学术投稿

淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的克隆表达与鉴定

陆春雪;谭立志;朱翠明;万艳平;余敏君;杨胜辉

关键词:淋病奈瑟菌, porB, 克隆, 表达
摘要:目的构建表达淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB重组质粒,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白.方法用PCR方法从淋病奈瑟菌WHO标准株E株基因组扩增出PorB基因片段,插入pUCm-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pQE30中,进一步测序正确后在大肠杆菌M15中表达.结果获得淋病奈瑟菌PorB蛋白基因,经序列测定与GenBank公布的序列同源性高达99%;表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;重组蛋白经Western印迹法鉴定,在34kD位置有特异条带,PorB蛋白在宿主菌中高表达.结论基因重组表达的融合蛋白将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的功能,并有可能用于淋病预防疫苗的研制.
中国皮肤性病学杂志相关文献
  • 甲下血管球瘤1例

    1 临床资料患者女,49岁,因左足趾甲变形伴压痛30余年就诊.患者30余年前偶然因左足趾疼痛发现甲板有部分隆起,因对日常生活无大妨碍而一直未特殊处理,但一直有轻压痛.因近来压痛明显而就诊.

    作者:袁姗;雷鹏程 刊期: 2004年第04期

  • 头孢菌素治疗性传播感染研究进展

    头孢菌素是一种广谱抗生素,自上世纪70年代以来,各种头孢菌素更新换代产品陆续进入临床,为治疗各种感染,尤其是细菌性感染,其中特别是对青霉素类等抗生素耐药的菌株所所起的感染、院内感染和对青霉素类过敏者提供了有效而又不易耐药的新药,为临床所广泛应用.

    作者:吴绍熙;郭宁如 刊期: 2004年第04期

  • 皮肌炎伴发肝内多发性血管瘤1例

    患者男,52岁.因眶周起红斑、浮肿6个月,四肢乏力、肌肉酸痛加重1个月就诊.6个月前发现两侧眼眶潮红、浮肿,伴有轻度瘙痒不适.曾到卫生院按皮肤过敏治疗,疗效不佳.1个月前突然感到四肢肌肉酸痛不适、乏力,上肢抬举困难,不能蹲.平素身体健康,家族中无类似病史.

    作者:肖小军;曾先锋 刊期: 2004年第04期

  • 毫米波联合湿润烧伤膏治疗皮肤溃疡疗效观察

    目的观察毫米波治疗仪联合湿润烧伤膏治疗皮肤溃疡的疗效.方法治疗组46例先用毫米波治疗仪治疗,随后将湿润烧伤膏外用于溃疡面.对照组40例采用CQ-BS7特定电磁波谱治疗仪(TDP)治疗.结果治疗组治疗有效率为93.48%,对照组为72.50%,两组比较差异有显著性(χ2=6.91,P<0.01).结论毫米波联合湿润烧伤膏对皮肤溃疡具有良好的治疗效果.

    作者:杜宇;杨西群;许扬;熊霞;陈德宇 刊期: 2004年第04期

  • 外阴恶性肿瘤中P21WAF1/CIP1 P53及HPV 6/11HPV 16/18的检测和意义

    目的探讨P21WAF1/CIP1,P53及HPV6/11,16/18与外阴恶性肿瘤的关系.方法 P21WAF1/CIP1,P53用免疫组化SP法检测;HPV6/11,16/18用原位杂交法(ISH)检测.结果 P21WAF1/CIP1,P53在外阴恶性肿瘤组、外阴上皮内瘤变(VIN)组、正常对照组中的阳性检测率分别为40.00%(12/30)、63.33%(19/30),52.38%(11/21),47.62%(10/21),0(0/10)和0(0/10);外阴病变各组P21WAF1/CIP1,P53与正常组比较差异均有显著性(P均<0.05);HPV6/11、16/18在外阴恶性肿瘤组、VIN组中的阳性检测率分别为60.00%(18/30)和33.33%(10/30),42.86% (9/21)和28.57%(6/21),正常对照组没有检测出;HPV6/11阳性率外阴恶性肿瘤组、VIN组与正常组比较差异均有显著性(P均<0.05);外阴恶性肿瘤组HPV16/18阳性率与正常组比较差异有显著性(P<0.05).结论 P21WAF1/CIP1P53及HPV感染在外阴恶性肿瘤的发生发展中可能起一定的作用.

