学术投稿

实时荧光定量聚合酶链反应技术检测解脲脲原体生物群的研究

董春雷;朱长太

关键词:解脲脲原体, 实时荧光定量聚合酶链反应, 生物群, 检测
摘要:目的 建立解脲脲原体生物群Taqman荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测方法.方法 根据解脲脲原体生物群MBA基因差异,分别设计并合成引物和探针.优化引物和探针浓度及试验条件,并进行试验的灵敏度、特异性和重复性评价.结果 生物1群适缓冲体系:25 μL反应体系中包含2.5 U Taq酶,Mg2+ 2.5 mmol/L,上、下游引物0.1 pmol/L,TaqMan探针0.2 pmol/L,模板DNA 2 μL.生物2群适缓冲体系:25 μL反应体系中包含2.5 U Taq酶,Mg2+2.5 mmol/L,上、下游引物0.2 pmol/L,TaqMan探针0.3 pmol/L,模板DNA 2 μL.PCR反应条件:95 ℃ 2 min;95 ℃ 10 s;55℃(检测荧光信号)20 s,循环40次.该方法线性范围在1.0×102~8 copy/mL之间,检测限达到100~200 copy/mL,特异性达到100%,CV值为2.5%.结论 本研究建立的TaqMan荧光PCR检测解脲脲原体生物群线性范围宽、灵敏度高、特异性及重复性好,能够快速进行解脲脲原体生物群检测.
检验医学与临床杂志相关文献
  • 输卵管血肿扭转坏死误诊卵巢囊肿蒂扭转1例

    作者遇到输卵管血肿扭转坏死误诊卵巢囊肿蒂扭转1例,报道如下.1 临床资料患者,女,32岁,因体检时发现下腹部包块2个月,伴疼痛4 d为主诉,门诊诊断为下腹部包块性质待查:卵巢囊肿蒂扭转或急性盆腔炎,收住妇科.患者2个月前体检时发现下腹部包块,在门诊口服消炎药后症状缓解,近4 d来下腹部疼痛加重,伴肛门坠胀痛,恶心,胃痛.妇科检查:外阴:经产型, 阴道:畅通,宫颈:肥大、无糜烂、内口有一0.5 cm×0.5 cm大小的息肉,宫体:前位,正常大小、活动欠佳、质中,压痛(+),附件:右侧附件区可触及一约7 cm×8 cm大小的包块,质硬,压痛(+)活动正常,左侧附件未触及明显异常.

    作者:惠海英 刊期: 2011年第15期

  • 52例甲型H1N1流行性感冒确诊患者实验室结果分析

    目的 分析52例甲型H1N1流行感冒(简称流感)患者实验室检测指标,探讨其变化特点对甲型H1N1流感诊断及评估病情发展变化的价值.方法 在诊疗中进行血细胞、肝肾功能、无机离子、心肌酶、血糖及血气等实验室指标检测.对检验结果进行回顾性总结和统计学分析.结果 入院时的实验室检查指标血细胞分析中有34.6%的患者白细胞总数下降,其中44.2%的患者中性粒细胞下降,76.9%的患者单核细胞升高;生物化学指标中有28.8%的患者钾离子下降,13.5%的患者乳酸脱氢酶升高,30.8%的患者肌酸激酶升高或明显升高;血气指标中有13.5%的患者氧分压下降,48.1%的患者氧饱和度下降.数据显示部分血细胞及生物化学指标的变化与病毒的感染时间长短有关,病毒感染时间越长,上述指标的变化越大.结论 外周血中的白细胞计数、中性粒细胞及单核细胞百分比和钾离子浓度、肌酸激酶及血气指标,是甲型H1N1流感患者鉴别诊断以及病情进展程度的重要指标,动态观察其变化对患者的病情发展、疗效观察和预后判断等方面有重要的指导价值.

