张坤;余佩武;高朋芬;汪灏;刘伟;饶云
目的研究猪内源性逆转录病毒在体内和体外的感染性,建立理想的细胞模型,为猪一人间跨种移植的生物安全性评价奠定良好的基础.方法运用组织块培养法、冷胰蛋白酶方法及热胰蛋白酶方法培养猪皮肤成纤维细胞,比较3种方法的优点和缺点.结果建立了猪皮肤成纤维细胞系组织块培养法优于胰酶法.结论应用组织块培养法培养猪皮肤成纤维细胞优于胰酶法,经济实惠、操作简便、易于掌握;并为研究PERV在体内和体外的感染性提供了理想的细胞模型,为评估猪一人间跨种移植的生物安全性提供一种新的方法;对建立动物克隆生产的皮肤体外培养模式具有重要的参考价值.
作者:丁生财;陈意生;魏泓;刘萍 刊期: 2004年第13期
目的以细胞外基质成分纤维连接蛋白促进培养的人头皮毛乳头细胞凝集性生长行为,观察毛乳头细胞的凝集性生长对诱导毛囊形成能力的影响.方法传代培养的人头皮毛乳头细胞经细胞外基质纤维连接蛋白预处理后,促进形成凝集性生长团,再与毛囊上皮细胞共同移植于裸鼠皮下,分别于8、12周进行组织学检查,观察毛囊形成及分化程度.结果8周后纤维连接蛋白预处理的毛乳头细胞组可见有毛囊样结构形成,未处理组仅见松散细胞团;12周后两组均可见有毛囊样结构形成,但纤维连接蛋白预处理组较未处理组诱导形成毛囊样结构分化更成熟;真皮成纤维细胞组未见有毛囊样结构形成.结论毛乳头细胞的凝集性生长特性对其诱导毛囊形成的能力有密切的关系,细胞呈凝集性生长后,其生物学功能增强.
作者:麦跃;刘荣卿;伍津津;程波;唐书谦;钟白玉 刊期: 2004年第13期
目的研究胃癌患者外周血树突状细胞(DCs)细胞表型表达水平,与正常人DCs细胞表型表达进行比较并分析其临床意义.方法分离培养胃癌患者及正常人外周血DCs,流式细胞仪检测细胞表型表达变化.结果培养第3天,DCs细胞表型表达均较低,两组之间差异不显著;培养第7天,两组培养DCs细胞表型表达均较第3天显著升高,且两组之间差异非常显著;培养第12天,DCs表型表达较培养第3天差异非常显著,较培养第7天差异不显著,两组之间差异显著.结论外周血培养DCs的细胞表型表达随培养时间推移而升高,至细胞成熟时趋于稳定;胃癌患者DCs细胞表型表达较正常人显著降低,了解胃癌患者体内DCs细胞表型表达水平,对评判患者预后及生物治疗疗效有一定的参考价值.
作者:张坤;余佩武;高朋芬;汪灏;刘伟;饶云 刊期: 2004年第13期
目的建立适宜于各种肝脏交感神经实验的动物模型.方法应用家兔解剖出肝脏的内脏神经支,并测定刺激该神经后血糖值的变化来加以鉴别.结果明确了肝脏的交感神经支的界定方法,电刺激该神经支后血糖值明显升高.结论该模型可为各种有关肝脏交感神经的实验提供稳定而可靠的实验手段.
作者:夏锋;何振平;段恒春;李昆;董家鸿 刊期: 2004年第13期
由于无精子症的发病机制相当复杂,给临床治疗带来了许多困难.随着这些年来的辅助生殖技术(ART)不断完善和深入发展,人们对无精子症的病因及治疗的研究都有了更深刻的认识.下面就近年来人们对无精子症的相关研究及治疗进展做一综述.