    作者:邢兰瑛;范引侠;白雅卉;樊江波 刊期: 2004年第04期

  • 淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的克隆表达与鉴定

    目的构建表达淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB重组质粒,并在大肠杆菌中表达获得基因重组蛋白.方法用PCR方法从淋病奈瑟菌WHO标准株E株基因组扩增出PorB基因片段,插入pUCm-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到表达载体pQE30中,进一步测序正确后在大肠杆菌M15中表达.结果获得淋病奈瑟菌PorB蛋白基因,经序列测定与GenBank公布的序列同源性高达99%;表达蛋白经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;重组蛋白经Western印迹法鉴定,在34kD位置有特异条带,PorB蛋白在宿主菌中高表达.结论基因重组表达的融合蛋白将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜蛋白PorB的功能,并有可能用于淋病预防疫苗的研制.

    作者:陆春雪;谭立志;朱翠明;万艳平;余敏君;杨胜辉 刊期: 2004年第04期

  • 广西银星竹鼠与人马尔尼菲青霉病关系的研究

    目的探讨动物与人马尔尼菲青霉病的流行病学关系.方法收集16只广西银星竹鼠进行真菌学研究.结果从15只竹鼠体内分离出与人类马尔尼菲青霉病的病原菌一致的马尔尼菲青霉菌,阳性率达93.2%.结论野生竹鼠自然携带马尔尼菲青霉菌,但无病态,其可能为该菌的贮存宿主.其分泌排泄物可通过呼吸道、消化道、皮肤等途径致人感染马尔尼菲青霉菌,在免疫功能低下时而致病.

    作者:吴易;李菊裳;梁伶 刊期: 2004年第04期

  • 胆石症82例皮肤瘙痒的分析

    目的探讨胆石症与皮肤瘙痒的关系.方法有条件地选择82例胆石症患者作为研究对象,对其皮肤瘙痒及皮损情况进行观察,并作相关检查.以单纯性阑尾炎作对照.结果①瘙痒程度与黄疸程度、皮疹面积、瘙痒持续时间及睡眠困难程度呈正相关;②瘙痒与结石部位有关,结石位于胆管(包括胆总管及肝内胆管)者瘙痒发生率明显高于结石位于胆囊者;③胆石症患者的胆总管内径、血清总胆汁酸及直接胆红素数值均明显高于单纯性阑尾炎患者.结论胆石症患者皮肤瘙痒与黄疸程度、结石发生部位及胆道梗阻有关.

    作者:陆富永;李德宪;杨威;明海霞 刊期: 2004年第04期

  • 银屑病患者角质形成细胞VEGF表达的研究

    目的研究银屑病发病与血管内皮生长因子(VEGF)的关系,探讨银屑病可能的发病机制.方法①用免疫组化法检测银屑病患者皮损和非皮损处皮肤、正常健康人皮肤及体外培养的银屑病患者和正常人角质形成细胞(KC)VEGF的表达;②用双抗体夹心ELISA法检测银屑病患者及正常人KC培养上清液中VEGF含量.结果①银屑病皮损处VEGF表达明显高于非皮损处和正常人皮肤(P均<0.001),非皮损处与正常人皮肤VEGF表达也有显著性差异(P<0.05);②体外培养的银屑病皮损处和非皮损处KC VEGF表达明显高于正常人(P均<0.001);银屑病皮损处KC与非皮损处KC相比VEGF表达也有显著性差异(P<0.05)).结论 VEGF可能参与银屑病的发病.