    作者:严芝光;林世锋;姚海东 刊期: 2011年第15期

  • 2005~2009年旬阳县高考学生体检乙型肝炎病毒表面抗原及丙氨酸氨基转移酶筛查分析

    目的 调查分析安康市旬阳县高考学生体检主要指标乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的异常情况,为旬阳县中学生乙型肝炎防治提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附法及酶动力速率法对旬阳县2005~2009年高考学生体检项目HBsAg、ALT进行检测,并对结果进行统计学分析.结果检测14 698名学生中,HBsAg阳性者共896例,阳性率6.10%;其中男生659例,阳性率7.38%,女生237例,阳性率4.11%.结论旬阳县参加高考体检学生HbsAg阳性率低于全国9.8%的水平,男生高于女生,乡镇中学高于县城中学.

    作者:张宏兴;吴涛;杨定坤;刘玢 刊期: 2011年第15期

  • 株洲地区职工健康体检血脂4项水平综合分析

    目的 通过对株洲地区职工健康体检者血脂4项水平的调查,为研究原发性高血压、高脂血症、心脑血管疾病的预防、发生、治疗提供基础的资料.方法 选择株洲各地区职工健康体检成人3 982名,年龄在40~60岁.男2 588例,女1 394例,采用国际标准化方法,对该地区血脂水平进行评价分析,了解血脂水平的变化趋势,并与正常参考值进行比较.结果统计分析显示该地区成人血脂水平整体明显升高,男、女各项指标与国家推荐的正常参考值比较,经t检验,P<0.05,差异均有统计学意义.同性别间不同年龄组进行比较显示不同程度的差异,说明该地区人群的健康状况不理想.结论 随着生活水平的提高,饮食结构,饮食习惯发生改变,工作性质对其健康已经带来影响,该地区职工血脂水平已显著上升.应增强健康意识,合理饮食,改变不良生活方式,将血脂水平控制在合适的范围内,以降低心、脑血管疾病的发生率.

    作者:张新果;何树光 刊期: 2011年第15期

  • 从护理角度分析如何防治白内障术后眼内炎

    目的 从护理角度分析白内障术后眼内炎的原因,并提出相应的防治策略.方法 调查近5年来眼科2 363例白内障患者手术后眼内炎的发生情况.结果 无1例患者发生白内障术后眼内炎.结论 严格执行完善的术前准备,避免术中使用的耗材被污染,正确消毒灭菌,同时严密监测灭菌效果,让患者在相对较好的全身状况下手术.认真做好术前、术后健康教育,严格执行医护人员手卫生要求,是减少白内障术后眼内炎发生的有效措施.

    作者:余时智 刊期: 2011年第15期

  • 亲环素A基因多态性与急性胰腺炎的相关性研究

    目的 探讨亲环素A(cyclophilin A,CyPA)基因BamHⅠ多态性与急性胰腺炎的关系.方法 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析101例急性胰腺炎患者和123名健康对照人群的CyPA基因型及等位基因频率分布状况,同时测定白细胞数、血糖、血清钙离子和尿素氮.结果 两组均存在3种基因型:AA型、AG型和GG型;急性胰腺炎组AA型频率高于对照组,GG型频率低于对照组,基因型构成比有明显差异(χ2=20.206,P<0.05);对照组G等位基因频率高于急性胰腺炎组,两组间等位基因频率有明显差异(χ2=22.364,P<0.05).结论 AA型可能是致急性胰腺炎的危险因素,G等位基因可能具有降低正常人群患急性胰腺炎的作用,CyPA基因多态性可能与急性胰腺炎有相关性.

    作者:符自清;周明黎 刊期: 2011年第15期

  • 临床1021株细菌耐药监测分析

    目的 调查临床感染细菌类型及其耐药趋势.方法 采用湖南天地人生物技术有限公司鉴定卡,采用K-B纸片扩散法,英国Oxoid公司的药物敏感纸片.结果 本院分离的1 021株感染菌前5位依次是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌属.碳青酶烯类、喹诺酮类和氨基糖苷类药对革兰阴性杆菌保持低水平耐药,第一至三代头孢对革兰阴性杆菌高水平耐药,且有上升趋势.结论 通过对细菌耐药性的监测,指导临床合理使用抗菌药物.

