学术投稿

PKC同工酶研究进展

余刚;罗勇;彭国光;董为伟

关键词:蛋白激酶, 神经内分泌, 蛋白水解酶, 大鼠脑组织, 细胞功能, 细胞变性, 神经递质, 激酶活性, 基因表达, 组蛋白, 限制性, 证明, 塑性, 调节, 凋亡
摘要:蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)是早被确认的蛋白激酶之一;Nishizuka等在1977年首先将大鼠脑组织中的蛋白激酶确认为PKC,发现它具有组蛋白激酶活性,并能被限制性蛋白水解酶所激活。随后的研究证明,PKC在神经细胞功能的调节中(如神经递质的释放、突触塑性、神经内分泌、基因表达、细胞变性及凋亡等)起着较为关键的作用。
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • 精神分裂症患者父母亲神经系统软体征研究

    目的:了解精神分裂症患者父母亲神经系统软体征的发生情况及其与患者之间的关系。方法:对46例精神分裂症及其78位父母亲(实验组)和46例正常健康人的76位父母亲(对照组)分别进行神经系统软体征检查与评定。结果:实验组父母亲神经系统软体征评分及阳性发生率皆明显高于对照组父母亲:精神分裂症患者神经系统软体征评分与其父、母亲的神经系统软体征评分皆呈正相关。结论:支持精神分裂症神经系统软体征与遗传因素有关,具有病因学意义。

    作者:王广新;蒙华庆 刊期: 2001年第01期

  • 高效液相色谱法测定4株肠道杆菌胞内环丙沙星浓度

    目的:建立用反相高效液相色谱法(HPLC)测定肠道杆菌胞内药物浓度的方法。方法:将待测肠道杆菌与环丙沙星在37℃振荡温育,不同时段各取出1ml菌液超声裂解,取上清以HPLC法测定浓度,以ODS-C18作固定相,流动相组成为甲醇/0.008M磷酸缓冲液/四丁基溴化铵(25:75:v/v/v),荧光检测激发波长278nm,发射波长445nm。结果:低检出限0.06mg/L,线性范围0.154~12.5mg/L,r=0.9997,日内精密度2.66%,日间精密度4.15%。摄取曲线表明各菌株在10min处达大峰浓度。结论:高效液相色谱法测定细菌胞内药物浓度能更好的避免干扰,准确检测药物浓度,可用于氟喹诺酮类药物耐药机制的研究。

    作者:贾蓓;钱元恕;来晓云 刊期: 2001年第01期

  • 心脏不停跳及浅低温体外循环下心瓣膜替换术40例报告

    目的:对心脏不停跳、浅低温体外循环下行心脏瓣膜替换术中相关的心肌保护、空气栓塞等问题进行探讨。方法:常规建立体外循环,维持全身浅低温32~33℃;心脏缓慢跳动,进行二尖瓣替换;若行主动脉瓣替换,则钳夹主动脉的同时,进行冠状静脉窦逆灌,维持心脏缓慢跳动。结果:40例手术全部成功,无术后脑部并发症及低心排并发症。结论:采用这种新技术能够在术中对心肌进行良好的保护,术中空气栓塞是可以避免的。