    作者:张宪旗;冯捷;马慧群;牟宽厚;李建国 刊期: 2004年第04期

  • Wiskott-Aldrich综合征1例

    患儿男,2个月.因面部反复出现红色小丘疹和紫斑40天就诊,自发病以来经常感冒、咳嗽.患儿的同胞哥哥亦出现过同样病情,于生后5个月时因支气管肺炎、呼吸衰竭死亡.血常规检查血小板计数减少,免疫学检查IgG,IgM,IgA均高于正常.初步诊断Wiskott-Aldrich 综合征.给予丙种球蛋白、胸腺肽和抗生素等治疗,病情可暂时缓解.随访4年,病情仍反复发作.

    作者:朱敬先;林元珠;王曙霞 刊期: 2004年第04期

  • P53,Fas,Bcl-2蛋白在尖锐湿疣组织中的检出及其与HPV感染的相关性

    目的探讨P53,Fas,Bcl-2蛋白在尖锐湿疣(CA)组织中的检出情况及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系.方法采用标准免疫组化法检测了24例CA、46例宫颈癌和28例正常宫颈组织P53,Fas,Bcl-2蛋白,用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行检测和6,11,16,18分型.结果 P53,Fas,Bcl-2蛋白在CA组的阳性率显著高于正常对照组(P<0.001);CA组和宫颈癌组之间差异无显著性(P>0.05).综合分析, 蛋白阳性率与HPV感染率密切相关(P<0.05),但CA组或宫颈癌组的蛋白阳性率与HPV6/11型或16/18型的检出与否无统计学意义(P>0.05).结论 P53,Fas,Bcl-2蛋白与尖锐湿疣的发病有密切关系,凋亡基因的表达可能抑制HPV的增殖.

    作者:夏克栋;董海艳;林巧爱;陈韶;陈向敏;张丽芳;胡芸;董缪武 刊期: 2004年第04期

  • 全反式维A酸对UVA诱导人成纤维细胞胶原合成的影响

    目的探讨全反式维A酸(at-RA)对UVA诱导人成纤维细胞胶原生物合成的影响,为应用全反式维A酸治疗光老化皮肤病提供实验依据.方法正常人来源的单层培养的皮肤成纤维细胞,经UVA照射后立即加入含不同浓度at-RA的培养液,共2天,用MTT法检测细胞增殖情况,3H-脯氨酸检测细胞胶原合成情况.结果在各组之间细胞增殖差别无显著性时,at-RA浓度为10-6mmol/L和10-5mmol/L的实验组比对照组的细胞胶原合成显著增高(P<0.05,P<0.01);而at-RA浓度为10-4mmol/L的实验组比对照组的细胞胶原合成显著降低(P<0.01).结论在体外细胞培养情况下,相对低浓度的at-RA(10-6mmol/L,10-5mmol/L)可逆转UVA诱导人成纤维细胞胶原生物合成的降低,而相对高浓度(10-4mmol/L)则不能.

    作者:雷小兵;谭升顺;彭振辉;冉立伟;张江安;刘安 刊期: 2004年第04期

  • 淋菌性直肠炎1例

    患者男,25岁,同性恋者,有肛交史.因肛门脓性分泌物、里急后重2周就诊.体检:肛门少许黄色脓性分泌物,淋球菌培养阳性,确诊为淋菌性直肠炎.

    作者:张红娟;杨健;杨文林;叶婷 刊期: 2004年第04期

  • 儿童大疱性系统性红斑狼疮1例

    患儿女,10岁.因关节疼痛伴血尿2月,全身皮肤起水疱1月余入院.入院后查抗核抗体阳性,抗sm抗体阳性;皮损组织病理示表皮下疱;直接免疫荧光示基底膜带IgG,IgA,IgM,C3呈线状沉积.诊断为儿童大疱性系统性红斑狼疮.

