmi-1表达，观察其对胆囊癌细胞增殖的效应及对细胞周期的影响。方法：针对Bmi-1不同位点构建4个miRNABmi-1重组质粒，采用RT-PCR和Western blot检测各组Bmi-1 mRNA和蛋白表达，选择干扰效果明显组质粒转染胆囊癌GBC-SD细胞，48 h后采用BrdU及流式细胞仪检测细胞增殖及细胞周期变化。结果：RT-PCR显示miRNABmi-1重组质粒1、3、4组mRNA表达明显低于对照组（P＜0．05）；Western blot显示miRNABmi-1重组质粒2、3、4组蛋白表达明显低于对照组（P＜0．05）；选取第4组（mRNA及蛋白表达抑制效果强）质粒转染GBC-SD细胞，BrdU显示mRNA-Bmi-1-4组细胞增殖抑制明显，增殖率为46．63±5．31，明显低于对照组（P＜0．05）；细胞周期显示miRNA-Bmi-1-4组G0/G1期细胞增加（72．20±1．71），G2/M和S期细胞减少（18．30±7．21，9．50±6．01），与对照组比较，差异具有显著性（P＜0．05）。结论：靶向沉默Bmi-1表达，能有效抑制胆囊癌细胞增殖，使细胞周期阻滞于G0/G1期，Bmi-1可能成为胆囊癌基因治疗的有效靶点。
作者：魏东；邹浩；王琳；吴雪松；骆志玲；王滔；张小文 刊期： 2014年第05期
目的：应用RNA干扰技术，针对单纯疱疹Ⅱ型病毒（HSV-2）UL29基因构建短发夹RNA重组表达载体，观察其对HSV-2的干扰效应。方法：针对HSV-2 UL29基因筛选出4条拟干扰靶位点序列，分别设计、合成4组靶向UL29基因shRNA的基因真核表达载体。通过脂质体转染到HEK293细胞。再将HSV-2接种到HEK293细胞中。采用终点滴定法检测病毒滴度，RT-PCR检测shRNA对转录水平的影响，Western-blot检测shRNA对蛋白质表达水平的影响。结果：终点滴定法结果显示UL29shRNA各组均可不同程度降低病毒感染滴度，与空白组（未转染重组表达载体）比较差异显著（P＜0．01）。RT-PCR结果显示，与空白组比较，4组抑制率分别为28．80％、59．95％、66．08％、36．27％，差异均具有显著性（P＜0．05），shRNANC（不针对任何基因的序列）与空白组相比差异无显著性，其中以UL29shRNA1461组效果为佳。 Western-blot检测表明UL29shRNA各组ICP8蛋白表达水平比阴性对照组明显降低。结论：UL29shRNA能有效干扰HSV-2UL29基因的表达，抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制。
作者：黄畅；潘晓瑜；袁俊杰；吕延成 刊期： 2014年第05期
喉癌、下咽癌是头颈部常见的恶性肿瘤，近年来全喉切除手术明显减少，保留喉功能的手术开展越来越普遍。但在保留喉功能的手术中需切除部分喉及下咽组织，同时需行颈淋巴结清扫术和预防性气管切开，导致术中及术后并发症的增多。探寻一种安全、有效、简易的手术方法是目前耳鼻喉科医生面临的重要问题。我科自2004年1月至2012年12月对86例保留喉功能的喉癌、下咽癌的患者行简易气管造瘘术，临床效果满意，现报告如下。
作者：金日群；彭韶平；廖志莹；刘家锋；谢洋；熊义豪 刊期： 2014年第05期
