锌指蛋白A20 RNAi腺病毒的制备及其对人脑胶质瘤细胞系U87细胞功能的影响

郭庆东；张伟；王春梅；李兵；曹卫东；李侠；章翔

关键词：神经胶质瘤, RNA结合蛋白质类, 锌指, 基因

摘要：目的:进一步探讨A20与促进脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡之间的关系,尝试今后在动物体内进行脑胶质瘤基因治疗的研究,通过构建针对A20基因的重组腺病毒干涉载体感染U87细胞系,观察其对细胞生存状态的影响.方法:在前期预实验的基础上构建对A20干涉效果好的腺病毒干涉表达载体pSilencerTM adeno 1.0-CMV-A20R1,通过HEK-293细胞的包装后收获腺病毒并进行纯化,后用此腺病毒再次感染人脑胶质母细胞瘤细胞U87,经RT-PCR、Western blot确认干涉效果;通过流式细胞术(FCM)观察A20表达抑制对U87细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:完成了重组腺病毒干涉表达载体pSilencerTM adeno 1.0-CMV-A20R1在HEK-293细胞内的包装;对病毒进行纯化后获得了高滴度(1.1×1011 pfu/mL)的感染病毒,将其感染U87细胞系后,RT-PCR和Western blot结果证实U87细胞中A20 mRNA和蛋白的表达均受到明显抑制;FCM结果也证实U87-A20R1细胞内凋亡细胞明显增多.结论:重组A20腺病毒干涉载体可很好地抑制U87细胞内A20的表达且能导致细胞凋亡,该研究结果为临床上用新思路治疗脑胶质瘤提供了实验依据.

实用医学杂志相关文献

炎性乳癌13例综合治疗

目的:探讨炎性乳癌的综合治疗效果.方法:对13例炎性乳癌患者的临床表现、病理类型及治疗方法进行回顾性分析.结果:13例均予以手术为主的综合治疗.随访10例,生存期为0.5～5.2年,平均存活27个月;现仍存活5例(3个月～2.3年).结论:采用以手术为主的综合治疗可改善炎性乳癌的预后.

作者：杨威；胡虞乾；廖文胜；莫瑞祥刊期： 2007年第09期
有氧运动对高血压并发房颤患者血小板表面糖蛋白受体的影响

目的:探讨规律运动对高血压并发房颤患者血小板表面活化分子标志蛋白及血小板聚集率的影响.方法:将我院门诊就诊的高血压并发房颤患者61例随机分为两组,常规治疗组(对照组)31例,规律运动组(实验组)30例,后者在常规治疗的基础上采取中等量的运动疗法3个月.采用流式细胞术以单克隆抗体分子作为探针,分别测定两组患者运动前后血小板膜上CD62P、CD61的阳性百分率及血小板聚集率.结果:进行运动疗法3个月后,对照组与实验组两组患者,收缩压(mmHg)分别为158±3.8及151±4.3(P＜0.05),舒张压(mmHg)分别为98±3.4及90±3.1(P＜0.01);左室射血分数(%)分别为54.6±4.7及60.3±3.6(P＜0.05);血小板膜上CD62P阳性百分率(%)分别为27.4±2.2及20.5±3.1(P＜0.05)、CD61阳性百分率(%)分别为27.2±3.5及21.3±2.9(P＜0.05);血小板聚集率(%)分别为81.2±4.3及73.6±4.6(P＜0.05).结论:规律运动能降低高血压并发房颤患者血小板表面活化受体分子的密度及血小板聚集率,有利于改善高血压患者的血栓前状态.

