何祥辉;范友芬;张淳;陈维亚
目前已有几种较常用的胶原蛋白测定方法,但仅为定性或半定量分析,结果有失精确,操作较复杂,对实验设备要求较高.笔者将羟脯氨酸法和免疫组织化学法相结合(以下简称结合法)测定正常人皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量,并校正相对粗略的盐析法结果,以期建立一种操作简便、精确度高、重复性好的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白测定法.
作者:王成;张国安;荣艳华 刊期: 2007年第06期
1 临床资料本组患者中男35例、女32例,年龄1~25岁.热力烫伤46例、化学烧伤12例、机械损伤9例.患者小指掌侧均有线状或蹼状瘢痕,掌指关节、指间关节中度或重度屈曲挛缩.患指不同程度地向尺侧屈曲,近指间关节较为明显.
作者:郑健生;郑庆亦;陈锦河;蔡少甫 刊期: 2007年第06期
1 对象与方法1.1 一般资料选择笔者单位收治的胸、背部开水烫伤患者男6例、女3例,年龄20~55岁,烫伤总面积(24±16)%TBSA,深Ⅱ度.LH080Y型氧化电位水生成设备购自江西林河实业有限公司.用无菌等渗盐水与氧化电位水作为清洗液,均选用传统的徒手清洗及喷吸组合盘清洗患者创面.以喷吸组合盘盘口面积(16 cm2)为每次清洗的样本面积.
作者:王年云;郭光华;史南玫 刊期: 2007年第06期
目的 了解高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的影响及其受体机制.方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,在巨噬细胞中加入不同的刺激物,分为HMGB1组:加入10 μg/ml的HMGB1;HMGB1+抗晚期糖基化终末产物受体(RAGE)组:先加入RAGE多克隆抗体5μg/ml孵育2 h后,再加入HMGB1;HMGB1+重组鼠(rm)RAGE/Fc组:将10 μg/ml的HMGB1与10μg/ml的rmRAGE/Fc混合作用2 h后,再加入巨噬细胞;对照组:加入磷酸盐缓冲液.采用流式细胞仪检测细胞表面RAGE的表达强度.激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 HMGB1组RAGE阳性细胞率(54±12)%明显高于对照组[(13±5)%,P<0.01],其荧光强度(126±10)也显著高于对照组(34±8,P<0.01).HMGB1+rmRAGE/Fc组、HMGB1+抗RAGE组凋亡细胞明显多于对照组,而HMGB1组晚期凋亡及坏死细胞明显多于其他3组.HMGB1组细胞凋亡率(39.5±2.3)%高于HMGB1+rmRAGE/Fc组[(17.3±3.6)%]、HMGB1+抗RAGE组[(14.8±4.8)%]及对照组[(5.4±2.3)%,P<0.01].结论 HMGB1可诱导RAGE表达上调,RAGE是HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的主要受体之一.
作者:刘峰;姚咏明;董宁;徐珊;盛志勇 刊期: 2007年第06期
目的 了解胰岛素样生长因子I(IGF-I)对缺血缺氧致心肌细胞凋亡的影响,探讨其调控机制.方法 分离培养SD乳鼠的心肌细胞.于制备缺血缺氧心肌细胞模型(缺血缺氧组)前1 h,用IGF-I(200μg/L)进行干预(干预组),以缺血缺氧组致伤前测定结果为正常对照(对照组).观察不同时相点心肌细胞凋亡的吸光度(A)值、线粒体膜电位变化及磷酸化Akt蛋白表达变化.结果 对照组心肌细胞凋亡A值为0.18±0.03;缺血缺氧后1、3、6、12 h分别为0.33±0.05、0.61 ±0.06、1.17±0.08、2.25±0.11,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);干预组上述时相点的A值分别为0.26±0.04、0.49±0.05、0.84±0.06、1.63±0.09,与缺血缺氧组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).缺血缺氧6、12 h,心肌细胞线粒体膜电位荧光强度较对照组40.2±10.1下降,分别为18.7±5.1、6.3±1.9(P<0.01),干预组较缺血缺氧组相对增高,分别为28.8±6.2、12.5±3.1(P<0.05).与对照组比较,其余各组缺血缺氧后6 h磷酸化Akt蛋白表达量增加.结论 IGF-I对缺血缺氧心肌细胞具有抗凋亡作用,其机制可能与IGF-I激活磷脂酰肌醇3-激酶/Akt、增加磷酸化Akt表达、减少细胞色素c的释放有关.