目的：比较分析剂量递增靶中靶放疗（TIT）与常规放疗脊柱转移癌的治疗结果。方法：采用放射治疗90例椎体转移癌患者（病灶118处），靶中靶放疗52例（病灶63处），计划靶体积（PTV）30～40 Gy，大体靶体积（GTV）50～60 Gy，15～25次。常规放疗38例（病灶55处），PTV 30～40 Gy，10～20次。结果：两组止痛有效率分别为90．4％、81．6％，但止痛疗效无差异。近期治疗部位改善分别为31处（49．2％）、25处（45．5％），稳定状态28处（44．4％）、20处（36．3％），恶化4处（6．35％）、10处（18．1％）。1年局部控制率、生存率分别为84．7％、68．6％，49．4％、32．2％，差异均有显著性。急性不良反应主要有血液毒性，两组无统计学差异。结论：靶中靶放射治疗脊柱转移癌是一种更安全有效的局部治疗手段，具有更好的疗效和副反应少的特点。
作者：张立娜；韩婷婷；李宏奇；王颖杰；吴伟章；夏廷毅 刊期： 2014年第05期
目的：构建PTEN原核融合质粒，利用原核表达体系表达PTEN蛋白。方法：从人新鲜外周血中提取总RNA，采用逆转录和聚合酶链反应等分子生物学技术扩增PTEN编码区基因，并将其pET32a质粒融合，化学法转化大肠杆菌DH5α进行克隆。将鉴定正确的pET32a-PTEN融合质粒转化入表达菌株BL21，通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导其蛋白表达，SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况。结果：菌落PCR及DNA测序证实目的基因与质粒完整融合；融合质粒成功转入表达菌株BL21（DE3），SDS-PAGE和Western-Blot结果显示表达菌经IPTG诱导后表达出73 kDa左右的蛋白。结论：成功构建融合质粒，并且PTEN全长蛋白在原核表达菌BL21中完整、高效表达。
作者：张战锋；韩丽乔；庄俊华；黄宪章 刊期： 2014年第05期
全球每年新增200万～300万脑出血患者，其中约1／3的患者在发病早期死亡，而幸存者多数遗留残疾，影响生存质量。临床研究证实，高血压可以增加脑出血发生和再发出血的风险，多数脑出血患者发病后即表现为明显的血压升高，特别是在起病24 h内血压的增高是显著的，再出血的几率也是高的，因此早期血压管理非常重要。但是降压治疗目前却无统一的方案，也没有明确的治疗目标，早期强化降压治疗能否改善预后尚不肯定。一些证据表明，早期降压治疗可改善预后，机制可能为通过降压减少血肿的扩大，进而减少再出血；也有学者认为，脑出血后血压增高是机体应激反应，能增加脑血流量，保持脑灌注，而早期降压治疗可能会降低脑灌注压，导致脑供血供氧减少，加剧血肿周围区域的脑细胞损伤。因此，为了解决以上问题，需要进行一些大样本、多中心的临床研究来确定合理的早期降压治疗方案和佳目标血压。近期在《新英格兰医学杂志》发表的急性脑出血患者的快速降压治疗临床研究（INTERACT 2）［1］结果振奋人心，该研究认为急性脑出血的早期强化治疗可以改善患者生存质量。此项研究是迄今为止在急性脑出血治疗领域重要的研究之一，具有里程碑意义，为全球急性脑出血患者的早期康复探索出了一个安全的途径。
作者：陈纯波；吕波 刊期： 2014年第05期
目的：探讨蛋白激酶G（PKG）对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中炎症因子[白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]分泌的影响。方法：THP-1单核细胞用160 nmol/L的佛波酯诱导分化成巨噬细胞，再以50 mg/L氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）处理形成泡沫细胞，油红“O”染色，镜下观察细胞形态。