沈丽娟;王飞;黄崴;于修文;孙杰
目的:利用重叠延伸聚合酶链反应(SOE‐PCR)快速构建乙型肝炎病毒(HBV )阿德福韦酯耐药株(RT A181T )感染性克隆,观察重组质粒在Huh7细胞中的表达,建立 HBV阿德福韦酯耐药株(RT A181T )的体外研究细胞模型。方法设计保守引物,从慢性乙型肝炎阿德福韦酯耐药患者血清中扩增全长 HBV基因组,利用SOE‐PCR技术构建1.3倍基因组长度的感染性克隆质粒pHBV1.3,转染肝癌细胞系Huh7,采Western Blot、Real‐time PCR检测感染性克隆复制以及表达情况,同时用抗病毒药物拉米夫定以及阿德福韦酯验证对感染性克隆复制及表达的抑制情况。结果成功构建了 HBV阿德福韦酯耐药株感染性克隆质粒pHBV1.3(RT A181T ),该质粒在Huh7细胞系中能有效复制、转录和表达。拉米夫定能有效抑制该感染性克隆的复制和表达,阿德福韦酯不能抑制该感染性克隆的复制和表达。结论构建的 HBV 阿德福韦酯耐药株感染性克隆质粒pHBV1.3(RT A181T )在体外能高效复制及表达蛋白,其转染细胞可用于HBV复制机制及抗病毒研究。
作者:赵建华;陆仁飞 刊期: 2016年第23期
酶联免疫吸附试验(ELISA )由于测定灵敏度高、特异度高、操作简便、酶标记试剂比较稳定、无放射性污染、易于自动化,且易与其他相关技术偶联,使其成为目前应用广泛而且发展快的一种免疫测定技术[1]。Addcare Elisa 800全自动酶免工作站以操作简单、快速检测、结果准确等优点,实现了ELISA分析的自动化、标准化、快速化、网络化逐渐在全国各大医院使用[2‐3]。本科于2013年6月引进 Addcare Elisa 800全自动酶免工作站1台,现将笔者使用的体会报道如下。
作者:付杰;蒋兴宇;刘畅;蒲晓允 刊期: 2016年第23期
目的:了解徐州市东方人民医院检验科危急值报告频率及科室分布情况,对危急值报告进行总结、评估,持续改进。方法通过Lis信息系统查询检验科报告的危急值病例,统计年内发生率,项目分布、病区分布。结果一年内共报告危急值总例数是358例,年内总发生率为0.143%。危急值发生率排前3位的是血锂、血糖、钾,构成比排在前3位的项目分别是血糖、钾、氯。排在前3位的科室分别是七病区(老年二科)、门诊、一病区(老年一科)。结论通过对危急值报告的评估,采取适当的措施对危急值报告项目和报告范围进行持续改进,可提高危急值报告的有效性。
作者:张云飞;张稳燕;贾黎方 刊期: 2016年第23期
目的:观察不同类型冠心病(CHD)患者触珠蛋白(Hp)、超敏C反应蛋白(hs‐CRP)水平变化,探讨 Hp、hs‐CRP临床意义及二者相关性。方法选取CHD患者142例,分稳定性心绞痛(SAP)组48例、不稳定性心绞痛(UAP)组63例、急性心肌梗死(AMI)组31例,另外选择同期健康体检者40例为对照组。检测各组 Hp、hs‐CRP水平及其相关性。结果与对照组比较, CHD各组Hp、hs‐CRP水平随着病变严重程度上升(P<0.05);AMI组hs‐CRP、Hp水平明显高于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。Hp、hs‐CRP在各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CHD患者 Hp、hs‐CRP水平明显升高,两者具有相关性(r=0.812),联合检测Hp、hs‐CRP对CHD的预测及判断预后有重要意义。
作者:王新;陈勇 刊期: 2016年第23期