作者:宋华培;颜洪;张东霞;褚志刚;张琼;黄跃生 刊期: 2007年第06期
例1 女,1岁6个月.热面汤烫伤后5 d(无尿33 h)收入笔者单位.查体:体温37.5℃,脉搏149次/min,呼吸40次/min,血压96/61 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa);创面分布于会阴、臀部及双下肢;血钾3.31 mmol/L,血钠130.0mmol/L,血氯105.0 mmol/L,尿素氮19.8 mmol/L,肌酐390μmol/L.人院当天患儿尿量为10 ml,静脉输入呋塞米10mg后尿量未增加.
作者:丁楠;齐鸿燕 刊期: 2007年第06期
患者男,43岁,身高184 cm,体质量98 kg,火焰烧伤后2 h收入笔者单位.人院查体:体温37.1℃、心率98次/min、呼吸20次/min、血压131/95 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、血糖6.08 mmol/L.患者鼻毛烧焦,无声音嘶哑,四肢及胸腹部创面苍白,否认有高血压或糖尿病等病史.诊断:(1)火焰烧伤总面积56%,其中浅Ⅱ度13%、深Ⅱ度33%、Ⅲ度10%TBSA.(2)轻度吸人性损伤.
作者:陈炯;韩春茂;苏国良;廖海 刊期: 2007年第06期
1临床资料2003年3月~2007年5月,笔者单位采用皮肤扩张技术[1]获得大张全厚皮片移植修复瘢痕挛缩畸形患者5例,其中男2例、女3例,烧伤面积68%~87%TBSA.瘢痕部位:2例为双膝关节,1例为双髋关节,2例为双手.扩张部位:双侧胸壁3例、腰臀部1例、右大腿1例.
作者:孟杰;张维鹏;张义民;夏双印 刊期: 2007年第06期
1 临床资料1958-2004年笔者单位共收治烧伤患者25 780例,符合脓毒症诊断标准[1].且血培养阳性者共937例占3.63%,其中男674例(71.93%)、女263例(28.07%),年龄1个月~81.0岁,平均21.4岁.
作者:杨晓东;赵广贺;焦秋云;林国安 刊期: 2007年第06期
目的 了解大鼠严重烫伤后早期应用胰岛素对肝脏氧自由基损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠84只,随机分为正常组、盐水组、胰岛素组,每组各28只.后2组大鼠在背部造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后立即腹腔注射等渗盐水40 ml/kg或皮下注射胰岛素3 U/kg.伤后6、12、24、48 h,检测盐水组和胰岛素组大鼠肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)及血清丙氨酸转氨酶(ALT)含量,同时检测肝脏胞间黏附分子1(ICAM-1),光学显微镜下观察肝细胞形态学改变.正常组大鼠亦作相应检测.结果 与正常组比较,盐水组大鼠伤后6 h肝脏T-AOC、SOD明显降低,ROS明显升高(P<0.05或P<0.01);伤后12~48 h血清ALT及ICAM-1均高于正常组(P<0.01).伤后24 h,胰岛素组大鼠肝脏T-AOC、SOD分别为(386±75)、(210±39)U/g,较盐水组(124±18)、(111±9)U/g明显升高(P<0.01);ROS为(154±29)U/g,较盐水组(351±41)U/g明显降低(P<0.01).伤后48 h,胰岛素组大鼠血清ALT及肝脏ICAM-1与盐水组比较呈下降趋势(P<0.01).组织病理学结果显示,胰岛素可减轻烫伤后肝细胞损伤程度.结论 严重烫伤后早期用胰岛素干预,可增强大鼠肝脏抗氧化损伤能力,对肝脏有保护作用.
作者:王耘川;贾赤宇;张万福;吕根法;董茂龙;汤朝武;胡大海 刊期: 2007年第06期
目的 了解琥珀酸对人外周血中性粒细胞(PMN)凋亡的影响,探讨其致病机制.方法 体外孵育PMN,将PMN浓度调至5×106个/ml.在细胞中加入琥珀酸刺激,根据所加琥珀酸浓度分为5、10、20、30 mmol/L琥珀酸组;对照组加入常规培养液.取各组细胞培养上清液,检测其活性氧含量.5、20 mmol/L琥珀酸组细胞于处理前及处理后2、4、6、8、10 h分别取细胞悬液1 ml,行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)活性及细胞凋亡率检测.结果 5、10、20、30 mmol/L琥珀酸组活性氧含量(0.437±0.056、0.432±0.024、0.395±0.049、0.386±0.010)均低于对照组(0.505±0.028,P<0.05).随着孵育时间延长,各组细胞caspase-3活性均逐渐增加,但与对照组比较,5 mmol/L琥珀酸组caspase-3活性降低,20 mmol/L琥珀酸组则升高(P<0.05).对照组细胞处理前凋亡率为(6.1±1.1)%,处理后2 h为(13.2±2.0)%,10 h达(27.7±3.7)%;5 mmol/L琥珀酸组细胞凋亡率除处理后4 h外其余时相点均低于对照组(P<0.05);20 mmol/L琥珀酸组细胞处理后4~10 h凋亡率均高于对照组(P<0.05).结论 低浓度琥珀酸抑制PMN凋亡,而高浓度琥珀酸可促进PMN凋亡.细菌感染时,通过代谢产物琥珀酸抑制PMN免疫功能.
