学术投稿

荜茇酰胺对人肺癌A549/DDP细胞耐药性的逆转作用

钱钧强;孙蓓;房志仲

关键词:荜茇酰胺, 肺癌, 耐药, 顺铂, 细胞, 基因, 逆转
摘要:目的:研究荜茇酰胺对人肺癌A549/顺铂(DDP)细胞耐药性的逆转作用.方法:A549/DDP细胞经0、20、30 μmol/L荜茇酰胺作用48h后,用MTS法检测肿瘤细胞抑制率;流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡、细胞周期、P-糖蛋白(P-gp)表达和肿瘤细胞内罗丹明Rht123含量的变化;Western blotting法检测多药耐药基因(MDR)1、多药耐药相关蛋白(MRP)1、DNA拓扑异构酶(Top)Ⅱ、谷胱甘肽S-转移酶(GST)-π、凋亡抑制蛋白Survivin、周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK)1和蛋白激酶(PK)Cζ蛋白表达;实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MDR1、MRP1、Top-Ⅱ、GST-π、Survivin和CDKl mRNA表达;酶标仪检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、8活性.结果:A549/DDP细胞经0、20、30 μmol/L荜茇酰胺作用48 h后,DDP对肿瘤细胞增殖的抑制率明显升高;与0 μmol/L比较,20、30μmol/L荜茇酰胺作用48 h后,DDP导致的细胞凋亡率和G2期/M期明显升高,P-gp表达明显减弱,Rh-123浓度明显增加,MDR1、MRP1、Top-Ⅱ、GST-π、Survivin、CDK1和PKCζ蛋白表达明显减弱,MDR1、MRP1、Top-Ⅱ、GST-π、Survivin、CDKmRNA表达明显减弱,Caspase-3、8的活性明显增强.结论:荜茇酰胺可逆转人肺癌A549/DDP细胞DDP耐药性,可能与其调节多药耐药相关基因表达有关.
中国药房杂志相关文献
  • 人参多糖的化学结构及其降血糖活性研究进展

    目的:了解人参多糖的化学结构及其降血糖活性的研究情况,为其进一步研究、开发提供参考.方法:通过对国内外关于人参多糖的化学结构及降血糖活性的相关文献进行归纳和总结,对人参多糖的化学结构及降血糖活性进行综述.结果与结论:人参多糖的结构及降血糖活性因分离、纯化的手段不同而表现出明显差异,因此今后应对其分析手段及活性机制进行进一步研究.

    作者:南敏伦;赵昱玮;吕娜;赫玉芳;司学玲;赵全成 刊期: 2014年第47期

  • 山萸肉炮制前后4种环烯醚萜苷类成分的含量变化研究

    目的:研究山萸肉炮制前后4种环烯醚萜苷类成分的含量变化情况.方法:以同一种山萸肉为原料,分别依法炮制,制成酒蒸、酒炖、加压酒蒸萸肉,再采用高效液相色谱法测定各样品中4种环烯醚萜苷类成分的含量.色谱柱为Waters sunfire C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(梯度洗脱),柱温为(30±1)℃,流速为0.8 ml/min,进样量为10 μl,莫诺苷、獐牙菜苷、马钱苷和山茱萸新苷的检测波长分别为240、246、237、219 nm.结果:炮制前,莫诺苷、獐牙菜苷、马钱苷和山茱萸新苷在山萸肉中的含量分别为10.66、0.56、4.90、1.48mg/g,但炮制后4种成分均有不同程度的下降,其中酒炖萸肉中莫诺苷、獐牙菜苷和马钱苷的含量低,加压酒蒸萸肉中山茱萸新苷的含量低.结论:山萸肉炮制后4种环烯醚萜苷类成分的含量均有下降.

    作者:朱敏;刘志辉;姚毅;方祝元 刊期: 2014年第47期

  • 脾阳虚动物模型的生物学标志研究

    目的:总结脾阳虚动物模型的生物学标志,为科研及临床相关工作者提供参考.方法:对近10年有关脾阳虚动物模型生物学标志的文献进行整理,寻找可作为脾阳虚动物模型生物学标志的参考指标.结果:已发现的脾阳虚动物模型的生物学标志主要包括脏器系数、肠道菌群数量、淋巴细胞转化率、睾酮、集落刺激因子、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、肽转运载体1、水通道蛋白3、抗凋亡基因、促凋亡基因、下丘脑胶质原纤维酸性蛋白和Ⅲ型补体受体抗体等.结论:上述生物学标志物可用于衡量中医证型造模是否成功,可把各种中医症状与客观实验指标联系起来,使中医实验研究更加科学严谨、有章可循.

