学术投稿

豚鼠心肌细胞急性酶分离方法

周亮;曾晓荣;杨艳;刘智飞;李妙龄;裴杰

关键词:豚鼠, 心肌, 胞急性, 细胞分离方法, 膜片钳实验, 培养方式, 细胞膜, 经验, 活性, 表面
摘要:用于膜片钳实验的细胞必须具备细胞膜完整、表面光洁、活性良好.这类细胞既可以通过原代培养方式获得,也可通过急性酶分离方法获得.细胞情况如何是膜片钳实验是否成功的第一个关键性步骤.本研究总结多年的经验摸索出一套行之有效的豚鼠心肌细胞分离方法,具体步骤如下:
四川生理科学杂志相关文献
  • 创新-21世纪教育的选择

    21世纪以高新技术为核心的知识经济将占主导地位:国家综合国力和国际竞争能力将越来越取决于教育发展,以及科学技术和创新的水平.所以,创新是21世纪教育的选择.要实现创新思想的教育,就必须要打破旧的传统教育.创新精神的基本内涵包括:创新思维的开发要从青少年抓起,创新是人脑本身的一种潜能的开发,要在教学中充分发挥学生的主体作用和教育的开放性以及注重智能教育的创造性.要使创新思想在教育中实施,首先是教育方针必须反映创新精神,扭转教育观念,并注意全面发展和个性发展相结合,而开展素质教育是实现创新教育的必要途径.一、创新思想的提出二、创新精神的内涵三、创新思想教育的实施和要求四、开展素质教育是实现创新教育的必要途径

    作者:梁建清;王永德 刊期: 2000年第02期

  • 氯胺酮对缺氧大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用

    脑缺血时细胞外兴奋性氨基酸浓度增高,增高的兴奋性氨基酸将通过N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体及非NMDA受体门控的离子通道导致细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)增高,终将导致神经元的损害或坏死.另一方面,脑缺血也诱导产生多种自身代偿机制,以拮抗各种病理性损伤及增加神经元的存活率.其中钙激活钾通道(Kca通道)激活产生超极化电位,使细胞兴奋性降低,减少Ca2+的内流及兴奋性氨基酸的释放,这对于避免各种损伤事件的发生具有重要的作用.氯胺酮为NMDA受体非竞争性拮抗剂,对Kca通道具有激活作用,但氯胺酮对缺氧神经元Kca通道作用情况尚未见报道.

    作者:唐兴江;范生尧;李小刚;曾晓荣;杨艳;贺军;李妙龄;刘智飞;周文 刊期: 2000年第02期

  • 七味红花殊胜丸对实验性肝损伤的保护作用

    本文研究了七味红花殊胜丸对实验性肝损伤的保护作用.结果表明,七味红花殊胜丸高、中剂量组能显著抑制四氯化碳(CCl4)所致慢性肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的升高并提高血清总蛋白含量(TP),减轻肝组织的病理损害程度:高、中剂量能显著抑制D-半乳糖胺盐酸盐(D-Gla)所致急性损伤小鼠ALT及肝组织的病理损害程度;各剂量组对小鼠异硫氰酸苯酯(APIT)所致黄胆模型均有非常显著的降低血清总胆红素(SB)及ALT作用;高剂量组能明显提高小鼠网状内皮系统吞噬功能.提示七味红花殊胜丸对实验性肝损伤有保护作用,其降酶退黄作用明显.