目的:探讨降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和白细胞计数(WBC)联合检测在儿童呼吸道感染中的诊断价值。方法选择2014年1月至2015年6月该院儿科住院的呼吸道感染儿童358例,根据咽拭子或痰培养结果分为细菌感染组和非细菌感染组,在治疗前后采集静脉血分别进行PCT、CRP检测和WBC计数;同时随机抽取30例健康儿童作为对照组。结果细菌感染组与非细菌感染组及对照组相比,PCT、CRP、WBC水平明显增高(P<0.01);非细菌感染组与对照组相比,PCT、CRP、WBC水平比较接近(P>0.05);而治疗1周后的细菌感染组PCT、CRP、WBC水平与治疗前相比明显降低(P<0.01),非细菌感染组与治疗前相比PCT、CRP、WBC水平变化不大(P>0.05)。结论 PCT、CRP、WBC水平联合检测对儿童呼吸道感染的鉴别诊断及指导用药具有重要的应用价值。
作者:沈有期;胡志愿;廖志玲;黄顺娇 刊期: 2016年第23期
自2009年报道产NDM‐1的肠杆菌后,“超级细菌”这一概念为公众所熟知,这一类耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌常表现为多重耐药菌(MDR),甚至泛耐药菌(PDR),对几乎所有β‐内酰胺类抗生素耐药,并使酶抑制剂(克拉维酸等)失效,使临床治疗陷入被动。肠杆菌主要耐药机制为产碳青霉烯酶,水解β‐内酰胺类抗生素而表现耐药性状。肺炎克雷伯菌(CPKP)常见于人体呼吸道、消化道,是一种条件致病的肠杆菌科细菌,临床检出率高。近年来产碳青霉烯酶类CPKP报道日渐增多,尽管总体上检出率并不高(除了南亚大陆,均<7%)[1‐2]。但CPKP已在世界多地出现暴发流行,同时也有在自然环境中发现CPKP的报道[3]。表明其播散趋势不容乐观,研究CPKP的耐药机制及其流行病学规律,对此类感染的防控具有重要意义。
作者:陈绍淳(综述);张娟(审校) 刊期: 2016年第23期
目的:探讨蛋白芯片法与胶体金法对于结核病的临床价值。方法选取该院从2015年2~11月所收治的90例确诊结核病患者作为临床研究对象,同时采用蛋白芯片法与胶体金法进行检测并比较两种检测方法的差异性,分析不同方法在结核病辅助诊断当中的临床价值。结果结核组患者的胶体金法阳性反应率为73.3%(66/90),显著高于对照组[7.8%(7/90)],差异有统计学意义(P<0.05);结核组患者蛋白芯片法的阿拉伯甘露糖脂(LAM )、蛋白16kD和蛋白38kD阳性反应率为53.3%(48/90)、22.2%(20/90)和53.3(48/90),高于对照组5.6%(5/90)、0%(0/60)和5.6%(5/90),差异有统计学意义( P<0.05)。结果表明,结核组患者的胶体金法阳性反应率显著高于蛋白芯片法阳性反应率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胶体金法在结核病的辅助诊断中更有优势,其灵敏度高、操作简单,有利于推广,对于结核病的早诊断、早治疗具有较强实用性,是一种比较理想的免疫学检验方法。值得在今后临床工作中推广应用。
作者:高正洪 刊期: 2016年第23期
目的:讨论尿干化学中的白细胞酯酶和尿亚硝酸盐与尿沉渣细菌计数及白细胞在诊断泌尿系疾病中的作用,建立准确快速并且适合该地区的诊断依据。方法收集2015年1~8月在该院泌尿外科住院及门诊尿标本共计976例。分别检测白细胞酯酶及亚硝酸盐和尿沉渣细菌计数,并且对阳性标本进行尿细菌培养和鉴定。结果在976例标本中,尿细菌培养阳性结果为318例,阳性率为32.6%。革兰阴性菌176例占55.35%,其他细菌142例占44.65%。尿干化学的白细胞酯酶、亚硝酸盐与尿沉渣中细菌、白细胞假阳性率4.32%~11.49%,假阴性率20.24%~25.39%,特异度86.12%~95.73%,敏感度32.13%~39.43%,阴性预测值65.87%~71.79%,阳性预测值56.25%~77.17%。结论尿干化学亚硝酸盐与尿沉渣细菌计数联合检测可初步判断泌尿系疾病,尿细菌培养与上述两种方法联合检测更能准确诊断疾病。
作者:吴春华;李树敏 刊期: 2016年第23期