以PKG激动剂100μmol/L 8-Br-cGMP和抑制剂2μmol/L KT-5823分别处理巨噬细胞和泡沫细胞，同时设立巨噬细胞正常对照组和泡沫细胞模型对照组，24 h后收集细胞上清液，ELISA检测各组细胞IL-6、IL-10、TNF-α的分泌。结果：ox-LDL处理巨噬细胞48 h后，成功构建为泡沫细胞。泡沫细胞中IL-6、TNF-α分泌显著增加（P＜0．05）。8-Br-cGMP处理巨噬细胞后，IL-6分泌显著减少（P＜0．05），IL-10分泌显著增加（P＜0．05）；KT-5823处理巨噬细胞后，IL-10分泌显著减少（P＜0．05）。8-Br-cGMP处理泡沫细胞后，IL-6和TNF-α分泌显著减少（P＜0．05），IL-10分泌显著增加（P＜0．05）；KT-5823处理泡沫细胞后，IL-6和TNF-α分泌显著减少（P＜0．05）。结论：PKG可能通过上调抗炎因子IL-10的表达、下调促炎因子IL-6和TNF-α的表达，抑制炎症的发生发展；PKG可作为潜在的抗动脉粥样硬化的新思路和新靶点。
作者：李红艳；诸葛祥真；张弭；黄健 刊期： 2014年第05期
患者男，48岁，系“精神行为异常伴发作性肢体抽搐16 d”入院。16 d前患者家人发现其言语增多，精神行为异常（将自己手表扔入池塘）、躁狂、幻觉（幻觉见到已故的人），未就诊。2周前家人发现其昏迷在家，身上有大量呕吐物，急诊入当地医院，住院过程中多次出现意识丧失、肢体抽搐、口吐白沫伴口唇紫绀，每次持续1～3 min后好转，当地医院诊断为单纯疱疹性脑炎，予以抗病毒、脱水降颅压等处理，患者肢体抽搐未再发作，但烦躁及精神行为异常未见好转，并出现记忆力减退，症状进行性加重，为求进一步诊治入住我院。入院时查体：T 36．5℃，BP 134／84 mmHg，P 80次／min，R 16次／min，神智清楚，精神差，言语较多，清晰，多为自言自语。查体部分合作，答非所问。注意力尚可，近记忆力差，远记忆力保存，时间定向力尚可，空间定向力差，计算力100-7＝？。双侧瞳孔等大等圆，光反射灵敏，双侧鼻唇沟对侧，伸舌居中，颈软，克氏症及布氏症阴性，四肢肌力肌张力正常，双侧病理征阴性，针刺觉检查正常。 MMSE量表检查不能合作。实验室检查：血常规、生化、凝血象均正常，甲状腺功能及甲状腺T系列正常，抗核抗体全套正常，抗中性粒细胞胞浆抗体阴性，肿瘤12项蛋白筛查均为阴性，抗链球菌素“O”及类风湿因子阴性，叶酸、维生素B12正常，血沉9 mm／h，免疫组化提示：梅毒螺旋体抗体阳性、余均为阴性，血清TPPA、TRUST阳性、滴度1∶8，脑脊液生化：葡萄糖3．4 mmol／L、氯化物120 mmol／L、蛋白0．3 g／L，脑脊液常规：无色透明，有核细胞数39×106个／L、红细胞数16×106个／L，脑脊液找细菌、结核杆菌、真菌均为阴性，脑脊液IgG 64．9 mg／L（正常值0～34 mg／L）、IgA 8．17 mg／L （正常值0～5 mg／L）、IgM 3．22 mg／L（正常值0～1．3 mg／L），脑脊液TPPA／TRUST均为阳性。视频脑电图提示中度异常脑电图。头颅MRI：T2像及 FLAIR 像见双侧颞叶内侧、海马、杏仁核、岛叶高信号，增强未见强化，头颈部CTA：左侧椎动脉及基底动脉多处纤细狭窄（图1）。诊断为神经梅毒，给予青霉素400万U，每4小时1次，患者3d后精神症状明显改善，空间定向力恢复，记忆力较前改善。2周后患者症状明显改善，MMSE量表24分（大专文化），复查24 h动态脑电图正常。患者带药出院。
作者：刘晓敏；余锋；陈银河 刊期： 2014年第05期
