学术投稿

焦磷酸测序技术检测63例晚期NSCLC患者血浆KRAS基因突变

孙洁;明华;孙建国;张晓晶;王欣欣;刘佳;陈正堂

关键词:癌, 非小细胞肺, 血浆, 基因, RAS, 突变, 焦磷酸测序
摘要:目的 探讨应用焦磷酸测序技术检测血浆KRAS基因突变的实用性,了解晚期非小细胞肺癌(NSCLC)血浆KRAS基因突变率和突变特征.方法 收集63例晚期NSCLC患者的外周血标本,分离血浆并提取DNA,采用巢式PCR结合焦磷酸测序分析KRAS基因12和13号密码子突变.结果 在63例晚期NSCLC患者中,3例存在血浆KRAS基因突变(4.76%),突变率较低,与亚裔组织KRAS突变率一致,低于西方人KRAS突变率,其突变类型均为单碱基替换突变.其中2例为12密码子突变,1例为13密码子突变.统计学分析未发现血浆KRAS突变与性别、吸烟史、年龄、病理类型、肿瘤分期、体力状况(PS)评分存在相关性.结论 焦磷酸测序技术操作简便,可以快速、高通量地进行外周血循环KRAS基因突变检测,可广泛用于筛选对酪氨酸激酶抑制剂耐药的NSCLC患者,更有利于指导患者的个体化分子靶向治疗.
重庆医学杂志相关文献
  • 肿瘤细胞生物治疗临床关注的几个问题

    随着生物医学的进步,肿瘤生物治疗成为继手术、放射治疗和化学治疗之后的肿瘤治疗又一新方法.肿瘤生物治疗是通过调节机体的防御机制,调动机体自身的生物学反应而发挥抗瘤作用的一大类疗法,包括细胞因子治疗、单克隆抗体治疗、小分子化合物类治疗、细胞免疫治疗,以及基因药物治疗等.

    作者:陈正堂;胡春燕 刊期: 2012年第11期

  • 145例原发性干燥综合征肺间质病变的危险因素分析

    目的 探讨原发性干燥综合征(pSS)患者合并肺间质病变(ILD)的危险因素.方法 收集145例确诊为pSS患者的临床资料,分析合并ILD发生的相关危险因素.结果 单因素分析显示,合并ILD的相关因素包括发病年龄大于60岁,男性,雷诺现象、肾损害,肺动脉高压,关节炎,神经损害,抗SSA、抗R0-52阳性者.Cox分析表明,发病年龄大于60岁(OR=3.051,95%可信区间1.185~7.855,P=0.003)、男性(OR=5.684,95%可信区间2.215~15.585,P=0.000)、肾损害(OR=2.635,95%可信区间1.031~6.737,P=0.042)、肺动脉高压(OR=7.091,95%可信区间2.631~18.087,P=0.000)、SSA(OR=3.765,95%可信区间1.193~11.878,P=0.024)是pSS患者发生ILD的危险因素.结论 年龄大于60岁、男性、血清抗SSA阳性、合并肺动脉高压、肾损害等是pSS合并ILD的独立危险因素.

    作者:石宇红;周润华;莫汉有;许佳 刊期: 2012年第11期

  • 猪缺血再灌注损伤与心肌细胞凋亡的实验研究

    目的 探讨猪心肌梗死不同区域细胞凋亡的分布.方法 滇南小耳猪10只,随机分为两组,每组5只.(1)假手术组(S组),在X线的监控下,经右股动脉置入冠状动脉球囊导管至左前降支,不行冠脉封堵心肌缺血;(2) 缺血再灌注组(I/R组),冠脉球囊扩张阻断冠脉血流60 min致心肌缺血,撤除球囊恢复冠脉灌注.再灌注72 h,行猪心肌末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞及免疫组化法检测Bcl-2和Bax的蛋白表达.结果 再灌注后72 h,S组未发生心肌梗死及心肌细胞凋亡,I/R组在心肌梗死区、边缘区、非梗死区的心肌组织均存在细胞凋亡现象,梗死区和边缘区的心肌细胞凋亡指数(AI)明显高于非梗死区,且相应区域的Bax蛋白表达及Bax/Bcl-2比值均较非梗死区增加(P<0.05).结论 猪心肌缺血再灌注损伤后心肌梗死区、梗死边缘区、非梗死区均存在心肌细胞凋亡现象,细胞凋亡主要分布在梗死区和边缘区.

