党民芳;邢方
目的 建立本教研室纳米金侧流免疫快速检测试纸研发的技术平台.方法 通过柠檬酸三钠还原法制备纳米金颗粒.以免疫纳米金(A520-A580)为纵坐标,相应的金标记参数(pH值、抗体量)为横坐标绘制曲线,曲线拐点为选择参数.标记缓冲体系的选择主要依据标记过程中纳米金聚沉与否确定.根据免疫金的释放程度和速度,选择合适的硝酸纤维素膜和作为结合垫和样品垫的玻璃纤维素膜、结合垫及样品垫预处理液配方.依据点加抗体的硝酸纤维素膜和结合垫在不同条件下干燥后组装试纸,免疫金的释放程度和速度确定干燥条件.组装试纸检测临床血清标本,比较与ELISA检测法的阳性符合率.结果 成功制备了40 nm的纳米金.甲胎蛋白(AFP)抗体Ⅰ适标记pH值为8.5,适抗体标记量为78 mg/mL纳米金,标记缓冲体系为pH值8.5 10mM Tris-HCl溶液.硝酸纤维素膜为whatman Immunopore RP,以玻璃纤维素膜Ahlstrom8964作为结合垫和样品垫.结合垫选择pH值8.5的处理液预处理,样品垫选择pH值9.5的处理液预处理.硝酸纤维素膜封闭洗涤后在26 ℃湿度26%条件下干燥1 h,结合垫在26 ℃湿度26%条件下干燥2 h.当AFP含量大于10 ng/mL时,组装试纸检测临床血清标本的阳性检出率与ELISA法符合率为100%.结论 成功建立了本组纳米金侧流免疫快速检测试纸研发的技术平台,适用于病原微生物感染及肿瘤特异性标志物的现场快速检测.
作者:方立超;程平;蒋丽莉;黄辉;李艳;贺娟;邓均;郑峻松;桂忆南;杨聚 刊期: 2011年第07期
目的 了解近5年北京地区某三甲医院临床分离的病原菌结构和耐药性变迁,为临床抗感染治疗提供依据.方法 统计分析2005~2009年患者各类标本分离细菌的鉴定及药敏试验结果.结果 5年间该院分离出的病原菌数目逐年增加,病原菌构成以革兰阴性杆菌为主(47.6%~50.0%),革兰阳性球菌(19.7%~20.9%)和真菌(18.1%~19.7%)次之.金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌构成比均有下降趋势,真菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌构成比有上升趋势.药敏结果显示MRSA对常用抗生素高度耐药,仅对万古霉素、呋喃妥因、复方新诺明的耐药率较低;革兰阴性杆菌中,肺炎克雷伯菌对第3代头孢耐药率上升,2009年的耐药率达到高.结论 该院临床感染的病原微生物种类中革兰阳性球菌比例5年间明显下降,院内感染控制较好,但应注意真菌及产ESBLs的肺炎克雷伯菌及鲍曼不动杆菌感染呈上升趋势.
作者:朱静;蒋伟;常东;于勇 刊期: 2011年第07期
目的 研究乳酸脱氢酶参考测量程序溶液配制过程中起始液加β-NAD锂盐或氢氧化锂两种方法的性能差异.方法 用RELA 2009样本和有证参考物质对两种方法进行测量正确度验证;将两种起始液置于37 ℃中水浴孵育,观察在指定时间点的测量结果,分析两者间可能存在的特性差异;参照CLSI的EP9-A2文件,对两种方法及迈克检测方法进行一系列相关性分析.结果 上述两种方法测定RELA 2009样本和有证参考物质的相对偏倚均小于1.00%;37 ℃水浴条件下,加β-NAD锂盐的起始液随着孵育时间的延长,测定结果逐渐降低,而加氢氧化锂的起始液测定结果则与之相反;两种方法相关性分析结果为:Y=0.997 4X-2.651 2(r2=0.999 9).结论 乳酸脱氢酶参考测量程序溶液配制过程中起始液加β-NAD锂盐或氢氧化锂,两种方法性能不存在明显差异,同时也初步验证了迈克试剂量值溯源的有效性.