目的：探讨改良后的MDRD方程、CKD-EPI cr方程、CKD-EPI cys方程、CKD-EPI cr-cys方程及我国学者近研究开发的两个方程（记为CHINAcr-cys方程和CHINAcys方程）在早期慢性肾脏病肾小球滤过率估算中的适用性。方法：收集2009年8月至2013年5月间深圳市中医院53例慢性肾脏病2、3期患者血清血肌酐、血清胱抑素C水平，并同时行99mTc-DTPA肾动态显像。采用6种经验公式推算得出相应的eGFR，分别与99mTc-DTPA肾动态显像测得的tGFR做相关性研究，并比较它们的准确性、偏差、精确性及一致性。结果：组内相关系数及Pearson相关性分析显示，6种GFR方程估算结果与tGFR值的相关性由高到低依次为 eGFRCKD-EPI cr （0．567）、eGFRCKD-EPI cr-cys （0．513）、eGFRMDRD （0．496）、eGFRCHINAcr-cys （0．468）、eGFRCHINAcys （0．401）、eGFRCKD-EPI cys（0．399）。准确性比较中，eGFRCKD-EPI cr的准确性高。Bland-Altman分析显示，eGFRCHINAcys的偏差及精确度佳。6个eGFR对CKD2、3期的一致性均不理想（Kappa值分别为0．218、0．343、0．0627、0．206、0．274、0．160），以eGFRCKD-EPI cr一致性高。结论：6种评估方程中，CKD-EPI cr公式计算的eGFR与tGFR相关性优，偏差、精确度方面以CHINAcys公式优，但优势尚不明显。
作者：何日明；曾又佳；韩鹏勋；吴喜华；杨曙东 刊期： 2014年第05期
目的：观察高压氧对左室射血分数保留的心力衰竭（HFpEF）患者左室重构的影响。方法：将110例HFpEF患者随机分为两组，对照组55例应用常规抗心衰药物治疗，治疗组在常规药物治疗基础上加用高压氧治疗，应用彩色多普勒超声检测治疗前及治疗后3个月左心室结构各项指标。结果：两组治疗后，左室结构各项指标（左室舒张末期内径、室间隔舒张末期厚度、左室后壁舒张末期厚度、左室心肌重量指数）均明显下降（P＜0．01），治疗组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。随访3个月，治疗组发生复合心血管事件较对照组减少且差异有显著性（P＜0．05）。结论：高压氧治疗能显著改善HFpEF患者左室舒张和收缩功能，逆转左室重构，并可减少心血管事件的发生。
作者：李继锋；林炳钦；林宝珠；蔡建生；彭志坚；许锦叶 刊期： 2014年第05期
目的：系统性评价胸腔镜下胸腺扩大切除术（VATET）与胸骨正中劈开胸腺扩大切除术（T-3b）治疗非胸腺瘤重症肌无力的疗效及安全性。方法：计算机检索PubMed、The Cochrane Library、中国生物医学文献数据库（CBM）、中国期刊全文数据库（CNKI）、维普数据库（VIP）和万方数据库，收集比较VATET与T-3b治疗非胸腺瘤重症肌无力的相关文献，搜索时间为建库至2013年9月，采用Stata12．0软件比较手术时间、术后肌无力危象发生率、术后肺部感染发生率及术后1年完全稳定缓解率。结果：终纳入7篇文献，病例数650例，其中VATET组278例，T-3b组372例。 Meta分析结果显示：（1）VATET与T-3b相比，在手术时间[SMD ＝0．369，95％CI （0．449，1．187）， P ＝0．377]、术后1年完全稳定缓解率[OR ＝1．083，95％CI （0．722，1．625），P＝0．699]方面无统计学差异；（2）VATET的术后肌无力发生率[OR＝0．224，95％CI（0．105，0．474）， P＝0．000]和术后肺部感染发生率[OR＝0．228，95％CI（0．097，0．537）， P＝0．001]均低于T-3b。结论：VATET可以达到与T-3b相同的疗效，且降低了术后肌无力危象和术后肺部感染发生率。
