吴丽贤；许建华；吴国华；陈元仲
目的:克隆和表达G蛋白竞争性抑制肽(GCIP)基因,并研究其抗心肌肥大活性.方法:克隆GCIP基因,采用RTS500系统表达,镍螯合亲和层析方法纯化;测定其对培养细胞[3H]亮氨酸掺入量及总蛋白含量的影响,观察其抗心肌肥大的活性.结果:构建了pIVEX2.3MCS GCIP表达载体.用RTS500系统成功表达了GCIP,RTS表达的GCIP占反应液总蛋白的2.43%.RTS系统表达的GCIP经镍柱纯化后,SDS-PAGE显示均能得到一条分子量约8.5 kDa的单一的条带.对GCIP的抗心肌肥大作用做了初步研究,结果显示GCIP 100μg/L、1 mg/L和10 mg/L组[3H]Leu掺入量和总蛋白含量己明显减少(P＜0.01).结论:成功构建了GCIP的表达载体pIVEX2.3MCS-GCIP.用RTS500系统表达GCIP蛋白,并经镍柱纯化,其表达量约为100 mg/L.表达的GCIP在细胞模型具有抗心肌肥大活性.
作者：周见至；李晓辉；张海港；唐渊；王小芹 刊期： 2003年第11期
目的:在中国人群中检测血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)基因多态性,并通过病例-对照研究揭示其与原发性高血压(EH)的相关性.方法:通过直接测序的方法,对19个高血压个体进行AT2R基因的单核苷酸多态性(SNP)检测.250例高血压患者和250例正常对照用于检测AT2R基因多态性是否与EH相关.结果:在AT2R基因的启动子、内含子、外显子和3'非编码区共检测到9个SNP,其中5个为首次在中国人群中发现.对启动子区高频的SNP(1334T/C)进行病例-对照研究,显示C1334等位基因频率在男性高血压患者中(17.5%)明显升高(男性正常对照为10.3%,P＜0.05).结论中国人群AT2R基因的SNP目录显示基因变异存在种族差异.AT2R基因启动子区的1334T/C多态性可能与中国人群EH相关.
作者：张怡；张奎星；王谷亮；黄薇；朱鼎良 刊期： 2003年第11期
目的:观察脑缺血/再灌注(I/R)后海马组织信号转导与转录激活子-3(STAT3)的激活及金雀异黄素对其的影响.方法:免疫印迹测定STAT3蛋白表达及磷酸化水平,电泳迁移率改变分析STAT3的DNA结合活性.结果:I/R3h后胞浆STAT3持续磷酸化激活,再灌注3 h和72 h达两高峰(1.7和2.5倍);而STAT3蛋白表达I/R24h开始升高,72h达高峰(1.7倍);核内STAT3的磷酸化水平及DNA结合活性缺血后即显著增高,再灌注3 h和72 h达两高峰(分别为2.6、3.1及3.6、4.4倍).金雀异黄素呈剂量依赖方式明显抑制I/R 72 h诱导STAT3的磷酸化及DNA结合活性的升高,但不影响STAT3蛋白表达.结论:脑缺血/再灌注导致STAT3的磷酸化激活及DNA结合活性的增加,蛋白酪氨酸激酶参与STAT3的激活调控.