本文主要是对基层妇幼保健计划生育服务中心在改革合并的大趋势下检验工作存在的一些问题进行了归纳总结,并提出相应的建议:基层妇幼保健计划生育服务中心主要存在着对口专业从业人员的相对不足,检验设备的相对落后及对检验缺乏足够的重视等;需要从引进人才、更新相应的仪器设备、注重质量控制和提高对检验工作的认识等方面着手。只有加强对检验工作的足够重视,才能使基层妇幼保健与计划生育的相关政策达到预期的目标。
作者:方强;罗曦 刊期: 2016年第23期
目的:评价Mindray BC 6800、Sysmex XE‐5000和Sysmex XT‐1800i 3台血细胞分析仪检测结果的准确性和一致性。方法在保证仪器重复性稳定的情况下,用新鲜的全血分别在3台血细胞分析仪上检测,分析白细胞计数(WBC )、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HB)、红细胞压积(HCT)以及血小板计数(PLT)5个项目的准确性和一致性。结果除了Sysmex XE‐5000的HCT和Sysmex XT‐1800i的RBC的相对偏差超出1/2CLIA′88的标准外,其他项目均有良好的一致性和相关性。结论实验室有多台血液分析仪时,要定期做比对试验,及时发现仪器存在的误差,通过调整和校准来保证检验结果的准确性和一致性。
作者:张莉 刊期: 2016年第23期
目的:分析2015年该院中孕期妇女产前筛查阳性率并了解各年龄段中孕期产前筛查阳性情况,为进行临床干预措施提供依据。方法采用双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法,对孕周在15~20+6周的孕妇进行血清甲胎蛋白(AFP)、游离β‐绒毛膜促性腺激素(Free‐βhCG)的检测,结合孕妇孕周、出生日期、末次月经、体质量等因素,采用广州市丰华产前筛查风险评估软件对数据进行综合风险评估,回顾性分析2015年进行中孕期血清学产前筛查结果。结果3556例孕妇中筛查高风险295例,阳性率为8.30%。其中21‐三体综合征(T21)高风险244例,阳性率为6.86%;18‐三体综合征(T18)高风险5例,阳性率为0.14%;神经管缺陷(NTD )高风险46例,阳性率为1.29%;在各年龄段中,小于20岁有108例,高风险有10例,阳性率为9.52%;20~<26岁有1115例,高风险有88例,阳性率为7.87%;26~<31岁有1796例,高风险有132例,阳性率为7.33%;31~<35岁有532例,高风险有62例,阳性率为11.65%。≥35岁的只有5例,高风险0例,只归为年龄高风险。平均年龄(27.2±3.8)岁,年龄标准偏差3.8岁。结论低龄和大龄怀孕高风险率较高,大龄孕妇比低龄孕妇高风险率更高,产前筛查可减少缺陷胎儿出生。
作者:郭庆同;何浩瑜;梁景欣 刊期: 2016年第23期
目的:探讨脂蛋白(a )与多项生化指标用于冠心病患者检测中的临床效果。方法从该院2015年4月至2016年4月接收治疗的冠心病患者中,随机选择50例作为观察组,选取同期接收的50例健康体检人员作为健康组,并对两组的脂蛋白(a)、超敏C反应蛋白(hs‐CRP)、血清同型半胱氨酸(Hcy)、心肌肌钙蛋白 I(CTNI)、心肌肌钙蛋白T(CTNT)、高敏心肌肌钙蛋白T(hs‐CTNT)水平进行比较分析,了解其与冠脉狭窄程度之间的关系,总结脂蛋白(a)与多项生化指标用于冠心病患者检测中的应用价值。结果观察组脂蛋白(a)水平显著高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的 Hcy、hs‐CRP、纤维蛋白原(Fib)和狭窄程度相关,不同的冠状动脉狭窄患者的Hcy、hs‐CRP、Fib比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂蛋白(a)及其他生化指标在冠心病甚至是其他心血管疾病的检测中,具有显著的临床应用价值。
作者:邓真国 刊期: 2016年第23期
