学术投稿

TALE-TFs构建方法的建立及优化

王媛媛;苏攀柯;黄爱龙;胡接力

关键词:类转录激活效应物, 质粒构建, 转录, 转染
摘要:目的:在传统方案的基础上建立一种经济有效且易于操作的类转录激活效应子转录因子(TALE‐TFs)的构建和功能检测方案。方法采用基于PCR的Golden gate克隆法分别尝试构建类转录激活效应物(TALEs)的六聚体、五聚体、四聚体和三聚体,比较构建结果,选择优效果方案进行TALE‐TFs的构建。采用片段置换反应(FSR)构建了含有 TALE‐TFs结合片段的RFP质粒pminCMV ,并与TALE‐TFs进行共转染,观察红色荧光验证TALE‐TFs的转录活性。结果 TALEs中所含的串联重复模块越少,获得的构建产物越多。共转染时,TALE‐TFs使得pminCMV成功启动表达。结论该研究为不同条件下实验方案的选择提供了依据,并利用含有TALE‐TF结合片段和红色荧光的质粒建立了快捷直观的转录活性验证方法。
重庆医学杂志相关文献
  • 促甲状腺激素降低与脑卒中后抑郁的相关性研究

    目的:探讨促甲状腺激素(TSH)降低与脑卒中后抑郁的相关性。方法收集2012年10月至2014年7月该院住院治疗的急性脑梗死患者101例,根据TSH是否小于0.27 uIU/mL分成 TSH降低组和 TSH正常组。入院时两组患者分别进行神经功能缺损(NIHSS)评分,出院后随访3个月分别进行汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分和改良的Rankin量表(mRS)评分。结果 TSH降低组3个月时的HAMD评分(16.04±3.34 vs .14.03±3.47,P=0.000)、mRS均明显高于TSH正常组(3.2±1.1 vs .2.1±1.5,P=0.000)。TSH降低组预后差的比率(89.3%)高于TSH正常组(38.4%)。结论 TSH浓度降低与脑卒中后抑郁可能存在相关性,TSH浓度低的急性脑梗死患者预后较差。

    作者:陈劲松;林贵喜;姚键 刊期: 2015年第15期

  • 精神心理因素与功能性消化不良的相关性研究进展

    功能性消化不良(functional dyspepsia ,FD)是一种常见的功能性胃肠疾病。欧美发达国家成年人发病率19%~41%,我国消化不良患者约占普通内科门诊的10%,占消化内科门诊的50%[1]。随着社会经济的快速发展,中国FD的发病率呈上升趋势。目前治疗 FD的常用药物(如抑酸剂、促动力药物)及治疗方法可一定程度上缓解 FD患者症状,但总的治疗效果不尽人意,其主要原因是 FD的发病机制尚不完全清楚。越来越多的资料表明:FD的发生除了与胃肠动力障碍、内脏高敏感性、幽门螺杆菌感染和脑‐肠轴等因素有关外,精神心理因素与FD的发生、发展密切相关。近年来,精神心理因素与FD相关性研究取得了较大的进展,本文就此作一综述。

    作者:杨昌妮(综述);刘纯伦(审校) 刊期: 2015年第15期

  • 肺源性心脏病并发低钠血症92例临床分析

    肺源性心脏病是由慢性支气管炎、肺气肿及其他胸肺部疾病引起的心脏病,是老年性心脏病中的多发病,肺动脉高压、右心室增大、右心功能不全为其主要病理改变。急性发作时可以发生多种严重并发症,其中低钠血症是常见的并发症之一,严重低钠血症可出现低渗性脑病,易与肺源性心脏病缺氧或者二氧化碳潴留产生肺心脑病相混淆,特别是老年患者,由于特殊生理结构及疾病的不典型临床表现,在诊疗过程中极易误诊或漏诊[1‐2]。本研究旨在探讨肺源性心脏病合并低钠血症的病因及治疗方案,为临床提供依据。

