学术投稿

鸭乙型肝炎病毒表面抗原的纯化及应用

唐霓;黄爱龙;郭树华;张定凤

关键词:鸭乙型肝炎病毒表面抗原, Western杂交
摘要:目的:从鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染鸭血清中纯化表断抗原(DHBsAg),初步应用于病毒感染后复制的研究。方法:用蔗糖密度梯度离心纯化病毒表面抗原,经Bradford法定量血清中该蛋白含量;建立DHBsAg ELISA检测方法,并与DHBV DNA斑点杂交相比较。结果:纯化DHBsAg经ELISA检测OD490nm≥1.0,Western杂交显示主要肽分子量为17KDa和35KDa:Bradford法定量血清蛋白含量为2.85~5.10μg/m1,DHBsAgELISA检测100份血清标本阳性数为84例,斑点杂交检测阳性数为88例,两者吻合率为94%。结论:DHBsAg的制备及ELISA方法的建立,为进一步研究病毒感染后复制及体内免疫应答状况奠定了基础。
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • 十二指肠损伤11例临床分析

    十二指肠损伤在临床上较为少见,由于十二指肠具有独特的解剖结构和生理特性,其诊断和治疗较困难。本文报告我院近十年来收治的11例病例,对其诊治和术后并发症的预防进行分析。1 临床资料1.1 性别与年龄 男性9例,女性2例。年龄16~58岁,平均37岁。1.2 损伤原因 高空坠落伤4例,腹部刀刺伤3例,车祸伤2例,踢伤1例,自服金属异物伤1例。1.3 损伤部位 十二指肠第一段1例,第二段5例,第三段3例,第四段2例。

    作者:向志;闫雄;戴远兵 刊期: 2001年第01期

  • 热休克、心肌缺血预处理对I/R心肌的第二窗保护作用

    目的:观察IP(ischemic preconditioning,缺血预处理)、HS(heat shock,热休克)对I/R(ischemic/reperfusion,缺血/再灌注)损伤的保护作用。方法:建立Wistar大鼠I/R动物模型,缺血90min后再灌注3h,分为对照组、Hs组和IP组3组,用免疫组化方法检测第二窗保护(second window of protection,SWOP)过程中蛋白激酶Cα、δ(PKCα、PKCδ)的活性,并用TTC染色测定心肌坏死范围。结果:HS组和IP组心肌坏死范围较对照组明显缩小(P<0.01),3组PKCα、PKCδ均未见从胞浆向细胞膜转位。结论:HS和IP均有心肌保护作用,PKCα、PKCδ在SWOP中可能不起作用,其确切机制有待进一步研究。

    作者:王悦喜;陈运贞;刘元生 刊期: 2001年第01期

  • 三种静脉麻醉药诱导期对循环及内分泌的影响

    目的:比较异丙酚、硫喷妥钠、依托咪酯静脉诱导、气管捕管期间对循环及内分泌的影响。方法:全麻病人30例,随机分为二组(n=10),分别给予异丙酚(Ⅰ组)、硫喷妥钠(Ⅱ组)、依托咪酯(Ⅲ组)行静脉诱导、插管,观察其平均动脉压、心率、血糖、皮质醇、胰岛素在诱导、插管期间的变化。结果:心率:Ⅱ组、Ⅲ组在插管即刻明显增快,(P<0.05)。平均动脉压:Ⅰ组在插管前下降明显,(P<0.05)。Ⅱ组在插管前下降和插管后4min明显上升,(P<0.05)。Ⅲ组在插管即刻有明显上升,(P<0.05)。皮质醇、胰岛素:Ⅱ组、Ⅲ组在插管后4min有明显上升,(P<0.05)。血糖:3组在诱导插管期间均无明显变化,(P>0.05)。结论:异丙酚静脉诱导比硫喷妥钠、依托咪酯对循环及内分泌的影响小,应激反应轻,静脉诱导平稳,适用于各种全麻手术的诱导。

    作者:刘新伟;房秀生 刊期: 2001年第01期

  • CA-1500全自动血凝仪性能评价

    目的:了解CA-1500全自动血凝仪的基本性能。方法:选择凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)、D-二聚体(D-Dimer)、抗凝血酶3因子(AT-3)几种指标,对该仪器的凝固法、发色底物法、免疫比浊法三个检测系统的一些性能进行初步评价。结果:各指标线性试验,相关系数均在0.97以上,CV小于5%,携带污染率PT为0.2%,APTT为4.6%,溶血干扰试验结果经t检验发现无显著差异(P>0.05)。结论:CA-1500全自动血凝仪具有较高的精密度,准确度,溶血干扰影响小,可消除携带污染,检测速度可达120项/h,可储存1000人次的实验数据,检验项目组合,打印报告方式多样化等优点,能够应用于临床常规工作。

