学术投稿

鸭乙型肝炎病毒表面抗原的纯化及应用

唐霓;黄爱龙;郭树华;张定凤

关键词:鸭乙型肝炎病毒表面抗原, Western杂交
摘要:目的:从鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染鸭血清中纯化表断抗原(DHBsAg),初步应用于病毒感染后复制的研究。方法:用蔗糖密度梯度离心纯化病毒表面抗原,经Bradford法定量血清中该蛋白含量;建立DHBsAg ELISA检测方法,并与DHBV DNA斑点杂交相比较。结果:纯化DHBsAg经ELISA检测OD490nm≥1.0,Western杂交显示主要肽分子量为17KDa和35KDa:Bradford法定量血清蛋白含量为2.85~5.10μg/m1,DHBsAgELISA检测100份血清标本阳性数为84例,斑点杂交检测阳性数为88例,两者吻合率为94%。结论:DHBsAg的制备及ELISA方法的建立,为进一步研究病毒感染后复制及体内免疫应答状况奠定了基础。
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • 输入供体血对大鼠移植胰腺白介素-2和TNF-α的影响

    目的:了解输入供体血延长大鼠移植胰腺功能存活的机制。方法:取封闭群健康wistar大鼠作为供受体。制成糖尿病模型的受体大鼠分为对照和输入供体血二组。采用胰管开放全胰腺腹腔内移植。术后7天处死动物,取移植胰腺作HE染色和胰岛gomori改良醛复红染色,碱性磷酸酶桥联酶标法检测淋巴细胞和细胞因子。结果:输入供体血组的移植胰腺腺泡和胰岛结构正常,CD+4T细胞显著增高。对照组胰腺腺泡和胰岛结构破坏,CD+8T细胞,IL-2,TNF-α显著增高。对照组CD3T细胞、NK细胞均比输入供体血组高,但无显著差异。结论:输入供体血延长大鼠移植胰腺功能存活与IL-2,TNF-α降低有关。

    作者:孙治君;姚榛祥 刊期: 2001年第01期

  • 冷冻对人精子结构及功能的影响

    目的:研究冷冻对人精子结构和功能的影响。方法:采集健康已生育25~35岁男性供精者精液作标本,7.5%单甘油为冷冻保护剂(Cryopreservative agent,CPA),每份精液分别采用速、缓降温法冷冻,冻前、后分别作精液常规分析、精尾低渗肿胀试验、精子超微结构、精子穿卵试验。结果:复温后未加CPA者.均未见有复苏存活的精子;加CPA者,精子存活率、活动率、精尾低渗肿胀率、精子超微结构相对完整的百分率、穿卵率均显著下降,速冻法比缓冻法下降更明显。结论:7.5%单一甘油对人类精子具有显著的冷冻保护作用,精液冻贮对精子的结构及功能均有不同程度的损害,不同的降温速度对人精子产生不同的冷冻损伤,缓冻法降温冻贮人类精液的力法简单经济,能较好地较长时期地保持人精子功能和结构完整性。

    作者:汤召兵;陈在贤 刊期: 2001年第01期

  • 精神分裂症患者父母亲神经系统软体征研究

    目的:了解精神分裂症患者父母亲神经系统软体征的发生情况及其与患者之间的关系。方法:对46例精神分裂症及其78位父母亲(实验组)和46例正常健康人的76位父母亲(对照组)分别进行神经系统软体征检查与评定。结果:实验组父母亲神经系统软体征评分及阳性发生率皆明显高于对照组父母亲:精神分裂症患者神经系统软体征评分与其父、母亲的神经系统软体征评分皆呈正相关。结论:支持精神分裂症神经系统软体征与遗传因素有关,具有病因学意义。

    作者:王广新;蒙华庆 刊期: 2001年第01期

  • 日本血吸虫重组BCG-sj26GST疫苗免疫小鼠后IgG抗体反应的动态观察

    目的:检测日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠不同时间后的IgG抗体。方法:将106CFU疫苗采用皮下和静脉注射分别免疫BABL/C鼠,分别于免疫后0、4、8、10、14和16周各剖杀4只,收集血清,常规ELISA法检测IgG抗体,同时设PBS皮下注射对照组。结果:皮下注射组和静脉注射组IgG抗体水平都于免疫后4周显著增加,免疫后10周达高水平,并持续在较高水平至免疫后16周。疫苗免疫后10周静脉注射组的抗体水平显著高于皮下注射组。结论:日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗静脉注射免疫效果优于皮下注射。