    作者:孙伟越;袁琛皓;董广通;王欣;郭炜 刊期: 2014年第47期

  • HPLC法同时测定补肾通络方中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的含量

    目的:建立同时测定补肾通络方中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为HypersilC18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%醋酸水溶液(35∶65,V/V),检测波长为240 nm(马钱苷)、320 nm(阿魏酸和二苯乙烯苷),柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,进样量为10 μl.结果:马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的质量浓度分别在0.050~2.500(r=0.999 9)、0.005~0.250(r=0.999 9)、0.060~3.000(r=0.999 8)μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;精密度试验的RSD<2%,稳定性、重复性试验的RSD<3%;马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的平均加样回收率分别为98.31% (RSD=1.92%,n=6)、96.33%(RSD=1.91%,n=6)和100.78%(RSD=1.93%,n=6).结论:该方法简单、准确,灵敏度高,可用于补肾通络方的质量控制.

    作者:刘湘丹;黄攀;袁林祥;卢岳华;马铭 刊期: 2014年第47期

  • HPLC-MSn法分析当归乙酸乙酯提取物在大鼠体内的代谢产物

    目的:探讨当归乙酸乙酯提取物的抗凝血活性药效物质及其显效形式.方法:采用高效液相色谱-二极管阵列-电喷雾飞行时间质谱联用(HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn)技术对当归乙酸乙酯提取物的化学成分进行鉴别,并对其在大鼠体内的代谢产物进行分析.色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为28℃,流动相为0.1%甲酸水-甲醇(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm.结果:通过对当归乙酸乙酯提取物的成分进行分析,共指认出22个化合物,其中当归相关研究中首次报道的化合物为4,7-二羟基-3-丁基苯酞;从大鼠含药尿液中共指认出18个化合物,包括原形成分4个,以及当归相关研究中首次报道的代谢产物14个,其中新化合物2个,分别为N,N-4,5-alkene-ligustilide-6/7-O-sulphate和6,7-dihydrosenkyunolideF-9-sulphate-6/7-thiol.结论:该方法能准确、快速地从复杂的生物样品中筛选和鉴定相关代谢产物,可为阐明当归抗凝血活性的药效物质及显效形式(原形、代谢产物或两者兼有)提供化学依据.

    作者:王璐;徐风;刘广学;尚明英;蔡少青 刊期: 2014年第47期

  • RP-HPLC法同时测定羚羊感冒胶囊中5种成分的含量

    目的:建立同时测定羚羊感冒胶囊中绿原酸、牡荆苷、连翘酯苷A、连翘苷和牛蒡苷含量的方法.方法:采用反相高效液相色谱法.色谱柱为Waters Atlantis C18(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,检测波长为280 nm.结果:绿原酸、牡荆苷、连翘酯苷A、连翘苷和牛蒡苷的进样量分别在0.008 2~0.164 0 μg(r=0.999 9)、0.052 8~1.056 0 μg(r=0.999 8)、0.022 7~0.454 0 μg(r=0.999 6)、0.021 4~0.427 0 μg(r=0.999 6)、0.020 6~0.412 0 μg(r=0.999 5)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.00%;平均加样回收率分别为100.81%、99.22%、102.03%、98.55%、99.14%(n均为6).结论:该方法操作简便,结果准确、可靠,可用于羚羊感冒胶囊的质量控制.

    作者:王玉团;许丽丽;林晓;刘群 刊期: 2014年第47期

  • 氯化钠浓度对黄芩幼苗生长情况及生理指标的影响

    目的:探讨氯化钠(NaCl)浓度对黄芩幼苗生长情况及生理指标的影响,为黄芩药材的大田生长提供依据.方法:采用盆栽方式,待黄芩幼苗长至8~11 cm时,用1/2 Hoagland营养液兑加不同剂量的NaCl,模拟盐胁迫环境,培养3d后统计幼苗成活率,并采用紫外-可见分光光度法测定叶绿素和类胡萝卜素的含量,用硫代巴比妥酸法测定丙二醛的含量,用电导法定膜透性.结果:随着NaCl浓度的增大,黄芩幼苗成活率、叶绿素和类胡萝卜素的含量均呈先升后降的趋势,丙二醛含量和相对电导率呈逐渐升高的趋势;其中,NaCl浓度为0.4%时,黄芩幼苗成活率、叶绿素和类胡萝卜素的含量均达到峰值.结论:黄芩幼苗的临界耐盐浓度为0.4%,盐浓度<0.4%时对黄芩幼苗的生长无明显影响,>0.4%时盐害作用较严重.

