彭晶
酶联免疫吸附试验（ELISA ）由于测定灵敏度高、特异度高、操作简便、酶标记试剂比较稳定、无放射性污染、易于自动化，且易与其他相关技术偶联，使其成为目前应用广泛而且发展快的一种免疫测定技术［1］。Addcare Elisa 800全自动酶免工作站以操作简单、快速检测、结果准确等优点，实现了ELISA分析的自动化、标准化、快速化、网络化逐渐在全国各大医院使用［2‐3］。本科于2013年6月引进 Addcare Elisa 800全自动酶免工作站1台，现将笔者使用的体会报道如下。
作者：付杰；蒋兴宇；刘畅；蒲晓允 刊期： 2016年第23期
目的：探讨血清降钙素原（PC T ）水平在重症糖尿病足患者中的变化及临床价值。方法对86例糖尿病足患者治疗前及治疗后1、2周的血清PC T进行检查。结果治疗前随着糖尿病足患者感染程度加重，PC T 水平增高越明显。治疗后1周PCT水平呈下降趋势，但差异无统计学意义（P＞0．05）；治疗后2周Wagner 3～5级患者 PCT水平均呈明显下降趋势，且差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 PCT可作为判断重症糖尿病足患者转归的敏感指标之一，具有重要临床意义。
作者：张继东；童书青；张炳昌 刊期： 2016年第23期
目的：探讨维生素D在系统性红斑狼疮（SLE）中的临床应用。方法选取62例SLE患者作为试验组，并选取30例健康体检者作为对照组，检测维生素D、红细胞沉降率（ESR）、双链DNA（ds‐DNA）、白细胞介素‐6（IL‐6）、C反应蛋白（CRP）、白细胞计数（WBC）水平并进行统计学分析，通过Pearson相关检验分析维生素D与系统性红斑狼疮活动度评分（SLEDAI评分）、ESR、ds‐DNA、IL‐6、CRP、WBC间的相关性。结果经两样本 t检验分析，维生素D在SLE活动组、稳定组及对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。经Pearson相关检验分析，维生素D与SLEDAI评分、ESR、ds‐DNA、IL‐6、CRP呈负相关（r＝－0．492、P＜0．05，r＝－0．345、P＜0．05，r＝－0．368、P＜0．05，r＝－0．352、P＜0．05，r＝－0．336、P＜0．05）。结论维生素D的降低与SLE疾病本身及疾病活动有关。
作者：王志强；曹贤 刊期： 2016年第23期
目的：对罗氏公司Cobas E602电化学发光分析仪检测抗缪勒管激素（AMH）进行方法学评价。方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP文件要求，制订定量检测方法的方法学评价方案，即通过在罗氏公司Cobas E602电化学发光分析仪检测AM H的精密度、准确度、分析测量范围和携带污染率来评价其性能。结果 AM H低、中和高浓度时，批内精密度CV分别是1．971％、1．540％和1．707％，批间精密度 CV分别为3．508％、3．072％和3．199％，均符合要求；多个不同浓度定值校准品的检测结果与靶值的相对偏倚均在±5％之内，且将已知浓度的 AM H标本加入到健康人血清中，测得的添加回收率为97．05％～102．52％，准确度满足判断标准；分析测量线性范围为0．083～22．398 ng／m L ，相关方程Y＝0．9877 X＋0．1006（ a值在0．95～1．05，r2≥0．95）；携带污染率为0．769％（≤2．0％）。结论罗氏公司Cobas E602电化学发光分析仪检测AM H的精密度高、准确度好，具有良好的线性测量范围及携带污染率低，验证和评价标准符合，可为临床检测工作提供准确的参考依据。
作者：曾玉；吴畏；姚辉；严忠亚；钟天鹰 刊期： 2016年第23期