作者:刘锋;邹彦;邓志华;王植柔;卢克焕 刊期: 2004年第13期
目的研究脑出血后血肿周围水肿带细胞凋亡随出血时相点的变化规律,以及脑出血后神经细胞凋亡和神经功能的关系.方法健康雄性Wistar大鼠体质量200~250 g,随机分组,脑内尾状核注射分别Ⅳ型胶原酶/肝素生理盐水溶液、单纯生理盐水,分为术后6、12、24h、3、7 d共5个时相点.术后在相应时相点评价大鼠神经功能缺损后,制作冰冻切片,对切片进行HE染色和TUNEL染色,之后利用图像分析仪,观察阳性细胞数.结果脑出血后动物出现不同程度神经功能缺损,在3 d神经功能损害严重.出血6 h后血肿周围出现TUNEL阳性细胞,3 d左右TUNEL阳性细胞范围广.结论脑出血后细胞凋亡与神经功能损害程度一致,细胞凋亡在脑出血后神经功能损伤中起重要作用.
作者:张艳玲;陈康宁;邵淑琴;王英 刊期: 2004年第13期
肠套叠在小儿发生较多,成人较为少见[1],因而腹部侧伤后发生肠套叠报道甚少.我科于2003年抢救治愈成人腹部创伤手术后发生粘连性肠梗阻继发肠套叠1例,现报告如下.
作者:孙溦;文亮;尹昌林;阎伯刚;楚军;张渝 刊期: 2004年第13期
目的以构成比不同的聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)为原料制备人工神经诱导管,并对其体内外降解性能变化进行观测.方法①以0.2 mol/L PBS(pH 7.4)为人工降解液,观测PLGA(85:15)和PLGA(50:50)管12周体外降解期间吸水率、失重率及生物降解率变化,并以扫描电镜观察其微结构变化;②采用肌肉包埋方法,观测PLGA(85;15)和PLGA(50:50)管8周体内生物降解率变化.结果①体内外降解条件下,PLGA(50:50)管吸水率、失重率及生物降解率显著高于PLGA(85:15)管;②两种材料样品体内生物降解率显著高于体外降解率;③扫描电镜观察显示,随降解时间延长,材料样品表现为特征性的虫蚀样破坏并逐渐加重,以PLGA(50:50)管尤为明显.结论共聚物的构成比以及降解环境是影响聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物生物降解性能的重要因素.
作者:张文捷;李兵仓;王建民;王建忠;陈建梅 刊期: 2004年第13期
目的观察茶树油(teatree oil,TTO)对脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)的杀灭效果,了解TTO对病毒的灭活能力.方法根据消毒技术规范指定的方法,采用细胞感染试验测定病毒与各浓度TTO溶液作用前后感染细胞的滴度.结果0.5%TTO作用40min和60min能分别灭活PV 4.33 log10和5.5 log10;1.0%TTO作用40min和60min能灭活PV 5.33 log10和5.5 log10.结论TTD对悬液中的PV有明显的杀灭作用.
作者:王懿;王振维 刊期: 2004年第13期
目的确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP2的形态与大小、裂菌特性、佳感染复数、一步生长特性等基本的生物学特性.方法电镜观察纯化噬菌体颗粒;制备PaP2噬斑,观察其特点;提取噬菌体感染的细菌基因组,用SmaⅠ酶切,通过脉冲场电泳观察酶切产物的带型特点;测定不同感染复数,培养3.5 h后细菌/噬菌体液中的噬菌体滴度;加入宿主菌及噬菌体使MOI=10,进行一步生长实验,在0时刻和每隔15 min测定噬菌体滴度.结果噬菌体PaP2头部直径约为52nm,无囊膜,有一短尾;噬斑雾状半透明,直径约1~2 mm;被噬菌体感染的宿主菌基因组的Sma Ⅰ酶切产物带型,比未感染宿主菌的多出了1条大于噬菌体基因组的片段;当MOI=10时宿主菌产生的子代噬菌体滴度高;绘制出了一步生长曲线.结论PaP2属短尾噬菌体科,是溶原性噬菌体;佳感染复数是10;感染宿主菌的潜伏期是75 min,裂解期是90min,平均裂解量是34.