作者:孙可其;杨涛;吕磊 刊期: 2011年第07期
目的 对该地区149例抗-HCV和HCV核酸定量检测的结果进行分析.方法 血清标本同时以酶联免疫吸附法检测抗-HCV和荧光定量PCR法检测HCV RNA.结果 在149例标本中,抗-HCV阳性率为70.47%(105/149),HCV RNA的阳性率为59.73%(89/149).结论 荧光PCR检测HCV RNA可以直接反映体内丙型肝炎病毒(HCV)的活动性和复制情况,优于抗-HCV对HCV感染检测的准确性,有利于抗病毒治疗的疗效观察.
作者:党民芳;邢方 刊期: 2011年第07期
目的 探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化以及与胰岛素抵抗(IR)之间的关系.方法 检测35例正常糖耐量孕妇(NGT)组、32例妊娠期糖耐量受损孕妇(IGGT)组及32例妊娠糖尿病孕妇(GDM)组血清hs-CRP、TNF-α水平,并用稳态模型分析法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果 GDM组hs-CRP、TNF-α、HOMA-IR均高于IGGT组和NGT组,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关分析显示,hs-CRP、TNF-α与HOMA-IR呈显著相关性(r=0.282,P<0.01;r=0.461,P<0.01).结论 血清hs-CRP、TNF-α升高与GDM患者胰岛素抵抗关系密切,是GDM发生、发展的重要影响因素.
作者:王慧;罗炜;廖伟娇;刘汉欣;向波;范婷婷 刊期: 2011年第07期
干化学分析仪检测尿常规已被普及使用,运用干化学法检测尿液简便、快捷,但干化学法永远不能代替镜检法,显微镜检查仍是尿液有形成份检测的金标准[1],这两种方法各有其优点和局限性.因此干化学法和显微镜检查的符合率越来越受到临床关注.现对尿常规干化学分析仪检测潜血、白细胞与尿沉渣镜检中的红细胞、白细胞符合程度,在高校学生健康人群男、女性间进行检验比较,结果报道如下.
作者:张丽莉 刊期: 2011年第07期
目的 了解泌尿生殖道支原体感染情况及对抗生素的耐药性.方法 对可疑非淋菌性尿道炎患者139例泌尿生殖道分泌物标本进行支原体培养及药敏试验.结果 支原体培养阳性率为56.8%.其中解脲脲原体(Uu)检出率高,为52.5%;人型支原体(Mh)检出率较低,为1.4%;Uu合并Mh感染检出率为2.9%.阳性标本中,21~40岁年龄段百分率高,占97.5%.药敏结果显示,支原体对环丙沙星、氧氟沙星耐药率高,达96.2%;对多西环素耐药率低,为3.8%、交沙霉素、普那霉素、四环素、克拉霉素、阿奇霉素、红霉素的耐药率分别为5.1%、5.1%、10.1%、17.7%、31.5%、29.1%.结论 Uu对喹诺酮类药物已产生严重耐药,临床应限制使用,临床医生应根据药敏结果合理使用抗生素.
作者:王红;叶嗣颖;刘小燕 刊期: 2011年第07期
目的 探讨甘露糖结合蛋白(MBP)基因多态性及HBV基因型与慢性乙型肝炎(HBV)进展的关系.方法 采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对360例慢性HBV感染者[其中66例无症状HBV携带者组(ASC组)、182例慢性乙型肝炎患者组(CH组)、112例肝硬化患者组(LC组)和65例对照组]的MBP基因第54号密码子多态性和HBV基因分型进行检测.结果 ASC组和轻、中型CH组均以B基因型占优势,MBP基因GGC/GAC基因型频率和GAC等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);重型CH组、代偿期LC组、失代偿期LC组均以C基因型占优势,MBP基因GGC/GAC基因型频率和GAC等位基因频率显著高于对照组(P<0.05),其中失代偿期LC组突变率高(37.7%).结论 该地区乙型肝炎人群以B和C基因型为主;MBP基因第54号密码子突变与HBV感染的慢性化无明显关系,而与HBV C基因型及慢性HBV感染者的肝病进展有关.
作者:高建平;郑瑞丹;朱青川;林震群;洪伍华;李庆端;陈哲;蔡秀珍 刊期: 2011年第07期
目的 探讨医院检验科实验室用水的构建方法.方法 依次采用机械过滤、活性碳过滤、水质软化、脱气、反渗透(RO)、电去离子(EDI)、紫外杀菌、超滤等水处理技术,结合自动监控系统和回流设计,构建超纯水制备系统.结果 水质监测电阻率达17.0~17.5 MΩ/cm,微生物数达0~6 CFU/mL,后期投入少,保养简单.结论 合理利用各种水处理技术,充分考虑实验需求,能够构建成理想的实验室用水系统.