目的：应用实时荧光核酸恒温扩增检测技术（SAT ）对不孕不育症患者的泌尿生殖道拭子及尿液进行解脲脲原体（UU）检测，并评价其敏感性和特异度。方法对452例不孕不育症患者的泌尿生殖道拭子标本，采用S A T检测法、培养法、荧光定量聚合酶链反应（PCR）进行UU检测，同时再对同一患者的尿液标本进行SAT检测，根据实验结果评估SAT在拭子及尿液标本UU检测中的灵敏度和特异度；同时UU培养阳性的标本经过临床UU规范治疗后，仍采用上述方法对患者进行UU复查，根据实验结果评估SAT在UU检测中的判断预后效果。结果初检时与 UU培养结果作比较，UU‐SAT拭子标本的检测灵敏度为97．1％（170／175），特异度为97．8％（271／277），差异无统计学意义（χ2＝0．0102，P＝0．9197）；UU‐S A T尿液标本的检测灵敏度为96．0％（168／175），特异度为98．9％（274／277），差异无统计学意义（χ2＝0．1635，P＝0．6860）。结论 S A T检测泌尿生殖道患者拭子及尿液UU检测具有很高的灵敏度和特异性，同时又有很好的判愈效果，为 UU的临床实验室诊断提供了新的检测手段。
作者：陈小波；朱庆文；徐爱萍；苏良香；费倩倩 刊期： 2016年第23期
目的：了解铜绿假单胞菌的耐药特点及指导临床抗菌药物选择。方法收集徐州市第一人民医院2013年临床分离出的335株铜绿假单胞菌进行药敏分析，并用WHONET5．6软件对实验结果和数据进行分析。结果临床分离出的335株铜绿假单胞菌对15种抗菌药物存在不同程度的耐药，其中对哌拉西林／他唑巴坦、丁胺卡那霉素、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素对铜绿假单胞菌的敏感性较高；对氨苄西林／舒巴坦、头孢曲松、氨苄西林、头孢噻肟耐药率高达97％以上。同一患者多次检测出该菌的，哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、庆大霉素药敏结果存在较大的波动性，同时铜绿假单胞菌的耐药谱有一定的趋向性。结论加强铜绿假单胞菌连续性病原学和耐药性监测，以应对急性耐药的发生和医院感染扩散，同时指导临床治疗。
作者：蒋新华；王丽；刘道彦 刊期： 2016年第23期
目的：分析某三甲医院血培养病原菌分布及其耐药性，为临床血流感染（BSI）防控和抗菌药物的合理使用提供依据。方法回顾性分析2014年6月至2016年9月该院住院患者送检的3241份血培养结果，采用BacT／ALERT 3D和VersaTrek仪器进行血培养，采用VITEK‐2 Compact和ARIS 2X进行鉴定和药敏试验。结果3241份血培养标本中，共分离出病原菌99株，阳性率为3．1％。共分离得到革兰阴性菌42株（42．4％），革兰阳性菌54株（54．5％），真菌3株（3．0％）。分离前3位的革兰阴性菌依次为大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌；革兰阳性菌依次为：凝固酶阴性葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，化脓链球菌。肠杆菌科对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林／他唑巴坦、阿米卡星保持100．0％敏感，阳性球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁以及庆大霉素耐药率为0．0％，其余有不同程度耐药。结论大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌是该院血流感染常见的病原菌，各病原菌对不同抗菌药物耐药性不同，临床需根据药敏试验结果合理选择抗菌药物，减缓耐药菌株的产生。
作者：娄小燕；金伟峰；朱莉莉；陈淑子；阳青兰；李萍；林萍 刊期： 2016年第23期