    作者:李强;李朝先;向小勇;杨双强;李良彬 刊期: 2001年第01期

  • 自发性高血压大鼠细胞凋亡相关基因蛋白的研究

    目的:研究自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞Bax和Bcl-2基因蛋白表达的变化及其与心肌细胞凋亡的关系。方法:采用免疫组化和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测Bax和Bcl-2基因蛋白及凋亡细胞。结果:(1)心肌细胞凋亡和Bax基因蛋白表达在1月龄SHR组(NLVH组)和18~20月龄SHR组(CHF组)显著增高且Bax基因蛋白表达与心肌细胞凋亡呈显著正相关(P均<0.01)。(2)在10月龄SHR组(LVH组),心肌细胞凋亡显著降低但Bcl-2基因蛋白表达显著增高且Bcl-2基因蛋白表达与心肌细胞凋亡呈显著负相关(P均<0.01)。(3)NLVH组和CHF组Bcl-2/Bax比例显著降低,但LVH组Bcl-2/Bax比例显著增高且Bcl-2/Bax比例与心肌细胞凋亡呈显著负相关(P均<0.01)。结论:SHR心肌细胞Bax和Bcl-2基因蛋白表达及心肌细胞凋亡存在动态变化,且Bax基因蛋白表达上调可能与SHR心肌细胞凋亡增加和CHF相关而Bcl-2基因蛋白表达上调则可能与SHR心肌细胞凋亡减少和LVH有关。因此,Bax和Bcl-2基因蛋白表达的动态变化可能在SHR心肌细胞凋亡和心脏重构中起重要作用。

    作者:李法琦;陈运贞 刊期: 2001年第01期

  • 实验性脑缺血再灌流后Bak和Bad基因在脑内的表达

    目的:观察全脑缺血再灌流后Bak和Bad基因在脑内表达的变化规律和意义。方法:采用大鼠4血管结扎全脑缺血30min再灌流模型,用免疫组织化学染色法观察Bak和Bad基因在脑内的表达。结果:全脑缺血再灌流后12h开始在皮质和海马等缺血易损部位:Bak表达降低,24h达低点;而Bad则表达升高,24h达高点;表达变化明显的时间均是24~48h,此时间与脑缺血后脑细胞凋亡发生的高峰时间一致。结论:脑缺血再灌流可以诱导Bak和Bad基因在脑内表达发生变化,这种变化与脑细胞凋亡的发生关系密切。Bak在脑缺血后表达降低说明其在脑内表达可抑制细胞凋亡。

    作者:刘颖菊;蒋远明;薛春生;周歧新 刊期: 2001年第01期

  • 髌骨不同截面的生物力学研究

    目的:了解髌骨在冠状面上不同水平截面部位上内外侧骨质力学强度。方法:20个新鲜的髌骨的不同截面的骨组织制成柱状试件,分别进行压缩及折弯强度测试。结果:髌骨外侧关节面软骨下骨的压缩及折弯强度与其他各组比较有显著性差异。结论:髌骨外侧关节面软骨下骨骨质为坚固。为临床手术操作提供了实验依据。

    作者:张健;安洪;蒋电明 刊期: 2001年第01期

  • 日本血吸虫重组BCG-sj26GST疫苗免疫小鼠后IgG抗体反应的动态观察

    目的:检测日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠不同时间后的IgG抗体。方法:将106CFU疫苗采用皮下和静脉注射分别免疫BABL/C鼠,分别于免疫后0、4、8、10、14和16周各剖杀4只,收集血清,常规ELISA法检测IgG抗体,同时设PBS皮下注射对照组。结果:皮下注射组和静脉注射组IgG抗体水平都于免疫后4周显著增加,免疫后10周达高水平,并持续在较高水平至免疫后16周。疫苗免疫后10周静脉注射组的抗体水平显著高于皮下注射组。结论:日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗静脉注射免疫效果优于皮下注射。

    作者:李文桂;石佑恩;韩家俊 刊期: 2001年第01期

  • 肾母细胞瘤术前化疗前后P-糖蛋白表达的变化及临床意义

    目的:探讨肾母细胞瘤术前化疗耐药性的生物学特性及与疗效相关性。方法:对18例未术前化疗和经不同疗程术前化疗病理档案,以JSD-单克隆抗体对肾母细胞瘤组织多药耐药蛋白(P-glycoprotein,P-gp)进行免疫组织化学,检测P-gp在术前化疗不同疗程的表达,确定其耐药性;同时对15例资料记录完整、术前化疗>5周的小儿肾母细胞瘤,通过B超随访测量术前化疗不同疗程肿瘤大小,了解其疗效及与耐药性的相关性。结果:术前化疗后的肿瘤细胞P-gp表达比未经术前化疗的肿瘤细胞强,而术前化疗疗程越长,肿瘤细胞P-gp表达越强,疗效降低。结论:术前化疗4周后疗效降低与瘤组织对化疗药物耐药性明显增强有关,免疫组织化学检测P-gp可为制定或更改肾母细胞瘤术前化疗方案及术后化疗方案提供有用的依据。