    作者:陈齐英;黄明;陈武 刊期: 2000年第02期

  • 机能学实验设计教学体会

    机能学作为一门独立的实验学科,集生理学、药理学、病理生理学实验于一体,既节约了资源,又使学生有一个系统整体的观念来理解机能学问题.我校已开设机能学一学期,学生普通反映较好.我们还对医学生有专门的一次实验设计课(4学时)作为考核这门学科的主要成绩.作为实验设计,二、三年级医学生可能还不知为何物,教材上也没有相关的内容,并且学生对图书馆的利用也不是很高,因此如何上好实验设计课,使学生了解实验设计,并作好实验设计,教师的指导是非常重要的.结合本人的教学经验、心得体会归纳如下:

    作者:熊文碧 刊期: 2000年第02期

  • 记忆机制在教学过程中的应用

    近年来在商品经济的冲击下,随着学校招生人数的扩大,学生的文化基础程度日趋逾下,给教学工作带来许多困难,如何教学达标是每位教师极为关注的问题.为此针对学生的实际情况科学地指导教学,从理论上充分地认识学习方法与学习效果的关系,严格把握教学的各个环节,对提高学习效率极其重要.作者几年来将记忆机制应用于教学过程之中,以成社班、成护班、社区班学生为对象,随机为50%的人数进行对比,取得了较好收效.

    作者:尹月波;曾加肾 刊期: 2000年第02期

  • 普萘洛尔对映体在离体大鼠灌流肝脏中的药动学研究

    临床上应用的普萘洛尔系外消旋体.动物试验表明,S(-)-普萘洛尔对β-受体的阻断作用比R(+)-普萘洛尔大100倍.有资料显示:普萘洛尔主要在肝脏代谢.健康志愿者口服dl-普萘洛尔(80mg)后,其S-普萘洛尔与R-普萘洛尔的AUC比值为1.38倍,但t1/2β(基本相近.蒙古犬给予40mg的普萘洛尔,S-普萘洛尔与R-普萘洛尔的AUC比值仅为0.48,前者的血浆半衰期较前者明显缩短.由于整体研究时,血液成分和神经体液因素对药物代谢和分析的影响较大,故难以反映肝脏对药物的代谢动力学过程.本文采用Miller肝灌流方法研究大鼠肝脏对普萘洛尔对映体的代谢动力学.方法:12只大鼠随机分为2组,用乌拉坦麻醉大鼠,10min内完成肝脏游离手术,并将之置于特定肝循环灌流装置中.

    作者:雷军;张银娣;沈建平 刊期: 2000年第02期

  • β-防御素-1基因在大鼠皮肤和肾脏固有表达

    目的:检测大鼠β-防御素-1基因表达的组织分布.方法:从Genbank检索到的Norway大鼠β-防御素-1 cDNA序列,据此设计一对特异引物,采用RT-PCR技术在Wistar大鼠10种受检测组织的总RNA中,扩增其特异cDNA片段,然后进行克隆扩增、限制性内切酶谱分析和DNA序列测定.结果:在10种大鼠组织中,仅从皮肤和肾脏扩增出一条长度为272bp的cDNA片段,在气管、子宫、子宫颈、膀胱、小肠、脾脏、骨骼肌、腮腺等均未检测出其mRNA.其RT-PCR产物经测序分析证明系大鼠β-防御素-1 cDNA.结论:本研究显示大鼠β-防御素-1基因除在肾脏表达外,亦在皮肤组织固有表达,提示β-防御素-1亦可能在大鼠皮肤天然抵抗微生物感染机制中发挥作用.

    作者:黄宁;吴琦;唐彬;陈新年;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

  • 关于OTC

    1定义OTC的缩写是由Over?The?Counter而来,系指非处方药物,即特指病患者或消费者毋需凭着医师开写的处方,而直接从药房、药局、药店购买自认为需要的药品,这些药品的使用也不一定由医护专业人员来监控和指导,而确是安全有效的药品,它与处方药物(Rx或Rp,是Recipe的缩写,意示“请取”,这属一般处方笺中的“上记”)不同,它必须凭医生所开写的处方才能从药房、药局或药店购得的药品,而且亦需在医护人员的监控和指导下使用,才能保证药物的疗效和用药的安全。这称谓医药的分业管理,医药分业早始于德国,为保障人民的生命安全和疾病的正确治疗,于1240年德国的宪法规定禁止医师销售药品。

    作者:包定元 刊期: 2000年第02期

  • 医学本科生理学教学模式的改革

    传统的生理学教学模式以教师讲授为主,与中学教学模式并无本质的差别.多年来,我们在生理学教学中虽然先后尝试过一些新的教学方式,如“学导式”、“启发式”、“自学讨论式”等,但大多局限于生理学教学的分部内容,难以对旧的教学模式起到根本的变革作用.