    作者:白垚;李胜发;陈太金 刊期: 2001年第01期

  • 国产尼莫地平软胶囊人体相对生物利用度研究

    目的:研究尼莫地平软胶囊的人体相对生物利用度。方法:10名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服国产尼莫地平软胶囊和进口尼莫通片后,用HPLC法测定血浆中尼莫地平的浓度变化情况。结果:两种制剂的体内药时数据符合二室模型,Cmax分别为27.15±9.77ng/ml,38.02±14.83ng/ml;Tmax为1.04±0.41h,0.77±0.25h;AUC(0~12)为107.79±38.56μg/h/L,111.22±47.63 μg/h/L。两种制剂的相对生物利用度比较,其生物利用度为99.92%。结论:表明国产尼莫地平软胶囊与进口尼莫通片属生物等效制剂。

    作者:吴妍;罗大林;吕立明;何海霞;姚高琼;雷自强;朱治本;周远大 刊期: 2001年第01期

  • 高效液相色谱法测定4株肠道杆菌胞内环丙沙星浓度

    目的:建立用反相高效液相色谱法(HPLC)测定肠道杆菌胞内药物浓度的方法。方法:将待测肠道杆菌与环丙沙星在37℃振荡温育,不同时段各取出1ml菌液超声裂解,取上清以HPLC法测定浓度,以ODS-C18作固定相,流动相组成为甲醇/0.008M磷酸缓冲液/四丁基溴化铵(25:75:v/v/v),荧光检测激发波长278nm,发射波长445nm。结果:低检出限0.06mg/L,线性范围0.154~12.5mg/L,r=0.9997,日内精密度2.66%,日间精密度4.15%。摄取曲线表明各菌株在10min处达大峰浓度。结论:高效液相色谱法测定细菌胞内药物浓度能更好的避免干扰,准确检测药物浓度,可用于氟喹诺酮类药物耐药机制的研究。

    作者:贾蓓;钱元恕;来晓云 刊期: 2001年第01期

  • 肝癌患者血浆肿瘤坏死因子及其可溶性受体Ⅰ的意义

    目的:探讨肝癌患者血浆TNF和sTNFR-Ⅰ的临床意义。方法:分别用放射免疫法和ELISA法检测36例肝癌患者血浆TNF和sTNFR-Ⅰ。结果:肝癌患者血浆TNF、sTNFR-Ⅰ均显著高于肝硬变和正常人,sTNFR-Ⅰ水平与AFP、TB、g-GT、ALP无关,与血清白蛋白水平呈负相关,Ⅲ、Ⅳ期或门脉癌栓患者sTNFR-Ⅰ高于Ⅱ期或门脉无癌栓患者,TNF与分期及门脉癌栓无关;有效治疗后sTNFR-Ⅰ水平明显降低。结论:sTNFR-Ⅰ可能参与了肿瘤细胞的免疫逃避机制,检测sTNFR-Ⅰ有助于了解肝癌患者的免疫状态、病程分期、判断预后、监测治疗,临床价值优于TNF测定。

    作者:刘超;姚榛祥 刊期: 2001年第01期

  • BAEP检查对颅脑损伤后的预后判断

    BAEP的研究中很少涉及BAEP的波幅问题。本文结合93例不同预后颅脑损伤病例BAEP检查数据,从波幅和潜伏期两方面进行了探讨。1 对象和方法1.1 研究对象1.1.1 病例93例,男50例,女43例,平均年龄45岁。诊断以CT、MRI为据。手术治疗57例,非手术治疗36例。检查于伤后24小时内完成。

    作者:李建伟;程兴玉;唐文渊 刊期: 2001年第01期

  • 小鼠→大鼠异位心脏移植模型的建立

    目的:建立小鼠→大鼠异种心脏移植动物模型。方法:选择NIH小鼠和Wistar大鼠分别作为供体和受体。小鼠升主动脉与大鼠右颈总动脉端端吻合,小鼠肺动脉与大鼠右颈外静脉端端吻合以建立小鼠→大鼠颈部异位心脏移植模型。排斥后取移植心脏作病理学检查。结果:移植成功率87%(13/15)。移植心脏平均存活时间2.15±0.90天。病理检查发现排斥心脏中广泛血管内血栓形成,出血及炎症细胞浸润,部分心肌有局灶性梗塞和凝固性坏死。结论:本模型容易操作,易于观察,稳定可靠,是研究异种移植较理想的动物模型。