作者:程涌江;李丽;陈海鸣 刊期: 2011年第07期
反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)是指育龄女性连续3次或3次以上都是妊娠在28周以前、胎儿体重在1 000 g以下,胚胎自动停止发育而流产.其发病机制复杂,涉及常见的遗传、免疫、感染、生殖系统和内分泌异常等多种因素.其中30%~70%与免疫因素有关, 国内外临床文献有相关报道[1-10].
作者:陈秀莲;何明娟;吴春红;杨生宙;林丽琴 刊期: 2011年第07期
目的 评价定位显色培养基在细菌快速初步鉴定中的作用.方法 将3 313株临床菌株和145株室间质评菌株点种于定位显色培养基上,观察显色特点,总结细菌显色规律.结果 不同种属的细菌在定位显色培养基上具有一定的显色规律.结论 定位显色培养基对细菌的快速初步推测和鉴定具有重要的应用价值,具有成本低廉、有助于提高工作效率等优势,值得推广应用.
作者:杨自副;陈默蕊 刊期: 2011年第07期
目的 研究干化学试剂和微型光谱仪技术快速检测氯离子的方法.方法 将所配制的电解质氯离子液体试剂冻干于微型光谱仪配套的检测杯中,运用冷冻干燥机真空抽干,制备成干粉状试剂,封存备用.测定时,在配制好的干试剂检测杯中加入标本和稀释液后,放入微型光谱仪的检测卡槽中,经微型光谱仪的磁力搅拌系统混匀,经加热系统孵育后,运用速率法的反应原理,于405 nm处进行氯离子的吸光度(A)值检测.并对试剂的性能进行评价,将结果进行统计学分析.结果 该指标线性范围为40~160 mmol/L,冻干后90 d内反应稳定性良好.其批内变异系数(CV)<4%,批间CV<5%,回收率为96.5%~104.4%.当血清内胆红素(TB)<280.0 μmol/L以及三酰甘油(TG)<12.0 mmol/L时,结果未见明显干扰.结果显示,与全自动生化分析仪具有良好的相关性(r=0.976 9).结论 以微型光谱仪干试剂法测定电解质氯离子结果准确可靠,检测过程简便,可用眼直接观察颜色变化,避免漏检且仪器试剂携带方便,符合战地救治、基层医疗的需要.
作者:吴杰红;傅灵媛;张志伦;蒲晓允 刊期: 2011年第07期
目前,中国还没有输血医学教育的高等专业学科,输血科的实习学生主要来自于医学检验系、临床医学系两部分.输血科的知识和技能主要靠从实践工作中获得,输血科的专业性和系统性较为专一,在实际输血医学工作中,大部分从业人员从事的是简单、机械、重复性工作.
作者:滕本秀 刊期: 2011年第07期
泡囊短波单胞菌(Brevundimonas vesicularis,BV)又名泡囊假单胞菌,通常存在于土壤、河流等自然界中,极少引起人类感染[1].脑脊液中检出该菌的文献报道很少,现报道如下.
作者:肖传宇;马兵兵;汪春林 刊期: 2011年第07期
目的 探讨健康者凝血混合血浆的制备、稳定性和精密度,能否作为日常凝血室内质控物.方法 采集门诊健康者20例(男、女各半),制作混合血浆,分装于塑料小离心管,每支约0.3 mL,置-20 ℃低温冰箱速冻备用.每天从冷冻冰箱取出1支速溶后,同时复溶1瓶进口正常水平凝血质控物,随同当日凝血标本检测,记录每日结果.结果 PT、TT在22 d后,凝固时间延长,APTT延长更明显.以22 d为周期自制混合血浆,分别计算出正常混合血浆5个月的PT、APTT、TT均值、标准差、变异系数,结果以第1个月的均值、标准差、变异系数作为靶值,差异均无统计学意义(P>0.05),月CV值小于5%.结论 自制质控血浆保存在-20 ℃时,凝血3项在一定保存时间内相对稳定,可用于日常凝血室内质控,有效期22 d.