作者：李洪春；张光毅 刊期： 2003年第11期
目的:观察低浓度的毒毛旋花子苷原(Strophanthidin,Str)对离体豚鼠心脏是否有强心作用,及其与心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性的关系.方法:采用Langendorff离体灌流装置经主动脉逆行灌流心脏;八道生理记录仪记录心率(HR),左室内压(LVP)及其大变化速率(±dp/d tmax);无机磷法测定心肌细胞膜Na+,K+-ATP酶活性.结果:Str 0.1 nmol/L可兴奋Na+,K+-ATP酶活性(P＜0.05)但不影响心脏的收缩功能.Str 1 nm01/L仅能升高+dp/dtmax(P＜0.05)并兴奋Na+,K+-ATP酶活性(P＜0.01).Str 10和100 nmol/L可升高LVP和+dp/dtmax(P＜0.05或P＜0.01),对Na+,K+-ATP酶活性无明显作用.Str 1-100μml/L虽能短暂升高LVP和±dp/dtmax(P＜0.01),但随后出现不规则收缩并使LVP和±dp/d tmax降低,其对Na+,K+-ATP酶活性则表现为剂量依赖性抑制作用(P＜0.01).结论:高浓度Str的正性肌力作用是通过抑制Na+,K+-ATP酶活性实现的,而低浓度Str的强心作用似与Na+,K+-ATP酶抑制作用无关.
作者：苏素文；王永利；李军霞；梅和珊；尹京湘 刊期： 2003年第11期
AIM: To determine whether or not low molecular G-proteins are involved in the endothelium-dependent relaxations to bradykinin. METHODS: The effects of botulinum ADP-ribosyltranferase C3 were studied in porcine coronary arteries and endothelial cells. RESULTS: Incubation of membrane fractions isolated from endothelial cells with the enzyme and 32p-NAD resulted in the ribosylation of the proteins with molecular weight of 24-25 kDa. Radio labelling of these proteins was suppressed in the presence of guanosine 5t-O-(3-thiotriphosphate) (GTP-yS), a hydrolysis-resistant analog of GTP. In the isolated arteries, ADP-ribosyltransferase C3 attenuated the relaxations tobradykinin during contractions with prostaglandin F2α in the presence of tween 80 (non ionic detergent), but not in the absence of tween 80. CONCLUSION: Low molecular weight G-proteins of the Rho family contribute to the mechanism of relaxation induced by bradykinin.
作者：Toshiro SHIBANO；Paul M VANHOUTTE 刊期： 2003年第11期
Vascular endothelium releases vasocontracting and/or vasorelaxing substances. Here, we report the diversity of endothelium-derived vasocontracting factors (EDCFs), arachidonic acid metabolites, and discuss the pathophysiological significance. In the canine basilar artery and the rabbit intrapulmonary artery, acetylcholine-induced contractions (Ach-induced EDC) are due to endothelial thromboxane A2 (TXA2) (TXA2-type). The Ach-induced EDC in the rabbit coronary artery is due to endothelial leukotrienes (LTs) (LTs-type). In addition, in the rat coronary artery, nicotine and noradrenaline (Nad)-induced EDCs are due to endothelial COX-metabolites (COX metabolite-type). These arachidonic acid metabolites derived from endothelium (activation by vasoactive substances including Ach, Nad and nicotine) cause a contraction of vascular smooth muscle cells and may disturb the local circulation. These EDCFs (TXA2, LTs and COX-metabolites) may be involved in the pathophysiology of cardiovascular immuno-inflammatory diseases.
作者：KURAHASHI Kazuyoshi；NISHIHASHI Tsuyoshi；TRANDAFIR Cristina Corina；WANG Ai-Min；MURAKAMI Shizuka；JI Xu 刊期： 2003年第11期
目的:研究新的钙调素抑制剂E6对纯化的原代培养大鼠脑微血管内皮细胞上P糖蛋白活性的影响.方法:使用流式细胞仪纯化大鼠脑微血管内皮细胞,通过检测P-糖蛋白底物罗丹明123在大鼠脑微血管内皮细胞中的荧光评估E6对P-糖蛋白功能的影响.结果:使用流式细胞仪能将大鼠脑微血管内皮细胞从其它杂细胞中分离纯化,3,10μmol/L E6和50 μ mol/L维拉帕米能显著提高大鼠脑微血管内皮细胞内罗丹明123的含量(P＜0.01),10 μ mol/L E6能使罗丹明123的胞内浓度增加接近三倍,而无P-糖蛋白表达的人脐静脉内皮细胞中的罗丹明123浓度则不受影响.结论:E6能显著抑制大鼠脑微血管内皮细胞上P-糖蛋白活性.