目的:探讨脓毒症患者降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)等指标与其预后的关系。方法收集来自上海市嘉定区中心医院脓毒症108例患者的临床资料,其中死亡患者25例。根据患者年龄分为<60岁组(n=27)、60~70岁组(n=46)及>70岁组(n=35);根据患者是否发生肝功能损害分为肝损伤组(n=8)、肝未损伤组(n=100);根据患者是否发生肾功能损害分为肾损伤组(n=17)及肾未损伤组(n=91),采用χ2检验分别比较各组间生存率的差异。根据患者预后分为生存组(n=83)和病死组(n=25),采用非参数检验比较两组患者CRP和PCT水平的差异。结果108例脓毒症患者28 d生存率为76.85%。与病死组比较,生存组患者的性别、年龄、肝损伤发生率差异无统计学意义(P>0.05),但肾损伤的发生率显著降低;同时,肾损伤组的生存率显著降低(P=0.024)。病死组的血清PCT水平及CRP水平均显著增高。结论脓毒症患者的预后可能与患者肾损伤情况及患者的PCT、CRP血清水平密切相关。
作者:沈丽娟;王飞;黄崴;于修文;孙杰 刊期: 2016年第23期
目的:应用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT )对不孕不育症患者的泌尿生殖道拭子及尿液进行解脲脲原体(UU)检测,并评价其敏感性和特异度。方法对452例不孕不育症患者的泌尿生殖道拭子标本,采用S A T检测法、培养法、荧光定量聚合酶链反应(PCR)进行UU检测,同时再对同一患者的尿液标本进行SAT检测,根据实验结果评估SAT在拭子及尿液标本UU检测中的灵敏度和特异度;同时UU培养阳性的标本经过临床UU规范治疗后,仍采用上述方法对患者进行UU复查,根据实验结果评估SAT在UU检测中的判断预后效果。结果初检时与 UU培养结果作比较,UU‐SAT拭子标本的检测灵敏度为97.1%(170/175),特异度为97.8%(271/277),差异无统计学意义(χ2=0.0102,P=0.9197);UU‐S A T尿液标本的检测灵敏度为96.0%(168/175),特异度为98.9%(274/277),差异无统计学意义(χ2=0.1635,P=0.6860)。结论 S A T检测泌尿生殖道患者拭子及尿液UU检测具有很高的灵敏度和特异性,同时又有很好的判愈效果,为 UU的临床实验室诊断提供了新的检测手段。
作者:陈小波;朱庆文;徐爱萍;苏良香;费倩倩 刊期: 2016年第23期
1915年,Frederick在研究牛痘病毒时,发现细菌被杀死的现象,但尚未进行深入研究[1]。1917年,Felix发现了一种能够杀灭涂布在琼脂表面上细菌并且呈现独立噬斑的“微生物”,并认为这种微生物可以侵入细菌内并在其体内扩增,因此称之为“噬菌体”。此后,噬菌体的研究拉开了帷幕。噬菌体被定义为一类能够感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。1921年,Bruynogh和Maisin首次利用噬菌体治疗了由葡萄球菌引起的人类皮肤疖肿。在噬菌体研究的前十年里,研究者们因过多关注噬菌体的应用而忽视了噬菌体的生物学特性。起初,研究者们在噬菌体中只检测到蛋白质,直到1936年, Schlesinger研究发现噬菌体中还存在DNA ,这才证实了噬菌体是由核酸和蛋白质组成的病毒颗粒。1940年,Ruska首次用电镜观察到噬菌体的形态。随后,陆续有研究者利用电镜观察到噬菌体的形态并得出了噬菌体的一般特征。噬菌体的生物学特性逐渐明了。近年来,随着抗菌药物的广泛使用,出现了越来越多的难以用抗菌药物治疗的多重耐药菌(MDR),现已成为全球许多重症监护室(IC U )一个迫在眉睫的医疗危机[2]。人们不得不将关注点转向寻找抗菌药物的替代疗法。于是,噬菌体疗法成为了一个潜在的治疗细菌感染的可行性方案。
作者:高静(综述);刘新(审校) 刊期: 2016年第23期