目的：了解血液的温度、采血后贮存时间对去白细胞血液制备的影响，寻找白细胞滤除的佳温度和贮存时间，为临床提供更加优质的血液制品，让更多患者受益。方法按照血液温度、采血后贮存时间，对滤后白细胞残存量、红细胞回收率效果进行统计分析。结果（1）血液温度的影响，通过397份标本的观察，血液温度在10℃及以下172份，合格率86．62％（149／172）；10℃以上225份，合格率61．77％（139／225）。2组白细胞滤过合格率经χ2检验，差异有统计学意义（χ2＝30．22，P＜0．05）。（2）采血后贮存时间的影响，通过545份标本的观察，采血后贮存时间4 h内滤除208份，合格率59．13％（123／208）；4～12 h内滤出189份，合格率87．30％（165／189）；12～48 h内滤除148份，合格率86．48％（128／148）；3组白细胞滤过率经过χ2检验，差异有统计学意义（χ2＝18．16，P＜0．05）。结论结合当地实际，云南保山无偿献血血液白细胞去除工作佳滤出温度，血液温度控制在2～10℃。兼顾到冷沉淀的制备时效（8 h内），血液贮存4～8 h内进行白细胞滤出工作为佳过滤时间。
作者：鲁国勇；朱荣华；李维锦；陈兆庆；谢函凌；段志燕 刊期： 2016年第23期
目的：探讨慢性粒细胞白血病（CM L ）患者不同时期骨髓白细胞介素（IL ）‐1β、IL‐2、IL‐4、IL‐6、IL‐10及干扰素‐γ（INF‐γ）表达的变化。方法应用流式细胞仪分析30例CML慢性期（CML‐CP）、21例加速期（CML‐AP）、15例急变期（CML‐BP），经治疗后缓解患者42例、未缓解患者7例的骨髓液中IL‐1β、IL‐2、IL‐4、IL‐6、IL‐10及INF‐γ表达水平，并与对照组比较。结果 CML各组患者INF‐γ、IL‐2水平均低于对照组（P＜0．05），IL‐1β、IL‐4、IL‐6、IL‐10均高于对照组（P＜0．05）。随着病情进展， INF‐γ、IL‐2水平逐渐降低，即CML‐BP＜CML‐AP＜CML‐CP ，且组间比较差异有统计学意义（P＜0．05）；IL‐1β、IL‐4、IL‐6、IL‐10逐渐增高，即CML‐BP＞CML‐AP＞CML‐CP ，组间比较差异有统计学意义（P＜0．05）。患者经治疗完全缓解后，INF‐γ、IL‐2有所回升，但仍低于对照组（P＜0．01），IL‐1β、IL‐4、IL‐6、IL‐10有所降低，同样也高于CML‐CP（P＜0．05）；未缓解组IL‐1β、IL‐4、IL‐6、IL‐10及IL‐2、INF‐γ与急变期相比差异无统计学意义（P＞0．05）。结论在CML 患者骨髓微环境中细胞因子水平的变化对CML的发生、发展及与预后评估有一定的意义；检测CML骨髓IL‐1β、IL‐2、IL‐6、IL‐10及INF‐γ水平有望为CML患者免疫治疗及预后判断提供新的思路和理论依据。
作者：宋建新；张芹；梅芬；欧阳红梅；蒋雅先；撒亚莲 刊期： 2016年第23期
目的：探讨蛋白芯片法与胶体金法对于结核病的临床价值。方法选取该院从2015年2～11月所收治的90例确诊结核病患者作为临床研究对象，同时采用蛋白芯片法与胶体金法进行检测并比较两种检测方法的差异性，分析不同方法在结核病辅助诊断当中的临床价值。结果结核组患者的胶体金法阳性反应率为73．3％（66／90），显著高于对照组[7．8％（7／90）]，差异有统计学意义（P＜0．05）；结核组患者蛋白芯片法的阿拉伯甘露糖脂（LAM ）、蛋白16kD和蛋白38kD阳性反应率为53．3％（48／90）、22．2％（20／90）和53．3（48／90），高于对照组5．6％（5／90）、0％（0／60）和5．6％（5／90），差异有统计学意义（ P＜0．05）。结果表明，结核组患者的胶体金法阳性反应率显著高于蛋白芯片法阳性反应率，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论胶体金法在结核病的辅助诊断中更有优势，其灵敏度高、操作简单，有利于推广，对于结核病的早诊断、早治疗具有较强实用性，是一种比较理想的免疫学检验方法。值得在今后临床工作中推广应用。
作者：高正洪 刊期： 2016年第23期