作者：祝浩杰；刘国卿 刊期： 2003年第11期
目的:观察木瓜苷(GCS)对大鼠佐剂性关节炎(AA)的作用,分析该作用与改善滑膜细胞的形态和功能之问的联系.方法:弗氏完全佐剂诱导大鼠AA,足容积法测量AA大鼠继发侧足容积,对关节疼痛和多发性关节炎进行评分,用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶消化和分离滑膜细胞,透射电镜进行滑膜细胞的超微结构观察,小鼠胸腺细胞增殖法测定滑膜细胞培养上清液中的IL-1水平,放射免疫法测定其中TNFα和PGE2含量.结果:GCS(60,120 mg/kg)连续灌胃8天,可明显减轻大鼠AA的继发性足肿胀、炎性疼痛反应和多发性关节炎指数,改善滑膜细胞形态的异常并降低其高分泌的IL 1、TNFα和PGE2含量;GCS(120 mg/kg)在减轻继发性炎症、疼痛和抑制滑膜细胞分泌PGE2方面明显优于阿克他利.结论:GCS具有减轻大鼠AA的作用,该作用的发挥可通过改善滑膜细胞异常的超微结构并抑制其过度分泌IL-1、TNFα和PGE2.
作者：戴敏；魏伟；沈玉先；郑咏秋 刊期： 2003年第11期
目的:用β-e sci n在豚鼠心室肌细胞建立穿孔膜片箝技术(PPR),并记录L-型钙电流(ICa,L),与传统的全细胞记录(WCR)模式相比较.方法:用酶消化法分离单个心室肌细胞,将β-escin配在电极内液中穿孔心室肌细胞膜形成PPR模式.用WCR及PPR技术记录心室肌细胞ICa,L.结果:β-escin 20,25,30 μmol/L可在心室肌细胞膜穿孔形成PPR模式,用β-escin 25 μmol/L成功率高(16/17,94%).用PPR模式记录的ICa,L其衰减明显比WCR方式记录的慢,ICa,L幅值在WCR形成后20 min减小36%,而在PPR形成后30 min仅缓慢减小8%.在两种模式下,ICa,L的I-V曲线,激活和失活曲线无显著差异.在PPR模式下,ICa,L的失活速率比在WCR模式下慢,在-20 mV-+10 mV电压下,其快失活相时间常数(τf)比WCR长(n=6,P＜0.05),在-10 mV-+10 mV电压下,其慢失活相时间常数(τs)也比WCR长(n=6,P＜0.05).在两种方式下,ICa,L的激活速率无显著差异.结论:用β-escin 25 μmol/L在豚鼠心室肌细胞能得到较稳定的PPR模式,此方法可以用于在普通的WCR模式下衰减较明显的电流如L-型钙电流的记录.
作者：傅丽英；王芳；陈雪松；周红义；姚伟星；夏国瑾；江明性 刊期： 2003年第11期
目的:在中国汉族人群中检测Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体(AT1)基因启动子区域的单核苷酸多态(SNPs),并探讨其与原发性高血压病(EH)及冠心病(CHD)的发病相关性.方法:应用PCR-直接测序法检测AT1基因启动子区域序列,在160例EH、128例CHD、185例EH合并CHD及160例健康对照者中,对所发现的SNPs进行基因分型和统计分析.结果:在AT1基因启动子区域共发现6个SNPs,其中-810A/T多态与另4个SNPs(-713G/T,-214A/C,-213G/C和-153A/G)几乎呈完全的连锁不平衡.EH组与对照组相比,-810A/T多态的基因型和等位基因分布未达统计学差异.CHD组与对照组相比,-810A等位基因分布达到统计学临界值(X2=3.649,P=0.056).-810A/T多态的基因型分布在EH合并CHD组(TT=126,TA=51,AA=8)分别与EH组(TT=127,TA=26,AA=7,X2=6.410,P=0.041)和对照组(TT=130,TA=24,AA=6,X2=7.742,P=0.021)相比,均有显著性差异.EH合并CHD组的A等位基因频率显著高于对照组(0.181vs0.106,X2=7.690,P=0.006)和EH组(0.181 vs 0.125,X2=4.119,P=0.042).携带TA基因型(OR=1.977,95%CI 1.160-3.354,P=0.011)或A等位基因(0R=1.548,95%CI 1.015-2.361,P=0.043)的EH患者并发CHD的危险性显著增加.结论:本研究首次报道在中国汉族人群中,AT1基因-810A/T多态可能是EH合并CHD发病的遗传危险因素.