作者：李玉峰；王士雯；赵玉生；卢才义；薛侨刊期： 2007年第09期
全身炎症反应综合征大鼠心肌G蛋白变化的实验研究

目的:探讨全身炎症反应综合征(SIRS)时大鼠心肌G蛋白的变化,为临床防治SIRS和多脏器功能障碍综合征的发生、发展提供理论依据.方法:Wistar大鼠24只,随机分为内毒素(LPS)注射后3 h组(3.0 h组)、LPS注射后6 h组(6.0 h组)、正常对照组,每组8只.实验组大鼠给予大肠杆菌内毒素(E.Coli O55B5,美国Sigma公司产品)20 mg/kg腹腔注射,制造SIRS大鼠模型,免疫印记法测定大鼠心肌G蛋白的含量.观察3 h、6 h后SIRS大鼠心肌G蛋白的变化,并与正常对照组比较.结果:与正常对照组相比,LPS 3.0 h组、LPS 6.0 h组大鼠心肌Gsα蛋白的相对含量(单位:%)分别下降为92.375±2.187、89.755±4.621,P＜0.01,尤以6.0 h组下降明显;而LPS 3.0h组、LPS 6.0 h组大鼠心肌Gi α蛋白含量均升高,分别上升为106.0±3.381(P＜0.05)、111.0±6.590(P＜0.01),尤以6.0 h组升高明显.结论:SIRS大鼠心肌Gs、Gi蛋白发生改变,并且随着病情的进展变化明显,推测SIRS时心功能障碍的发生可能与G蛋白的异常变化有密切的关系.

作者：梁丽；高嵩刊期： 2007年第09期
胸腺肽针、他扎罗丁凝胶联合治疗手部慢性湿疹50例

我们应用胸腺肽针剂联合他扎罗丁凝胶外用治疗手部慢性湿疹取得较好疗效,现报告如下.1 资料与方法1.1 一般资料 50例患者均为我科门诊病例,将其分成治疗组和对照组.其中治疗组28例,男13例,女15例.

作者：蒋建华刊期： 2007年第09期
孕妇年龄与妊娠期糖代谢异常的关系

目的:探讨孕妇分娩年龄与妊娠期糖代谢异常的关系.方法:对2003年1月至2005年6月在广州市番禺区何贤纪念医院产科住院分娩的10 815例产妇的妊娠期糖代谢异常情况进行分析.采用病例-对照研究设计,以2005年1-9月期间在我院确诊的妊娠期糖代谢异常的100例孕产妇为病例组,对照组为同期在我院产前保健和分娩的糖代谢正常的孕周相同的孕产妇200例.用Logistic回归模型对年龄进行分析.结果:随着孕妇分娩年龄的增加,糖代谢异常的发病率逐渐增加,但年龄在妊娠期糖尿病(GDM)组和妊娠期糖耐量受损(GIGT)组之间的差别无统计学意义.结论:年龄是妊娠期糖代谢异常的不可忽视的危险因素.

作者：黄杏端；陈维清；韩轲刊期： 2007年第09期
脊硬麻醉下高龄老年患者全膝人工关节置换术的麻醉体会

目的:探讨脊硬麻醉用于高龄老年患者全膝关节置换术的安全性.方法:对48例65～80岁实施全膝人工关节置换术的患者采用脊硬联合麻醉,并辅以呼吸循环功能维护、加强围麻醉期监护等监测和管理措施.结果:(1)穿刺置管一次成功42例;(2)48例麻醉效果均达Ⅰ级,呼吸循环稳定,肌松良好.结论:成功的穿刺、合适的麻醉平面调控、呼吸循环功能的监测和维护是保证脊硬联合麻醉成功用于此类手术的关键.

作者：高改莉；闵红星；高玉华刊期： 2007年第09期
尿survivin mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值

目的:评价尿survivin mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值.方法:80例膀胱肿瘤和30例非膀胱肿瘤患者,同时行尿survivin mRNA和尿脱落细胞学检查,比较各方法的敏感性、特异性.结果:尿survivin mRNA和尿脱落细胞学的敏感性分别为95.0%、36.2%;特异性分别为96.7%和100%.尿survivin mRNA检测的敏感性高于尿脱落细胞学检查(P＜0.05).结论:尿survivin mRNA检测的高敏感性、高特异性为膀胱癌提供了一个简单无创的检测方法.