铜绿假单胞菌是世界范围内医院获得性感染的重要病原菌。对引起疾病的病原菌基因分型的传染源确定、阻止病原菌的传播、潜在病原菌危险的控制和医院耐药监测有很重要的作用。细菌分型作为分子流行病学研究调查的主要研究内容,其结果的准确性依赖于分型方法是否稳定可靠、准确[1]。细菌分型的方法包括依靠生理、生化特征的表型分型法和近年来流行使用的基因分型法。表型分型方法是根据细菌的生理、生化等表型特征进行分类包括噬菌体分型法、血清型法、营养分型法和药物敏感试验等,这些分型的方法由于受到细菌本身复杂因素及方法的敏感性因素影响,往往就无法有效对不同的菌株进行区分,因此其应用受到很大限制。运用分子生物学方法检测细菌基因型来鉴别菌株的基因分型法,是1980年起逐渐被引入微生物鉴定领域,成为目前较主流的流行病学研究工具,在基因组水平对细菌进行鉴定与分类,与表型分型相比更加细化,对院内引起感染的铜绿假单胞菌近亲缘性,即克隆性菌株鉴定有重要意义,从根本上确定菌株遗传基础的相互联系和变异,为流行病调查工作中确定菌株间的遗传亲缘关系等方面提供更为有力的实验室证据[2]。基因分型法目前运用较多的有:重复序列聚合酶链反应(PCR )、随机扩增多态性 DNA (RAPD)、多位点可变数目串联重复序列分析(VNTR)、限制性片段长度多态性PCR(RFLP)、多位点序列分型(MLST )、脉冲场凝胶电泳(PFGE)。分型方法是在微生物学、遗传学、流行病学等交叉学科一系列研究中的工具,选择合适的方法,有效监测院内病原菌的分子流行病学变化,如此研究预期和终目的才能达到。现就目前常用于铜绿假单胞菌基因分型的技术进行简要介绍。
作者:张伟;徐益恒(综述);邰文琳(校审) 刊期: 2016年第23期
目的:观察表皮生长因子受体‐酪氨酸激酶抑制剂(EGFR‐TKI)联合化疗对非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗前后血清胰岛素样生长因子1(IGF‐1)和前梯度蛋白2(AGR2)水平变化的影响,探讨IGF‐1和AGR2能否作为评估NSCLC化疗疗效及预后的指标。方法选取68例晚期NSCLC患者给予EGFR‐TKI联合化疗为试验组,并以30例健康人群为健康对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定化疗前、化疗3周后血清IGF‐1、AGR2水平。采用Kanplan‐Meier法分析血清IGF‐1、AGR2水平变化对预后的影响。结果(1)EGFR‐TKI联合化疗疾病控制率(DCR)为52.9%;(2)试验组治疗前血清 IGF‐1水平为(329.35±88.13)μg/L ,明显高于健康对照组的(146.36±41.27)μg/L(P<0.01),试验组治疗前血清AGR2水平为(16.72±6.23)ng/mL ,高于健康对照组的(4.38±2.17)ng/mL(P<0.01);治疗后血清 IGF‐1为(211.53±52.31)μg/L、AGR2水平为(9.72±3.56)ng/mL ,均比治疗前明显降低(均 P<0.01);NSCLC患者血清IGF‐1与AGR2水平呈正相关(r=0.489,P<0.01);(3)治疗有效组患者血清 IGF‐1水平为(128.62±48.24)μg/L、AGR2水平为(7.22±4.27)ng/mL ,分别较治疗前 IGF‐1[(334.23±82.11)μg/L]、AGR2[(18.43±6.17)ng/mL]明显下降(均 P<0.01)。Kanplan‐Meier分析显示,治疗后血清IGF‐1、AGR2水平的高低对预后有明显影响。结论 IGF‐1、AGR2水平在评估EGFR‐TKI联合化疗对晚期NSCLC的疗效及预后有着潜在的临床价值。
作者:岳红红;赵亮;姜威 刊期: 2016年第23期
