学术投稿

熔解曲线分析检测临床常见5种革兰阴性菌的方法建立

陈弟;胡大春;邵剑春;刘德华;周玲;秦海燕

关键词:熔解曲线分析, 方法建立, 检测, 革兰阴性病原菌
摘要:目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌.方法:选取临床常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种.对目标菌种设计种特异性引物.构建熔解曲线法,并进行特异性验证.检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析.检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价.结果:(1)经预实验后,对Tm值差异较大的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌三对引物同时进行熔解曲线分析,对大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌两对引物同时进行熔解曲线分析.(2)特异性验证显示,目标菌种均有特异性的熔解曲线,各自的Tm值依次为88.37、86.32、80.86和87.56、86.32℃.(3)可检测到的拷贝浓度稀释液约为3.0 × 103 copies/mL.(4)稳定性评价的结果显示,Tm值变化范围窄小,差异有统计学意义.结论:所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性.
实用医学杂志相关文献
  • 间充质干细胞对睾丸辐射损伤的影响

    目的:研究间充质干细胞(MSCs)对睾丸辐射损伤的影响,为临床上治疗放射性睾丸损伤奠定理论基础.方法:选取15只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组.模型组和治疗组大鼠均接受直线加速器产生的高能电子线行一次性全身照射;对照组不接受照射.治疗组大鼠接受辐射24 h后尾静脉输注MSCs 3 × 106 /只;模型组和对照组大鼠尾静脉输注生理盐水1 mL;共3周.当模型组处于濒死状态时处死所有大鼠,检测各组大鼠血清中睾酮水平、血清和睾丸组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用苏木精-伊红染色法 (HE染色法)制作大鼠的睾丸病理切片,观察辐射对睾丸形态学的影响.结果:模型组大鼠精神萎靡,反应迟钝,活动少,嗜睡,毛发变黄;治疗组大鼠较模型组反应灵敏.治疗组大鼠血清SOD明显高于模型组,而MDA水平低于模型组;治疗组大鼠血清睾酮含量明显高于模型组,但较正常组低.病理结果显示对照组生精小管横切面见精原细胞及不同发育阶段的精母细胞、精子细胞、精子,组成多种形态的完整生精上皮图像;模型组生精上皮变薄,生精层数减少,各级生精细胞明显减少,部分曲细精管内仅剩支持细胞和少量精原细胞,精子细胞及精子消失,显示辐射对大鼠睾丸组织损伤明显;治疗组外形较规则,各级生精细胞有序排列,初级精母细胞、精子细胞数量增多,精子发生良好,形态结构接近于对照组.结论:MSCs对睾丸的辐射损伤具有明显的修复作用,能够改善睾丸的生殖功能.

    作者:郭洪波;蒋玲;孟伟;郭坤元 刊期: 2011年第15期

  • 腹膜巨大恶性间皮瘤1例

    患者男,66岁.腹痛、腹胀、尿频1年,腹水2个月来我院就诊.患者半年前不明原因出现腹痛、腹胀,当地就诊诊断为肠梗阻,给予对症治疗后,症状稍有缓解.近半年来,症状逐渐加重且出现腹水,为求进一步诊治来我院就医.既往体健,无家族史及外伤史.

