肖传宇;马兵兵;汪春林
目的 评价自主研发的荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体用于快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的效果.方法 将狂犬病病毒核蛋白的一段线性表位肽与KLH耦联后免疫Balb/c小鼠制备的高效价单克隆抗体抗-RVNP-Mcl,经浓缩、纯化、异硫氰酸荧光素(FITC)标记用于RFFIT检测,以Millipore公司DFA5100为对照试剂,对200例人血清进行平行RFFIT检测,将结果进行统计学分析.结果 两种抗体检测结果的线性相关分析显示相关系数(r)=0.980;两种抗体检测定性结果一致率为96.83%,卡方检验显示两种抗体检测定性结果差异无统计学意义(χ2 =0.098,P>0.05),发生定性结果不一致的6例(3.00%)血清两种抗体检测结果均小于1 IU/mL;68例两种抗体检测结果均小于或等于1 IU/mL的血清样品中有6例(8.82%)发生结果定性不一致,其余样品均未发生不一致的情况.结论 使用荧光标记抗-RVNP-Mcl与DFA5100进行RFFIT检测时结果高度一致,荧光标记抗-RVNP-Mc1可供RFFIT检测使用.
作者:吕新军;马学军 刊期: 2011年第07期
目的 对该地区149例抗-HCV和HCV核酸定量检测的结果进行分析.方法 血清标本同时以酶联免疫吸附法检测抗-HCV和荧光定量PCR法检测HCV RNA.结果 在149例标本中,抗-HCV阳性率为70.47%(105/149),HCV RNA的阳性率为59.73%(89/149).结论 荧光PCR检测HCV RNA可以直接反映体内丙型肝炎病毒(HCV)的活动性和复制情况,优于抗-HCV对HCV感染检测的准确性,有利于抗病毒治疗的疗效观察.
作者:党民芳;邢方 刊期: 2011年第07期
目的 对产CMY型AmpC酶费劳地枸橼酸杆菌进行耐药表型及分子学特性进行研究,探讨研制新的酶抑制剂.方法 对临床分离的两株费劳地枸橼酸杆菌所产CMY型AmpC酶用纸片扩散法、三相水解试验进行耐药表型检测,以该菌总基因组DNA和质粒DNA为模板进行PCR扩增、序列分析、质粒接合试验、构建重组表达载体及AmpC酶检测.结果 两株菌株对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖苷类抗生素均表现为耐药,对呋喃类和碳青霉烯类表现为敏感;三相水解试验结果显示该菌能水解头孢西丁;PCR扩增出大小为1 146 bp的基因片段,与GenBank上多种CMY亚型的基因序列同源性为97%;质粒接合试验证实质粒上含CMY基因,为可转移质粒.结论 两株菌株所产CMY型AmpC酶为新的CMY型头孢菌素酶,它介导了该菌对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类等抗生素耐药,其耐药性能水平传播.
作者:张晓坤;徐韫健;廖伟娇;张东梅;张丽梅 刊期: 2011年第07期
目的 了解金黄色葡萄球菌(SA)的分离率及耐药现状,为临床提供诊疗依据.方法 采用K-B纸片法进行药敏试验,采用头孢西林纸片法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)鉴定.结果 本组233株SA在呼吸道标本检出率高,在脓液中第2.MRSA对抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA).结论 应加强对患者医院感染好发部位的监测与护理,即使在二级医院的临床微生物室也务必常规开展MRSA的检测工作.
作者:吕卫东;张平安 刊期: 2011年第07期
目的 探讨胸水中白介素-18(IL-18)、腺苷脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)联合检测对胸水鉴别诊断的价值.方法 检测127例不同病因引起胸水的患者IL-18、ADA和CEA浓度.结果 结核组IL-18和ADA平均含量分别为(619.7±186.8)ng/L和(53.1±23.4)U/L,显著高于恶性组,差异有统计学意义(P<0.05);恶性组CEA平均水平为(38.63±18.55)U/L,显著高于结核组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 胸水中IL-18、ADA和CEA的联合检测对鉴别结核性与恶性胸水有重要价值.
作者:熊军;龙聪;郭辉;周铭 刊期: 2011年第07期
成纤维母细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)是近年来被证实的调节机体血磷稳定的因子.作为一种分泌性蛋白质,主要有骨细胞产生,作用于肾脏对磷的重吸收而有效地维持血磷的稳定,同时还参与骨的矿化和分化等.FGF23过多或过少都将破坏血磷的稳定性,从而引发多种疾病.现就FGF23相关研究进展作一综述.