    作者:郭菊梅;陈红刚;曹瑞;杜弢 刊期: 2014年第47期

  • 陈皮压制饮片的煎煮质量评价

    目的:评价陈皮压制饮片的煎煮质量.方法:采用传统煎煮法,以橙皮苷含量和干膏率为评价指标,考察陈皮压制饮片和普通饮片的煎煮溶出情况及二者在中药复方中的煎煮溶出情况.采用高效液相色谱法测定橙皮苷的含量;采用相似因子f2法比较二者溶出曲线的相似性.结果:在单味饮片和复方的煎煮中,压制饮片的干膏率和橙皮苷含量均高于普通饮片,但差异无统计学意义(P>0.05);f2相似因子比较结果f2=82,表明压制饮片和传统饮片溶出行为相似.结论:陈皮压制饮片不影响陈皮的煎煮溶出效果,且有效成分橙皮苷的含量较高,并具有易于运输、贮藏等优点,符合中药现代化的要求.

    作者:贺宝莹;王聪颖;唐安玲;宋英;李园园 刊期: 2014年第47期

  • 雷公藤甲素对类风湿性关节炎患者外周血T细胞的免疫抑制作用

    目的:研究雷公藤甲素对类风湿性关节炎(RA)患者外周血T细胞免疫功能的抑制作用.方法:在RA患者外周血T细胞中加入T细胞多克隆刺激剂(0.2μg/ml)以活化淋巴细胞并分泌细胞因子.实验分为空白对照(常规培养液)组、抗人CD3抗体(anti-CD3)刺激(0.2 μg/ml)组、雷公藤甲素(anti-CD3 0.2 μg/ml+雷公藤甲素lmmol/ml)组.采用密度梯度离心法分离RA患者的外周血单核细胞(PBMCs),加入雷公藤甲素,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞γ干扰素(IFN-γ)含量,流式细胞仪检测分泌IFN-γ、白细胞介素(IL)-2、IL-4与T细胞活化分子CD69和CD25的CD4+、CD8+T细胞百分比.结果:与anti-CD3刺激组比较,雷公藤甲素组PBMCs中IFN-γ含量减少,分泌IFN-γ、IL-2、IL-4的CD4+、CD8+T细胞百分比降低,分泌CD69和CD25的CD4+、CD8+T细胞百分比降低,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:雷公藤甲素可能通过抑制T细胞活化和细胞因子分泌来发挥免疫抑制作用,从而发挥对RA的临床治疗作用.

    作者:周铭;马丽华;崔颖;谢军 刊期: 2014年第47期

  • HPLC法测定不同产地凤仙花饮片中山奈素的含量

    目的:建立测定不同产地凤仙花饮片中山奈素含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(35∶65,V/V),检测波长为360nm,流速为1.0 ml/min,柱温为40℃,进样量为5μl.结果:山奈素的质量浓度在8.16~81.60 μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 6);精密度、重复性、稳定性试验的RSD<2%;平均加样回收率为99.68%,RSD=1.9%(n=9).结论:湖北宜昌所产的凤仙花饮片中的山奈素含量高.该方法操作简便,结果准确、可靠,可用于凤仙花饮片的质量控制.

    作者:李瑞生;曹军华 刊期: 2014年第47期

  • HPLC法测定白花蛇舌草中槲皮素-3-O-β-d-吡喃葡萄糖苷的含量

    目的:建立测定白花蛇舌草中槲皮素-3-O-β-d-吡喃葡萄糖苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸(60∶40,V/V),检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃.结果:槲皮素-3-O-β-d-吡喃葡萄糖苷的质量浓度在5.24~52.40 μg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<1.97%;平均加样回收率为99.57%,RSD=1.28%(n=6).结论:该方法操作简便,结果准确、可靠,可用于白花蛇舌草药材中黄酮类活性成分的含量测定.

    作者:曹广尚;杨培民;周鹏;李芳 刊期: 2014年第47期

  • 近红外光谱法快速鉴别市售不同厂家生产的藿胆丸

    目的:建立快速鉴别市售不同厂家生产的藿胆丸的方法.方法:采用近红外光谱法.采集7个厂家的藿胆丸样品的近红外光谱,并用判别分析方法和聚类分析方法分别对数据进行分析.结果:聚类分析中,当类间距离为0.64时,K厂家和G厂家样品首先聚为一类,当类间距离为1.84时,其他5个厂家样品自成一类;所建立的判别分析模型错判例数为0,判别分析准确率为100%.结论:所建立的近红外光谱法可以快速、准确、无损地对不同厂家生产的藿胆丸制剂进行定性分析.