目的:探讨还原型谷胱甘肽(G S H )联合早期护理干预对新生儿黄疸的治疗效果及对脂质过氧化指标血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和氧化型谷胱甘肽(GSH‐PX)水平的影响。方法选取新生儿黄疸患儿68例,随机分为观察组(34例)和常规组(34)例。另选取同时期出生的健康足月新生儿20例为健康对照组。观察组在常规组基础上加用GSH治疗及早期护理干预。检测治疗前后血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、MDA、SOD、GSH‐Px水平。结果观察组的治疗总有效率为91.2%,明显高于常规组(73.5%)(P<0.05);治疗后,两组患儿血清 TBIL、DBIL 水平均较治疗前明显下降(均 P<0.01),且观察组治疗后TBIL、DBIL水平明显低于常规组(均 P<0.01)。治疗前,两组患儿血清MDA水平明显高于健康对照组(均P<0.01),两组SOD、GSH‐Px水平明显低于健康对照组(均 P<0.01);治疗后,两组患儿血清MDA水平明显下降(P<0.01或0.05),而血清SOD、GSH‐Px则明显升高(P<0.01或0.05);与常规组比较,观察组血清MDA 水平下降更明显(P<0.05), GSH‐Px水平明显增高(P<0.05)。结论 GSH联合早期护理干预对新生儿黄疸具有较好的临床疗效,且能有效降低患儿血清TBIL、DBIL、MDA水平,提高SOD、GSH‐Px水平,具有积极的临床意义。
作者:刘小姣;李堰松 刊期: 2016年第23期
目的:分析苏州吴江地区儿童呼吸道病毒感染情况。方法回顾性分析吴江区第一人民医院2013年1月至2015年12月入住儿科的行呼吸道病毒检测的肺炎、上呼吸道感染、毛细支气管炎、支气管炎患儿589例,男392例、女179例,年龄0.5~11岁。结果在性别的比较中男性送检阳性率为45.66%;女性送检阳性率为38.07%,差异有统计学意义( P<0.01);<1岁组阳性率52.72%;1~3岁组阳性率33.33%;>3岁组阳性率16.16%,各组阳性率比较差异有统计学意义(χ2=1012.654, P<0.01);本研究所纳入的肺炎、上呼吸道感染、毛细支气管炎、支气管炎4种疾病的阳性率分别为39.44%、30.18%、71.96%、32.65%,毛细支气管炎的阳性检出率高;4个季节的病毒阳性率分别为春季(3~5月),阳性率46.45%;夏季(6~8月),阳性率28.14%;秋季(9~11月),阳性率27.01%;冬季(12~次年2月),阳性率66.04%,差异有统计学意义(χ2=1072.252,P<0.01)。结论呼吸道病毒感染与性别、季节、年龄和各病种有着密切的关系。
作者:钮文思;卫志奇;陆静芬;沈昊 刊期: 2016年第23期
目的:探讨2011~2015年海军总医院肺炎克雷伯菌的临床分布情况及耐药性变迁,为临床用药提供参考依据。方法选取海军总医院2011~2015年临床分离出的肺炎克雷伯菌,分析其检出率、科室分布情况、标本来源、抗菌药物耐药性及对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的变化趋势。结果2011~2015年肺炎克雷伯菌的检出株数和分离率呈逐年上升趋势,标本主要来源于重症监护室、高压氧科、呼吸内科、放射肿瘤科、肾脏病科等10个科室,其中高压氧科检出率高,其次是呼吸内科、重症监护室;送检标本以痰液和尿液为主,分别占送检标本的59.7%和21.4%;2011~2015年肺炎克雷伯菌耐药性呈逐年上升趋势。该菌对哌拉西林、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦和头孢呋辛酯耐药率较高,对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南和妥布霉素的耐药率较低;对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药率逐年不断上升,泛耐药肺炎克雷伯菌呈快速上升趋势。结论肺炎克雷伯菌耐药现象严重,尤其耐碳青霉烯类抗菌药物的肺炎克雷伯菌近年来明显增加,应加强对其耐药性监测,指导临床合理用药。
作者:钱扬会;李小乐;李艳君;郝秀红;丁毅伟;丁赔赔;王娇贤;赵强元 刊期: 2016年第23期