    作者:黄平;姚榛祥 刊期: 2001年第01期

  • MHC-Ⅱ类抗原在角膜碱烧伤后眼组织的动态改变

    目的:探讨角膜碱烧伤后角膜溃烂溶解穿孔以及眼内炎症的免疫学机制。方法:在大鼠角膜上制作碱烧伤模型,在烧伤后的不同阶段,制备角膜、虹膜、脉络膜以及视网膜铺片,采用卵白素-生物素过氧化物酶免疫组化方法(ABC法),检测眼组织MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞。结果:烧伤初期,角膜及虹膜即有MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞的轻度增多;在角膜溶解穿孔阶段,MHC-Ⅱ类抗原阳性细胞大量出现,密集分布于角膜缘及溃疡溶解处,以及虹膜、脉络膜组织中,且在形态学上也发生了一些变化。当烧伤后期溃疡愈合角膜病变稳定时,虹膜上依然见较多阳性细胞。正常视网膜细胞未见MHC-Ⅱ类抗原的表达,但在烧伤后角膜溶解期以及稳定期,均可见Ⅱ类抗原阳性细胞。结论:免疫反应可能参与了严重角膜碱烧伤角膜溶解及眼内炎症的病理过程,其发生机理可能与自身免疫反应有关。

    作者:赵敏;陈家祺;杨培增 刊期: 2001年第01期

  • 髌骨不同截面的生物力学研究

    目的:了解髌骨在冠状面上不同水平截面部位上内外侧骨质力学强度。方法:20个新鲜的髌骨的不同截面的骨组织制成柱状试件,分别进行压缩及折弯强度测试。结果:髌骨外侧关节面软骨下骨的压缩及折弯强度与其他各组比较有显著性差异。结论:髌骨外侧关节面软骨下骨骨质为坚固。为临床手术操作提供了实验依据。

    作者:张健;安洪;蒋电明 刊期: 2001年第01期

  • 超声波对小鼠胚胎表达整合素及其着床能力的影响

    目的:研究超声波照射对小鼠胚胎表达整合素α1、α5、β1、β3的影响以及与其着床能力的关系。方法:取小鼠二细胞胚经超声波照射后体外培养至囊胚期,用免疫组化法检测其整合素α1、α5、β1、β3的表达及其着床能力的改变,并与未经照射的正常胚胎比较。结果:1、超声波照射组胚胎贴附率、滋养细胞外延生长率均显著低于正常胚胎。2、正常胚胎桑椹胚期即有α5、β1、β3整合素表达,而无α1表达;囊胚期α5、β1、β3表达增强,仍无α1表达;α1只出现在外延生长的滋养细胞。3、超声波照射组胚胎β3整合素的表达明显弱于正常组,且未见α1表达;而α5、β1的表达两组间无差异。结论:超声波照射使胚胎着床能力明显降低,可能与其影响胚胎细胞α1、β3整合素的正常表达有关。

    作者:李真;顾美礼;王智彪;胡凯;艾玲;杜永洪 刊期: 2001年第01期

  • 心脏不停跳及浅低温体外循环下心瓣膜替换术40例报告

    目的:对心脏不停跳、浅低温体外循环下行心脏瓣膜替换术中相关的心肌保护、空气栓塞等问题进行探讨。方法:常规建立体外循环,维持全身浅低温32~33℃;心脏缓慢跳动,进行二尖瓣替换;若行主动脉瓣替换,则钳夹主动脉的同时,进行冠状静脉窦逆灌,维持心脏缓慢跳动。结果:40例手术全部成功,无术后脑部并发症及低心排并发症。结论:采用这种新技术能够在术中对心肌进行良好的保护,术中空气栓塞是可以避免的。

    作者:李强;李朝先;向小勇;杨双强;李良彬 刊期: 2001年第01期

  • 原发性高血压患者心率变异及其昼夜节律变化

    目的:探讨原发性高血压患者心率变异及其昼夜节律变化规律。方法:对126例原发性高血压患者进行24h及每小时心率变异时域分析,并与年龄匹配的对照组比较,同时比较高血压伴与不伴左心室肥厚者心率变异及其昼夜节律变化。结果:原发性高血压患者时域分析各项指标均下降(P<0.01),高血压伴左心室肥厚组rMSSD、pNN50进一步降低(P<0.01),昼夜节律消失。结论:原发性高血压患者心率变异减低,自主神经功能受损,平衡失调。高血压伴左心室肥厚者迷走神经功能进一步受损,昼夜节律消失。