    作者:邢荣格;田亮;张荣菊 刊期: 2011年第15期

  • 瑞芬太尼、异丙酚加小剂量麻黄碱应用于肠镜检查麻醉的效果

    目的:观察瑞芬太尼复合异丙酚加小剂量麻黄碱应用于肠镜检查的麻醉效果.方法:将拟行肠镜检查的108例ASAⅠ~Ⅱ级患者随机分为3组:A组(异丙酚 + 瑞芬太尼 + 麻黄碱组)、B组(异丙酚 + 瑞芬太尼组)和C组(单纯异丙酚组),每组36例.比较3组患者诱导前后收缩压(SBP)、心率(HR)、呼吸频率(RR)、血氧饱和度(SpO2)变化;术中镇痛效果;诱导时间、术毕清醒时间及住院时间长短.结果:A组诱导后循环稳定,SBP、HR、RR、SpO2无明显变化,B、C两组患者给药诱导后SBP(mmHg)(B组105.5 ± 8.6,C组106.4 ± 9.2)、HR(次/min)(B组71.5 ± 14.5,C组71.8 ± 13.2)、RR(次/min)(B组18.34 ± 4.12,C组18.62 ± 4.38)、SpO2(%)(B组94.07 ± 3.12,C组93.92 ± 2.27)均显著降低;A、B组与C组比较,在诱导时间(min)(A组1.51 ± 0.24,B组1.48 ± 0.55,C组2.14 ± 0.56)、术后清醒时间(min)(A组3.16 ± 0.38,B组3.28 ± 0.24,C组5.02 ± 1.26)及住院时间(min)(A组16.26 ± 3.08,B组16.38 ± 3.15,C组20.52 ± 3.27)方面,均明显减少(P < 0.05); A、B组镇痛优良率为100%,C组优良率为87.5%.结论:瑞芬太尼、异丙酚伍用小剂量麻黄碱应用于肠镜检查血流动力学平稳、诱导迅速、苏醒快、可控性强.麻醉效果满意,不良反应少.

    作者:徐文;谭小云;袁超;王海文 刊期: 2011年第15期

  • 北京社区人群颈动脉内中膜厚度与冠状动脉钙化的相关性研究

    目的:评价北京社区人群颈动脉内中膜厚度与冠脉钙化的分布特点,并对两者的相关性进行探讨.方法:随机抽取北京朝阳地区社区人群共1 209人,应用超声检测颈动脉内膜内表面到中膜外表面的距离(intimal-medial thickness,IMT),并行冠状动脉多排螺旋CT(multi-detetor computed tomography,MDCT)检查,应用Agatston积分方法分别计算冠状动脉钙化积分(coronary artery calcium score,CACS),分析IMT及CACS与临床危险因素之间的关系及其分布特征,并对两者的相关性进行研究.结果:入选者男性颈总动脉内中膜厚度(common carotid artery-IMT,CCA-IMT)(1.09 ± 0.43 vs 0.84 ± 0.33,P = 0.016)、斑块发生率(47% vs 29%,P = 0.001)、冠状动脉钙化(coronary artery calcium,CAC)发生率(45% vs 31%,P = 0.004)、CACS (120 ± 82 vs 62 ± 49,P = 0.001)及ln(CACS+1)(0.63 ± 0.40 vs 0.53 ± 0.32,P = 0.001)等各项指标均明显高于女性组患者;36 ~ 45岁组、46 ~ 55岁组男女性相比较,斑块发生率及斑块积分差异有显著性(P < 0.001),而> 55岁年龄组男性与女性斑块发生率及斑块积分无明显差别( P > 0.05);年龄、吸烟、低密度脂蛋白、体重指数、空腹血糖水平为IMT增厚的独立危险因素,而年龄、吸烟、低密度脂蛋白、收缩压是冠状动脉钙化的独立危险因素;男女两组ln(CACS + 1)及IMT之间存在显著相关(P < 0.01).结论:北京社区人群CAC阳性率、IMT、CACS均有明显的性别差异,而随着年龄增加男女性之间的斑块发生率及斑块积分差异渐不明显.对传统危险因素的评估可较好预测冠状动脉钙化和颈动脉斑块存在及程度.CACS与IMT之间存在正相关,两者对无症状冠状动脉粥样硬化患者的评价尚待进一步的研究.

    作者:孙涛;程宇彤;陈顺华;王苏;阴成茜;张京梅;李志忠 刊期: 2011年第15期

  • 去牙垫经口气管插管增加舒适度、减少呼吸机相关性肺炎的作用研究

    目的:观察去除牙垫在增加经口气管插管患者舒适度、减少呼吸机相关性肺炎(VAP)发生中的作用.方法:比较去牙垫(无牙垫组)和放置牙垫(有牙垫组)经口气管插管固定法对患者口腔局部舒适度的影响和VAP的发生率.结果:无牙垫组舒适度明显优于有牙垫组,VAP发生率较有牙垫组下降,两组相比差异有显著性.结论:去牙垫经口气管插管可增加患者舒适度,减少VAP的发生,值得在临床上推广应用.