作者:庄兴 刊期: 2011年第07期
目的 比较不同检测方法检测心肌标志物的结果.方法 用定性、定量方法检测胸痛患者心肌标志物及确诊心肌梗死(AMI )患者胸痛后1、3、7 d心肌标志物,并对结果进行比较.结果 60例AMI患者首次检测结果定性、定量差异不显著,第1、3、7天定量结果显示,肌酸激酶同工酶(CK-MB)出现明显降低,血清心肌肌钙蛋白I (cTnI)结果也呈一定下降,但不明显,定性结果变化无显著意义;150例胸痛患者其中被确诊为AMI的患者31例,定量结果较定性结果更敏感,特异性较差,但对诊断的比较无显著意义.结论 对可疑胸痛患者入院筛查宜选取用定量法检测,定性方法可协助进行确诊,但对已确诊患者作疗效及愈后观察应选用定量检测.
作者:李祥坤;赵芬;陈小东 刊期: 2011年第07期
目的 使用新的乳汁前处理方法对乳汁中的HBV DNA含量进行检测,提高乳汁中HBV DNA的检出率,以期评价该方法的准确性及有效性.方法 应用Microcon YM 100超滤柱法与传统的提取方法提取乳汁中的DNA,通过实时荧光定量法检测HBV DNA,比较两种方法对乳汁中HBV DNA的检出率.结果 在50例乳汁样本中,使用超滤柱法检出HBV DNA阳性的样本共40例,阳性率达到80%,而使用传统方法共检出30例,阳性率只有60%;比较两种方法检出HBV DNA的拷贝数,P<0.05,差异有统计学意义.结论 使用超滤柱法提取乳汁中的HBV DNA能提高乳汁中的HBV检出率,对于指导临床科学的母乳喂养提供可靠的实验室依据.
作者:李国玉;陈勇;陈金弟;李静梅 刊期: 2011年第07期
目的 探讨乙二胺四乙酸三钾(EDTA-K3)引起血小板(PLT)聚集原因以及采取的相应措施.方法 对3例典型EDTA 依赖性血小板假性减少(PTCP)患者采用XE-2100血液分析仪,观察不同抗凝剂(EDTA-K3、枸橼酸钠及肝素锂)在不同时间段测定血小板的变化.结果 (1)3例典型EDTA-PTCP患者均显示在仪器旁,即刻检测血小板3种抗凝剂均可,且结果相近,超过30 min后,EDTA-K3抗凝下降明显,而枸橼酸钠与肝素锂抗凝血对血小板也有不同程度的影响.(2)仪器异常直方图和散点图提示血小板的异常凝集.(3)新鲜血涂片与EDTA-K3抗凝血对比显示血小板的大片聚集.结论 EDTA-PTCP患者采取机前即刻检测结果比较可靠,更换枸橼酸钠与肝素锂抗凝剂的方法不作首选.结合临床症状、血常规直方图与散点图及周围血涂片,避免对EDTA-PTCP患者的误诊误治.
作者:张静;韩志梅 刊期: 2011年第07期
泡囊短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis,BV)又名泡囊假单胞菌,通常存在于土壤、河流等自然界中,极少引起人类感染[1].脑脊液中检出该菌的文献报道很少,现报道如下.
作者:肖传宇;马兵兵;汪春林 刊期: 2011年第07期
2010年4月14日,青海玉树地区发生里氏7.2级地震,为了解伤员的总体机体状态,进行了血常规、生化指标的检测及甲型肝炎抗体、丙型肝炎抗体、乙型肝炎三系统、梅毒螺旋体抗体初筛实验,现将检测结果分析如下.
作者:梁勤;乔登嫣;柳渊洁 刊期: 2011年第07期
目的 研究乳酸脱氢酶参考测量程序溶液配制过程中起始液加β-NAD锂盐或氢氧化锂两种方法的性能差异.方法 用RELA 2009样本和有证参考物质对两种方法进行测量正确度验证;将两种起始液置于37 ℃中水浴孵育,观察在指定时间点的测量结果,分析两者间可能存在的特性差异;参照CLSI的EP9-A2文件,对两种方法及迈克检测方法进行一系列相关性分析.结果 上述两种方法测定RELA 2009样本和有证参考物质的相对偏倚均小于1.00%;37 ℃水浴条件下,加β-NAD锂盐的起始液随着孵育时间的延长,测定结果逐渐降低,而加氢氧化锂的起始液测定结果则与之相反;两种方法相关性分析结果为:Y=0.997 4X-2.651 2(r2=0.999 9).结论 乳酸脱氢酶参考测量程序溶液配制过程中起始液加β-NAD锂盐或氢氧化锂,两种方法性能不存在明显差异,同时也初步验证了迈克试剂量值溯源的有效性.