目的：探讨不同标本类型间髓过氧化物酶（M PO ）检测结果的差异性、抗凝剂的选择及检测结果的比对。方法同时采集165例健康体检人群含乙二胺四乙酸二钾（EDT A‐K2）、肝素钠两种抗凝剂的血浆标本及不含抗凝剂的普通生化管的血清标本，分别检测3种标本类型中M PO水平，并对各组检测结果进行统计学分析。结果同一例体检者不同抗凝剂的血浆标本间及与不含抗凝剂的血清标本间MPO检测结果差异有统计学意义（P＜0．05）。结论不同标本类型对血液标本中MPO水平检测结果差异较大，建议各个实验室检测时根据不同抗凝剂制订相应的参考区间；由于ED T A‐K2抗凝血浆不受体外白细胞中M PO释放的影响，推荐采用EDT A‐K2抗凝血作为检测M PO水平的首选。
作者：王永博；钱净；陈慧琳 刊期： 2016年第23期
目的：探讨维持性血液透析（M HD ）患者骨密度变化的特点及其影响因素，以达到早期诊断骨质疏松的目的。方法选取72例M HD患者和76例健康者（对照组），利用双能X射线（DEXA ）骨密度仪检测其腰椎和髋部的骨密度值，分析M HD患者骨密度的异常情况及骨代谢生化指标的变化特点，进而探索影响骨密度的相关因素。结果 M HD患者腰椎和髋关节的骨密度明显减少，以老年女性降低为显著，骨质疏松的发生率明显上升（P＜0．05）。血清检测结果显示碱性磷酸酶（AKP）、甲状旁腺素（iPTH）、磷（P）、骨钙素（OC）、1型前胶原氨基端伸展肽（P1NP）和β‐1型胶原羧基末端肽（β‐CTX）水平明显上升；而25‐羟基维生素D（Vit D）和血钙（Ca）水平明显下降。相关性分析结果显示，骨密度与体质量指数（BMI）和血Ca呈正相关；与年龄、透析龄及AKP、OC呈负相关。结论 MHD患者易出现骨质疏松现象，其中性别、年龄、透析龄、BMI及AKP、Ca和OC均是影响骨密度的因素之一。
作者：王艳华；朱秀菊；南宇乐 刊期： 2016年第23期
目的：分析2015年该院中孕期妇女产前筛查阳性率并了解各年龄段中孕期产前筛查阳性情况，为进行临床干预措施提供依据。方法采用双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法，对孕周在15～20＋6周的孕妇进行血清甲胎蛋白（AFP）、游离β‐绒毛膜促性腺激素（Free‐βhCG）的检测，结合孕妇孕周、出生日期、末次月经、体质量等因素，采用广州市丰华产前筛查风险评估软件对数据进行综合风险评估，回顾性分析2015年进行中孕期血清学产前筛查结果。结果3556例孕妇中筛查高风险295例，阳性率为8．30％。其中21‐三体综合征（T21）高风险244例，阳性率为6．86％；18‐三体综合征（T18）高风险5例，阳性率为0．14％；神经管缺陷（NTD ）高风险46例，阳性率为1．29％；在各年龄段中，小于20岁有108例，高风险有10例，阳性率为9．52％；20～＜26岁有1115例，高风险有88例，阳性率为7．87％；26～＜31岁有1796例，高风险有132例，阳性率为7．33％；31～＜35岁有532例，高风险有62例，阳性率为11．65％。≥35岁的只有5例，高风险0例，只归为年龄高风险。平均年龄（27．2±3．8）岁，年龄标准偏差3．8岁。结论低龄和大龄怀孕高风险率较高，大龄孕妇比低龄孕妇高风险率更高，产前筛查可减少缺陷胎儿出生。
作者：郭庆同；何浩瑜；梁景欣 刊期： 2016年第23期
目的：探讨脓毒症患者降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）等指标与其预后的关系。方法收集来自上海市嘉定区中心医院脓毒症108例患者的临床资料，其中死亡患者25例。根据患者年龄分为＜60岁组（n＝27）、60～70岁组（n＝46）及＞70岁组（n＝35）；根据患者是否发生肝功能损害分为肝损伤组（n＝8）、肝未损伤组（n＝100）；根据患者是否发生肾功能损害分为肾损伤组（n＝17）及肾未损伤组（n＝91），采用χ2检验分别比较各组间生存率的差异。根据患者预后分为生存组（n＝83）和病死组（n＝25），采用非参数检验比较两组患者CRP和PCT水平的差异。结果108例脓毒症患者28 d生存率为76．85％。与病死组比较，生存组患者的性别、年龄、肝损伤发生率差异无统计学意义（P＞0．05），但肾损伤的发生率显著降低；同时，肾损伤组的生存率显著降低（P＝0．024）。病死组的血清PCT水平及CRP水平均显著增高。结论脓毒症患者的预后可能与患者肾损伤情况及患者的PCT、CRP血清水平密切相关。