    作者:魏光辉;金先庆;李旭良;林涛;何大维 刊期: 2001年第01期

  • MTT法检测羟基喜树碱对兔晶体上皮细胞生长的作用

    目的:检测羟基喜树碱(Hydroxycamptothecine,HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞(rabbit lens epithelial cells,P.LECs)增殖的影响。方法:取2~3代的RLECs在96孔板中培养24h后,用不同浓度的HCPT分别作用24及72h,用甲基噻唑基四唑(Methylthiazolyltetrazolium,MTT)测定法观察HCPT对RLECs增殖及贴壁的影响。结果:HCPT既能抑制RLECs的增殖,还可抑制RLECs的贴壁,24h的半数抑制量(IC50)为96.041μg/ml,72h的IC50为1.34μg/ml。结论:一定浓度的HCPT能有效抑制RLECs的生长。

    作者:罗莉霞;李平华;彭惠;骆云鹏;汤为学 刊期: 2001年第01期

  • 几种组织培养上清液对造血祖细胞体外增殖分化的比较

    目的:寻求既经济又有效的造血生长因子样活性物质。方法:采用造血祖细胞体外培养与造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术,检测胎肌培养上清液、骨髓基质细胞培养上清液、胸腺细胞培养上清液与脾细胞培养上清液对造血祖细胞CFU-GM、BFU-E和CFU-Mix增殖分化的影响。结果:胎肌培养上清液和对CFU-GM和CFU-Mix的体外增殖与分化有明显刺激作用,而胸腺与脾细胞条件培养上清液对BFU-E的生长有显著促进作用。结论:胎肌培养上清液中可能含GM-CSF样活性物质,而胸腺与脾细胞培养上清液具有较高IL-3样活性,可以利用组织与细胞培养上清液替代重组造血生长因子进行造血细胞的实验研究和临床诊断。

    作者:姜蓉;郑敏;王亚平;吴宏;王莎莉;戴勤 刊期: 2001年第01期

  • CA-1500全自动血凝仪性能评价

    目的:了解CA-1500全自动血凝仪的基本性能。方法:选择凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)、D-二聚体(D-Dimer)、抗凝血酶3因子(AT-3)几种指标,对该仪器的凝固法、发色底物法、免疫比浊法三个检测系统的一些性能进行初步评价。结果:各指标线性试验,相关系数均在0.97以上,CV小于5%,携带污染率PT为0.2%,APTT为4.6%,溶血干扰试验结果经t检验发现无显著差异(P>0.05)。结论:CA-1500全自动血凝仪具有较高的精密度,准确度,溶血干扰影响小,可消除携带污染,检测速度可达120项/h,可储存1000人次的实验数据,检验项目组合,打印报告方式多样化等优点,能够应用于临床常规工作。

    作者:白垚;李胜发;陈太金 刊期: 2001年第01期

  • 肝癌患者血浆肿瘤坏死因子及其可溶性受体Ⅰ的意义

    目的:探讨肝癌患者血浆TNF和sTNFR-Ⅰ的临床意义。方法:分别用放射免疫法和ELISA法检测36例肝癌患者血浆TNF和sTNFR-Ⅰ。结果:肝癌患者血浆TNF、sTNFR-Ⅰ均显著高于肝硬变和正常人,sTNFR-Ⅰ水平与AFP、TB、g-GT、ALP无关,与血清白蛋白水平呈负相关,Ⅲ、Ⅳ期或门脉癌栓患者sTNFR-Ⅰ高于Ⅱ期或门脉无癌栓患者,TNF与分期及门脉癌栓无关;有效治疗后sTNFR-Ⅰ水平明显降低。结论:sTNFR-Ⅰ可能参与了肿瘤细胞的免疫逃避机制,检测sTNFR-Ⅰ有助于了解肝癌患者的免疫状态、病程分期、判断预后、监测治疗,临床价值优于TNF测定。

