学术投稿

3种核酸提取方法检测甲型H1N1流感病毒的比较

傅松哲;倪贤生;夏文;龙永艳;涂俊凌

关键词:甲型H1N1病毒, 全自动核酸提取, 提取效率, 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
摘要:目的 选择常见的3种核酸提取方法,比较其对低拷贝数甲型H1N1流感病毒核酸检测的敏感性差异,为实验室应用和结果的评价提供依据.方法 对已确定阳性的甲型H1N1流感病毒标本,作10-1~10-4系列稀释,选用Promega公司全自动核酸提取仪及配套试剂盒、QIAGEN公司Rneasy Mini Kit和国产H公司提取试剂盒3种核酸提取方法提取上述标本核酸模板,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(荧光RT-PCR)对其进行评价.结果 在对不同拷贝数流感病毒的检测中,3种核酸提取方法以Promega公司全自动核酸提取仪提取效率高,以此提取效率作为100%,则QIAGEN Rneasy Mini Kit和国产H公司提取试剂盒的平均提取效率依次为83.27%、55.70%.经方差分析,3种方法之间存在显著性差异(P<0.05).结论 各试剂之间提取核酸的效率存在显著差异,建议根据实际情况采用合适的核酸提取试剂和方法.
中国热带医学杂志相关文献
  • 5例小儿复杂先心病术后急性肾衰临床观察

    目的 观察腹膜透析(PD)对复杂先心病术后急性肾衰(ARF)患儿的临床疗效.方法 时5例复杂先心痛术后出现ARF患儿实施PD,观察治疗前后K+、肌苷(Cr)、尿素氮(BUN)及HCO3-等的变化.结果 经PD治疗2~10d患儿全部存活,PD48h后与PD前相比,各项观察指标均具有统计学差异(P<0.05),PD结束后除BUN和平均动脉压(MAP)外,其他观察指标均具有显著性差异(P<0.01),纠正酸中毒和高钾血症效果优于Cr和BUN的清除.结论 PD是治疗小儿复杂先心病术后ARF有效方法,尽早PD是治疗成功关键.

    作者:赵玉石;陈建新;张智杰;马丽娟;卢红光;董晟;李野 刊期: 2010年第07期

  • 244例院内深部真菌感染的菌种分布和耐药分析

    目的 了解医院深部真菌感染的特点,为医院真菌感染控制提供依据.方法 采用回顾性调查方法对深圳市第六人民医院连续4年发生的医院真菌感染病例进行调查分析.结果 4年间院内共培养出244株真菌,其中白色假丝酵母菌占70.08%,热带假丝酵母菌占9.02%,光滑假丝酵母菌占4.92%,3种菌株对伊曲康唑、氟康唑和两性霉素B、特比萘芬的抗药性1.17%~68.18%.院内深部真菌感染的主要部位是呼吸道和泌尿道,主要的致病菌为念珠菌.分离菌株对两性霉素B和伊曲康唑的敏感性很高.结论 院内深部真菌感染病例近年呈上升趋势.白念珠菌仍是院内深部真菌感染的主要病原菌.临床医生应根据真菌对常用抗真菌药物敏感性不同,合理选用治疗药物.

    作者:熊瑛;曾飞鹏;杨翠华;柴宝;金丽 刊期: 2010年第07期

  • 湖北部分地区中华按蚊对溴氰菊酯抗药性的现场调查

    目的 了解中华按蚊对溴氰菊酯抗药性,为合理使用杀虫剂提供科学依据.方法 采用WHO成蚊滤纸接触法,观察首只蚊虫击倒时间、击倒率和死亡率,以区分剂量判定抗性级别,半数致死量判定抗性程度.结果 襄阳、广水、京山、安陆、孝昌、仙桃和恩施等地中华按蚊对溴氰菊酯首只蚊虫击倒时间分别为32、19、25、10、15、10和10min,60min击倒率分别为3.13、10.31、16.04、18.35、7.00、4.95和6.12%;京山、安陆、孝昌、仙桃和恩施等地中华按蚊对溴氰菊酯KT50分别为227.78、138.41、263.41、6 234.72和1 575.88min,比1996年提高20~631倍;京山县中华按蚊LT50684.12min,比1998年提高306倍;7地区中华接蚊对溴氰菊酯区分剂量死亡率均<50%,为高抗群体,比1993年提高2~3个抗性级别.结论 湖北地区中华按蚊对溴氰菊酯抗击倒力强,抗性程度高,抗性发展快,应加强监测,现场应用宜适当加大使用剂量,确保防制效果.