    作者:岳利民;周祖玉;李红宇;吕广能;何亚平;郑煜 刊期: 2000年第02期

  • 头孢克洛干糖浆人体生物利用度试验

    本试验对8名男性健康志愿受试者口服国产头孢克洛干糖浆和市售进口头孢克洛混悬剂的血药浓度和药代动力学参数进行比较.血药浓度用HPLC法检测,用3P87和NDST程序,按非室模型药代动力学分析.结果表明:口服国产的头孢克洛干糖浆和市售进口头孢克洛混悬剂后,其AUC分别为24.37±2.81与25.26±1.87mg/L@h,Tpeak:0.81±0.12与0.81?.12h Cmax13.60.22 14.27.87mg/L两制剂的相同参数经统计学处理均无明显差异(P》0.05),结果表明国产头孢克洛干糖浆口服后的药代动力学参数与市售进口混悬剂相仿,其相对生物利用度为96.48%.

    作者:洪诤;王浴生;李章万;范爱兰;张三友;薛京会 刊期: 2000年第02期

  • 提高“药理”教学效果的几点经验

    好的学习体系应是简单和充满乐趣的.药理教学目标实施中,应用“概貌法”,指导学生动手制作读书卡片,应用它们进行“横向比较”,重难点处使用押韵简短词融入卡片,利用“处方”进行综合能力训练是实施目标教学,提高教学质量,培养学生自学能力,观察能力,思维能力,实际应用能力的有效途径.

    作者:崔如玉 刊期: 2000年第02期

  • 重组人beta防御素基因在COS-7细胞的转染表达

    为探索建立持续稳定表达hBD-2的哺乳类动物型工程细胞的可能性,本研究构建真核重组表达载体pCMV.tag2B/hBD-2以进行COS-7细胞转染表达实验.将本室克隆获得的hBD-2全长cDNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒pCMV.tag2B构建出hBD-2的重组表达裁体pCMV.tag2B/hBD-2,并经DNA顺序证明hBD-2 cDNA片段的插入方向和其全长cDNA的硷基组成顺序均准确无误.通过脂质体转染法将pCMV.tag2B/hBD-2导入COS-7细胞.RT-PCR法和免疫印迹法分别从mRNA水平和蛋白质水平检测到被转染的COS-7细胞系能有效表达hBD-2.

    作者:蔡绍晖;杜军;陈新年;黄宁;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

  • 吗啡成瘾大鼠脑电图的频谱信号分析

    在系统观察大鼠吗啡成瘾不同阶段脑电图时我们发现大鼠成瘾后脑电图有特殊改变,表现为波形、频率及幅度的变异.为了考察该变化的含义,我们将经过A/D转换记录与贮存于计算机内的大鼠脑电图信息依频率(H2)分为0-0.5、0.5-4、4-8、8-13、13-40、40-50等6个频段,采用频谱分析方法对大鼠脑电图各频段能量分布情况进行分析,分别比较大鼠未用吗啡(对照)、吗啡成瘾、短期戒断、长期戒断、复用及纳络酮阻断等不同时期各频段能量分布的差异.结果显示大鼠吗啡成瘾后4-8H2波段(θ波)能量明显增多,并随戒断逐渐恢复,而戒断后复用吗啡该波段又增多,纳络酮阻断后该波段明显减少;8-13H2波段(α段)也随吗啡成瘾而增多,并且在戒断期持续不变,但随纳络酮阻断而恢复.而13-40H2波段(β波)则呈相反改变,即成瘾后减少,戒断期逐渐恢复,复用吗啡又减少、纳络酮阻断后则明显增多.上述现象似可作为吗啡使用不同阶段的指征.由于脑电图反映了大脑容积导体综合电变化,而脑电图的记录与电脑离分析技术联系起来用于成瘾研究可能有潜在的临床意义,值得进一步探索.