    作者:洪小玲;康福新 刊期: 2011年第15期

  • 环索奈德气雾剂治疗成人支气管哮喘的有效性和安全性评价

    目的:评价环索奈德气雾剂治疗成人支气管哮喘的临床疗效和安全性.方法:72例轻、中度支气管哮喘患者随机分成两组,进行单盲、平行、阳性药(布地奈德)对照试验,治疗12周,以晨间PEF值作为主要评价指标,辅以夜间PEF值、FEV1值、ACQ评分、哮喘症状评分、缓解症状所需的万托林剂量等评价环索奈德的有效性;通过心电图、口咽部检查、实验室检查及不良事件数据评价环索奈德的安全性.结果:治疗前、后试验组和对照组的晨间PEF值变化差异均有显著性(P < 0.05),但组间差异无统计学意义(P > 0.05);试验组和对照组夜间PEF、FEV1和ACQ数据有明显改善,所需万托林的剂量显著减少,哮喘症状评分明显好转,但组间差异无统计学意义(P > 0.05).试验组不良事件发生率为16.67%,对照组为13.89%,组间比较无统计学意义(P > 0.05).结论:本研究证实环索奈德气雾剂1次/d,2喷/次(200 μg)治疗成人哮喘有效而且安全.

    作者:张颖;何桦;赵子文 刊期: 2011年第15期

  • 小剂量安定致晕厥患者持续低血压状态1例

    患者男,68岁,入院前1 d发生3次晕厥.每次晕厥发生均与体位有关,由蹲位或卧位变为立位时即出现头晕、恶心,继而晕倒,平卧休息后可逐渐缓解.第3次晕厥发作后,患者觉有持续性胸闷、胸痛、心悸、头晕,为进一步诊治而入科.

    作者:易绍东;向定成 刊期: 2011年第15期

  • 血清同型半胱氨酸水平测定在短暂性脑缺血发作患者临床转归中的应用

    目的:探讨短暂性脑缺血发作(TIA)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平测定在患者临床转归中的应用.方法:对100例颈内动脉系统TIA患者,行ABCD2评分,并测定患者的血清Hcy水平,以患者第7天发生脑梗死为终点事件,分析Hcy与患者ABCD2评分危险度分型的关系,并分析研究患者血清Hcy水平与患者临床转归的关系.结果:不同危险度分型的TIA患者其Hcy水平比较差异有统计学意义(P < 0.01),不同临床转归患者的Hcy比较差异有统计学意义(P < 0.01).结论:TIA患者的Hcy水平与其ABCD2危险度分型有关,并与患者不同临床转归存在一定的联系,测定患者Hcy水平,可帮助临床医师评估TIA患者的临床转归.

    作者:王坤;王文明;盛玉国;李乃选;陈刚;荆秀荣;段新武 刊期: 2011年第15期

  • 海洛因脑病1例

    患者男,38岁,主因意识障碍1月余于2009年2月27日入院.于入院前1个月静注海洛因后持续昏迷,17 h后送至省第六医院,测BP 70/50 mmHg,经纳洛酮等治疗无好转,并呕吐咖啡色胃内容物.2009年2月3日转至我院急诊科,查有昏迷、高热、双肺湿鸣,血WBC及中性分类高,床旁胸片见双下肺纹理粗, CK、肌红蛋白、肝肾功、电解质水平异常,经止血、抗炎,辅助呼吸及支持治疗病情得以控制,以上指标好转.

    作者:王丽 刊期: 2011年第15期

  • 乙肝肝纤维化血清标记物筛选的初步研究

    目的:比较乙型肝炎肝纤维化患者和正常对照的血清蛋白标记物并建立相关筛选模型.方法:通过SELDI-TOF-MS技术对38例乙肝肝纤维化患者和18例健康者的血清进行蛋白质谱检测分析,并建立诊断模型以鉴别乙肝肝纤维化.结果:共检测出91个峰值,12个为差异蛋白峰,其中6个在纤维化组高表达,6个在纤维化组低表达.用质荷比为M8596的差异蛋白建立的诊断模型优,其特异度为84%(32/38),灵敏度为67%(12/18),阳性预测值为0.060,阴性预测值为0.994.结论:健康组和乙肝肝纤维化组的血清蛋白表达存在着差异,SELDI技术在乙肝肝纤维化血清标记物筛选方面具有较好的临床应用前景.