    作者:裴速建;李凯杰;胡乐群;张华勋;袁方玉;黄光全;董小蓉 刊期: 2010年第07期

  • 西酞普兰联合心理干预治疗抑郁障碍临床研究

    目的 探讨西酞普兰联合心理干预治疗抑郁障碍的临床疗效.方法 将62例抑郁障碍患者随机分为研究组32例,对照组30例.两组均给予西酞普兰治疗.在药物治疗的基础上,研究组联合心理治疗.8周疗程结束后,两组均进行门诊随访每月1次,共6个月,观察复发情况.治疗前与治疗第8周末采用汉密顿抑郁量表、汉密顿焦虑量表评定临床疗效.结果 治疗8周末研究纽总有效率90.63%,对照组70.00%,两组间比较差异有显著性(χ2=4.98,P<0.05);两组治疗8周末汉密顿抑郁量表、汉密顿焦虑量表评分均较治疗前有极显著性下降(P<0.01),研究组较对照组下降更显著(P<0.01).随访6个月末研究组复发率显著低于对照组(χ2=6.87,P<0.01).结论 西酞普兰联合心理干预治疗抑郁障碍较单纯药物治疗疗效显著.

    作者:龙栩慧;吴星湖;刘星星;蒋陆平 刊期: 2010年第07期

  • 成人手足口病临床特征分析

    手足口病(Hand-food and mouth disease,HFMD)是夏秋季常见的一种流行性疾病,多发生在5岁以下的婴幼儿身上,成人很少感染,但国内外也有零星个案报道.本文对文献报道的成人手足口病病例进行临床表现和流行病学进行综合,以期对成人手足口病的相关情况有统一认识.

    作者:王来;耿慧霞;蒋建平;徐莉娟;王衡;高明灿 刊期: 2010年第07期

  • 阴离子色谱-脉冲安培检测法测定酒中氨基酸

    目的 建立不同种类酒中氨基酸的高效阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定.方法 样品用去离子水稀释后经滤膜过滤直接进样,采用梯度洗脱、阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法测定了黄酒、清酒、葡萄酒和啤酒中的氨基酸.结果 五种黄酒氨基酸平均含量是3155.15mg/L,清酒氨基酸平均含量为2435.53mg/L,葡萄酒氨基酸平均含量为1158.66mg/L,啤酒氨基酸平均含量为773.54mg/L.结论 利用阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定不同种类酒中的氨基酸,样品前处理简单,方法适用性宽,测定重复性好,灵敏度高,定性定量准确,结果满意.

    作者:邹红海 刊期: 2010年第07期

  • 肺曲霉菌球16例临床分析

    目的 探讨肺曲霉菌球的临床特点、手术治疗的安全性与疗效.方法 回顾分析16例采用外科手术治疗的肺曲霉菌病的临床资料和随访结果.结果 共行肺叶切除术4例,局部切除术12例,切除标本送检,均证实为肺曲霉菌病,术后行抗真菌治疗2~4周.全组无手术死亡,术后发生曲霉菌胸腔播散2例.随访4个月~9年无肺曲霉病复发和播散.结论 手术治疗肺曲霉菌球安全、有效,一旦确诊应积极手术治疗.