    作者:周锋荣 刊期: 2011年第15期

  • 泌尿生殖道支原体感染现状及13种抗生素的药物敏感试验结果分析

    目的 了解泌尿生殖道炎症患者支原体感染状况及其对13种抗菌素的药物敏感试验.方法 采用美国其昌达生物高科技(上海)有限公司的解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)培养鉴定药物敏感试剂盒,对该院442例泌尿生殖道炎症患者做体外支原体培养鉴定及药物敏感试验.结果 442例患者中支原体培养阳性241例,阳性率54.52%;单纯Uu感染204例,单纯Mh感染10例,Uu+Mh混合感染27例,阳性率分别为46.15%、2.26%、6.11%;女性感染率58.05%明显高于男性感染率9.38%(P<0.01).13种抗菌素药物敏感试验结果显示,单纯Uu或Mh感染者对强力霉素、美满霉素、交沙霉素敏感性高(≥92.16%),壮观霉素、克拉霉素、司帕沙星的敏感性其次(52.45%~63.73%),对林可霉素、诺氟沙星的耐药率高(≥90.2%),罗红霉素、环丙沙星、氧氟沙星的耐药率其次(51.96%~80.00%);混合感染者对所有药物的耐药率均超过单纯Uu或Mh感染者,敏感药物中只有强力霉素、美满霉素、交沙霉素的疗效较高.结论 支原体是引起泌尿生殖道炎症患者的重要病原体之一,人群感染率高,临床应重视病原学检查及药物敏感试验,根据药物敏感试验结果合理使用抗生素,减少耐药菌株产生,提高治疗效果.

    作者:沈小健;李君 刊期: 2011年第15期

  • 提高痰涂片检测抗酸杆菌阳性率的体会

    肺结核病是当今全球范围对人类具有威胁性的传染性疾病,是发展中国家的头号传染性疾病杀手.由于肺结核病的生物学性和社会因素以及近几十年来对结核病的忽视,造成全球性的疫情回升.在我国肺结核病是国家重点控制的乙类传染病.建国后党和政府采取多种措施使我国肺结核病发病率呈下降趋势,因近十几年来经济的持续发展及人口的流动性增加,结核病的发病率在逐年增加,部分地区有蔓延趋势.特别是近年来艾滋病毒及艾滋病患者多的地区,肺结核病的发病率与病死率均有大幅增高[1].常规的痰涂片找抗酸杆菌是诊断肺结核病的依据和考核疗效随访病情的重要指标,疑诊肺结核病的患者均应痰涂片或培养[2].

    作者:范辉泽 刊期: 2011年第15期

  • 血清胱抑素C 尿β2-微球蛋白和尿NAG酶在糖尿病早期肾损伤中的意义

    目的 探讨血清胱抑素C(CysC)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG enzymuria)在2型糖尿病早期肾损伤的意义.方法 采用免疫比浊法检测尿液微量清蛋白,比色法测定尿NAG,乳胶增强散射比浊法测定血清胱抑素C、尿β2-MG.根据尿清蛋白排泄率(UAER),将Ⅱ型糖尿病患者71例分成两组,即UAER正常组和微量清蛋白尿组,同健康对照组(n=35),进行组间比较.结果 UAER正常组与健康对照组比较,CysC结果已经升高,阳性率为28.5%,但β2-MG,NAG和健康对照组比较差异无统计学意义.微量清蛋白组CysC阳性率为88.5%,β2-MG阳性率为80.0%,NAG阳性率为65.7%,和健康对照组比较差异有统计学意义.结论 血清胱抑素C和β2-MG和尿NAG酶可反映早期肾损害,且升高的程度与肾损伤的程度成正相关.若联合检测,可提高糖尿病肾损伤的早期检出率.