    作者:李杰;陈茂伟;周怡;邹俊;李黎 刊期: 2011年第15期

  • HBeAg 阳性慢性乙肝患者红细胞补体受体Ⅰ型分子基因点突变的分布及意义

    目的:研究免疫耐受与应答组HBeAg阳性慢性乙肝患者红细胞补体受体Ⅰ型分子 (complement receptor type 1,CR1)基因点突变分布特点及数量水平,并分析其临床意义.方法:选择114例肝脏功能正常、血清HBV DNA含量大于106 IU/mL的HBeAg阳性慢性乙肝患者作为免疫耐受组研究对象,选择110例初次转氨酶高于正常值2倍以上伴或不伴有肝细胞性黄疸的HBeAg阳性慢性乙肝患者为免疫应答组研究对象.采用PCR和Hind Ⅲ酶切技术对红细胞CR1分子基因点突变进行分类,并采用酶联法定量测定红细胞CR1分子数量水平.结果:免疫耐受组红细胞CR1基因无点突变的患者明显低于应答组(P < 0.05);免疫耐受与应答组的女性患者其无点突变百分率明显高于男性患者(P < 0.05);在红细胞CR1基因无点突变的患者中,耐受组患者CR1分子数量较应答组明显下降(P < 0.05);发生点突变个体的CR1分子数量明显低于未发生点突变的患者(P < 0.01).结论:红细胞CR1基因点突变与HBeAg阳性慢性乙肝患者的免疫反应状态有关,女性患者以无点突变类型为多.

    作者:罗丽莎;张继万;周建丽;何鹏飞;隆莉;张晓芳;赵志勇;刘娴;王海滨 刊期: 2011年第15期

  • 激光喉部肿瘤手术并发症的预防及处理

    目的:探讨激光喉部肿瘤手术并发症的预防及处理.方法:1999年4月至2010年8月以来多中心共1 158例喉肿瘤患者使用Diamod激光、Nd:YAG激光、CO2激光行喉部肿瘤切除术,对术后并发症进行回顾性分析,对并发症提出预防及处理策略.结果:激光引起的并发症110例,占9.50%,术中呼吸道烧伤1例,占0.08%,术后声带粘连72例,占6.21%,术后出血20例,占1.72%,颈部皮下气肿及颈部瘘管7例,占0.60%,呼吸困难6例,占0.52%,局部感染伴颈前脓肿3例,占0.30%,术后吞咽困难及吸入性肺炎1例,占0.08%.结论:激光治疗喉部肿瘤并发症是相对常见的,外科医师必须非常清楚并发症的预防及处理策略.并发症的发生与肿瘤的位置有关,肿瘤侵犯前联合,术后并发症增加;还与术者的经验、支撑喉镜下肿瘤的暴露效果有关.

    作者:马超武;黄益灯;刘丹;罗兴华;孙广滨;夏思文;梁耕田;周水淼 刊期: 2011年第15期

  • 直肠黏膜套扎术在南海守礁官兵69例内痔患者中的疗效观察

    目的:观察和评价直肠黏膜套扎术在南海守礁官兵内痔患者中的疗效.方法:回顾分析南海守礁官兵69例Ⅰ~Ⅲ度内痔患者临床资料.结果:手术平均时间5 ~ 10 min,47例Ⅰ、Ⅱ度内痔,45例治愈,治愈率为95.8%;22例Ⅲ度内痔,19例治愈,治愈率为86.4%,总治愈率为92.8%,随访3 ~ 6个月,无明显不良并发症发生.结论:直肠黏膜套扎术疗效确切、安全、无需麻醉,无需住院,操作简单,适用于南海守礁官兵及舰艇人员,值得推广使用.