    作者:吴昊;彭均伟;卜涛 刊期: 2010年第07期

  • 阿托伐他汀脑血管痉挛的效果观察

    目的 观察阿托伐他汀预防蛛网膜下腔出血后症状性脑血管痉挛的疗效.方法 47例自发性蛛网膜下腔出血患者随机分为研究组(24例)和对照组(23例),研究组在常规治疗基础上加用阿托伐他汀20mg/d,对照组予常规治疗,比较两组患者大脑中动脉的血流速度以及症状性脑血管痉挛和迟发性脑梗塞的发生情况.结果 研究组患者大脑中动脉的平均血流速度在发病第7d和第14d时均明显慢于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组脑血管痉挛和症状性脑血管痉挛均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但迟发性脑梗塞发生率与对照组之间比较差异羌统计学意义(P>0.05).结论 阿托伐他汀可以减少蛛网膜下腔出血后症状性脑血管痉挛的发生.

    作者:李喜朋 刊期: 2010年第07期

  • 易误诊的肺结核病X线表现

    目的 了解易误诊的肺结核病X线表现,以提高肺结核病确诊率和降低误诊率.方法 对4533例肺结核病患者影像学资料进行分析.结果 对肺内显示直径3cm以上的球形病灶的肺结核病易误诊为肺癌,误诊率为0.22%;对一侧中肺或下肺的孤立结核性空洞易误诊为肺囊肿或肺脓疡,误诊率为0.42%;对双中下肺多发斑片状阴影的病灶易误诊为小叶肺炎,误诊率0.55%.结论 结核病x线表现形式多样,应综合多方面考虑,以降低误诊率.

    作者:许瑶彬;洪宏洪 刊期: 2010年第07期

  • HL7702-HBX与HepG2-HBX细胞株的建立及鉴定

    目的 建立稳定、高效的HBx蛋白体外表达细胞株.以便进一步研究HBX基因和HBx蛋白的致癌作用及机理.方法 建立HBX真核表达载体pcDNA3.1-HBX,通过脂质体介导将pcDNA3.1-HBX转染到人正常肝细胞株HL7702及人肝肿瘤细胞株HepG2中.结果 RT-PCR、蛋白质印迹及免疫荧光的实验结果显示,HBX基因在人正常肝细胞株HL7702及人肝肿瘤细胞株HepG2中得到了表达.结论 成功构建了表达HBx蛋白的HL7702-HBX与HepG2-HBX细胞株,为进一步研究HBX基因和HBx蛋白的致癌作用及机制奠定了实验基础.

    作者:尤红娟;裴冬生;刘晓梅;汤仁仙 刊期: 2010年第07期

  • 玉叶解毒颗粒对多种呼吸道病毒作用体外实验研究

    目的 观察玉叶解毒颗粒对多种呼吸道病毒导致病变的抑制作用.方法 分别接种甲1型流感病毒FM1株、呼吸道合胞病毒long株、腺病毒7型、鼻病毒R14型于MDCK、A549、HEL细胞,采用细胞病变抑制法(CPE),观察玉叶解毒颗粒体外对多种呼吸道病毒作用.结果 玉叶解毒颗粒在125mg/ml的浓度能完全抑制流感病毒A型FM1株,在6.25mg/ml浓度能完全抑制鼻病毒、腺病毒所致病变,在3.12mg/ml浓度下能完全抑制呼吸道合胞病毒.结论 玉叶解毒颗粒具有体外抑制多种呼吸道病毒作用.

    作者:刘丽娟;刘妮;史晨希;张奉学 刊期: 2010年第07期

  • 硬膜外注药治疗56例带状疱疹疗效分析

    目的 探讨带状疱疹的治疗方法,为今后带状疱疹的治疗和预防后遗症提供,临床依据.方法 采用硬膜外置管连接注药泵,有病人根据具体情况控制给药.结果 56例患者经治疗后创面干燥,愈合好,无疱疹后神经痛.结论 硬膜外配合全身治疗是目前带状疱疹病人比较适宜的治疗方案