    作者:陈太金 刊期: 2011年第15期

  • 甲状腺功能亢进患者治疗前后血清脂联素和游离脂肪酸水平的变化

    目的 分析甲状腺功能亢进(简称甲亢)患者治疗前后血清脂联素(adiponectin,ADPN)和游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)水平变化,探讨其与甲亢发生、发展过程中的相关性.方法 对甲亢患者初诊组32例,复诊组32例(经他巴唑治疗时间大于1年),对照组20名(健康体检人群),进行血清ADPN、FFA、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)和糖化血红蛋白(glycolated hemoglobin,GHb)检测分析.结果 (1)血清ADPN和FFA水平:甲亢患者明显高于对照组,且治疗前明显高于治疗后(P<0.05);(2)FBG水平:甲亢患者明显高于对照组(P<0.05),且其治疗前后差异无统计学意义(P>0.05);(3)GHb水平:甲亢患者治疗前后与对照组均差异无统计学意义(P>0.05).结论 (1)甲亢治疗前后ADPN和FFA水平存在差异,甲亢的药物治疗对患者血清ADPN和FFA水平有下调作用,其产生及下降的机制尚有待进一步的研究.(2)检测血清ADPN和FFA水平对甲亢患者的诊断和预后具有重要价值.

    作者:周振忠;王永伦;李传达;袁平宗 刊期: 2011年第15期

  • 精神科护士存在的不安全因素及防范措施

    精神科是一个专门收治精神病患者的科室,精神科患者的病情复杂,瞬息发生变化,随时都有伤害和被伤害发生,对于在精神科工作的护士,特别容易成为患者攻击和伤害的对象,造成躯体的伤害.精神病患者潜在患有其他内科疾病和传染性疾病,护士在诊治的过程中容易感染.高度紧张的工作极易产生不安全的因素,甚至造成自身的职业危害,严重影响到护士的身心健康.本文就针对精神科护士在临床工作中所面临的不安全因素和防范措施做一个简单分析.

    作者:陈华 刊期: 2011年第15期

  • 老年肺结核的临床特点及治疗展望

    近年来,老年人肺结核患病率居高不下,且有逐渐增多的趋势,老年肺结核成为结核病的重要传染源[1].为此,作者就老年人肺结核的流行现状、临床特点、治疗和督导策略等做如下简要分析,为老年结核病防治提供参考[2-3].

    作者:宋关君 刊期: 2011年第15期

  • 梅毒三种检测方法的比较

    目的 比较三种梅毒血清学实验方法的准确性及在临床诊断中的应用价值.方法 应用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测228例血清样本.结果 TRUST、TPPA、ELISA的敏感性分别为85.83%、98.33%、99.17%;特异性为95.37%、99.07%、98.15%.其他两种方法与敏感性、特异性均较好的TPPA比较,TRUST的敏感性和特异性较低,差异具有有统计学意义(P<0.05);ELISA的敏感性和特异性和TPPA比较,差异无统计学意义(P>0.05).ELISA与TRUST敏感性比较,差异有统计学意义(P<0.05),ELISA与TRUST特异性比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 TPPA和ELISA敏感性高、特异性强,是目前用于检测梅毒抗体的首选方法.

    作者:陈辉;魏聪;李媛 刊期: 2011年第15期

  • 四川成都地区2型单纯疱疹病毒检测结果分析

    目的 了解四川成都地区疑有单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染患者的感染情况.方法 用荧光定量(FQ-PCR)法对1 107例疑有HSV-2感染的门诊患者进行检测.结果 (1)1 107例生殖器疱疹疑似患者检测HSV-2阳性患者616例,阳性率为55.65%(616/1107),其中男性患者阳性率47.58%(59/124),女性患者阳性率56.66%(557/983),男性患者与女性患者的发病率比较,差异具有统计学意义(P<0.05).(2)三个年龄段患者,即≤20岁,>20岁~≤40岁,>40岁的阳性率分别为60.34%(70/116)、55.23%(486/880)、54.05%(60/111),三个年龄段患者发病率比较,差异不具有统计学意义(P>0.05).结论 (1)成都地区生殖器疱疹疑似患者中HSV-2感染率高,感染率有性别差异,女性发病率高于男性.(2)不同年龄段发病率差异不具有统计学意义.(3)FQ-PCR具有快速,简便,灵敏度高等优点,适用于临床检测.