    作者:孙婷;袁连红;余伟杰 刊期: 2015年第15期

  • 子宫肌瘤相关性不孕研究进展

    子宫肌瘤即子宫平滑肌瘤是女性常见的良性肿瘤,其发病率从5.4%到77%不等,检测对象和手段的不同导致了如此大的差异;流行病学调查显示随着年龄的增加,其发病率呈上升趋势。子宫肌瘤导致的不孕患者约占所有不孕症患者的5%~10%,既可以引起反复流产,也可以作为独立因素存在(1%~2.4%[1])而导致不孕;这类排除了内分泌及其他器质性病变的不孕症患者,可以称为子宫肌瘤相关性不孕。随着社会婚育观念的变化,及辅助生殖技术的大力发展,35岁以上子宫肌瘤相关性不孕患者数量明显增加。

    作者:陈骊;王智亮(综述);邹敏(审校) 刊期: 2015年第15期

  • 单人行全身麻醉诱导不同通气方式对腹腔镜下胆囊切除术胃胀气的影响

    近年来,由于物质生活的提高,人们运动量的减少,使结石性胆囊炎发病趋于年轻化[1]。腹腔镜下胆囊切除术因其创伤小、恢复快、住院时间短、出血少等优点被迅速应用于临床。而良好的手术视野是手术顺利进行的前提。该手术选用气管内插管控制呼吸的全身麻醉为常用和安全。但麻醉诱导期间引起的胃胀气常影响胆囊三角的暴露,影响外科的手术操作,严重者需要安置胃管吸引出进入胃内的气体减压后才能使手术继续进行,延长了手术时间,对患者也造成了不良影响。作者在临床工作中观察了单人行全麻诱导时,机械控制呼吸与手控呼吸对腹腔镜胆囊切除术患者胃胀气程度的影响,并将二者进行了比较,现报道如下。

    作者:肖雪梅;程邵洪 刊期: 2015年第15期

  • 126例梗阻性黄疸患者的磁共振胰胆管成像随访分析

    目的:探讨磁共振胰胆管成像(M RC P )在梗阻性黄疸中的应用价值。方法收集126例临床诊断为梗阻性黄疸的患者,行腹部M RI平扫及M RCP检查,记录诊断结果,持续随访观察,将M RCP诊断结果与随访得到的病理或逆行胰胆管造影(ERCP)结果进行对照分析。结果 MRCP诊断结果与随访结果对比,定位诊断符合率100%。定性诊断 MRCP与随访结果无统计学差异。针对不同原因的梗阻,MRCP具有较高的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结论 MRCP在梗阻性黄疸定位及定性诊断方面具有较高的准确性,对不同梗阻原因的判断亦具有较高的诊断价值。

    作者:李建;张文兰;赵丽华 刊期: 2015年第15期

  • 《重庆医学》开通微信公众平台

    作者: 刊期: 2015年第15期

  • 重庆市永川区居民高血压患病率及影响因素分析

    目的:了解永川区居民高血压患病率及影响因素,为开展高血压防治工作提供建议。方法采用分层整群随机抽样的方法抽取3个镇与1个街道的18岁以上的常住居民,进行问卷调查、体格检查与抽血检测空腹血糖和餐后2 h血糖,采用SPSS17.0统计分析高血压患病率,采用卡方检验与多因素Logistic回归分析高血压的影响因素。结果共计调查1202人,调查发现居民对高血压防治知识认知水平低于30.00%,21.46%的居民每天吸烟,31.78%的居民平时进行体育锻炼,超质量与肥胖的比例分别为24.63%与6.07%,高血压患病率为23.88%。多因素 Logistic回归分析结果提示:年龄(OR=1.95,95% CI:1.74~2.17)、高血压危险因素认知水平(OR=2.11,95% CI:1.18~3.79)、平均每天每人油摄入量(OR=0.80,95% CI:0.64~0.99)、体质量(OR=1.97,95% CI:1.58~2.46)与血糖(OR=0.63,95% CI:0.50~0.78)是高血压患病率的独立影响因素。结论永川区居民高血压患病率高,居民高血压防治知识匮乏,吸烟、饮酒、膳食不合理、身体活动不足等高危因素普遍存在,应切实加强高血压的综合防治工作。