    作者:黄琼宝;梁滨 刊期: 2010年第07期

  • 多西他赛联合卡培他滨治疗耐药性晚期乳腺癌疗效观察

    目的 观察及评价周剂量多西他赛联合卡培他滨治疗蒽环类药物耐药晚期乳腺癌的疗效和不良反应.方法 46例经病理证实的蒽环类耐药性晚期乳腺癌患者,采用多西他赛联合卡培他滨方案化疗,多西他赛35mg/m2、静脉滴注、d1、d8,卡培他滨1 250m/(m2·d),分2次口服、d1~d14,21 d为1个周期,化疗周期数为2~8个周期,中位周期数4个,直至病情进展或不良反应无法耐受.结果 46例患者中,完全缓解6例(13.0%),部分缓解23例(50.0%),稳定13例(28.9%),疾病进展4例(8.7%),有效率为63.0%.不良反应主要为胃肠道反应、骨髓抑制和手足综合征,患者均可耐受.结论 周剂量多西他赛联合卡培他滨治疗蒽环类耐药性晚期乳腺癌的疗效确切及毒副反应轻,患者耐受性好,值得临床推广.

    作者:陆林;徐秀理;卢虎生;李妍 刊期: 2010年第07期

  • EGFR和细胞角蛋白7在几种皮肤病中的表达及其意义

    EGFR是一种转膜糖蛋白,广泛分布在许多正常和恶性上皮细胞中,其过度表达和自我激活可能与许多肿瘤的发生发展有关.Paget病是一种少见的恶性肿瘤,又称为湿疹样癌,分乳房Paget病(Mammary Paget disease,MPD)和乳房外Paget病(Extramammary Paget disease,EPD)两型.免疫组化研究表明Paget细胞表达癌胚抗原(CEA)[1]、癌基因蛋白(CD44)[1-3]和低分子细胞角蛋白(CK7)[4],而不表达高分子角蛋白(34beta E12)和黑色素瘤特异性抗体(HMB45)[1].为了探讨EGFR和CK7在Paget病和外阴癌发病中的相互关系,我们对Paget病和外阴鳞癌等几种皮肤病组织进行免疫组化研究,结果报告如下.

    作者:王晓鸿;刘少璇;林宇静;郑燕璇;陆东庆 刊期: 2010年第07期

  • 云南德宏州边境县5年疟疾防治效果评价

    目的 评价云南德宏州4个边境县疟疾控制措施的效果.方法 采用专项调查方式,调查当地疟疾推断发病率、中小学生能够正确回答至少3个与疟疾相关问题的比例、发热病人在症状出现2天内求诊的比例、拥有杀虫荆浸泡蚊帐的家庭比例、网络直报疟疾病人比例情况.结果 当地疟疾推断发病率、中小学生能够正确回答至少3个与疟疾相关问题的比例、发热病人在症状出现2天内求诊的比例、拥有杀虫剂浸泡蚊帐的家庭比例、网络直报疟疾病人比例分别从2003年239.44/万、31.97%、34.09%、0.34%和11.80%下降或提高到2007年的36.09/万、95.32%、93.09%、73.78%和68.85%.结论 疟疾控制措施放果较为显著.

    作者:马杰;杨捷;郭天巧;江伟;杨世朝;师敏;刘永华;董书华;夏荣济;蔺应学 刊期: 2010年第07期

  • 卡介菌多糖核酸治疗寻常型银屑病的临床研究

    目的 探讨卡介菌多糖核酸治疗寻常型银屑病的临床疗效及对T淋巴细胞亚群的影响.方法 72例患者随机分为对照组和试验组,两组患者治疗前及治疗3个月后分别检测外周血T淋巴细胞亚群并观察疗效.结果 试验组有效率76.19%,对照组有效率53.33%,试验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),试验组治疗后CD4+、CD4+/CDs+比值均增高.结论 卡介菌多糖核酸治疗寻常型银屑病疗效肯定,与调节免疫机能有关.