作者：沈丽娟；王飞；黄崴；于修文；孙杰 刊期： 2016年第23期
目的：观察二甲双胍对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响和可能的作用机制。方法选用人绒毛膜癌细胞系JEG‐3，分为对照组和二甲双胍组（终浓度为5、10、20、40 mmol／L ）处理48 h后，使用流式细胞术和免疫荧光检测细胞凋亡情况，分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和免疫蛋白印迹检测凋亡相关基因半胱天冬酶‐3（Caspase‐3）、Bcl‐2和凋亡调节蛋白（Bax）的mRNA及蛋白变化趋势。结果和对照组相比，二甲双胍组的JEG‐3细胞早晚期凋亡率显著上升，同时Caspase‐3和Bax的mR‐NA及蛋白表达水平显著增加，但Bcl‐2的mRNA和蛋白表达显著降低。结论二甲双胍可以通过Caspase‐3及Bcl‐2／Bax通路诱导JEG‐3细胞发生凋亡。
作者：柳光芬 刊期： 2016年第23期
目的：探讨2011～2015年海军总医院肺炎克雷伯菌的临床分布情况及耐药性变迁，为临床用药提供参考依据。方法选取海军总医院2011～2015年临床分离出的肺炎克雷伯菌，分析其检出率、科室分布情况、标本来源、抗菌药物耐药性及对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的变化趋势。结果2011～2015年肺炎克雷伯菌的检出株数和分离率呈逐年上升趋势，标本主要来源于重症监护室、高压氧科、呼吸内科、放射肿瘤科、肾脏病科等10个科室，其中高压氧科检出率高，其次是呼吸内科、重症监护室；送检标本以痰液和尿液为主，分别占送检标本的59．7％和21．4％；2011～2015年肺炎克雷伯菌耐药性呈逐年上升趋势。该菌对哌拉西林、氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦和头孢呋辛酯耐药率较高，对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南和妥布霉素的耐药率较低；对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药率逐年不断上升，泛耐药肺炎克雷伯菌呈快速上升趋势。结论肺炎克雷伯菌耐药现象严重，尤其耐碳青霉烯类抗菌药物的肺炎克雷伯菌近年来明显增加，应加强对其耐药性监测，指导临床合理用药。
作者：钱扬会；李小乐；李艳君；郝秀红；丁毅伟；丁赔赔；王娇贤；赵强元 刊期： 2016年第23期
目的：利用重叠延伸聚合酶链反应（SOE‐PCR）快速构建乙型肝炎病毒（HBV ）阿德福韦酯耐药株（RT A181T ）感染性克隆，观察重组质粒在Huh7细胞中的表达，建立 HBV阿德福韦酯耐药株（RT A181T ）的体外研究细胞模型。方法设计保守引物，从慢性乙型肝炎阿德福韦酯耐药患者血清中扩增全长 HBV基因组，利用SOE‐PCR技术构建1．3倍基因组长度的感染性克隆质粒pHBV1．3，转染肝癌细胞系Huh7，采Western Blot、Real‐time PCR检测感染性克隆复制以及表达情况，同时用抗病毒药物拉米夫定以及阿德福韦酯验证对感染性克隆复制及表达的抑制情况。结果成功构建了 HBV阿德福韦酯耐药株感染性克隆质粒pHBV1．3（RT A181T ），该质粒在Huh7细胞系中能有效复制、转录和表达。拉米夫定能有效抑制该感染性克隆的复制和表达，阿德福韦酯不能抑制该感染性克隆的复制和表达。结论构建的 HBV 阿德福韦酯耐药株感染性克隆质粒pHBV1．3（RT A181T ）在体外能高效复制及表达蛋白，其转染细胞可用于HBV复制机制及抗病毒研究。