    作者:谷伟;袁跃龙;丁贤彬;沈卓之;张春华;陈克江;张红军 刊期: 2015年第15期

  • 血液灌流联合血液滤过对有机磷农药中毒患者疗效及炎症状态的影响

    目的:探讨血液灌流(HP)联合血液滤过(HF)在有机磷农药中毒患者中的应用及对机体炎症状态的影响。方法将68例急性有机磷农药中毒(AOPP)患者按随机数字表法分为对照组及观察组,对照组采用血液透析(HD)联合HP进行血液净化,而观察组则采用HP联合 HF进行血液净化。观察并比较两组患者生存率、生存时间、全血胆碱酯酶活力、血清转化生长因子‐β1(TGF‐β1)、血清肿瘤坏死因子‐α(TNF‐α)以及血清白细胞介素‐6(IL‐6)的水平。结果与治疗前相比,所有患者血清 TGF‐β1、TNF‐α、IL‐6水平均显著下降(P<0.05);与对照组相比,观察组生存时间显著延长(P<0.05),治疗后血清 TGF‐β1、TNF‐α以及IL‐6水平下降更为显著(P<0.05)。结论血液净化疗法治疗AOPP疗效肯定,以 HP联合HF方案疗效更佳。

    作者:黄建;王晓艳 刊期: 2015年第15期

  • Pim-1在非小细胞肺癌中的表达及其与c-M yc的相关性

    目的:研究原癌基因Pim‐1在非小细胞肺癌及癌旁正常组织中的表达情况及其与c‐M yc的相关性。方法收集该院胸外科手术切除的非小细胞肺癌患者的肺癌及癌旁正常肺组织标本各30例,统计临床病例资料及跟踪后期病理结果,利用RT‐PCR、qRT‐PCR及免疫组织化学方法检测肺癌及癌旁正常组织中 Pim‐1 mRNA、c‐Myc及 Pim‐1蛋白的表达,分析Pim‐1表达与临床病理特征及c‐Myc表达的相关性。结果在非小细胞肺癌中Pim‐1阳性率、mRNA及蛋白表达量明显高于癌旁组织, mRNA表达量分别为0.798±0.083和0.394±0.107(P<0.01),蛋白阳性例数分别为18例及6例(P=0.002)。Pim‐1蛋白的表达与非小细胞肺癌患者的年龄差距、性别差异、有无吸烟史、肿瘤病理类型及分化程度无关(P>0.05),但与有无淋巴结转移及肿瘤的TNM分期有关(P<0.05),有淋巴结转移及TNM分期升高,其表达量也随之上调。Pim‐1与c‐Myc蛋白表达呈正相关,相关系数(r)为0.433(P=0.017)。结论 Pim‐1在非小细胞肺癌组织中呈高表达趋势,且随着存在淋巴结的转移及 TNM 分期的升高,其表达也随之增加。

    作者:刘星宏;温桂兰 刊期: 2015年第15期

  • 脐动脉舒张期血流消失时胎儿生长发育及出生情况分析

    目的:分析晚孕期脐动脉舒张期血流信号消失时胎儿生长发育和出生时情况。方法采用彩色超声诊断仪检测脐动脉血流信号,对比分析脐动脉血流正常与脐动脉舒张期血流消失时胎儿的生长发育指标和出生时Apgar评分。结果脐动脉舒张期血流消失的胎儿生长发育小于孕龄的发生率明显高于正常组,出生时宫内窘迫的发生率也明显高于正常组。结论晚孕期脐动脉舒张期血流消失提示胎儿宫内缺氧,胎儿生长发育相对缓慢。

    作者:秦艳 刊期: 2015年第15期

  • 某学校风疹疫情预防控制实例分析

    目的:分析一起学校风疹疫情爆发的原因,探讨预防控制学校风疹疫情的措施。方法调查和收集风疹病例资料,应用描述性流行病学方法进行分析,并对所采取的措施进行评价。结果该起疫情发病209例,罹患率23.51%(209/889),从低年级到高年级发病率呈递减趋势(χ2=5.047,P<0.01),男生发病高于女生(χ2=4.378,P=0.036),内宿生发病高于外宿生(χ2=19.909,P<0.001);889名学生均无风疹疫苗接种史;采集15例病例血清进行实验室检测,麻疹Ig M抗体全部阴性,检出风疹 Ig M 抗体阳性3份,阳性检出率为20%(3/15);该起风疹疫情历时43 d ,以皮疹为主要症状,无危重病例;通过病例隔离治疗、环境和空气消毒、风疹疫苗应急接种、健康教育等综合防控措施,疫情得到控制。结论存在风疹疫苗免疫空白是学校风疹疫情爆发的主要原因。及时认真落实应急接种风疹疫苗、对传染源隔离治疗、对空气消毒和通风等措施,可以有效控制疫情。