    作者:郑定辉;杨娴;伍美香 刊期: 2010年第07期

  • 南宁市职业人群布鲁菌感染状况调查

    目的 了解南宁市职业人群布鲁菌感染状况,为开展科学防治工作提供依据.方法 采用试管凝集试验对南宁市南、北2大奶场的饲养员、挤奶工和农贸市场的生畜肉的销售员进行3年的布鲁菌抗体血清学跟踪检测.结果 636人份血清中检出阳性37份,阳性率为5.81%,南边奶场和农贸市场畜肉类销售员均为阴性.阳性感染者集中在北边奶场,且数量呈逐年递增趋势.检测和回访中发现阳性感染者血清抗体滴度以1:100~200者占97.30%(36/37),达到1:400仅1份,感染者未见有临床症状或有不适.结论 本市职业人群布鲁菌感染者的抗体阳性滴度不高,几乎均无临床症状.控制家畜布鲁菌痛的流行是降低人群布鲁菌感染率的关键,同时应继续关注并跟踪隐性感染者的健康状况.

    作者:尹俐;冯景强;何冰;潘海西;吴杰 刊期: 2010年第07期

  • 磁共振三维动态增强在肝癌和肝血管瘤的临床应用

    目的 评价磁共振三维多时相(3D FAME)动态增强新技术在原发性肝细胞癌与肝血管瘤诊断中的作用.方法 对70例肝睦占位痛变的病人,采用3D FAME序歹ll加脂肪抑制及二维MR对比增强图像,并将部分结果与手术病理对照,将二者对肝癌和肝血管瘤的检出率进行比较.结果 MR二维增强检出25个肝癌病灶和43个肝血管瘤病灶,而3D FAME序列动态增强扫描检出28个肝癌病灶和47个肝血管瘤病灶.3D FAME动态增强对肝癌病灶的敏感性(87%)较二维增强(78%)更高;3D FAME动态增强对血管瘤病灶的敏感性(95%)较二维(87%)更高.结论 3DFAME动态增强较二维增强对原发性肝细胞癌与肝血管瘤的敏感性及鉴别诊断具有更大的提高,其临床应用前景更为广泛.

    作者:赵应满;袁利 刊期: 2010年第07期

  • 四逆汤抗阿霉素性心衰心肌细胞线粒体凋亡机制探讨

    目的 探讨四逆汤抗阿霉素(ADR)性心衰大鼠心肌细胞凋亡的作用及线粒体机制.方法 SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(3.75g生药,kg/d),实验结束时留取各组大鼠心肌组织,检测线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn SOD活性及其肿胀程度;Western blotting检测胞浆中细胞色素C(Cyt-C)、凋亡诱导因子(AIF)表达;比色法测定Caspase-3、Caspase-9蛋白酶的活性;流式细胞术测定心肌细胞凋亡情况.结果 四逆汤组可以提高线粒体Mn SOD的活性,减少MDA的含量及肿胀程度;有效抑制Cyt-C及AIF蛋白释放及Caspase-9和Caspase-3蛋白酶活性,减少凋亡的发生.结论 线粒体在阿霉素性心衰发病中可能占有重要作用,四逆汤可能是通过减轻线粒体氧化损伤,减少心肌细胞凋亡来保护心肌组织.

    作者:赵明奇;吴伟康;赵丹洋;段新芬;刘颖 刊期: 2010年第07期

  • 216例0~6个月婴儿的血锌检测结果分析

    目的 了解0~6个月婴儿体内血锌的含量,分析月龄与性别间的差异,探讨其缺乏与喂养的关系.方法 对216例0~6个月健康婴儿的血锌浓度进行测定.首先把婴儿按月龄分为0~4个月和5~6个月两组,比较月龄对血锌的影响.另外把同一月龄婴儿按不同的喂养方式分为母乳喂养组和奶粉喂养组,比较喂养方式对血锌的影响.结果 同一喂养方式喂养的不同月龄两组婴儿的全血锌有明显的差异(P<0.01);同一月龄母乳喂养儿与奶粉喂养儿之间全血锌也有明显的差异(P<0.01).各月龄组中性别之间无明显差异(P>0.05).结论 0~6个月婴儿随着月龄的增加血清锌也增加,故没有明显的生长落后、临床症状的一般不予补锌,以防锌过剩;另外母乳喂养比奶粉喂养儿的血锌高,因此提倡母乳喂养.

    作者:周伟;杨绿舜 刊期: 2010年第07期

中国热带医学杂志

中国热带医学杂志

主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心