    作者:邓昌明;罗开良;黄晶;殷跃辉 刊期: 2001年第01期

  • 幽门螺杆菌vacA基因型cagA基因与胃肠疾病的关系

    幽门螺杆菌(Hp)是一种革兰氏阴性的微需氧菌,它是引起慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及粘膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等的重要病因[1~4]。Hp感染可持续数十年甚至终生,但感染所造成的结果却有很大的不同,一些感染者只表现为无症状的带菌者,而另一些则表现为慢性胃炎、消化性溃疡甚至发展为胃癌。对于这些不同的结果,有以下几点解释:①感染的Hp菌株不同,其致病性不同而造成不同的结果;②感染宿主不同,其炎症反应、免疫反应不同而造成不同的结果;③Hp感染后胃粘膜细胞的增殖程度增加,环境中的某些因素如亚硝胺、高盐等造成不同的结果;④感染的阶段不同,早期感染特别是儿童期感染增加了胃癌的发生,却减少了溃疡病的发生。近年来,Hp毒素的致病作用越来越受到人们的重视。

    作者:张霞;沈鼎明 刊期: 2001年第01期

  • 药物所致粒细胞缺乏症并发感染的防治

    许多不同类型的药物均可产生严重的血液系统毒性,甚至可引起骨髓粒系祖细胞严重的生成障碍或成熟障碍,以及外周血粒细胞破坏过多,终导致外周血粒细胞明显减少甚至完全缺如。严重的粒细胞缺乏极易并发感染。如何预防和治疗感染,已经成为药物性粒细胞缺乏症治疗成功的关键。本文就1983年至1998年间我院收治的药物性粒细胞缺乏症25例进行分析。

    作者:肖青;胡妮妮 刊期: 2001年第01期

  • DHBV DNA在鸭胰脾组织中原位杂交的研究

    目的:对慢性DHBV感染鸭的肝、胰、脾组织DHBV DNA作对比研究。方法:采用原位杂交技术。结果:DHBV不仅可以感染鸭肝细胞,且可感染胰、脾组织,DHBV DNA阳性细胞的分布密度以肝组织高,胰脾次之。结论:DHBV具有组织器官泛嗜性,但其在肝外组织中的复制似不及在肝细胞中活跃。

    作者:彭凤英;郭树华 刊期: 2001年第01期

  • 几种组织培养上清液对造血祖细胞体外增殖分化的比较

    目的:寻求既经济又有效的造血生长因子样活性物质。方法:采用造血祖细胞体外培养与造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术,检测胎肌培养上清液、骨髓基质细胞培养上清液、胸腺细胞培养上清液与脾细胞培养上清液对造血祖细胞CFU-GM、BFU-E和CFU-Mix增殖分化的影响。结果:胎肌培养上清液和对CFU-GM和CFU-Mix的体外增殖与分化有明显刺激作用,而胸腺与脾细胞条件培养上清液对BFU-E的生长有显著促进作用。结论:胎肌培养上清液中可能含GM-CSF样活性物质,而胸腺与脾细胞培养上清液具有较高IL-3样活性,可以利用组织与细胞培养上清液替代重组造血生长因子进行造血细胞的实验研究和临床诊断。

    作者:姜蓉;郑敏;王亚平;吴宏;王莎莉;戴勤 刊期: 2001年第01期

  • 冷冻对人精子结构及功能的影响

    目的:研究冷冻对人精子结构和功能的影响。方法:采集健康已生育25~35岁男性供精者精液作标本,7.5%单甘油为冷冻保护剂(Cryopreservative agent,CPA),每份精液分别采用速、缓降温法冷冻,冻前、后分别作精液常规分析、精尾低渗肿胀试验、精子超微结构、精子穿卵试验。结果:复温后未加CPA者.均未见有复苏存活的精子;加CPA者,精子存活率、活动率、精尾低渗肿胀率、精子超微结构相对完整的百分率、穿卵率均显著下降,速冻法比缓冻法下降更明显。结论:7.5%单一甘油对人类精子具有显著的冷冻保护作用,精液冻贮对精子的结构及功能均有不同程度的损害,不同的降温速度对人精子产生不同的冷冻损伤,缓冻法降温冻贮人类精液的力法简单经济,能较好地较长时期地保持人精子功能和结构完整性。

    作者:汤召兵;陈在贤 刊期: 2001年第01期

  • 颅内占位性疾病手术前后的动态脑电图(AEEG)监测

    目的:通过AEEG监测,了解颅内占位性疾病手术前后的脑机能变化特点。方法:选择260例颅内占位性疾病者,术前1~3天、术后1周、术后1~3月分别观察其AEEG表现。结果:(1)AEEG术前、术后1周或术后1~3月异常率分别为88.1%、97.7%、77.7%。(2)术前无癫痫发作组,术后新发癫痫17例,提示手术对大脑皮质的损害,可能增加致痫机会。结论:AEEG对颅内占位性疾病术前术后的监测,可在一定程度上反映病灶及手术对脑机能的影响,为临床治疗提供参考。

    作者:但炜;唐文渊;何建国 刊期: 2001年第01期

重庆医科大学学报杂志

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