    作者:孙海梅;郭涛;王雨平;唐睿珠;骆志玲;申丽娟 刊期: 2012年第11期

  • 焦磷酸测序技术检测63例晚期NSCLC患者血浆KRAS基因突变

    目的 探讨应用焦磷酸测序技术检测血浆KRAS基因突变的实用性,了解晚期非小细胞肺癌(NSCLC)血浆KRAS基因突变率和突变特征.方法 收集63例晚期NSCLC患者的外周血标本,分离血浆并提取DNA,采用巢式PCR结合焦磷酸测序分析KRAS基因12和13号密码子突变.结果 在63例晚期NSCLC患者中,3例存在血浆KRAS基因突变(4.76%),突变率较低,与亚裔组织KRAS突变率一致,低于西方人KRAS突变率,其突变类型均为单碱基替换突变.其中2例为12密码子突变,1例为13密码子突变.统计学分析未发现血浆KRAS突变与性别、吸烟史、年龄、病理类型、肿瘤分期、体力状况(PS)评分存在相关性.结论 焦磷酸测序技术操作简便,可以快速、高通量地进行外周血循环KRAS基因突变检测,可广泛用于筛选对酪氨酸激酶抑制剂耐药的NSCLC患者,更有利于指导患者的个体化分子靶向治疗.

    作者:孙洁;明华;孙建国;张晓晶;王欣欣;刘佳;陈正堂 刊期: 2012年第11期

  • 缺血修饰清蛋白的临床应用进展

    缺血修饰清蛋白(ischemia modified albumin,IMA)是一项早期反映心肌细胞缺血缺氧的一项敏感指标,近年来其在临床上的应用被广泛关注.大量的临床试验证实IMA对急性冠脉综合征(ACS)的诊断、排除诊断、判断预后具有重要临床意义,在临床其他领域的研究和应用也极为广泛.本文综述近年来IMA在临床中的应用新进展.

    作者:苟润泽 刊期: 2012年第11期

  • 浅谈新形势下助产士工作压力源及应对措施

    近年来医患关系持续紧张,据中华医院管理学会2003年对26家医院调查显示,发生医疗纠纷多的医院科室是产科和外科,风险大的是产科[1],加之母婴健康受到社会关注,人们的需求也越来越高,助产士承受着很大的精神、心理压力,这些压力若不能得到缓解和释放,将影响助产士的身心健康和护理工作质量,影响助产士工作积极性和创造性的发挥,影响整个团队的质量和母婴安全.

    作者:王贤华;韩建;邱海燕 刊期: 2012年第11期

  • 镇痛镇静在多发伤后急性心功能不全治疗中的作用

    目的 探讨镇静镇痛治疗严重胸外伤合并多发伤后急性心功能不全的可行性和安全性.方法 对该院34例多发伤后合并有急性心功能不全的呼吸支持治疗患者,随机分为持续镇静镇痛治疗16例(Ⅰ组)、间断镇痛镇静18例(Ⅱ组)两组,进行对比分析,比较的参数有入ICU时体质量、急性生理和慢性健康状态评分(APACHE Ⅱ)、氧合指数(OI)、心率(HR)、动脉舒张压(DBP)、动脉收缩压(SBP)、中心静脉压(CVP)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB).结果 两组入ICU时的各项指标差异无统计学意义,两组在治疗24 h后各指标均有明显改善,但Ⅰ组HR减慢、OI升高、血压升高的幅度较Ⅱ组更明显(P<0.05),且Ⅰ组循环指标波动较小,Ⅱ组波动大.结论 镇静镇痛有利于救治多发伤后急性心功能不全,持续镇静镇痛可能是更好的方法.