作者：金玮；刘艳；盛海晖；金璘；沈亚云；华琦；陆林；于金德；黄薇 刊期： 2003年第11期
目的:研究灯盏花乙素对超氧阴离子引起的大鼠脑突触体氧化应激的保护作用.方法:采用与黄嘌呤(0.3 mmol/L)和黄嘌呤氧化酶(0.02 U)体系在37℃下孵育30 min,建立大鼠脑突触体超氧阴离子氧化损伤模型.通过测定脂质过氧化产物丙二醛评价脂质过氧化程度.通过脂溶性荧光探针DPH的各向异性判断突触体膜的流动性.胞内钙离子的测定采用荧光光度法,以Fura 2-AM为荧光探针.测定ATP酶解释放的无机磷确定Na+/K+-ATP酶的活性.结果:超氧阴离子使大鼠脑突触体的脂质过氧化产物丙二醛及胞内钙离子浓度显著上升,突触体的膜流动性和Na+/K+-ATP酶的活性则显著下降,预先加入灯盏花乙素(25 100 μmol/L)则能显著缓解超氧阴离子引起的氧化性损伤,表现为丙二醛的水平和胞内钙离子浓度下降,膜流动性增加及Na+/K+-ATP酶活性的恢复.结论:灯盏花乙素对超氧阴离子引起的大鼠脑突触体氧化应激具有良好的保护作用.
作者：刘宏；杨祥良；王影；唐晓荞；江冬英；徐辉碧 刊期： 2003年第11期
目的:观察对钙调神经磷酸酶有激活作用的火麻仁提取物对化学药品诱发的小鼠学习记忆功能障碍的改善作用.方法:以对硝基苯酚磷酸盐为底物,测定了火麻仁提取物对钙调神经磷酸酶的作用.利用东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇和戊巴比妥钠造成小鼠学习记忆障碍,学习记忆功能检测采用小鼠跳台法和水迷宫法.结果:以牛脑中提取的钙调神经磷酸酶的比活力为100%.火麻仁提取物的浓度在10g/L时,对牛酶的大激活达到35%±5%.化学药品如东莨菪碱、亚硝酸钠、45%乙醇和戊巴比妥钠均引起小鼠学习记忆功能障碍,主要表现为在跳台作业中潜伏期短,累计错误次数增多;在水迷宫中也同样出现了小鼠空间学习记忆障碍.用对钙调神经磷酸酶有激活作用的火麻仁提取物(0.2,0.4,0.8 g/kg)连续给予(ig)7d,分别对上述改变有不同程度的改善作用.结论:对钙调神经磷酸酶有激活作用的火麻仁提取物能够改善化学药品诱发的小鼠学习记忆功能障碍.