    作者:许辉;邹文俊;邓昌林;周淑蓉 刊期: 2011年第15期

  • 2型糖尿病患者CA199水平与血糖的关系

    目的:观察2型糖尿病患者血清CA199水平与糖化血红蛋白(HbA1c)的关系.方法:收集90例健康对照(对照组)与156例住院2型糖尿病患者,其中糖尿病患者按HbA1c水平分为良好( < 6.5%)、尚可(6.5 ~ 7.5%)、控制差( > 7.5%)3组,采用电化学发光法测定血清CA199,比较4组CA199水平.结果:(1)HbA1c控制差组的CA199水平[(18.67 ± 8.29)U/mL]显著高于其他3组[对照组(10.52 ± 4.31)U/mL,良好组(11.03 ± 5.04)U/mL,尚可组(12.51 ± 6.60)U/mL,P < 0.01];(2)CA199高于正常水平的患者,经控制血糖2周后,CA199水平下降至(35.63 ± 3.30)U/mL,与治疗前(40.20 ± 1.01)U/mL比较差异有统计学意义(P < 0.01).结论:糖尿病患者CA199水平较正常人高,血糖控制差的糖尿病患者CA199水平明显高于血糖控制尚可及良好的患者.

    作者:杨黎娟;邹立军 刊期: 2011年第15期

  • 不同剂量盐酸氨溴索辅助治疗老年人肺炎的疗效

    目的:评价祛痰剂盐酸氨溴索注射液(伊诺舒)及不同剂量辅助治疗老年肺炎的疗效.方法:观察180例老年肺炎患者分别静脉应用盐酸氨溴索90、300、900 mg治疗前后的咳嗽、咳痰等临床症状的变化,并比较应用剂量为90 mg盐酸氨溴索与16 mg盐酸溴已新的疗效.结果:900 mg剂量组较300 mg剂量组及90 mg剂量组在临床疗效和祛痰作用等方面其治疗前后积分有明显改善(P < 0.05),900 mg剂量组与300 mg剂量组相比在痰液性质、咳嗽程度上有明显统计学差异(P < 0.05),90 mg盐酸氨溴索组的临床疗效明显优于16 mg盐酸溴已新组(P < 0.05),且90 mg盐酸氨溴索组治疗前后血清C反应蛋白、痰液中白介素-8和肿瘤坏死因子α水平明显下降(P < 0.05),盐酸溴已新组治疗前后各指标差异无显著性.结论:盐酸氨溴索辅助治疗老年人肺炎临床疗效明显,并且增加应用剂量能够增加该药对老年人肺炎的治疗效果.

    作者:王丽莉;刘庆君;肖广辉;杜卫京 刊期: 2011年第15期

  • 全膝关节置换术后鸡尾酒配方PCA泵关节腔镇痛患者的护理

    目的:探讨人工全膝关节置换术后应用鸡尾酒配方PCA泵膝关节腔镇痛这一新的镇痛方法的护理.方法:选择2010年3-11月在广东省中医院骨科住院择期行单侧人工全膝关节置换术的患者32例,随机分为研究组和对照组,各16例,进行人工全膝关节置换术并应用鸡尾酒配方PCA泵膝关节腔镇痛,术后予配合心理护理、一般护理、留置管护理、疼痛护理及功能锻炼.结果:人工全膝关节置换术后应用鸡尾酒配方PCA泵膝关节腔镇痛并配合护理治疗,在术后18、26、34 h显示出镇痛优势,术后膝关节活动在第3天有较好恢复.结论:护理治疗在人工全膝关节置换术后应用鸡尾酒配方PCA泵膝关节腔镇痛这一新的治疗方法中能够起到预防感染、减轻患者心理负担等作用,特别是能够加快恢复关节功能.