作者:孙可其;杨涛;吕磊 刊期: 2011年第07期
目的 了解并评价该地区不同年龄、不同性别儿童血铅的分布,为临床预防和诊断提供依据.方法 对门诊儿保科进行微量元素检测的1 030例1个月至14岁儿童血铅水平进行回顾性统计分析.结果 随着年龄的增长,血铅水平有上升趋势,并且男性血铅平均水平高于女性,同时对各个年龄组、同年龄组中男、女性血铅水平分别进行多样本均数的多重比较.结果 显示,4~9岁与1个月至3岁组差异有统计学意义(P<0.01),4~9岁组与10~14岁组差异无统计学意义(P>0.05),10~14岁组与1个月至3岁组差异有统计学意义(P<0.01);1个月至3岁组男、女性间差异有统计学意义(P<0.05),4~9岁组男、女性差异有统计学意义(P<0.01),10~14岁组男、女性间差异无统计学意义(P>0.05).结论 铜川地区儿童高血铅发生率较低.不同年龄、不同性别间血铅水平有差异,4~9岁组血铅平均水平高.
作者:张碧莹 刊期: 2011年第07期
目的 探讨血清胱抑素C(CysC)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)检测对早期诊断糖尿病肾病的临床意义.方法 应用全自动生化分析仪,采用免疫比浊法对120例健康体检者、110例糖尿病患者进行CysC和hs-CRP浓度测定,同时用酶法检测血肌酐(Scr)和尿素(Urea)的浓度.结果 单纯糖尿病组(SDM)和糖尿病肾病组(DN)的CysC和hs-CRP浓度显著高于健康对照组(P<0.01).SDM组Scr和Urea浓度与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05),DN组Scr和Urea浓度与健康对照组差异有统计学意义(P<0.01).结论 CysC和hs-CRP联合检测对糖尿病肾病的发生和病情的监测有重要临床价值.
作者:张剑波;龚国富 刊期: 2011年第07期
目的 建立本教研室纳米金侧流免疫快速检测试纸研发的技术平台.方法 通过柠檬酸三钠还原法制备纳米金颗粒.以免疫纳米金(A520-A580)为纵坐标,相应的金标记参数(pH值、抗体量)为横坐标绘制曲线,曲线拐点为选择参数.标记缓冲体系的选择主要依据标记过程中纳米金聚沉与否确定.根据免疫金的释放程度和速度,选择合适的硝酸纤维素膜和作为结合垫和样品垫的玻璃纤维素膜、结合垫及样品垫预处理液配方.依据点加抗体的硝酸纤维素膜和结合垫在不同条件下干燥后组装试纸,免疫金的释放程度和速度确定干燥条件.组装试纸检测临床血清标本,比较与ELISA检测法的阳性符合率.结果 成功制备了40 nm的纳米金.甲胎蛋白(AFP)抗体Ⅰ适标记pH值为8.5,适抗体标记量为78 mg/mL纳米金,标记缓冲体系为pH值8.5 10mM Tris-HCl溶液.硝酸纤维素膜为whatman Immunopore RP,以玻璃纤维素膜Ahlstrom8964作为结合垫和样品垫.结合垫选择pH值8.5的处理液预处理,样品垫选择pH值9.5的处理液预处理.硝酸纤维素膜封闭洗涤后在26 ℃湿度26%条件下干燥1 h,结合垫在26 ℃湿度26%条件下干燥2 h.当AFP含量大于10 ng/mL时,组装试纸检测临床血清标本的阳性检出率与ELISA法符合率为100%.结论 成功建立了本组纳米金侧流免疫快速检测试纸研发的技术平台,适用于病原微生物感染及肿瘤特异性标志物的现场快速检测.