作者：骆静；尹江华；吴和珍；魏群 刊期： 2003年第11期
目的:评价三七皂苷的溶血性及免疫佐剂作用.方法:以分光光度法测定三七皂苷对红细胞的溶血百分率;以卵白蛋白(OVA)100μg、OVA 100μg加氢氧化铝2 mg及OVA 100 μg加不同剂量三七皂苷(50、100、200 μg)分别免疫ICR小鼠,二次免疫(间隔14天)后,用MTT法检测Con A、PWM和PHA诱导脾淋巴细胞增殖反应,ELISA检测血清中的抗OVA抗体效价.结果:三七皂苷浓度为500和250 mg/L时红细胞的溶血百分率分别为11.6%和3.6%;OVA加三七皂苷100 μg免疫组小鼠Con A、PWM和PHA诱导的脾淋巴细胞增殖反应显著高于OVA对照组(P＜0.01);OVA加三七皂苷(50、100、200 μg)免疫组小鼠血清中抗OVA抗体效价高于OVA对照组(P＜0.01).结论:三七皂苷具有免疫佐剂活性及较低的溶血性.
作者：孙红祥；潘杭君；潘远江 刊期： 2003年第11期
目的:研究姜黄素(Cur)对慢性粒细胞白血病(CML)细胞株K562增殖的影响,并且探讨这种影响与p210bcr/abl及其激活的Ras信号途径的关系.方法:以K562细胞为p210bcr/abl阳性表达细胞模型,以HL-60细胞为P21obcr/abl阴性表达细胞模型,以对p210bcr/abl无影响,并已知K562细胞对其有一定耐药性的足叶乙甙(Etoposide,VP-16)为抗癌药的对照,应用MTT法检测Cur对细胞增殖及凋亡的影响,应用Western blot及FCM方法检测蛋白含量的变化.结果:Cur对K562细胞及HL-60细胞增殖的抑制作用呈浓度和时间依赖性,并且Cur对二者的作用无差别(P＞0.05);相比之下,vP 16对HL-60细胞更敏感,对K562细胞较耐药(P＜0.01).Cur使K562细胞p210bcr/abl、MEK-1和c-JUN蛋白含量显著减少,且呈量效关系;而同样处理的HL-60细胞的MEK-1及c-JUN的含量减少不及K562细胞明显.结论:Cur抑制K562细胞增殖的作用与Cur下调p210bcr/abl含量从而阻断其激活的Ras信号途径有关.从新的角度证明了姜黄素具有治疗CML的潜在价值.
作者：吴丽贤；许建华；吴国华；陈元仲 刊期： 2003年第11期
目的:观察灯盏花乙素对脑缺血再灌损伤大鼠肝功能的影响.方法:大鼠灌胃给药7日后,阻塞大脑中动脉诱导脑缺血再灌损伤,检测大鼠血清和/或肝组织中的一氧化氮、黄嘌呤氧化酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、丙二醛、抗氧化酶、及细胞色素P-450活性(水平).结果:灯盏花乙素明显降低(P＜0.01)血清中升高的黄嘌呤氧化酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及肝组织中的丙二醛(P＜0.05),升高血清(P＜0.01)和肝组织(P＜0.05)中降低的一氧化氮并可诱导超氧化物歧化酶(P＜0.05)和谷胱甘肽过氧化物酶(P＜0.01).除明显降低(P＜0.01)CYP3A的活性外,大鼠脑缺血再灌损伤对肝CYP1A1、CYP1A2、CYP2E1的活性没有影响,灯盏花乙素不影响脑缺血再灌损伤大鼠肝CYP的活性.结论:大鼠脑缺血再灌可诱发肝细胞损伤,灯盏花乙素具有保护作用,其作用机制与抗氧化有关.
作者：杨秀芬；何蔚；鲁文红；曾繁典 刊期： 2003年第11期
目的:观察脑缺血后两种抗氧化剂对NF-κB蛋白表达及活性变化和IκB磷酸化水平变化的调节机制.方法:采用四动脉结扎全脑缺血模型,应用p65,p50抗体进行免疫印迹分析,凝胶电泳迁移改变分析法测定NF-κB的DNA结合活性,尼氏染色观察神经元的死亡.结果:NF-κB的蛋白表达和结合活性在脑缺血复灌不同时间呈明显的时间依赖性;NF-κB的活性在缺血/复灌6小时后达到高;其活性变化均能被吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)所抑制;组织学观察也证明了两种抗氧化剂对脑缺血的保护作用.结论:抗氧化剂对脑缺血/复灌引起的损伤的保护作用是通过降低NF-κB的活性而实现的,而NF-κB的活化和失活主要受抑制蛋白IκBα磷酸化降解调控.