    作者:李文桂;石佑恩;韩家俊 刊期: 2001年第01期

  • 心脏不停跳及浅低温体外循环下心瓣膜替换术40例报告

    目的:对心脏不停跳、浅低温体外循环下行心脏瓣膜替换术中相关的心肌保护、空气栓塞等问题进行探讨。方法:常规建立体外循环,维持全身浅低温32~33℃;心脏缓慢跳动,进行二尖瓣替换;若行主动脉瓣替换,则钳夹主动脉的同时,进行冠状静脉窦逆灌,维持心脏缓慢跳动。结果:40例手术全部成功,无术后脑部并发症及低心排并发症。结论:采用这种新技术能够在术中对心肌进行良好的保护,术中空气栓塞是可以避免的。

    作者:李强;李朝先;向小勇;杨双强;李良彬 刊期: 2001年第01期

  • 2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原与糖尿病肾病关系的研究

    目的:研究2型糖尿病患者尿Ⅳ型胶原(CⅣ)的变化及其对糖尿病肾病(DN)的诊断意义。方法:用放免法测定了72例2型糖尿病(DM)患者及30例正常人尿CⅣ、UAE、α-微球蛋白(α-MG)水平。结果:72例患者尿CⅣ水平明显高于对照组;在正常白蛋白尿期2型DM病人尿CⅣ较对照组已明显升高(P<0.05),各组间尿CⅣ水平差异显著,随24h尿白蛋白排泄量(UAE)的增加而递增。尿CⅣ与UAE、α-MG、收缩压(sBP)、病程、糖化血红蛋白(HbAc)呈正相关。结论:提示尿CⅣ随DN的严重程度而明显增高,可用来早期诊断DN,监测DN的发生发展。

    作者:胡怀东;王玉君;庞久高 刊期: 2001年第01期

  • 颅内占位性疾病手术前后的动态脑电图(AEEG)监测

    目的:通过AEEG监测,了解颅内占位性疾病手术前后的脑机能变化特点。方法:选择260例颅内占位性疾病者,术前1~3天、术后1周、术后1~3月分别观察其AEEG表现。结果:(1)AEEG术前、术后1周或术后1~3月异常率分别为88.1%、97.7%、77.7%。(2)术前无癫痫发作组,术后新发癫痫17例,提示手术对大脑皮质的损害,可能增加致痫机会。结论:AEEG对颅内占位性疾病术前术后的监测,可在一定程度上反映病灶及手术对脑机能的影响,为临床治疗提供参考。

    作者:但炜;唐文渊;何建国 刊期: 2001年第01期

  • MHC-Ⅱ类抗原在角膜碱烧伤后眼组织的动态改变

    目的:探讨角膜碱烧伤后角膜溃烂溶解穿孔以及眼内炎症的免疫学机制。方法:在大鼠角膜上制作碱烧伤模型,在烧伤后的不同阶段,制备角膜、虹膜、脉络膜以及视网膜铺片,采用卵白素-生物素过氧化物酶免疫组化方法(ABC法),检测眼组织MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞。结果:烧伤初期,角膜及虹膜即有MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞的轻度增多;在角膜溶解穿孔阶段,MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞大量出现,密集分布于角膜缘及溃疡溶解处,以及虹膜、脉络膜组织中,且在形态学上也发生了一些变化。当烧伤后期溃疡愈合角膜病变稳定时,虹膜上依然见较多阳性细胞。正常视网膜细胞未见MHC-Ⅱ类抗原的表达,但在烧伤后角膜溶解期以及稳定期,均可见Ⅱ类抗原阳性细胞。结论:免疫反应可能参与了严重角膜碱烧伤角膜溶解及眼内炎症的病理过程,其发生机理可能与自身免疫反应有关。

    作者:赵敏;陈家祺;杨培增 刊期: 2001年第01期

  • BAEP检查对颅脑损伤后的预后判断

    BAEP的研究中很少涉及BAEP的波幅问题。本文结合93例不同预后颅脑损伤病例BAEP检查数据,从波幅和潜伏期两方面进行了探讨。1 对象和方法1.1 研究对象1.1.1 病例93例,男50例,女43例,平均年龄45岁。诊断以CT、MRI为据。手术治疗57例,非手术治疗36例。检查于伤后24小时内完成。

    作者:李建伟;程兴玉;唐文渊 刊期: 2001年第01期

  • 三种静脉麻醉药诱导期对循环及内分泌的影响

    目的:比较异丙酚、硫喷妥钠、依托咪酯静脉诱导、气管捕管期间对循环及内分泌的影响。方法:全麻病人30例,随机分为二组(n=10),分别给予异丙酚(Ⅰ组)、硫喷妥钠(Ⅱ组)、依托咪酯(Ⅲ组)行静脉诱导、插管,观察其平均动脉压、心率、血糖、皮质醇、胰岛素在诱导、插管期间的变化。结果:心率:Ⅱ组、Ⅲ组在插管即刻明显增快,(P<0.05)。平均动脉压:Ⅰ组在插管前下降明显,(P<0.05)。Ⅱ组在插管前下降和插管后4min明显上升,(P<0.05)。Ⅲ组在插管即刻有明显上升,(P<0.05)。皮质醇、胰岛素:Ⅱ组、Ⅲ组在插管后4min有明显上升,(P<0.05)。血糖:3组在诱导插管期间均无明显变化,(P>0.05)。结论:异丙酚静脉诱导比硫喷妥钠、依托咪酯对循环及内分泌的影响小,应激反应轻,静脉诱导平稳,适用于各种全麻手术的诱导。