    作者:许月明;游波;冯春森;陈虎平 刊期: 2012年第11期

  • 亚甲蓝血浆病毒灭活对凝血因子的影响

    目的 探讨亚甲蓝(MB)光化学法血浆病毒灭活对主要凝血因子活性的影响,以及血浆病毒灭活后制备冷沉淀的可行性.方法 将16袋400 mL全血成分分得的新鲜血浆均分为两份,分别归为实验组和对照组;实验组加入MB进行病毒灭活,对照组不加MB但仍然进行病毒灭活光照过滤,检测各阶段标本凝血因子Ⅷ(FⅧ):C及纤维蛋白原(Fib).结果实验组与对照组之间FⅧ:C及Fib差异有统计学意义(P<0.05),经过病毒灭活后实验组血浆中FⅧ及Fib损失较大且含量未达制备冷沉淀的理论要求.结论 血浆病毒灭活对血浆中FⅧ及Fib均有较为显著的影响,且其损耗主要来自MB光化学反应,血浆病毒灭活后不宜用于制备冷沉淀.

    作者:宋敏;赵树铭;刘凤君;郭辉;蒋天伦 刊期: 2012年第11期

  • CT诊断胃黏膜巨肥厚症1例

    1 临床资料患者,女,49岁.体检行上腹部CT检查示:胃中等度充盈,胃底体部大弯侧黏膜皱襞明显粗大,呈不规则脑回状凸起,粗大者向腔内凸起达2.3 cm,粗大黏膜明显强化,其内见不规则裂隙状水样密度无强化区,病变区基底部胃壁厚度基本正常,浆膜面光整,胃体部大弯侧见一粗大血管自浆膜面出胃壁并向右前下方迂曲绕行汇入肠系膜上静脉内,病变区与正常胃壁分界清(图1),胃周脂肪间隙清,腹腔内及腹膜后未见淋巴结肿大,扫描范围内肝、胆、胰、脾、双肾、肾上腺、十二指肠、结肠肝曲、结肠脾曲未见异常征象.

    作者:梁秀梅 刊期: 2012年第11期

  • 低温等离子刀微创治疗高龄复发性喉乳头状瘤1例

    1 临床资料患者,女,86岁.声音嘶哑20年,气管切开7年入院.患者20年前开始出现声音嘶哑,7年前声嘶加重伴呼吸困难就诊,诊断为喉乳头状瘤,遂行气管切开及喉乳头状瘤摘除术.术后因反复复发,先后又行3次乳头状瘤摘除术,气管导管一直未能拔出.患者于2009年10月来本院就诊,门诊以喉乳头状瘤收入住院治疗.术前检查患者血压160/90 mm Hg,心电图有心肌缺血表现,胸部检查诊断肺气肿、慢性支气管肺炎.肝肾功能正常,血常规及凝血功能正常.

    作者:郑灵;潘明金;王宏伟 刊期: 2012年第11期

  • 30例晚期非小细胞肺癌胸腔积液KRAS基因突变的检测

    目的 通过对合并胸腔积液的非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液KRAS基因的检测,建立非组织来源KRAS检测的替代方法,探讨KRAS突变情况及主要临床病理特征.方法 收集30例NSCLC胸腔积液标本,用焦磷酸测序法和锁核酸探针-桑格测序法(LNA-PCR sanger)检测各标本中KRAS突变情况,统计分析KRAS突变与临床病理特征之间的关系.结果 焦磷酸测序法检出3例突变,而LNA-PCR sanger 测序法则检出6例突变.6例突变中有4例位于第2外显子第12号密码子,2例位于第2外显子第14号密码子.统计学分析KRAS突变与性别、吸烟史、年龄、病理类型及体力状况(PS)评分无关.结论 LNA-PCR sanger测序和焦磷酸测序法均可用于胸腔积液标本KRAS突变检测,可为NSCLC基因检测提供良好的非组织标本替代方法.