作者:李曼辉;杨宇勤;姚元超 刊期: 2011年第07期
目的 探讨胸腹水常规细胞形态学检查对胸腹水细胞良、恶性诊断的价值.方法 对301例胸腹水患者进行常规有核细胞计数时见到体积较大细胞的76例胸腹水,离心涂片后,用瑞氏染色进行细胞形态学镜检.结果 76例胸腹水中,53例可检出恶性细胞,后经病理、临床和其他方法证实58例胸腹水为恶性肿瘤性积液,诊断符合率为91%(53/58).结论 胸腹水有核细胞计数中细胞形态学检查十分重要,对良、恶性胸腹水的鉴别诊断有较高的特异性和较好的灵敏度.
作者:王莹莹 刊期: 2011年第07期
目的 研究血清胱抑素C(CysC)水平检测在一氧化碳中毒迟发性脑病(DEACMP)中的临床意义.方法 DEACMP患者53例为DEACMP组,经历一氧化碳中毒(ACMP)但未出现DEACMP的患者30例为ACMP组,另选择健康体检者30例为健康对照组.CysC采用乳胶颗粒增强免疫透射比浊法进行检测.结果 在急性一氧化碳中毒发生时,血清CysC水平在DEACMP、ACMP组较健康对照组均明显增高(P<0.01);DEACMP组与ACMP组比较差异无统计学意义.在治疗后,DEACMP组在假愈期后血清CysC仍然保持较高的水平,而ACMP组基本恢复至健康对照组水平.并且DEACMP组治疗后痊愈的患者血清CysC水平基本恢复到正常水平(0.85±0.11)mg/L.治疗后疗效为好转的患者血清CysC为(1.33±0.16)mg/L,仍高于正常水平;治疗后无效的患者血清CysC仍保持较高的水平(1.89±0.21)mg/L,血清CysC水平与DEACMP的疗效呈正相关,(r=0.306,P<0.01).结论 血清CysC检测有助于预测DEACMP的发生,并且与DEACMP的预后有关,经治疗后患者血清CysC水平恢复到正常水平者预后较好.
作者:姜梅;魏金凤;李娜 刊期: 2011年第07期
2010年4月14日,青海玉树地区发生里氏7.2级地震,为了解伤员的总体机体状态,进行了血常规、生化指标的检测及甲型肝炎抗体、丙型肝炎抗体、乙型肝炎三系统、梅毒螺旋体抗体初筛实验,现将检测结果分析如下.
作者:梁勤;乔登嫣;柳渊洁 刊期: 2011年第07期
目的 探讨DENND1B基因多态性在儿童哮喘患者中的分布及其与患者血清IgE水平的关系.方法 选取哮喘儿童296例(哮喘组),同期健康体检儿童225例(健康对照组),同时提取外周血基因组DNA,通过高温连接酶检测法(PCR-LDR)检测DENND1B基因rs1747815 、rs1775444、rs1775456位点的基因型.采用免疫散射比浊法检测样本血清总IgE水平.结果 rs1747815位点3组基因型(GG/GA/AA)及rs1775456位点3组基因型(AA/GA/GG)在健康对照组与哮喘组分布频率差异无统计学意义(P>0.05).rs1775444位点3组基因型(CC/TC/TT)在健康对照组与哮喘组分布频率差异有统计学意义(P<0.05),其中,哮喘组3种基因型患者中血清IgE水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论 DENND1B基因多态性与儿童哮喘有一定相关性,但与哮喘患者血清IgE水平无相关性.
作者:李佳;周娟;王娟;蔺丽慧;彭霞;刘亚楠;李莉 刊期: 2011年第07期
目的 探讨亮氨酸氨基肽酶(LAP)、β2-微球蛋白(β2-MG)在酒精性肝硬化和乙肝肝炎肝硬化患者鉴别诊断中的意义.方法 用Olympus AU5400全自动生化仪检测30例酒精性肝硬化(ALC)患者和72例乙型肝炎肝硬化(HLC)患者血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、r-谷氨酰转肽酶(r-GT)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、β2-微球蛋白(β2-MG),计算AST/ALT比值并对检测结果进行统计学分析.结果 ALC患者血清中的LAP、r-GT活性和AST/ALT比值均高于HLC患者,β2-MG的含量低于HLC患者,差异有统计学意义(P<0.05).LAP、r-GT、AST/ALT比值、β2-MG在ALC患者中的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.727、0.702、0.698和0.685;阳性率分别为75.0%、70.1%、67.8%和68.9%,ALC患者的各项指标的阳性率分别高于HLC患者(P<0.01).结论 LAP和β2-MG在酒精性肝硬化和乙肝肝炎肝硬化患者鉴别诊断中有一定的应用价值.
作者:王忠 刊期: 2011年第07期