    作者:刘超;姚榛祥 刊期: 2001年第01期

  • 鸭乙型肝炎病毒表面抗原的纯化及应用

    目的:从鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染鸭血清中纯化表断抗原(DHBsAg),初步应用于病毒感染后复制的研究。方法:用蔗糖密度梯度离心纯化病毒表面抗原,经Bradford法定量血清中该蛋白含量;建立DHBsAg ELISA检测方法,并与DHBV DNA斑点杂交相比较。结果:纯化DHBsAg经ELISA检测OD490nm≥1.0,Western杂交显示主要肽分子量为17KDa和35KDa:Bradford法定量血清蛋白含量为2.85~5.10μg/m1,DHBsAgELISA检测100份血清标本阳性数为84例,斑点杂交检测阳性数为88例,两者吻合率为94%。结论:DHBsAg的制备及ELISA方法的建立,为进一步研究病毒感染后复制及体内免疫应答状况奠定了基础。

    作者:唐霓;黄爱龙;郭树华;张定凤 刊期: 2001年第01期

  • DHBV DNA在鸭胰脾组织中原位杂交的研究

    目的:对慢性DHBV感染鸭的肝、胰、脾组织DHBV DNA作对比研究。方法:采用原位杂交技术。结果:DHBV不仅可以感染鸭肝细胞,且可感染胰、脾组织,DHBV DNA阳性细胞的分布密度以肝组织高,胰脾次之。结论:DHBV具有组织器官泛嗜性,但其在肝外组织中的复制似不及在肝细胞中活跃。

    作者:彭凤英;郭树华 刊期: 2001年第01期

  • MHC-Ⅱ类抗原在角膜碱烧伤后眼组织的动态改变

    目的:探讨角膜碱烧伤后角膜溃烂溶解穿孔以及眼内炎症的免疫学机制。方法:在大鼠角膜上制作碱烧伤模型,在烧伤后的不同阶段,制备角膜、虹膜、脉络膜以及视网膜铺片,采用卵白素-生物素过氧化物酶免疫组化方法(ABC法),检测眼组织MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞。结果:烧伤初期,角膜及虹膜即有MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞的轻度增多;在角膜溶解穿孔阶段,MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞大量出现,密集分布于角膜缘及溃疡溶解处,以及虹膜、脉络膜组织中,且在形态学上也发生了一些变化。当烧伤后期溃疡愈合角膜病变稳定时,虹膜上依然见较多阳性细胞。正常视网膜细胞未见MHC-Ⅱ类抗原的表达,但在烧伤后角膜溶解期以及稳定期,均可见Ⅱ类抗原阳性细胞。结论:免疫反应可能参与了严重角膜碱烧伤角膜溶解及眼内炎症的病理过程,其发生机理可能与自身免疫反应有关。

    作者:赵敏;陈家祺;杨培增 刊期: 2001年第01期

  • 小鼠→大鼠异位心脏移植模型的建立

    目的:建立小鼠→大鼠异种心脏移植动物模型。方法:选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体。小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端吻合,小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端吻合以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型。排斥后取移植心脏作病理学检查。结果:移植成功率87%(13/15)。移植心脏平均存活时间2.15±0.90天。病理检查发现排斥心脏中广泛血管内血栓形成,出血及炎症细胞浸润,部分心肌有局灶性梗塞和凝固性坏死。结论:本模型容易操作,易于观察,稳定可靠,是研究异种移植较理想的动物模型。

    作者:黄平;姚榛祥 刊期: 2001年第01期

  • 国产尼莫地平软胶囊人体相对生物利用度研究

    目的:研究尼莫地平软胶囊的人体相对生物利用度。方法:10名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服国产尼莫地平软胶囊和进口尼莫通片后,用HPLC法测定血浆中尼莫地平的浓度变化情况。结果:两种制剂的体内药时数据符合二室模型,Cmax分别为27.15±9.77ng/ml,38.02±14.83ng/ml;Tmax为1.04±0.41h,0.77±0.25h;AUC(0~12)为107.79±38.56μg/h/L,111.22±47.63 μg/h/L。两种制剂的相对生物利用度比较,其生物利用度为99.92%。结论:表明国产尼莫地平软胶囊与进口尼莫通片属生物等效制剂。