作者：刘太省；王武军；刘路浩；邝海能；庄贤勉；卢笛；吴华 刊期： 2014年第05期
目的：研究铸造连冠式磁力功能矫治器对早期骨性Ⅲ类错合的矫治效果。方法：治疗组选择骨性反颌病例16例（其中男7例、女9例，年龄8～12岁，平均10．3岁），均戴铸造连冠式磁力功能矫治器5～8个月（平均6．5个月）；对照组选择16例前来就诊，仅有轻度Ⅲ类面型，咬合关系Ⅰ类，但是不需要处理，随诊观察的患者。拍前后头颅侧位片，比较分析。结果：与对照组相比，治疗组上颌骨长度明显增加，前牙覆合覆盖正常，骨性Ⅲ类侧貌改变较明显。结论：铸造连冠式磁力功能矫治器对早期骨性Ⅲ类错合的矫治是有效的。
作者：王丽艳；张自清；施亮；张娟 刊期： 2014年第05期
目的：探讨阻断PI3K/Akt通路对乳腺癌细胞多药耐药的逆转作用及相关信号转导机制。方法：MTT法测定乳腺癌细胞MCF-7和MCF-7/ADR对阿霉素的半数抑制浓度（IC50）。对MCF-7/ADR进行PI3K/Akt通路抑制剂LY294002不联合或者联合用药，MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性。Western Blot检测加与不加LY294002时，PI3K/Akt通路、P-gp及Survivin激活情况。结果：（1）阿霉素对MCF-7和耐药细胞MCF-7/ADR的IC50分别为（0．28±0．04）μmol/L和（18．89±2．48）μmol/L，耐药倍数为66倍。（2）联合使用LY294002之后，耐药细胞MCF-7/ADR的IC50降至（3．21±0．08）μmol/L，耐药倍数降低至8，且细胞对药物敏感性明显增加。（3）耐药细胞株MCF-7/ADR中PI3K/Akt通路激活，GSK-3被抑制，且P-gp、Survivin等促存活蛋白活性高；阿霉素联合使用LY294002之后，MCF-7/ADR中PI3K/Akt/GSK-3、P-gp、Survivin等均被抑制。结论：LY294002联合阿霉素可有效增加MCF-7/ADR的化疗敏感性；LY294002通过抑制PI3K/Akt/GSK-3通路、进而抑制P-gp、Survivin促存活蛋白激活，从而有效逆转了MCF-7/ADR的耐药性。
作者：林思园；李磊；张利华 刊期： 2014年第05期
目的：观察胃转流术治疗2型糖尿病术后1年内各代谢指标变化，并探索胃转流术评价指标及适用人群的选择。方法：收集我院112例行胃转流术的2型糖尿病患者手术前后的临床及实验室检查资料。根据BMI大小分为两组：正常体质量组（≤25 kg/m2），超重肥胖组（＞25 kg/m2）。术后1、3、6、12个月随访各项生理及生化指标。行手术前后对照、组间对照和主成分分析。结果：与术前相比，两组在HbA1c、HOMA-IR等均有明显改善。主成分分析发现BMI、HbA1c在术后6个月前对结果贡献较大，而HOMA-β、HOMA-IR在术后6个月后对结果贡献较大，分别反映出术后恢复的综合指标及均匀程度。结论：2型糖尿病患者术后1年各代谢指标明显改善，术后完全缓解率逐步升高；超重肥胖组较正常体质量组血糖、血脂、HOMA-β改善明显，超重肥胖者是手术治疗更适合人群；BMI、HbA1c、HOMA-β、HOMA-IR对于手术效果评价及术前适应证的把握有较大指导意义。
作者：胡士涛；段瑞祥；张勇；王东；徐琳琳；王晓丽；季虹；荣海钦 刊期： 2014年第05期