    作者:周雪莲;李创;付莉 刊期: 2011年第15期

  • 危重患者常见感染细菌耐药性和耐药基因的检测及分析

    本文对重症监护病房(intensive care unit,ICU)和临床各科危重症患者大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌分离菌株的耐药情况,耐药菌株喹诺酮类耐药基因携带状况,及是否为产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测分析,为指导临床合理应用抗菌药物、有效预防和控制耐药细菌感染提供科学依据.

    作者:刘明霞 刊期: 2011年第15期

  • 小儿肺炎血清降钙素原检测的临床意义

    目的 探讨血清降钙素原检测在小儿肺炎患儿中的临床意义,为临床抗生素的合理使用提供依据.方法 60例肺炎患儿,其中细菌性肺炎32例,病毒性肺炎28例,采用化学发光免疫法测定患儿血清降钙素原含量.结果 细菌性肺炎组患儿血清降钙素原含量为(2.69±0.63)μg/L,而病毒性肺炎组患儿血清降钙素原含量为(0.36±0.12)μg/L,细菌性肺炎组患儿血清降钙素原水平明显高于病毒性肺炎组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 血清降钙素原测定有助于小儿肺炎诊断及鉴别诊断,可作为临床抗生素的使用依据.

    作者:黄华振;钟琼;叶中绿 刊期: 2011年第15期

  • 应用ROC曲线分析RF、CCP及AKA抗体对RA的诊断价值

    目的 探讨类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及抗角蛋白抗体(AKA)对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值.方法 收集149例RA患者,123例其他风湿性疾病患者和50名健康者血清,分别采用颗粒增强散射比浊法测RF、酶联免疫吸附法定量测CCP抗体及间接免疫荧光方法定性测AKA,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析三者及联合检测对RA的诊断价值,并确定其诊断临界点.结果 三种抗体单独检测的阳性率在RA患者组中均显著高于其他风湿性疾病患者和健康对照组(P<0.05),其中RF以400 U/mL临界点时,对RA诊断敏感度和特异度分别59.73%和71.10%,而CCP抗体以60 RU/mL为临界点时,对RA诊断敏感度和特异度分别84.56%和85.55%,AKA诊断敏感度为27.24%,特异度为94.56%.RF、抗CCP抗体、RF与抗CCP抗体联合检测及三者联合检测的曲线下面积分别为0.70、0.88、0.88、0.88.结论 合理确定诊断的临界点,联合检测CCP抗体与RF是诊断RA敏感而特异的指标,AKA则有助于判断疾病的严重及预后.

    作者:朱宗林;张淑花 刊期: 2011年第15期

  • 外周血异型淋巴细胞检测的临床意义

    目的 探讨外周血异型淋巴细胞在各种疾病出现比例的临床意义.方法 采用光学显微镜对8种病毒性感染患者血涂片异型淋巴细胞分型统计.结果 76例中Ⅰ型(空泡型)异型淋巴细胞检出45例(占59.2%),Ⅱ型(不规则型)异型淋巴细胞检出19例(占25%),Ⅲ型(幼稚型)异型淋巴细胞检出12例(占15.8%);同时异型淋巴细胞检出在5%~10%的占48.7%,异型淋巴细胞检出大于10%的占51.3%.结论 外周血异型淋巴细胞检出率以Ⅰ型(空泡型)居多,异型淋巴细胞检出率可提高对各种病毒感染性疾病确诊率.

    作者:覃小梅;刘勇;陆颖 刊期: 2011年第15期

  • 自拟排脓通窍汤治疗慢性鼻-鼻窦炎81例疗效观察

    慢性鼻-鼻窦炎是耳鼻喉科的一种常见病、多发病,属于中医学鼻渊的范畴.尽管目前对其治疗方法很多,但临床仍缺乏特效药物.经过多年临床探索和对文献的梳理研究,拟定出本科治疗慢性鼻-鼻窦炎的协定处方,并运用现代制剂技术制成合剂用于临床,以观察对慢性鼻-鼻窦炎的治疗作用.现将研究结果报道如下.

    作者:吴限远;文清泽;曾玲 刊期: 2011年第15期

检验医学与临床杂志

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主管:重庆市卫生局

主办:重庆市卫生信息中心 重庆市临床检验中心