    作者:蔡佳良;姬生国 刊期: 2014年第47期

  • 金盏银盘的本草考证

    目的:为金盏银盘的临床应用和对其开展科学研究提供理论依据.方法:通过查阅历代本草文献,对金盏银盘进行名称、原植物、性味及功效的本草考证.结果:金盏银盘的药用品种名称存在一定的混乱,与菊科近缘同属其他植物一并收载于地方性中草药著作中,使其品种质量参差不齐.金盏银盘的药用基源正品为菊科鬼针草属植物三叶鬼针草Bidens pilosa Linn.或金盏银盘B.biternata(Lour.)的干燥全草.结论:应加强对金盏银盘的研究工作,以利更好的开发和利用其植物资源.

    作者:林慧;梅全喜 刊期: 2014年第47期

  • 苦参碱胃内漂浮颗粒的质量标准建立及稳定性考察

    目的:建立苦参碱胃内漂浮颗粒的质量标准,并对其稳定性进行初步考察.方法:采用高效液相色谱法测定制剂中苦参碱的含量.色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(70∶30,V/V;用三乙胺调pH至6.0),检测波长为220 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为5 μl.通过影响因素试验考察制剂的初步稳定性.结果:苦参碱的质量浓度在0.004 95~0.316 8 mg/ml范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 8);精密度、稳定性、加样回收率的RSD<2.0%.3批样品2h/8h释放量分别为标示量的27.82%/82.18%、25.27%/84.21%、26.34%/86.99%;制剂在无包装保护的情况下,于高温(60℃)、强光[(4 500±500)1x]、高湿度[(90±5)%]环境中放置10d不稳定.结论:苦参碱胃内漂浮颗粒制备工艺简单,稳定易控,缓释效果和漂浮性良好,制备的样品符合制剂质量要求;初步稳定性试验结果提示本品应防潮、避光和常温贮藏.

    作者:韦亚洁;谢明全;李平 刊期: 2014年第47期

  • 四生汤联合补中益气汤对脾虚患者胃肠道和免疫功能的影响

    目的:探讨四生汤联合补中益气汤对脾虚患者胃肠道和免疫功能的影响.方法:选择广西中医药大学附属第一医院2012年9月-2013年9月诊断为脾虚证的患者68例,应用四生汤联合补中益气汤进行治疗,1个月为一疗程,观察并比较治疗前、后患者胃肠道及免疫的改善情况.结果:治疗后,患者的胃肠道功能积分较治疗前显著降低;免疫功能指标免疫球蛋白G(IgG)、IgM、IgA水平均较治疗前显著升高,治疗前、后比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:四生汤联合补中益气汤治疗脾虚证,可有效改善患者的胃肠道功能及免疫功能.

    作者:刘薇;朱云中 刊期: 2014年第47期

  • 黄芩素对人肝癌HepG2细胞生长的抑制作用

    目的:研究黄芩素对人肝癌HepG2细胞生长的抑制作用.方法:在培养HepG2细胞的96孔板上加入药物,使黄芩素的终浓度分别为0、20、40、80、160 μmol/L(即对照组与黄芩素①、②、③、④组).采用MTT法检测细胞的存活情况,分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、8、9的活性,并检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果:与对照组比较,培养24、48、72 h时,黄芩素②、③、④组各时间点的吸光度降低;培养24h时,Caspase-3、8、9活性增强,MDA含量增加,SOD、GSH-Px活性减弱,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:黄芩素对HepG2细胞生长具有抑制作用,其机制与增强Caspase-3、8、9活性,增加MDA含量,减弱SOD、GSH-Px活性有关.