作者：赵建华；陆仁飞 刊期： 2016年第23期
目的：探讨脂蛋白（a ）与多项生化指标用于冠心病患者检测中的临床效果。方法从该院2015年4月至2016年4月接收治疗的冠心病患者中，随机选择50例作为观察组，选取同期接收的50例健康体检人员作为健康组，并对两组的脂蛋白（a）、超敏C反应蛋白（hs‐CRP）、血清同型半胱氨酸（Hcy）、心肌肌钙蛋白 I（CTNI）、心肌肌钙蛋白T（CTNT）、高敏心肌肌钙蛋白T（hs‐CTNT）水平进行比较分析，了解其与冠脉狭窄程度之间的关系，总结脂蛋白（a）与多项生化指标用于冠心病患者检测中的应用价值。结果观察组脂蛋白（a）水平显著高于健康组，差异有统计学意义（P＜0．05）；观察组的 Hcy、hs‐CRP、纤维蛋白原（Fib）和狭窄程度相关，不同的冠状动脉狭窄患者的Hcy、hs‐CRP、Fib比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论脂蛋白（a）及其他生化指标在冠心病甚至是其他心血管疾病的检测中，具有显著的临床应用价值。
作者：邓真国 刊期： 2016年第23期
目的：通过分析乙型肝炎病毒（HBV）感染患者血清免疫学标志物乙型肝炎病毒外膜大蛋白（HBV‐LP）、HBV‐DNA及乙型肝炎病毒标志物（HBV‐M ）的相关性，探讨HBV‐LP对反映体内 HBV复制的意义。方法选取2013年4月至2015年9月深圳市龙岗区中医院收治的慢性乙型肝炎感染患者540例，采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测患者的血清 HBV‐DNA ，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定 HBV‐LP及 HBV‐M ，对 HBV‐LP、HBV‐M 及 HBV‐DNA 之间的相关性进行分析。结果乙型肝炎E抗原（HBeAg）阳性患者的HBV‐LP阳性率为96．39％，而HBV‐DNA的阳性率为93．33％，两者差异无统计学意义（P＞0．05）；HBV‐LP水平与 HBV‐DNA 的拷贝数对数值呈正相关；而 HBeAg 阴性患者的 HBV‐LP阳性率为63．33％， HBV‐DNA的阳性率为51．11％，两者差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 HBV外膜大蛋白能够有效反映慢性乙型肝炎患者体内HBV复制情况，其灵敏度高于HBeAg ，对于HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者而言，HBV‐LP更能反映患者体内病毒的复制状态。
作者：尹凌凡；唐景云；张日妹；冉云；熊建辉 刊期： 2016年第23期
C／EBP蛋白因其与启动子CCAAT 区及多种病毒增强子相结合而命名，目前为止已发现6种C／EB P家族成员，分别命名为 C／EB Pα，C／EB Pβ，C／EB Pγ，C／EB Pδ，C／EB Pε和 C／EBPζ。C／EBPs调控基因转录起始、转录后修饰及蛋白间的相互作用，在细胞增殖和分化、代谢和凋亡、炎症和转化、致癌基因引起的细胞老化及肿瘤发生等方面发挥重要作用［1‐2］。C／EBPα是C／EBPs家族中早被发现克隆和研究的基因，在肝脏组织中丰富表达。近年来研究表明，C／EB Pα参与肝细胞的增殖和分化，参与慢性肝炎、肝纤维化、肝癌发生等病理过程［3‐4］。本文介绍了C／EB Pα的基本结构和生物学功能及其在肝病中的研究进展。
作者：赵静静；娄晓丽；陈洪卫(综述)；侯彦强(审校) 刊期： 2016年第23期
国际检验医学杂志
主管:重庆市卫生局
主办：重庆市卫生信息中心