    作者:明华;孙洁;孙建国;张晓晶;王欣欣;刘佳;陈正堂 刊期: 2012年第11期

  • Ezrin介导骨肉瘤转移机制的相关研究

    骨肉瘤是一种主要侵犯儿童和青少年的恶性骨肿瘤.在骨肉瘤患者中肿瘤局限性患者的5年生存率为70%,而发生了肿瘤转移的患者的5年生存率却只有20%~30%[1].超过90%的肿瘤患者的死亡都归因于肿瘤转移[2].肿瘤转移是一个复杂的过程,而每一个过程都可以成为一个治疗的靶点.在过去的10年间,对于骨肉瘤的转移机制已经做了很多深入的研究,而近来发现Ezrin与骨肉瘤转移及预后有密切的关系,所以深入研究 Ezrin在骨肉瘤中的作用及机制对骨肉瘤的防治有重大意义.

    作者:邓文斌 刊期: 2012年第11期

  • 甲状腺激素水平对充血性心力衰竭患者心功能的临床评估

    目的 观察充血性心力衰竭(CHF)患者甲状腺激素水平变化情况,探讨其对CHF患者心功能的临床评估意义.方法 40例健康者(对照组),予安慰剂处理,64例CHF患者(CHF组),予常规抗心衰处理,分别测定其治疗前后甲状腺激素水平.结果 (1)与对照组相比,CHF患者血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、三碘甲腺原氨酸(T3)、游离甲状腺素(FT4)水平降低(P<0.01),甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)水平差异无统计学意义;(2)CHF患者治疗后,随心功能分级改善,甲状腺激素FT3、T3、FT4水平较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);T4、TSH水平治疗前后相比,差异无统计学意义.结论 甲状腺激素水平可作为CHF患者心功能临床评估指标.

    作者:丁玲新;梁晓芳;童辉;李强 刊期: 2012年第11期

  • WT1基因与消化系统肿瘤研究进展

    Wilms肿瘤基因WT1是早发现的与Wilms肿瘤的发生、发展有关的基因,早证实WT1存在于肾母细胞瘤、白血病等肿瘤细胞中,在肿瘤的发生发展中起关键作用[1-2].近来发现WT1在消化系统肿瘤中呈异常高度表达并与其发生、发展及预后有关.作者就WT1基因的结构、功能、在消化系统肿瘤中的表达及机制作一综述.

    作者:龚勇 刊期: 2012年第11期

  • 换瓣术中单极和双极射频消融治疗风湿性心脏病合并心房纤颤的临床研究

    目的 回顾分析风湿性心脏病(RHD)合并心房纤颤(AF)患者在瓣膜置换术中分别应用单极射频消融(RFA)、双极RFA治疗两组AF病例,探讨两者的优缺点和临床实用价值.方法 在瓣膜置换术中同期对12例患者应用国产单极RFA机按改良迷宫法行AF单极RFA治疗(A组);对70例患者应用进口双极RFA系统按改良迷宫方法行AF双极RFA治疗(B组).结果 A组随访22~30个月无死亡,10例(83%)恢复维持窦性心律,2例(17%)AF复发.B组随访10~50个月恢复维持窦性心律61例(87%),房扑心律3例4.2%,AF复发6例(8.5%).结论 双极RFA较单极RFA治疗RHD合并AF,恢复窦性心律成功率高,安全可靠、省时,有利于心肌保护,易于操作推广,具有较好的临床实用价值.

    作者:张大国;刘秀伦;范寿年;刘小斌;范永峰;龚启华;李旭;吴大庆;曾荣;谢贵华;范贵凤 刊期: 2012年第11期

  • 铅对小鼠学习记忆功能影响与突触囊泡蛋白相关

    目的 探讨小鼠海马中突触囊泡蛋白与铅对小鼠学习记忆功能影响的相关性.方法 将雄性昆明小鼠24只,随机平均分为两组,对照组和铅染毒组,对照组饲以蒸馏水,铅染毒组饲以2.4 mmol/L的醋酸铅水溶液,在暴露后30 d,进行Morris 水迷宫实验以检测其逃逸潜伏期,采用Western blot法检测海马中突触囊泡蛋白水平,并采用HE切片方法观察处理前后小鼠海马脑区病理变化.结果 Morris水迷宫结果显示铅暴露后30 d可导致小鼠逃逸潜伏期延长(P<0.05),且暴露后30 d铅染毒组小鼠海马中突触囊泡蛋白表达显著减少(P<0.05),但脑组织HE切片显示铅暴露30 d后并未引起脑组织海马脑区病理学改变.结论 慢性铅暴露可导致小鼠学习记忆功能损伤,且这种损伤可能与其海马中突触囊泡蛋白表达下降有关.