    作者:凌洪习 刊期: 2015年第15期

  • 微小RNA 在食管鳞癌化疗耐药性中的研究现状

    食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma ,ES‐CC)是我国常见的消化道恶性肿瘤之一;化疗及新辅助化疗是ESCC非手术治疗的重要手段,但后期肿瘤耐药性的产生是临床面临的难题。近年来表观遗传学领域研究显示:微小RNA (miRNAs)是非编码单链 RNA ,在肿瘤细胞增殖、转移、凋亡等过程中扮演着重要角色;通过筛查肿瘤耐药产生过程中miRNAs的变化,寻找相应的靶蛋白及信号通路,将为逆转耐药性,增加化疗药物敏感性提供帮助。

    作者:胡智;刘单(综述);戴天阳(审校) 刊期: 2015年第15期

  • 改变穿刺点后抽吸对治疗CT 引导下肺穿刺活检所致气胸的意义

    目的:探讨改变穿刺点抽吸对治疗C T 引导下肺穿刺活检并发气胸的价值。方法回顾性分析2012年1月至2014年1月C T引导下经皮肺穿刺活检术后并发气胸并行抽气治疗患者的相关资料,比较常规抽吸与改变穿刺点抽吸对气胸的疗效差异。结果85例进行常规抽吸治疗气胸患者,有效率68.2%(58/85),其中15例完全缓解,43例部分缓解;常规抽吸无效占31.8%(27/85),之后再改变穿刺点后穿刺抽吸,其中完全缓解3例,部分缓解21例,无效而采用胸腔闭式引流术者3例;增加使用改进方法后气胸治疗总有效率由68.2%(58/85)上升至96.5%(82/85)。结论采用改变穿刺点抽吸气体可使C T引导下肺穿刺活检术并发气胸治疗成功率明显增加。

    作者:曾利川;廖华强;杜勇;杨汉丰;徐晓雪;谢明国;张玉东;李莉;王渠;胡琳 刊期: 2015年第15期

  • 腓肠外侧皮神经营养血管皮瓣在小腿组织缺损修复中的应用

    目的:探讨腓肠外侧皮神经营养血管皮瓣修复小腿组织缺损的方法及效果。方法对收治的15例小腿前侧存在骨质或肌腱外露组织缺损患者,选择以腓肠外侧皮神经营养血管链为供血基础的皮神经营养血管皮瓣,通过明道转移修复缺损,顺行皮瓣以腘窝外侧皮动脉为供血源,逆行皮瓣以腓动脉穿支为供血源。结果15例患者15处创面,选用腘窝外侧皮动脉为供血源的皮瓣9块,腓动脉穿支为供血源的皮瓣6块,大切取面积19 cm ×10 cm。术后所有皮瓣均成活,术后随访长1年,皮瓣质地优良,外观功能良好。结论腓肠外侧皮神经营养血管皮瓣血供可靠,皮瓣不臃肿,手术操作简单易行,是修复小腿组织缺损的良好选择。

    作者:杨力;朱小平;郭贤钊 刊期: 2015年第15期

  • 2型糖尿病患者胰岛素敏感性与甲状腺激素相关性分析

    目的:探讨2型糖尿病患者胰岛素敏感性与甲状腺激素水平的关系,分析甲状腺激素与2型糖尿病病理关系。方法选择86例2型糖尿病患者列为观察组,选取同期健康体检者72例为对照组。所有患者实施空腹血浆葡萄糖(FPG )、餐后2 h血糖(2 h PG)及甲状腺激素检测,包括游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、促甲状腺激素(TSH ),计算胰岛素敏感性指数(ISI),分析胰岛素敏感性与甲状腺激素水平的关系。结果观察组FT3、FT4、FT3/FT4、HOMA‐IR、ISI分别为(4.82±1.13)pmol/L、(13.12±4.36)pmol/L、0.39±0.08、2.94±0.37、-5.18±0.82,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),观察组TSH为(2.51±1.03)mU/L ,两组对比差异无统计学意义(P>0.05);整体指标 HOMA‐IR与FT3呈负相关(r=-0.543,P=0.000),与FT4呈正相关(r=0.611,P=0.000),ISI与FT3呈正相关(r=0.551,P=0.001),与FT4呈负相关( r=-0.599,P=0.000)。结论甲状腺激素水平与胰岛素敏感性关系密切,甲状腺激素水平可能是2型糖尿病发病机制的部分病理原因。