    作者:吴妍;罗大林;吕立明;何海霞;姚高琼;雷自强;朱治本;周远大 刊期: 2001年第01期

  • 原发性纵隔肿瘤及囊肿的诊断和外科治疗(附272例报告)

    目的:探讨原发性纵隔肿瘤及囊肿的诊断和外科治疗,特别是术中防治意外损伤及保证手术安全的技术问题。方法:对我院手术治疗的原发性纵隔肿瘤及囊肿272例患者的临床资料进行分析。结果:272例中神经源性肿瘤占28.3%,其次为胸腺肿瘤或囊肿(27.6%)和畸胎样瘤(20.2%):X线检查与术后病理诊断的基本符合率为73.9%(201例);均在全麻下施行手术,其中开胸手术266例,经颈部手术4例,颈胸分别切口同期手术2例;手术方式包括肿瘤或囊肿完全切除、大部切除和开胸探查等。术中上腔静脉损伤4例,其中1例经右心耳上腔静脉插管后修补,二期(术后2周)拔除上腔静脉插管治愈。手术死亡6例,手术死亡率为2.2%。结论:在原发性纵隔肿瘤及囊肿中,神经源性肿瘤的发病率居首位,其次为胸腺瘤和畸胎样瘸:胸部X线检查是诊断本病的主要手段;充分的围手术期处理,认真选择切口,在手术操作中防治重要组织器官损伤是保证手术安全的关键。

    作者:吴庆琛;李良彬;温剑虎 刊期: 2001年第01期

  • p53基因与川崎病患者淋巴细胞凋亡关系探讨

    目的:进一步探讨川崎病(KD)急性期患者外周血淋巴细胞凋亡延迟的机理。方法:采用斑点杂交(Dot-blot)检测淋巴细胞p53基因mRNA表达水平;流式细胞仪(FCM)检测p53蛋白质表达阳性细胞百分率。结果:KD患者外周血淋巴细胞p53基因mRNA和p53蛋白质表达水平降低,与正常儿童比较差异显著(P<0.005);当给予静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗后或加入抗IL-6单抗培养时,外周血淋巴细胞p53基因mRNA和P53蛋白质表达水平提高。结论:KD急性期患者外周血淋巴细胞p53基因表达水平降低,其原因可能与本病患者异常升高的IL-6有关。p53基因具有促进细胞凋亡的作用,KD患者外周血淋巴细胞凋亡延迟可能与高浓度IL-6抑制p53基因的表达有关。

    作者:易岂建;杨锡强;李成荣;张远维;王莉佳 刊期: 2001年第01期

  • 离子交换高效液相色谱法分析兔肝环核苷酸磷酸二酯酶反应体系

    目的:用阴离子交换HPLC分析环核苷酸磷酸二酯酶反应体系。方法:用Shim-Pak WAX-I柱,30 mmol/L的pH 4.0磷酸钾为流动相,洗脱速度0.5 ml/min,254 nm检测,峰面积定量。结果:上述离子交换HPLC体系可分离并定量测定cAMP和AMP。在硫酸铵分级粗制兔肝PDE反应混合物中,cAMP和AMP同杂质完全基线分离;随反应进行,cAMP逐步下降,AMP上升到平台后再下降。用米氏酶的积分速度方程作图分析cAMP下降的进程曲线,发现硫酸铵分级粗制的兔肝PDE的米氏常数为负数。结论:此离子交换HPLC方法可以分析无杂酶干扰时PDE对cAMP的水解。

    作者:廖飞;张晓萍;周岐新;杨俊清;曾昭淳;陈文缘;汤先觉 刊期: 2001年第01期

重庆医科大学学报杂志

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主办:重庆医科大学