    作者:李亚萍;肖嵘;文海泉;苏玉文 刊期: 2004年第04期

  • 成人慢性活动性EB病毒感染1例

    患者男,48岁.发热40余天,伴全身红斑丘疹和肝脾肿大.外周血异形淋巴细胞56%,EB病毒抗体阳性,皮肤免疫病理示真皮浅中层血管周围灶状CD43(+)、CD45 Ro(+)T淋巴细胞浸润.疾病持续6周后自愈.

    作者:周俊娥;杜娟;李文海;张建中 刊期: 2004年第04期

  • 兰州地区浅部真菌病及病原菌种类分析

    目的了解兰州地区浅部真菌病发病情况及病原菌菌种分布特点.方法对临床拟诊为浅部真菌病的患者1 443例,取标本行10%KOH涂片镜检、分离培养及菌种鉴定.登记镜检阳性患者的相关临床资料,分析浅部真菌病的发病特点.结果真菌镜检阳性594例(41.2%),主要为足癣230例(38.7%)、甲真菌病165例(27.8%)、手癣80例(13.5%);分离菌株221株,其中红色毛癣菌97株(43.9%)、须癣毛癣菌65株(29.4%)、念珠菌31株(14.0%),其他菌种28株(12.7%).结论兰州地区浅部真菌病中足癣常见;致病菌以红色毛癣菌占首位,须癣毛癣菌位于第二,念珠菌居第三.

    作者:牛桃香;骆志成;石磊;武三卯;李文竹;周晓黎;薛晓云 刊期: 2004年第04期

  • 微创切口掏除法治疗腋臭250例临床疗效观察

    目的探讨治疗腋臭的有效方法.方法美兰在腋毛外缘画线标记,腋窝中央为切口线,长约3~4 cm.局麻后切开皮肤至筋膜,纯性分离,翻开皮瓣,剪除毛囊、汗腺,庆大霉素盐水反复冲洗创面,1-0线缝合并打包包扎.结果所有患者腋部切口均Ⅰ期愈合,248例气味完全消失,2例残留轻度气味.随访150例,术后瘢痕不明显,无牵拉及继发畸形.主要并发症为出血、血肿,共6例.结论应用微创手术治疗腋臭手术简单,疗效确切,并发症少.

    作者:许冬生;孔生生 刊期: 2004年第04期

  • 硫黄软膏治疗阴虱病48例

    本院自2000年以来接诊48例阴虱病患者,均以25%的硫黄软膏外涂治疗,方法简便,患者易于接受,收效迅速.现报告如下.

    作者:郑用谋 刊期: 2004年第04期

  • 尖锐湿疣患者疣体HPV多型别原位杂交检测

    目的探讨原位分子杂交技术多型别检测尖锐湿疣患者疣体HPV-DNA的敏感性.方法应用原位杂交法,通过广谱生物素标记的HPV-DNA探针,对尖锐湿疣患者疣体HPV 6,11,16,18,30,31,33,35,45,51,52型DNA进行检测.结果在35例标本中,有33例HPV-DNA呈阳性反应,阳性率94.3%.阳性反应物主要分布于表皮浅层空泡细胞的细胞核内,多呈片状或灶状分布.结论用广谱生物素标记的原位杂交技术,可检测HPV多型别,具有敏感性高、特异强的优点,并能进行病毒的组织学定位.

    作者:吴文中;佟菊贞;林汉良;吴惠茜;张书岭 刊期: 2004年第04期

  • 三蕊胶囊联合迪维霜治疗寻常性痤疮的疗效观察

    目的观察三蕊胶囊联合迪维霜治疗寻常性痤疮的疗效.方法治疗组外用0.025%迪维霜,对照组外用氯柳酊搽剂,均2次/d. 两组患者均口服三蕊胶囊500 mg,3次/d.结果两组治愈率比较差异有显著性(χ2=6.35,P<0.05); 两组有效率比较差异亦有显著性(χ2=12.12,P<0.01).结论三蕊胶囊联合迪维霜治疗寻常性痤疮疗效确切,可供临床选用.

    作者:刘霞 刊期: 2004年第04期

中国皮肤性病学杂志

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