    作者:周明康;罗代升;周颖恒;杨辉;何倩;李智;张莉;刘应兵;张益珍;徐建国;赵妍君;蒋维 刊期: 2000年第02期

  • 大鼠β-防御素rBD-2的分子克隆及其在皮肤组织的诱导表达

    本文应用RT-PCR技术,根据Genbank公布的Noreway大鼠β-防御素-2cDNA序列设计引物,从Wistar大鼠皮肤组织总RNA中扩增出一cDNA片段,经核苷酸序列测定证实为全长β-防御素-2cDNA.本文实验还显示大鼠β-防御素rBD-2基因在大肠杆菌感染性损伤皮肤组织中的表达明显增强,与人hBD-2的表达相似.这些实验结果提示β-防御素-2可能是皮肤组织对感染损伤的防御反应所产生的重要免疫介质.

    作者:陈新年;黄宁;吴琦;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

  • 胃炎合剂抗胃溃疡作用研究

    观察胃炎合剂对两种溃疡模型的作用,结果表明胃炎合剂对醋酸烧灼型溃疡的愈合有明显的促进作用,能明显降低胃液的总酸度.

    作者:饶凡;杨宁宁;许静 刊期: 2000年第02期

  • 猪冠状动脉平滑肌细胞急性酶分离及在离子通道研究中的应用

    目的:建立冠状动脉平滑肌细胞急性酶分离法并检验其在离子通道研究中的可靠性.方法:采用胶原酶分离单个平滑肌细胞和膜片钳单通道记录法记录通道电流.结果:用该急性酶分离方法所获的细胞数量多,形态正常,在这些细胞上容易记录到通道活动.结论:用该方法获得的单个细胞性能好,所记录的细胞膜上的离子通道活性正常.

    作者:李妙龄;杨艳;曾晓荣;刘智飞;周文;裴杰;贺军;聂红艺 刊期: 2000年第02期

  • 石榴健胃散药效学研究

    目的:观察受试药物的止泻、促进消化作用.方法:通过番泻叶所臻小鼠腹泻模型、活性炭标记小鼠小肠蠕动、测定大鼠胃酸、胃蛋白酶分泌量变化进行观察.结果:受试物对番泻叶所致小鼠腹泻、小肠蠕动有显著抑制作用,对大鼠胃酸、胃蛋酶分泌有显著促进作用.结论:石榴健胃散具有止泻、增加胃酸、胃蛋白酶分泌,促进消化作用.

    作者:韩五成;刘莉;张丽宏 刊期: 2000年第02期

  • 浅谈综合中专医学专业在临床实习管理的探讨

    医学是一门实践性较强的科学,一年临床实习是检验课堂教学的效果和同学是否能把书本上学到的理论知识与临床实践相结合的一个重要环节,它关系到为社会主义建设事业培养合格人才的事,如何使同学们在临床实习好,着重要抓好实习指导和管理工作.

    作者:朱春明 刊期: 2000年第02期

  • 孤啡肽的生物学功能研究进展

    1995年Meunier和Reinscheid等几乎同时从脑组织中分离出一种新的由17个氨基酸组成的肽-孤啡肽(OFQ)或痛敏肽,并证明孤啡肽特异性结合阿片样受体(opioid-like?receptor?1,OLR1)为OFQ的同源性配体。由于孤啡肽前体的分子结构与阿片类前体,如强啡肽和脑啡肽原的前体分子有很高的同源性。因此,它也可能有着巨大的潜在生物学功能。为此,许多学者作了大量的研究工作,现就其近年来的研究进展综述如下。

    作者:唐勇;郝亮;罗群英;蒲艺;余曙光 刊期: 2000年第02期

  • 对胡崎主编的《生理学》教材几处表述的修改建议

    作者: 刊期: 2000年第02期

四川生理科学杂志

四川生理科学杂志

主管:四川省科学技术协会

主办:四川省生理科学会