    作者:赵奇;王艳;武红娟;陈于 刊期: 2012年第11期

  • 高仿真情景模拟教学在健康评估教学中的应用

    高仿真情景模拟教学通过使用先进的生理驱动技术,设计模拟临床情景病例,再现真实的临床环境,缩短课堂教学与临床实践之间的差距.在欧美等发达国家得到广泛应用,并贯穿整个(包括健康评估在内的)护理教学课程中[1].但在国内护理教育中的应用尚处于起步阶段,缺乏在健康评估实践教学中的应用研究报道.本研究在健康评估实践教学中应用SimMan高仿真模拟系统,取得了较好的效果,现报道如下.

    作者:孙志岭;徐桂华;王丹文 刊期: 2012年第11期

  • 82例甲状腺微小癌的诊治分析

    目的 探讨甲状腺微小癌(TMC)的临床特点和诊断治疗.方法 回顾性分析82例TMC的临床资料.结果 术前彩超发现可疑TMC 62例(75.6%),主要表现为低回声、形态不规则、边界不清和瘤内微钙化.术中冰冻切片确诊率为93.1%.手术方式包括甲状腺次全切除术、甲状腺叶切除术和甲状腺全切除术等,35例行改良颈清扫术或中央区淋巴结清扫,证实淋巴结转移15例.术后2例复发.与淋巴结转移相关的因素有病灶较大和包膜侵犯.结论 TMC主要依靠彩超诊断;首选手术治疗,切除范围应规则彻底;淋巴结转移并不少见,有必要进行淋巴结清扫.

    作者:李玺;邱万寿;郭卫平;黄勇;姜华;刘仁斌 刊期: 2012年第11期

  • 计算机电磁辐射对男性精液质量影响

    目的 探讨计算机电磁辐射对男性的精液质量的影响.方法 采用计算机辅助精液分析系统检测每天使用计算机的男性精液质量.结果 使用计算机的男性精液参数(酸碱度、精液量、精子浓度、精子活力、精子活动率、精子低渗肿胀率)都在正常范围,但每天使用计算机超过5 h的男性精子形态正常率比不使用计算机的男性的精子形态正常率低,两组差异有统计学意义(P<0.05).结论 计算机电磁辐射不影响男性精子浓度、活力、活动率,但长时间使用计算机可降低正常精子的数量.

    作者:包华琼;蔡敏;陈可;李练兵;马明福;李川海 刊期: 2012年第11期

  • 质控小组在肿瘤患者PICC置管及护理质量中的作用

    目的 探讨病区质量控制小组(质控组)对提高肿瘤患者PICC置管护理质量的效果.方法 筛选病区2~3名护士组成PICC质控组,实行PICC专人维护管理.将成立前后一年内采用PICC置管的肿瘤化疗患者分为两组:(1)质控组成立后采用PICC置管组(实验组);(2)质控组成立前采用PICC置管组(对照组).对所有肿瘤化疗患者PICC置管操作时间、穿刺成功率、留置时间、并发症的发生率等进行比较,并进行统计学处理.结果 质控组成立前后PICC置管操作时间分别为20~30 min、15~20 min,一次穿刺成功率分别为68.3%、92.2%,并发症的发生率分别为16.1%、6.1%.小组成立后的相同时间内置管例数、置管操作时间、一次穿刺成功率、并发症的发生率都明显优于小组成立前(P<0.01).结论 成立质控组对PICC置管患者进行规范管理,可提高置管技术水平、减少并发症,显著提高PICC护理质量.

    作者:陈萍;李莎莎;张庆;周俊;刘玉馥 刊期: 2012年第11期

重庆医学杂志

重庆医学杂志

主管:重庆市卫生和计划生育委员会

主办:重庆市卫生信息中心,重庆市医学会