作者:任利成;黄晓元;张丕红;龙剑虹 刊期: 2007年第06期
烧伤后疼痛与伤后治疗会给患者造成严重的身心负担,疼痛在严重烧伤治愈后还可以持续1年以上.很多大面积严重烧伤患者由于创面换药疼痛而对换药产生恐惧心理,甚至拒绝换药治疗.烧伤患者迫切需要有效的镇痛措施.
作者:周湘桂;辛国华 刊期: 2007年第06期
患者男,30岁,全身多处被热水泥烫伤,伤后在外院曾行清创包扎及抗休克处理,伤后3 d转入笔者单位.入院查体:体温37.7℃、脉搏128次/min、呼吸20次/min、血压160/105 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),患者意识清楚,无呼吸困难.诊断:(1)烫伤总面积75%,其中深Ⅱ度15%、Ⅲ度60%TBSA.(2)双眼烧伤.(3)高血压.
作者:汤培;谢加水;黄道强 刊期: 2007年第06期
1 细菌来源2001年1月-2006年11月,笔者单位2110例住院烧伤患者创面分泌物、血液、痰等标本共检出细菌652株,其中创面分泌物标本587个占90.0%,痰标本52个占8.0%,血液标本11个占1.7%,尿标本2个占0.3%.
作者:王凌峰;张丽华;孟昭彦;于庆萍;高柏青;巴特;王晓冬;马文慧;李跃宇;张军 刊期: 2007年第06期
目的 建立适用于拮抗内毒素/脂多糖(LPS)药物研究的昆明小鼠内毒素性休克模型.方法 将不同剂量的D-氨基半乳糖(D-Gal)及LPS先后注射于小鼠腹腔,根据注射药物不同分为1组:等渗盐水(NS)+LPS 80 mg/kg;2组:Ns+LPS 90 mg/kg;3组:D-Gal 500 mg/kg+NS;4组:D-Gal 500 mg/kg+LPS 25μg/kg;5组:D-Gal 500 mg/kg+LPS 50 μg/kg;6组:D-Gal 500 mg/kg+LPS 250μg/kg;7组:D-Gal 600 mg/kg+NS;8组:D-Gal 600 mg/kg+LPS 10 μg/kg;9组:D-Gal 600 mg/kg+LPS25μg/kg;10组:D-Gal 600 mg/kg+LPS 50 μg/kg.观察注射后小鼠死亡情况,计算其死亡率.选择死亡率100%的剂量组合刺激小鼠,分为对照组:注射D-Gal 600 mg/kg+Ns;LPS组:注射D-Gal 600mg/kg+LPS 50μg/kg.于注射后30、75、120 min取小鼠静脉血,检测其血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.另取小鼠10只,同前分组,于注射后5 h处死,取其肺、肝、小肠行病理学观察.结果 2、6、10组小鼠死亡率达100%(P<0.01).对照组小鼠血清TNF-α含量保持在较低水平;LPS组伤后各时相点TNF-α含量均显著高于对照组(P<0.01),在注射后75 min时达高峰(6365±2087)ng/L.LPS组小鼠肺、肝、小肠出现明显炎性反应;对照组仅肝脏有轻微病理改变.结论 D-Gal致敏小鼠对LPS的反应符合内毒素性休克的特征,该小鼠模型适用于拮抗LPS的药理学研究.
作者:高宏富;肖光夏;任建东;夏培元 刊期: 2007年第06期
1 临床资料2005年11月-2007年4月,笔者单位收治5例踝部肌腱组织损伤患者,均为男性,年龄21~35岁.其中烧伤2例、热压伤2例、电损伤1例.创面面积6 cm×4 cm-11 cm×8 cm.手术时间为伤后48 h~10 d.