    作者:刘新伟;房秀生 刊期: 2001年第01期

  • 热休克、心肌缺血预处理对I/R心肌的第二窗保护作用

    目的:观察IP(ischemic preconditioning,缺血预处理)、HS(heat shock,热休克)对I/R(ischemic/reperfusion,缺血/再灌注)损伤的保护作用。方法:建立Wistar大鼠I/R动物模型,缺血90min后再灌注3h,分为对照组、Hs组和IP组3组,用免疫组化方法检测第二窗保护(second window of protection,SWOP)过程中蛋白激酶Cα、δ(PKCα、PKCδ)的活性,并用TTC染色测定心肌坏死范围。结果:HS组和IP组心肌坏死范围较对照组明显缩小(P<0.01),3组PKCα、PKCδ均未见从胞浆向细胞膜转位。结论:HS和IP均有心肌保护作用,PKCα、PKCδ在SWOP中可能不起作用,其确切机制有待进一步研究。

    作者:王悦喜;陈运贞;刘元生 刊期: 2001年第01期

  • DHBV DNA在鸭胰脾组织中原位杂交的研究

    目的:对慢性DHBV感染鸭的肝、胰、脾组织DHBV DNA作对比研究。方法:采用原位杂交技术。结果:DHBV不仅可以感染鸭肝细胞,且可感染胰、脾组织,DHBV DNA阳性细胞的分布密度以肝组织高,胰脾次之。结论:DHBV具有组织器官泛嗜性,但其在肝外组织中的复制似不及在肝细胞中活跃。

    作者:彭凤英;郭树华 刊期: 2001年第01期

  • 心脏不停跳心内直视手术

    l 历史回顾 自1953年Gibbon应用体外循环技术为一房间隔缺损患者直视修补成功,体外循环心内直视手术经历了40多年的发展,与之相随的心肌保护技术也不断发展。首先在手术过程中是否维持心肌供血方面经历了供血-缺血-供血的过程;其次心脏停跳也有化学-非化学-化学的反复;然后体外循环过程的全身及心肌温度也出现常温-低温-浅低温变化[1]。而在心脏静止与跳动方面,出现停跳与不停跳的研究。自1950年Bigerlow,Lindsay和Greeword把低温技术导入心脏手术,1973年Gay成功应用冷钾晶体心停跳液术中心肌保护以来,传统的低温停跳液便成了心肌保护的重要措施。由于心肌不可避免缺血,缺氧和再灌注损伤,及低温所致全身生理紊乱,心肌保护效果欠佳,术后低心排血量综合征和严重心律失常仍是主要死亡原因[2]。

    作者:谢晓阳;李朝先 刊期: 2001年第01期

  • 小鼠→大鼠异位心脏移植模型的建立

    目的:建立小鼠→大鼠异种心脏移植动物模型。方法:选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体。小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端吻合,小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端吻合以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型。排斥后取移植心脏作病理学检查。结果:移植成功率87%(13/15)。移植心脏平均存活时间2.15±0.90天。病理检查发现排斥心脏中广泛血管内血栓形成,出血及炎症细胞浸润,部分心肌有局灶性梗塞和凝固性坏死。结论:本模型容易操作,易于观察,稳定可靠,是研究异种移植较理想的动物模型。

    作者:黄平;姚榛祥 刊期: 2001年第01期

  • 十二指肠损伤11例临床分析

    十二指肠损伤在临床上较为少见,由于十二指肠具有独特的解剖结构和生理特性,其诊断和治疗较困难。本文报告我院近十年来收治的11例病例,对其诊治和术后并发症的预防进行分析。1 临床资料1.1 性别与年龄 男性9例,女性2例。年龄16~58岁,平均37岁。1.2 损伤原因 高空坠落伤4例,腹部刀刺伤3例,车祸伤2例,踢伤1例,自服金属异物伤1例。1.3 损伤部位 十二指肠第一段1例,第二段5例,第三段3例,第四段2例。