作者:黄建军;胡晓梅;饶贤才;张克斌;金晓琳;周莹冰;李明;申晓冬;朱军民;胡福泉 刊期: 2004年第13期
目的比较国产盐酸托烷司琼和进口盐酸托烷司琼在控制由顺铂化疗所致食欲减退、恶心、呕吐反应的疗效和安全性.方法采用随机、双盲对照方法对48例接受含顺铂化疗的恶性肿瘤患者进行研究.于化疗前1 d开始给予国产盐酸托烷司琼或进口盐酸托烷司琼,1次/d,5 mg/次,连用6 d,同时观察并记录患者食欲减退、恶心、呕吐反应及其他不良反应.结果人选患者全部按试验要求完成现察,国产盐酸托烷司琼与进口盐酸托烷司琼在控制食欲减退、恶心、呕吐反应方面及发生其它不良反应方面均无显著性差异(P>0.05).结论国产盐酸托烷司琼在控制含顺铂化疗所致食欲减退、恶心、呕吐反应的疗效和用药安全性与进口盐酸托烷司琼相当.
作者:梁后杰;边志衡;黄海辉;胡绍毅;陈世旭;张艳玲;蒋金妍;左文伟;沈健;赵晓昕;康瑜 刊期: 2004年第13期
目的探讨重庆地区胃癌人群亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因1298AC多态性及与H.pylori感染的关系.方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测122例胃癌和101例正常对照的MTHFR基因1298AC多态性:采用PCR和Warthin-Starry银染色法检测幽门螺杆菌(H.pylori).结果胃癌组1298AA、1298AC和1298CC 3种基因型频率分别为59.8%、36.1%和4.1%,与对照组中3种基因型频率57.4%、37.6%和5.0%相比无显著差异(P>0.05).以1298AA基因型的OR为1.00,胃窦癌AC基因型的OR为0.87(95%CI,0.42~1.82),CC基因型的OR为0.41(95%CI,0.05~3.72).胃癌MTHFR1298AC 3种基因型中H.pylori的检出率无明显差别(P>0.05).结论重庆地区人群中MTHFR 1298AC多态性可能是胃窦癌的保护因素,MTHFR 1298AC多态性与H.pylori感染无关.
作者:司佩任;房殿春;张浩;杨柳芹;罗元辉;廖化禹 刊期: 2004年第13期
目的寻求方便、经济、实用的图形视网膜电图(pattern electroretiogram,P-ERG)记录电极,推广P-ERG在眼科临床的应用.方法正常人30人(50只眼),将自制的金片钩状记录电极,在表麻下安置于瞳孔正中下睑穹隆中,同时将用生理盐水湿润的DTL丝状电极放于下眼睑穹隆部,分别记录P-ERG的波形.结果自制电极记录的P-ERG波形稳定,与DTL电极记录比较,其N35、P50、N95波的振幅和潜伏期均无统计学上差异,数值可靠.结论自制金片钩状电极能稳定地记录到P-ERG的各波形,可代替传统的P-ERG记录电极,适用于眼科临床.
作者:王仕军;彭承琳;阴正勤 刊期: 2004年第13期
目的研究以自杀性质粒pUT携带的Mini-Tn5转座子对弗氏枸橼酸杆菌进行转座诱变.方法转座采用双亲本接合法,对获得的接合子进行无抗性选择条件下的连续传代测定其稳定性,并测其氨苄青霉素耐性及进行质粒提取以排除质粒传代原因造成假阳性的可能.对接合子进行营养缺陷株和运动突变株的筛选.结果Mini-Tn5 Km转座率约为每受体菌9.2× 10-6,接合子在无抗性选择的情况下培养3代仍保持稳定,卡那霉素抗性不消失,说明插入到染色体上的转座序列是稳定传代的.接合子的抗性是染色体而非质粒编码的结果.对营养缺陷株的筛选和分析提示,转座子的插入是随机的,弗氏枸橼酸杆菌染色体中无明显的转座插入热区.使用该转座子能有效筛出运动突变株.结论Mini-Tn5系列转座子适于大规模筛选弗氏枸橼酸杆菌突变株.
作者:丛延广;徐启旺 刊期: 2004年第13期
目的通过CRH刺激大鼠下丘脑脑片,探讨下丘脑CRH和CRH1R在下丘脑中的分布和表达规律.方法采用大鼠下丘脑脑片实验模型,运用免疫组织化学技术,观察CRH刺激大鼠下丘脑脑片后CRH和CRH1R在下丘脑中的分布和表达规律.结果CRH刺激下丘脑脑片后下丘脑CRH和CRHlR含量明显增多,而CP-154526、H89可显著抑制CRH和CRHlR的增加.结论CRH刺激下丘脑脑片后增多的CRH与CRHIR结合后进一步引起下丘脑神经元CRH和CRHIR表达增加.提示在严重创伤应激反应中,CRH通过PKA途径实现对下丘脑神经元CRH的表达的超短正反馈调节.