作者:巴特;王凌峰;曹胜军;张军;荣志东;王宏;侯智慧;孙晶 刊期: 2007年第06期
目的 观察局部应用鼠神经生长因子(NGF)对大张移植皮片感觉神经末梢再生过程的影响.方法 选择中小面积烧伤和需行瘢痕整形术的成年患者48例共60处创面,随机分为NGF组、对照组(各30处).NGF组术前采用含鼠NGF的等渗盐水(9000 AU/100 ml)纱布包裹皮片,术后用100 ml该盐水行皮片下冲洗;术后20 d起,于移植皮片下多点微量注射NGF,隔日1次,持续1个月.对照组单纯用等量等渗盐水作相同处理.检测术后12个月内移植皮片的两点辨别比并行皮片感觉功能评级.采集再次行整形术患者的术区组织标本行组织病理学检查,观察神经末梢再生和分布情况.结果 术后12个月,NGF组17处皮片达S4级、两点辨别比为1.11±0.14,而对照组仅5处皮片达S4级、两点辨别比为1.56±0.73(P<0.05或P<0.01);其余各时相点2项指标组间差异与之相似.术后6个月,NGF组可在皮片移植区的微血管床、瘢痕结节旁的疏松组织间隙和移植皮片下的瘢痕组织中,见到丰富的感觉神经末梢,附件结构也较为完整;对照组上述组织中神经末梢纤细,稀少.结论 局部应用NGF可加速感觉神经末梢的再生,促进移植皮片的感觉恢复.
作者:吴志宏;黄静;高微虹;王爱丽;贾卿;陈波;徐顺;顾耀辉 刊期: 2007年第06期
目的 了解携带供者抗原的第三方树突状细胞(DC)是否具有与供者源未成熟DC相似的免疫功能.方法 雌性C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠和昆明小鼠分别为皮肤移植的供者、受者和第三方.将40只BALB/c小鼠分为对照组、环磷酰胺组、供者源未成熟DC组、第三方未成熟DC组、携带供者抗原第三方DC组,每组8只.后4组大鼠皮肤移植术前4 d用环磷酰胺(200 mg/kg)预处理,对照组同法给予等量等渗盐水.后3组术前2 d用1 ml相应DC悬液(1×107个/ml)预处理,并在术后12 d重复给予1 ml DC悬液(1×107个/ml)1次;前2组于上述2个时相点同法给予等量等渗盐水.记录各组皮片平均成活时间(MST)并于术后5 d对皮片进行组织学观察.结果 与对照组(16.1±3.5)d比较,供者源未成熟DC组和携带供者抗原第三方DC组小鼠移植皮片的MST明显延长,分别为(38.3±7.7)、(34.9±7.7)d(P<0.01);携带供者抗原第三方DC组与供者源未成熟DC组皮片的MST相近(P>0.05),但与第三方未成熟DC组(23.7±2.7)d比较,差异有统计学意义(P<0.05).镜下见携带供者抗原第三方DC组移植皮片结构较清楚、排列有序,与供者源未成熟DC组情况相近.结论 携带供者抗原的第三方DC与供者源未成熟DC,均可在一定程度上建立抗原特异性免疫耐受.
作者:王强;彭毅志;王逸涛;王永权;游波;王元元;赵晓辉 刊期: 2007年第06期
自由基增多在动脉粥样硬化、肝纤维化、慢性间质性肺炎和肺肉芽肿等多种纤维化疾病的发病中具有重要意义.
作者:李伟人;岑瑛;于蓉;廖殿英 刊期: 2007年第06期
目的 了解四君子汤药膳对严重烫伤大鼠免疫功能紊乱的调理作用.方法 将90只健康Wistar大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤后,按照完全随机法分为药膳喂养组30只、肉汤喂养组30只、常规喂养组30只;另设对照组10只(模拟烫伤).药膳喂养组大鼠烫伤后按常规复苏及处理创面,分笼饲养,并于伤后2 h开始向胃内灌注37℃的四君子汤药膳,2 ml/次、2次/d;肉汤喂养组除灌注肉汤外,其余处理同前;常规喂养组伤后常规处理,自由进食、饮水.前3组大鼠于伤后3、7、14 d检测T淋巴细胞亚群和天然杀伤(NK)细胞的活性,血浆IgA、IgG、IgM、C 3、C 4水平,肠道分泌型IgA(sIgA)水平;对照组亦行相应检测.结果 前3组大鼠伤后大部分时相点各项指标(除CD8+T淋巴细胞活性外)均低于对照组(P<0.05或P<0.01).伤后3~14 d,药膳喂养组sIgA水平为(50±8)~(57±11)μg/ml,明显高于其他2个致伤组水平(P<0.05或P<0.01);其余免疫指标组间比较结果与此相似.结论 四君子汤药膳可以改善严重烫伤大鼠T淋巴细胞亚群的分布,提高NK细胞活性,促进血浆IgA、IgM、IgG、C 3、C 4水平的恢复和肠黏膜细胞slgA的分泌,从而改善机体免疫功能.
作者:詹剑华;严济;陶卫斌;游浩元 刊期: 2007年第06期