    作者:应元旦;林日可;杨宁 刊期: 2015年第15期

  • 云南省道路伤害不安全交通行为研究

    目的:了解2010年云南省居民不安全交通行为的流行现况、高发的人群特征及其影响因素,为制定相关的防治对策与措施提供科学依据。方法2010年采用多阶段分层随机整群抽样的方法,随机抽取每户中18岁及以上常住人口进行调查,分析居民不安全交通行为的流行现状及其特征。结果云南省居民不安全交通行为的发生率为59.09%。头盔佩戴率为40.45%;驾驶员安全带经常佩戴率为46.75%,酒后驾车率为18.05%;疲劳驾驶率为29.06%;无证驾驶率为16.25%。云南省不安全交通行为的高发人群是男性、非婚状态者、少数民族和体力劳动者。结论云南省不安全交通行为仍然很严重。

    作者:杨云娟;肖义泽;许雯;杨永芳;戴璟 刊期: 2015年第15期

  • 降低中心静脉导管脱管率的品管圈实践

    品管圈[1](quality control circle ,QCC)是由相同、相近或互补之工作场所的人们自动自发组成数人一圈的小圈团体(又称QC小组,一般6人左右),通过全体合作、集思广益,按照一定的活动程序,来解决工作现场、管理、文化等方面所发生的问题及课题。护理工作结合品管圈活动的宗旨:发现自己工作岗位上的问题,并加以研究、解析,通过标准化使管理安定,并促进品质保证的有效进行,从而达到节省劳动成本并提高产品质量的目的。本院于2012年初启动此项活动,科室立即相应号召学习、组织、开展品管圈活动,并结合科室自身特点,终取得满意成果,获得院领导、医务人员、患儿及家属的一致好评,现将活动相关事项汇报如下。

    作者:吴娟;张桂芳;王丽;陈涛燕;汪英;陈春利;郑显兰 刊期: 2015年第15期

  • 血清尿酸对便携式血糖仪测定末梢血糖的影响

    目的:了解血清尿酸对便携式血糖仪测定末梢血糖的影响。方法选择住院的伴有高尿酸血症的2型糖尿病患者60例为研究对象,同期住院的不伴有高尿酸血症的2型糖尿病患者60例为对照组。所有患者测定末梢血糖的同时,抽取静脉血测定血糖,并测定血清尿酸水平。分析血清尿酸对末梢血糖测定结果的影响程度。结果(1)末梢血糖与静脉血糖检测结果的差值与血清尿酸有相关性。(2)两组患者血糖的差值有差异。(3)两组血糖误差均在可接受范围内。结论血清尿酸对末梢血糖的测定有一定的影响,但在可接受范围内,可以信任便携式血糖仪测定的血糖值。

    作者:刘影;高鹏霞;吕述军;沈磊 刊期: 2015年第15期

  • TCT 联合DNA 定量分析在宫颈病变筛查中的临床应用

    目的:探讨液基薄层细胞学检查(TCT )联合DNA定量分析在宫颈病变筛查中的应用价值。方法回顾性分析TCT(n=2883)、DNA定量分析(n=1742)及TCT联合DNA定量分析(n=333)3种方法对诊断宫颈病变的临床意义。结果TCT、DNA定量分析和联合检查的阳性符合率分别为43.86%、68.04%、81.16%,对宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ及以上病变的诊断,TCT与DNA定量分析阳性符合率差异有统计学意义(P<0.01),联合检查与DNA定量分析、TCT相比,阳性符合率差异均有统计学意义(P<0.01)。TCT检查发现宫颈病变的敏感性、特异性为69.44%、92.42%;DNA定量分析发现宫颈病变的敏感性、特异性为85.71%、87.89%;联合检查发现宫颈病变的敏感性、特异性为96.55%、95.89%。结论 DNA定量分析和TCT在宫颈病变筛查中均有较高的临床诊断价值,联合检查更能有效地提高宫颈病变的检出率。

    作者:李敏;张春梅;周仕娴;向德兵;孙贵银;李华;张朝军 刊期: 2015年第15期

重庆医学杂志

重庆医学杂志

主管:重庆市卫生和计划生育委员会

主办:重庆市卫生信息中心,重庆市医学会