作者：汪官富；罗利飞；韩子华刊期： 2007年第09期
严重电击伤患者全麻术后苏醒延迟1例

患者男,27岁,因全身多处电弧烧伤1 h入院.入院诊断:烧伤总面积70%,其中Ⅲ度烧伤面积60%,以左上、下肢为甚.入院后逐渐出现明显的腹胀、呕吐,行胃肠减压后不能缓解.

作者：付葵；夏建国刊期： 2007年第09期
烧伤方对实验性烫伤小鼠超氧化物歧化酶的影响

目的:观察烧伤方外涂治疗实验性烫伤小鼠的作用机制.方法:采用烧伤方和京万红软膏外涂实验性烫伤小鼠的背部皮肤,与对照组比较,观察其对小鼠机体抗氧化防卫系统超氧化物歧化酶(SOD)的影响.结果:烧伤方组和京万红软膏组能提高实验性烫伤小鼠血清SOD含量,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:烧伤方对实验性烫伤小鼠SOD有升高作用.

作者：刘心亮；曾小粤；温志鹏；熊益群；邸振福；王重阳；徐绍钢刊期： 2007年第09期
伴β-hCG、AFP增高的肺腺癌1例

患者男,53岁,因左侧胸痛、胸闷2年8个月,加重伴咳嗽、咯痰、痰中带血2个月于2005年11月20日入院.入院前胸部正位X线片检查发现左肺上叶近肺门处肿块影.查体:全身皮肤黏膜无黄染,浅表淋巴结未及肿大,心肺未闻及异常.

作者：戴海峰；陈龙邦刊期： 2007年第09期
原发性低颅压综合征16例临床分析

目的:探讨原发性低颅压综合征(primary intracranial hypotension syndrome)的临床特点、诊断及治疗.方法:回顾性分析16例原发性低颅压综合征患者的临床资料.结果:本组患者均有体位性头痛、恶心、呕吐,伴有眩晕4例、耳鸣2例、颈项强直15例.16例行腰穿检查,脑脊液(CSF)压力均＜70 mmH2O.13例患者CSF中红细胞数有不同程度升高,1例患者为血性CSF.治疗以大剂量补充生理盐水为主,2例腰穿时行CSF置换,均痊愈.结论:体位性头痛是低颅压综合征的临床特征,腰穿CSF测压检查可确诊.本病一般预后较好.

作者：王红波刊期： 2007年第09期
诺和锐联合甘精胰岛素在2型糖尿病强化治疗中的疗效观察

循证医学证实高血糖与糖尿病慢性并发症显著相关,胰岛素强化治疗是使血糖达标、延缓疾病进展的有效手段.我们对50例血糖控制差的2型糖尿病患者分别采用诺和锐联合甘精胰岛素和诺和灵R联合诺和灵N进行强化治疗,现总结如下.

作者：赵向晖刊期： 2007年第09期
外伤性视神经病变32例临床分析

目的:探讨外伤性视神经病变的诊断及治疗效果.方法:对32例外伤性视神经病变患者早期应用甲基强的松龙冲击疗法、脱水剂、血管扩张剂、维生素、神经营养药物及高压氧综合治疗,并分析其效果.结果:外伤性视神经病变应用此方法治疗,外伤后24 h内就诊20例中5例恢复至0.8以上,外伤后1周以内就诊10例中7例提高至0.25～0.6,伤后超过1周就诊者治疗效果不理想,伤后无光感和视觉诱发电位(VEP)无波幅者效果也不理想.结论:早发现,早期应用甲基强的松龙冲击疗法辅助血管扩张剂等综合治疗外伤性视神经病变效果确切,VEP可作为诊断依据、判断预后和跟踪用药的指标.