目的：应用高通量长链非编码RNA（long non-coding RNA， lncRNA）芯片检测结肠癌组织和癌旁组织差异表达的lncRNA，并对其进行初步分析。方法：分别提取6例结肠癌患者的癌组织和癌旁组织中的RNA，体外逆转录制备并标记为双链cDNA（ds-cDNA），与含有22000条lncRNA的芯片进行杂交，计算机扫描并分析芯片荧光信号图像，筛选差异表达的lncRNA。结果：在结肠癌组织中差异表达的lncRNA达928条，其中在肿瘤组织中高表达的lncRNA 522条，低表达的lncRNA 406条（变化＞2倍且P＜0．05）。结论：结肠癌的发生过程中lncRNA的表达谱发生明显变化，lncRNA与结肠癌的发生密切相关。
作者：刘长；安公明；张胜龙；杨斌 刊期： 2014年第05期
目的：观察146例缺血性脑血管病患者动态动脉硬化指数（ambulatory arterial stiffness index， AASI）在颅内、外动脉狭窄中的变化，评价AASI与颅内、外动脉狭窄程度及数量的相关性，以指导临床预防。方法：对入组患者行头颈部CT血管成像（CTA）评价颅内、外动脉狭窄程度。以狭窄血管支数的不同分为无狭窄组、1支动脉狭窄组、2支动脉狭窄组、3支及以上动脉狭窄组。监测动态血压计算AASI。结果：（1）颅外动脉狭窄程度各组AASI值未见统计学差异（P＝0．614）。（2）AASI与颅内动脉狭窄程度呈正相关（r＝0．743， P＜0．05）。（3）AASI和3支及以上病变组呈正相关（r＝0．797，P＜0．05）。结论：AASI颅内动脉狭窄程度及病变支数呈正相关，与颅外动脉狭窄程度无明显相关。
作者：芦军；赵伟丽；孙晓红；崔其福 刊期： 2014年第05期
冠状动脉搭桥术（ coronary artery bypass grafting， CABG）已成为临床治疗严重冠心病的重要手段之一。术后监测技术的发展，为手术患者安全度过围手术期提供了有力的保障，近年来我们总结Swan-Ganz导管和PICCO在冠脉搭桥术后患者中的应用，指导冠脉搭桥术后患者的血管活性药物调整和容量治疗，以期望寻找更合理的监测手段，现报告如下。
作者：马冬璞；李成建；杨彩浮；李保林 刊期： 2014年第05期
作者： 刊期： 2014年第05期
恶性肿瘤的基本特征是肿瘤细胞的失控性增殖，而细胞失控性增殖的根本原因就是细胞调控机制的破坏。细胞调控机制的破坏会造成基因组不稳定性，从而使肿瘤细胞不仅恶性增殖，还发生一系列恶性表型的改变。因此，细胞的调控成为当前肿瘤研究的热点。肿瘤细胞内离子通道的正常表达有助于维持细胞的完整性及调控细胞间信息传递。氯离子通道蛋白1（chloride intracellular channel 1，CLIC1）是细胞内离子通道的一种，已成为当前肿瘤研究的重点。目前胃肠道肿瘤的发病率和死亡率呈逐年上升趋势，其发病机制复杂，与多种途径有关。目前CLIC1与胃肠道肿瘤关系的报道尚不多，本文就这方面的研究做一综述。
作者：刘金禄(综述)；陈俊强(审校) 刊期： 2014年第05期
目的：探讨局部巨大晚期乳腺癌术后胸壁皮肤缺损手术重建的临床应用价值。方法：回顾性分析2010-2013年收治的6例局部巨大晚期乳腺癌患者，探讨胸壁皮肤缺损重建手术方法的可行性。结果：4例患者行皮肤扩张器联合背阔肌肌皮瓣修复，2例行射频治疗联合背阔肌肌皮瓣修复，术后皮瓣成活良好，无重大并发症，无围手术期死亡，无胸壁复发，1例出现肝转移及对侧乳房转移。结论：背阔肌联合组织扩张器及联合射频治疗是修补晚期乳腺癌术后胸部缺损的有效手段，手术修复效果满意，其远期效果需进一步观察。
作者：胡小戊；章乐虹；夏婷；曹腾飞；贾海霞 刊期： 2014年第05期
实用医学杂志
主管:广东省卫生厅
主办：广东省医学情报研究所