    作者:向志;闫雄;戴远兵 刊期: 2001年第01期

  • CA-1500全自动血凝仪性能评价

    目的:了解CA-1500全自动血凝仪的基本性能。方法:选择凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)、D-二聚体(D-Dimer)、抗凝血酶3因子(AT-3)几种指标,对该仪器的凝固法、发色底物法、免疫比浊法三个检测系统的一些性能进行初步评价。结果:各指标线性试验,相关系数均在0.97以上,CV小于5%,携带污染率PT为0.2%,APTT为4.6%,溶血干扰试验结果经t检验发现无显著差异(P>0.05)。结论:CA-1500全自动血凝仪具有较高的精密度,准确度,溶血干扰影响小,可消除携带污染,检测速度可达120项/h,可储存1000人次的实验数据,检验项目组合,打印报告方式多样化等优点,能够应用于临床常规工作。

    作者:白垚;李胜发;陈太金 刊期: 2001年第01期

  • 顺铂、5-氟尿嘧啶对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的相互作用

    目的:观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤在体外对人宫颈肿瘤细胞(Hela细胞)的作用。并观察顺铂、5-氟尿嘧啶配伍对Hela细胞的相互作用。方法:采用MTT例定法观察顺铂、5-氟尿嘧啶及甲氨喋呤单用及合用对Hela细胞的影响,流式细胞仪观察凋亡及细胞周期的变化。并利用中效原理判定顺铂和5-氟尿嘧啶合用的效果。结果:顺铂和5-氟尿嘧啶单独应用时随着药物剂量增加,其抑制作用也增加,两药大剂量(大于中效剂量)合用时可产生拮抗作用(CI>1),小剂量(小于中效剂量)合用时可产生协同作用(CI<1)。甲氨喋呤在本实验条件下未见明显抑瘤作用。结论:顺铂和5-氟尿嘧啶合用小剂量产生协同作用,大剂量产生拮抗作用。

    作者:彭勤;彭惠;骆云鹏;汤为学 刊期: 2001年第01期

  • 超声波对小鼠胚胎表达整合素及其着床能力的影响

    目的:研究超声波照射对小鼠胚胎表达整合素α1、α5、β1、β3的影响以及与其着床能力的关系。方法:取小鼠二细胞胚经超声波照射后体外培养至囊胚期,用免疫组化法检测其整合素α1、α5、β1、β3的表达及其着床能力的改变,并与未经照射的正常胚胎比较。结果:1、超声波照射组胚胎贴附率、滋养细胞外延生长率均显著低于正常胚胎。2、正常胚胎桑椹胚期即有α5、β1、β3整合素表达,而无α1表达;囊胚期α5、β1、β3表达增强,仍无α1表达;α1只出现在外延生长的滋养细胞。3、超声波照射组胚胎β3整合素的表达明显弱于正常组,且未见α1表达;而α5、β1的表达两组间无差异。结论:超声波照射使胚胎着床能力明显降低,可能与其影响胚胎细胞α1、β3整合素的正常表达有关。

    作者:李真;顾美礼;王智彪;胡凯;艾玲;杜永洪 刊期: 2001年第01期

  • 非手术方法处理选择性脊髓血管造影术中导管断裂1例报道

    我科在行经股动脉插管选择性脊髓血管造影术中发生导管断裂一例,以非手术方法取出。现报道如下:1 临床资料 患者,女性,13岁。因左上肢、双下肢乏力伴麻木二周,加重一周入院。查体:左上肢肌力Ⅳ级,双下肢肌力0级,剑突以下痛觉减退,右下肢明显,左膝腱反射亢进,双侧病理征阳性。颈部MRI示:颈3-胸2髓内病变,考虑隐匿性血管瘤。诊断考虑为颈3-胸2脊髓血管畸形可能性大。入院后在局麻下行经股动脉插管脊髓血管造影术。术中将导管送至左锁骨下动脉,用高压枪注入两次造影剂,显影不满意,在调整导管位置时,发现导管前端已经断裂。

    作者:何朝晖;支兴刚 刊期: 2001年第01期

  • 国产尼莫地平软胶囊人体相对生物利用度研究

    目的:研究尼莫地平软胶囊的人体相对生物利用度。方法:10名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服国产尼莫地平软胶囊和进口尼莫通片后,用HPLC法测定血浆中尼莫地平的浓度变化情况。结果:两种制剂的体内药时数据符合二室模型,Cmax分别为27.15±9.77ng/ml,38.02±14.83ng/ml;Tmax为1.04±0.41h,0.77±0.25h;AUC(0~12)为107.79±38.56μg/h/L,111.22±47.63 μg/h/L。两种制剂的相对生物利用度比较,其生物利用度为99.92%。结论:表明国产尼莫地平软胶囊与进口尼莫通片属生物等效制剂。

    作者:吴妍;罗大林;吕立明;何海霞;姚高琼;雷自强;朱治本;周远大 刊期: 2001年第01期

重庆医科大学学报杂志

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