作者:陈立朝;许民辉;周继红 刊期: 2004年第13期
目的研制具有消除抗坏血酸干扰的电流型葡萄糖传感器.方法用电化学法聚合邻苯二胺膜于铂电极上,并将葡萄糖氧化酶嵌合其中,制成电流型葡萄糖传感器.结果该传感器对葡萄糖有很好的灵敏度、响应性、线形性、稳定性和抗抗坏血酸干扰性,灵敏度为0.39 mA·mmol-1·L-1,响应时间5 s,线性范围是3.5~7.5 mmol/L,稳定性为25d,抗坏血酸浓度低于80μmol/L时,对葡萄糖的测定结果均无明显影响(P>0.05).结论该传感器可有效地消除抗坏血酸的干扰,为研制实用型血糖检测仪奠定了基础.
作者:蒲晓允;邵方;李招权;黄辉;邓均;张春雷 刊期: 2004年第13期
目的探讨去甲肾上腺素(NE)诱导心肌细胞原癌基因的超常表达与适应性心肌肥大的关系及其受体介导和跨膜信号转导的作用.方法以10-6mol/L NE灌流大鼠离体心脏1 h,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,测定不同实验条件下左心室c-fos和c-myc表达水平.结果10-6mol/L NE灌流心脏后c-fos和c-myc表达均显著增强;用5×10-6mol/L的哌唑嗪预先灌流可完全阻断NE诱导的c-fos和c-myc表达增强的效应;分别用50mmol/L的新霉素和10μmol/L的钌红预先灌流心脏,可显著抑制NE诱导的c-fos和c-myc表达.结论NE经α1-受体介导,可诱导心肌c-fos和c-myc表达增强;磷酸肌醇-钙信号系统和二酰基甘油-蛋白激酶C信号系统可能与NE诱导心肌c-fos和c-myc表达增强有关.
作者:刘晓红;魏振宇;高原 刊期: 2004年第13期
目的研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇(E2)对其骨形态发生蛋白受体(BMPR)ⅠA及核结合因子α1(Cbfα1)mRNA表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用.方法用1,25-(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,应用RT-PCR和Northern blot技术,观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中BMPR-Ⅰ A及Cbfα1 mRNA表达的影响,以α-磷酸奈酚为底物测定细胞碱性磷酸酶的活性,Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量.结果E2能明显抑制骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中BMPR-Ⅰ A及Cbfα1mRNA的表达,且呈剂量依赖性,并被Northern blot结果所证实.ALP活性随E2浓度增加而降低,细胞Ⅰ型胶原的合成量随E2浓度增加而减少.结论E2能明显抑制体外培养的骨髓基质细胞分化过程中BMPR-Ⅰ A及Cbfα1 mRNA的表达,降低成骨细胞生成.
作者:袁成良;金小岚;候建红;栗群英;黄迎春 刊期: 2004年第13期
下肢骨折后并发深静脉血栓形成(deep venous thrombosis of the extremity,DVT)是下肢骨折后常见的并发症之一.因其极易被忽视,多数病人未能得到及时的诊治,不仅影响原发病的治疗,且极易演变成血栓形成后遗症.长期影响患者生活,少数患者可发生肺栓塞,严重威胁生命安全.为提高对本病的治疗及预防水平,我们回顾性分析我院1996年1月-2003年12月收治的下肢骨折后并发深静脉血栓形成28例,重点对治疗和预防进行探讨.
作者:隆永效;孙英信;孔令泉 刊期: 2004年第13期
患者,男,20岁,发现心脏杂音19.5年.于多家医院就诊,行心脏彩超检查,均提示室间膈缺损的可能性大.19.5年来,患者无明显的心慌、气促、夜间阵发性呼吸困难等症状,体力不受限,与同龄相比,发育无明显差异.
作者:但三利 刊期: 2004年第13期