作者：沈万华；张春翌；张光毅 刊期： 2003年第11期
目的:研究扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌钙调节蛋白和内皮素系统的变化及培多普利和比索洛尔干预的影响.方法:二肾一夹制备高血压糖尿病大鼠模型,部分大鼠用培多普利及比索洛尔治疗.3个月后检测大鼠LV/BW及左室β1AR、钙调节蛋白、内皮素受体(ETR)等mRNA表达,ETR及亚型Bmax和K0值的变化.结果:与正常组相比,DCM大鼠LV/βW增高,SERCA表达下降,活力降低,β1AR及IP3-1R上调,ETR数量降低,ETAR降低为主.培多普利及比索洛尔治疗逆转心室肥厚同时改善钙调节蛋白及内皮素系统的失调.结论:DCM大鼠心室肥厚阶段存在心肌细胞钙调节蛋白及内皮素系统的失调,用培多普利及比索洛尔治疗后可逆转.
作者：张寄南；耿茜；陈相健；方五旺；吴晓晖；杨笛 刊期： 2003年第11期
目的:观察体外高渗灌注对正常及高血压大鼠心肌缺血及再灌注损伤的影响.方法:利用体外心脏逆行灌注装置将大鼠心脏在予以正常灌注液或高渗透压灌注液灌注后进行缺血及再灌注.监测缺血前后心肌功能、缺血后心肌肌酸激酶释放量,用高效液相加电化学法测定心肌儿茶酚胺释放量,用原子吸收光谱法测定再灌注后心肌钙离子含量.结果:高渗灌注可显著减轻正常及高血压大鼠心肌缺血损害,改善高血压大鼠缺血后心功能,减少心肌儿茶酚胺释放,但未能减少再灌注后心肌钙含量.结论:高渗灌注减轻心肌缺血与再灌注损害,其作用可能与减少心肌儿茶酚胺释放有关.
作者：陈立兵；刘涛；吴镜湘；陈晓枫；王荔；范春林；高平近；东野英明；李文雄；袁文俊；陈红 刊期： 2003年第11期
目的:观察白藜芦醇对佛波酯诱导的U937细胞中基质金属蛋白酶-9活性的影响,并从蛋白、mRNA及核转录因子激活蛋白-1(AP-1)水平对其影响进行分析.方法:酶谱法测定U937细胞培养上清中MMP-9的活性;Western blot法考察MMP-9蛋白的生成;RT-PCR法检测MMP-9 mRNA的表达;电泳迁移率变动分析法(EMSA)研究核转录因子AP-1的活性.结果:PMA 10 nmol/L可显著诱导无血清培养的U937细胞中MMP-9活性(P＜0.01);白藜芦醇在1和10 μmol/L浓度下可抑制PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9活性(P＜0.05和P＜0.01);PMA 10 nmol/L可显著诱导U937细胞中MMP-9蛋白生成(P＜0.01)和MMP-9 mRNA的表达(P＜0.01),白藜芦醇在l、10 μmol/L浓度下可抑制PMA l0 nmol/L诱导的MMP-9蛋白生成和MMP-9 mRNA的表达(P＜0.05);白藜芦醇在10、1和0.1 μmol/L浓度下可抑制PMA诱导的U937细胞中AP-1的活化.结论:白藜芦醇可有效地抑制PMA诱导的U937细胞中MMP-9的活性,其作用可能是通过抑制PMA诱导的U937细胞核转录因子AP-1活化,进而降低MMP-9 mRNA表达,减少MMP-9蛋白生成而实现的.
作者：李怡棠；沈放；刘柏合；程桂芳 刊期： 2003年第11期
中国药理学报（英文版）杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会和中科院上海药物研究所