作者:方立超;程平;蒋丽莉;黄辉;李艳;贺娟;邓均;郑峻松;桂忆南;杨聚 刊期: 2011年第07期
目的 探讨健康者凝血混合血浆的制备、稳定性和精密度,能否作为日常凝血室内质控物.方法 采集门诊健康者20例(男、女各半),制作混合血浆,分装于塑料小离心管,每支约0.3 mL,置-20 ℃低温冰箱速冻备用.每天从冷冻冰箱取出1支速溶后,同时复溶1瓶进口正常水平凝血质控物,随同当日凝血标本检测,记录每日结果.结果 PT、TT在22 d后,凝固时间延长,APTT延长更明显.以22 d为周期自制混合血浆,分别计算出正常混合血浆5个月的PT、APTT、TT均值、标准差、变异系数,结果以第1个月的均值、标准差、变异系数作为靶值,差异均无统计学意义(P>0.05),月CV值小于5%.结论 自制质控血浆保存在-20 ℃时,凝血3项在一定保存时间内相对稳定,可用于日常凝血室内质控,有效期22 d.
作者:李曼辉;杨宇勤;姚元超 刊期: 2011年第07期
目的 探讨恶性肿瘤患者血液纤溶酶原激活剂与抑制剂检测的临床应用价值.方法 检测156例恶性肿瘤患者血液纤溶酶原激活剂(t-PA)、纤溶酶原抑制剂(PAI-1)活性变化,对检测数据进行统计学分析.结果 不同类型的恶性肿瘤患者t-PA及PAI-1与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).应用全自动血凝仪底物发光法检测恶性肿瘤患者纤溶活性变化具有敏感性、特异性、准确性高的优点.结论 检测t-PA及PAI-1活性变化,从而可判断恶性肿瘤细胞浸润、增殖、转移及出血﹑血栓形成的原因.
作者:闫海润;陈宏娟;金春明;仝连信;黄永存;姜蕾;金大伟;鞠传余 刊期: 2011年第07期
目的 探讨DENND1B基因多态性在儿童哮喘患者中的分布及其与患者血清IgE水平的关系.方法 选取哮喘儿童296例(哮喘组),同期健康体检儿童225例(健康对照组),同时提取外周血基因组DNA,通过高温连接酶检测法(PCR-LDR)检测DENND1B基因rs1747815 、rs1775444、rs1775456位点的基因型.采用免疫散射比浊法检测样本血清总IgE水平.结果 rs1747815位点3组基因型(GG/GA/AA)及rs1775456位点3组基因型(AA/GA/GG)在健康对照组与哮喘组分布频率差异无统计学意义(P>0.05).rs1775444位点3组基因型(CC/TC/TT)在健康对照组与哮喘组分布频率差异有统计学意义(P<0.05),其中,哮喘组3种基因型患者中血清IgE水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论 DENND1B基因多态性与儿童哮喘有一定相关性,但与哮喘患者血清IgE水平无相关性.
作者:李佳;周娟;王娟;蔺丽慧;彭霞;刘亚楠;李莉 刊期: 2011年第07期
干化学分析仪检测尿常规已被普及使用,运用干化学法检测尿液简便、快捷,但干化学法永远不能代替镜检法,显微镜检查仍是尿液有形成份检测的金标准[1],这两种方法各有其优点和局限性.因此干化学法和显微镜检查的符合率越来越受到临床关注.现对尿常规干化学分析仪检测潜血、白细胞与尿沉渣镜检中的红细胞、白细胞符合程度,在高校学生健康人群男、女性间进行检验比较,结果报道如下.
作者:张丽莉 刊期: 2011年第07期
目的 表达SLA和LKM-1并纯化,初步应用于自身免疫性肝炎的临床诊断中.方法 在已构建的CYPIID6、SLA原核表达载体的基础上表达SLA和LKM-1,并采用NI-NTA琼脂糖珠亲和层析的方法纯化,并将纯化后蛋白用于临床自身免疫性肝炎的筛查.结果 经SDS-PAGE分析后,将两个重组质粒在大肠杆菌M15中表达的产物与控菌比较,含目的基因的转化菌在相对分子质量约47.5×103和50×103处各有一条极浓的蛋白带,将含有目的基因的阳性大肠杆菌筛出,并大量培养,可用IPTG诱导表达的即为目的蛋白.表达的融合蛋白需经过鉴定才可继续纯化,以保证纯化后蛋白的纯度,纯化产物经免疫印迹法鉴定具有抗原活性,即可将所得纯化产物用于临床自身免疫性肝炎患者的筛查.结论 表达纯化的SLA和LKM-1蛋白用于临床自身免疫性肝病,可以为临床诊断提供更多帮助.
作者:王莹;王懿 刊期: 2011年第07期