    作者:王方 刊期: 2014年第47期

  • 淡豆豉不同制法其成品性状及异黄酮类化学成分含量的比较

    目的:比较古法炮制与现今药典制法的淡豆豉其成品性状及异黄酮类化学成分的含量.方法:采用紫外-可见分光光度法对淡豆豉提取物中的总异黄酮进行含量测定;采用高效液相色谱法对淡豆豉提取物中异黄酮游离苷元(大豆素、染料木素)的含量进行测定.色谱柱为Prevail-C18(250 mm× 10.0 mm,5μm),流动相为乙腈-水-乙酸(35∶64∶1,V/V/V),检测波长为260nm,流速为1.0 ml/min,柱温为25℃,进样量为15 μl.结果:古法炮制的淡豆豉气香,质地柔软,断面为棕褐色,表皮皱缩,总异黄酮含量为4.140mg/g,大豆素含量为1.263 0 mg/g,染料木素含量为1.254mg/g;现今药典制法的淡豆豉气味微弱,质地稍硬,断面为棕黄色,表皮皱缩,总异黄酮含量为3.530 mg/g,大豆素含量为0.349 mg/g,染料木素含量为0.335mg/g.结论:古法炮制淡豆豉与现今药典制法淡豆豉相比,前者成品性状好、大豆异黄酮类含量高,古法炮制有明显优势.

    作者:李刚;梁永红;杨安金;苏明声;朱海针;谢小梅 刊期: 2014年第47期

  • 中药合理用药软件在医院中的应用现状和进展

    目的:为医务人员正确评价中医药处方,开发更全面的用药评价软件提供参考.方法:查阅、整理近年来关于合理用药软件使用方面的文献,归纳总结几种有代表性的中药合理用药软件的特点.结果与结论:目前,国内中药合理使用信息在医院信息系统中尚未得到充分的体现,包含传统中药和现代中药合理用药的软件大都是医院根据自身需求自主研发的,并且只是针对中药合理用药的某一方面,尚不够全面、成熟.因此,还需要中药临床药师在处方点评工作中予以重视,软件开发企业也应尽早开发出更全面的中药合理用药软件.

    作者:张静;马瑛 刊期: 2014年第47期

  • 2010-2012年武汉地区32家医院中药注射剂使用情况分析

    目的:评价武汉地区医院中药注射剂的应用现状,为临床合理使用中药注射剂提供参考.方法:采用世界卫生组织推荐的限定日剂量为指标的分析方法,对武汉地区32家医院2010-2012年中药注射剂的总销售金额、用药频度(DDDs)、日均费用(DDC)等数据进行统计分析.结果:武汉地区32家医院中药注射剂的销售金额呈逐年上升趋势,2010-2012年,年增长率分别为28.51%和36.99%.心脑血管疾病类中药注射剂的销售金额和DDDs连续3年排序稳居首位;抗感染类中药注射剂的品种多数临床疗效较好,价格适中,使用频度较高;部分抗肿瘤类品种因价格较高,限制了其应用范围.结论:中药注射剂已成为该地区医院临床用药的重要组成部分,其销售金额和用量都在快速增长.临床需要在使用中药注射剂的同时,密切关注其安全性问题.

    作者:杜光;吴涛 刊期: 2014年第47期

  • 羟基红花黄色素A联用β-乳香酸对血瘀证模型大鼠凝血功能、NO、cGMP的影响

    目的:研究羟基红花黄色素A(HSYA)联用β-乳香酸(β-BA)对血瘀证模型大鼠凝血功能、一氧化氮(NO)与环磷酸鸟苷(cGMP)的影响.方法:48只SD大鼠随机分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、阿司匹林(100 mg/kg)组、HSYA(100 mg/kg)组、-BA (200 mg/kg)组、联合用药(HSYA 50 mg/kg+β-BA 100 mg/kg)组,每12h灌胃给药1次,连续7次.第5次给药后给予大鼠皮下注射盐酸肾上腺素(0.8 mg/kg)2次,间隔4h,中间给予冰水刺激以复制大鼠急性血瘀证模型.末次给药30 min内取腹主动脉血检测凝血指标和NO、cGMP水平,并取大鼠颈动脉观察其病理变化.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血浆凝血酶时间(TT)、血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)缩短,纤维蛋白原(FIB)含量增加,NO、cGMP水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01);病理切片表明,大鼠颈动脉内皮受损,血管内皮细胞部分从血管壁脱落.与模型组比较,HSYA组、-BA组、联合用药组大鼠血浆TT、PT、APTT延长,FIB含量减少,NO、cGMP含量增加,差异均有统计学意义(P<0.01);大鼠血管内皮受损程度改善,且联合用药较单独用药效果明显.结论:HSYA联用-BA能显著改变血瘀证大鼠的凝血功能,增加血浆NO与cGMP的含量.

    作者:王明明;陈敏纯;李玉文;丁一;张一恺;卫培峰;文爱东 刊期: 2014年第47期

中国药房杂志

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