    作者:陈红云;傅秀珍;陈丽宜;刘美芬;贾晗 刊期: 2011年第15期

  • 新式中药灌肠在早期慢性肾功能衰竭中的应用

    目的:观察增加中药保留灌肠插管深度对早期慢性肾功能衰竭患者的疗效.方法:选择早期慢性肾功能衰竭患者60例,随机分成两组,其中对照组30例,采用传统的中药保留灌肠(灌肠插管深度10 ~ 15 cm);观察组30例,采用新式中药保留灌肠(灌肠插管深度25 cm).两组患者均采用中药保留灌肠1个月,观察治疗前后的血红蛋白、肌酐、尿素氮及治疗的有效率.结果:观察组的有效率和治疗效果均高于对照组(?字2 = 5.0,P < 0.05),观察组治疗后血红蛋白[(79.67 ± 15.44)g/L vs (71.64 ± 19.24)g/L]、肌酐[(299.88 ± 27.36)μmol/L vs (368.78 ± 46.57)μmol/L]、尿素氮[(9.13 ± 2.14)mmol/L vs (10.93 ± 3.90)mmol/L]较对照组均明显改善(P < 0.05).结论:增加中药保留灌肠插管深度,对早期慢性肾功能衰竭患者疗效肯定.

    作者:党小宁;付宇;袁莉 刊期: 2011年第15期

  • 双Endobutton钢板与锁骨钩钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位的疗效比较

    目的:探讨双Endobutton钢板与锁骨钩钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位的临床效果及差异.方法:回顾分析2007年8月至2011年3月本院收治的27例TossyⅢ型肩锁关节脱位患者.其中,13例应用双Endobutton钢板治疗,男12例,女1例,年龄22 ~ 65岁,平均(37 ± 5.4)岁;14例应用锁骨钩钢板治疗,男12例,女2例,年龄24 ~ 68岁,平均(39 ± 3.7)岁.对两组患者多项指标进行对比,比较两种治疗方法的疗效.结果:术后均随访4 ~ 26个月,平均13.2个月.双Endobutton钢板组的切口长度、肩部疼痛发生率及总住院天数低于锁骨钩钢板组(P < 0.05);在手术时间、切口感染率、肩关节外展角度及总治疗费用等两组比较差异无统计学意义(P > 0.05).术后按Karlsson标准进行疗效评定,两组比较差异无统计学意义(P > 0.05).双Endobutton钢板治疗组发生术后内固定松动失效1例.结论:双Endobutton钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位的临床效果与锁骨钩钢板总体相当,但术中应对锁骨及喙突钻孔位置准确定位,防止内固定松动失效.

    作者:王斌;高益;赵洪;彭立波;郑冲;徐建达;瞿玉兴 刊期: 2011年第15期

  • CypherTM 药物涂层支架治疗糖尿病冠心病的疗效观察

    目的:评价雷帕霉素药物涂层CypherTM支架在冠心病合并2型糖尿病患者中的即时及远期临床疗效.方法:79例冠心病合并2型糖尿病患者接受冠状动脉内支架术,其中44例植入CypherTM支架(SES组),35例植入普通金属裸支架(BMS组),比较两组的临床一般情况、冠脉造影、支架植入术和远期心脏不良事件(MACE)发生率(死亡、急性心肌梗死、靶病变再次血运重建).结果:两组支架植入操作成功率均为100%,住院期间均无严重并发症发生.随访至1年的MACE两组分别为2.0% vs 20.0%(P = 0.008),有统计学差异;随访至4年的总MACE分别为8.3% vs 32.6%;SES组有下降趋势,两组均无亚急性及迟发性血栓事件.结论:CypherTM药物涂层支架治疗糖尿病冠心病患者安全、有效,与普通金属裸支架相比能显著降低心脏不良事件发生率.

    作者:卢剑华;胡允兆;黎文生 刊期: 2011年第15期

  • 肾移植术后EB病毒相关淋巴组织增生病

    肾移植术后感染是移植患者死亡的重要原因.EB病毒感染后,不能被机体彻底清除,可引起从良性B细胞增殖到恶性淋巴瘤一系列移植后淋巴组织增生症(post-transplant lymphoproliferative disorders,PTLD).PTLD的发生率约1% ~ 2%,虽然不高,但预后较差,1年生存率约51%,5年生存率约39%.本文就肾移植术后EB病毒相关PTLD的发生,临床特征及诊治进行综述.

    作者:郝彤彤 刊期: 2011年第15期

实用医学杂志

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所