作者：钟帆；陆晓和；彭小娟；钟彦彦；桑璇刊期： 2007年第09期
黏液丝与尿蛋白检测的相关性及其意义

黏液丝是尿液中的常见成分,通常认为与尿道的长期炎症刺激以及泌尿系感染有关[1],也有报道认为其能干扰UF-50对管型的分析[2].

作者：胡志德；赫慧楠；王鑫；王璐璐；任倩刊期： 2007年第09期
微囊化胰岛移植的应用前景

自20世纪70年代初期,Lacy等首次用胰岛移植成功地改善糖尿病大鼠的高血糖症状以来,胰岛细胞移植作为一种恢复1型糖尿病人健康、实现胰岛素自给有效的方法,一直是糖尿病研究领域的重点和热点课题.

作者：吴建红；董梁；宋跃华刊期： 2007年第09期
柴芩承气汤结合内科治疗急性重症胰腺炎18例

我科于1999年9月至2005年8月,采用柴芩承气汤结合内科治疗急性重症胰腺炎(SAP)18例,疗效明显,现报告如下.

作者：李碧桃；文政琦；杨国桥；杨月乔；黄琼仙刊期： 2007年第09期
联合肝素雾化吸入及静滴治疗婴幼儿重症肺炎合并高凝状态

重症肺炎是婴幼儿常见危重病,本病发展迅速,病死率高,多合并一种或多种脏器损害,常存在缺氧及高凝状态.

作者：刘洋；林莹刊期： 2007年第09期
复式脉冲低能量体外冲击波碎石术结合中药治疗上尿路结石

目的:探讨采用复式脉冲低能量体外冲击波碎石术(ESWL)结合中药治疗上尿路结石的效果.方法:采用HB-ESWL-VG型复式脉冲低能量体外冲击波碎石机治疗符合ESWL适应证,直径≤2.0 cm的上尿路结石424例(其中直径≤2.0 cm的肾结石220例,直径≤1.0 cm的输尿管结石204例),治疗工作电压5～7.5 kV(平均6.6kV),平均冲击次数2 000次,治疗后再根据患者病情予以中药辅助排石治疗.结果:肾盂结石粉碎率100%,排净率100%,复打率为0.肾盏结石总粉碎率100%;上、中盏结石排净率100%,复打率为0;下盏结石的排净率67.2%,复打率为20.3%.输尿管结石粉碎率100%,排净率99.1%,复打率2.5%.结论:复式脉冲低能量体外冲击波碎石机结合中药治疗符合ESWL适应证的上尿路结石,具有治疗成功率高、复打率低、无严重并发症、副作用少的优点.

作者：冯钢；张启飞；张京；陈绍宗；杨帝宽；刘明建；张勇强；吴保忠刊期： 2007年第09期
婴幼儿肺炎支原体感染30例临床分析

目的:探讨婴幼儿肺炎支原体感染的临床特点、诊断及治疗.方法:对30例肺炎支原体感染的住院婴幼儿患者的临床资料进行回顾性分析.结果:婴幼儿支原体肺炎病情重,并发症多(19例),肺外并发症以消化系统、循环系统为主.结论:婴幼儿肺炎支原体感染病原学诊断有重要意义.婴幼儿肺炎支原体感染的治疗除选用大环内酯类抗生素外,应注意综合治疗及肾上腺皮质激素的使用.

作者：梁丽雯刊期： 2007年第09期
术中用过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停4例并文献复习

目的:探讨过氧化氢引起心跳呼吸骤停的原因与规律,以指导临床合理用药.方法:回顾性分析我院2005年8月至2006年1月术中用过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停4例病例资料,并对1994-2006年《中国医院数字图书馆CHKU》进行文献检索出6例过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停报道进行分析和总结.结果:术中用过氧化氢冲洗致心跳呼吸骤停与肺气体栓塞有关.结论:过氧化氢可引起致命性严重后果,且发生突然,出现的时间短,常危及生命,临床医师应引起高度重视.

作者：吴先荣；唐培佳刊期： 2007年第09期