学术投稿

反义皮层肌动蛋白基因对肝癌细胞功能影响的研究

许朱定;窦科峰;宋振顺;李韧;张福乔

关键词:高转移肝癌细胞MHCC97, 人皮层肌动蛋白cortactin, 转膜腔培养, 转移
摘要:目的:将反义的皮层肌动蛋白(cortactin)基因转染入人肝癌细胞中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响以及该基因在肝癌细胞转移中的作用.方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组质粒.重组质粒、空质粒分别转染入人高转移肝癌细胞株,进行扩增培养,分别绘制MHCC97/vect-cortactin(+)、MHCC97/vect和MHCC97细胞生长曲线;并进行Western-blot实验及通过小室培养模型进行细胞侵袭力实验.结果:RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序证实人皮层肌动蛋白基因cDNA片段已正确的反向插入真核表达载体中.细胞生长曲线提示转染与未转染该基因的肝癌细胞生长曲线相同;Western-blot结果显示转染反义基因的肝癌细胞皮层肌动蛋白cortactin呈低表达或不表达;细胞侵袭力实验表明转染有反义基因的肝癌细胞穿膜细胞数较未转染的有非常显著差异(P<0.01).结论:从蛋白水平和细胞水平均证实该反义基因能抑制肝癌细胞的皮层肌动蛋白的表达和游走而不影响细胞的生长特性.
现代肿瘤医学杂志相关文献
  • 全量放疗后复发性食管癌的外科治疗

    目的:探讨全量放疗后食管癌复发的外科手术治疗的可行性.方法:回顾性分析从1995年1月至2004年12月76例全量放疗后复发的食管癌施行外科手术治疗的临床资料.结果:手术切除率86.0%,并发症40.8%,死亡率17.1%.切除组术后1,3,5年生存率分别为63.1%、23.7%、14.5%.结论:对全量放疗后复发性食管癌行外科手术是可行的,但手术适应症应严格掌握.

    作者:韩泳涛;彭林;方强;李强;陈利华 刊期: 2006年第06期

  • 99m Tc标记抗肝癌单链抗体的生物分布及放射免疫显像的初步研究

    目的:研究全新的抗肝癌单链抗体scFv-PE38在活体内的生物分布和对肝癌组织的亲和性.方法:双功能螯合剂cDTPA间接标记99mTc于抗体.分组建立荷瘤裸鼠模型,标记抗体注射试验组,对照组注射相当剂量的锝盐溶液.分别在各时间点进行SPECT平面显像,观察病灶浓集情况,计算T/NT比值;并分离各主要组织器官测定放射性,计算各时间点组织摄取和瘤肝比.结果:注射30分钟后肿瘤开始显像,24小时显像明显,T/NT达1.89±0.84;36小时各组织器官中肿瘤摄取高,瘤肝比达1.64±1.12.结论:该抗体经标记后在活体内表现出对瘤组织的特异亲和性,为抗体应用于诊治奠定了初步的实验基础.

    作者:王军伟;师建国;汪静;刘彦仿 刊期: 2006年第06期

  • 全身热疗与肿瘤免疫的研究进展

    提高全身和/或肿瘤局部温度,利用热及其继发效应来到达治疗作用,称为肿瘤热疗(Hyperthermia).热疗的抗肿瘤作用不仅在于高热直接杀死肿瘤细胞,机体免疫状态的改变也对消灭肿瘤起着重要作用.

    作者:吕俊宏;王远东 刊期: 2006年第06期

  • Gd-DTPA在脑转移瘤诊断中的应用及护理体会

    目的:评价Gd-DTPA增强扫描在正确诊断不同表现的脑转移瘤中的作用,以及进一步探讨MRI增强前后的准备与护理方法.方法:对96例使用Gd-DTPA患者,增强前后病变MR表现进行分析比较.结果:96例中共检出瘤体灶148个,强化扫描比平扫多发现68个,在148个病灶中,呈弥散快速强化的93个,呈环状结节状强化的有55个,均为明显强化.结论:Gd-DTPA强化扫描对脑转移瘤的诊断价值是肯定的,在区别瘤体与水肿,坏死、囊变及显示微小病灶方面作用显著.加强扫描前后的护理,对保证受检者的安全及增强效果具有重要作用.

    作者:孙云霞;范玉贞 刊期: 2006年第06期

  • 陕西地区食管癌的遗传易感性分析

    目的:研究陕西地区食管癌的发生与雌激素受体α(estrogen receptor,ERα)基因多态性的关系.方法:收集陕西地区31例食管癌患者及76例对照人群的外周血,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法,对ERα基因PVUⅡ和XbaⅠ限制性酶切位点进行多态性分析.结果:ERα基因PVU Ⅱ位点和XbaⅠ位点基因型在食管癌组和正常对照组均无显著差异(P>0.05),但携带Xba Ⅰ位点的XX基因型患者较其它基因型患者患食管癌的危险性更大,而PVUⅡ位点等位基因可能为保护性因素,由强到弱依次为Pp>PP>pp.食管癌的发生和患者的年龄有关,而与吸烟、性别无关.结论:陕西地区食管癌的发生与ERα基因PVU Ⅱ位点和Xba Ⅰ位点基因多态性无明显相关性.

    作者:王淑芳;张伟;苏勤;朱少君;李爱宁;刘贵秋;张周良 刊期: 2006年第06期

  • 反义皮层肌动蛋白基因对肝癌细胞功能影响的研究

    目的:将反义的皮层肌动蛋白(cortactin)基因转染入人肝癌细胞中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响以及该基因在肝癌细胞转移中的作用.方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组质粒.重组质粒、空质粒分别转染入人高转移肝癌细胞株,进行扩增培养,分别绘制MHCC97/vect-cortactin(+)、MHCC97/vect和MHCC97细胞生长曲线;并进行Western-blot实验及通过小室培养模型进行细胞侵袭力实验.结果:RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序证实人皮层肌动蛋白基因cDNA片段已正确的反向插入真核表达载体中.细胞生长曲线提示转染与未转染该基因的肝癌细胞生长曲线相同;Western-blot结果显示转染反义基因的肝癌细胞皮层肌动蛋白cortactin呈低表达或不表达;细胞侵袭力实验表明转染有反义基因的肝癌细胞穿膜细胞数较未转染的有非常显著差异(P<0.01).结论:从蛋白水平和细胞水平均证实该反义基因能抑制肝癌细胞的皮层肌动蛋白的表达和游走而不影响细胞的生长特性.

    作者:许朱定;窦科峰;宋振顺;李韧;张福乔 刊期: 2006年第06期

  • 分化型甲状腺癌的诊治体会

    目的:总结分化型甲状腺癌的诊治经验.方法:回顾分析1995年1月至2004年1月期间96例分化型甲状腺癌的诊断和手术冶疗经验.结果:术前确诊52例(72.22%),术中确诊91例(94.40%),术后病理诊断均分化型甲状腺癌,术后随访90例,获得5年以上随访,5年生存率93.75%.结论:甲状腺癌术前常规细针穿刺,术中作冰冻切片,利于术前,术中确诊,并选择正确手术方式,使治疗更合理有效.

    作者:高军;查育峰;代引海 刊期: 2006年第06期

  • 非霍奇金淋巴瘤患者血清CA125水平与疗效关系的临床观察

    目的:探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者的血清CA 125水平与其他临床特点的关系.方法:分析40例NHL的患者在诊断治疗过程中血清CA 125的变化.结果:在40例NHL患者中,血清CA 125升高占总人数的48%.在低度恶性NHL中,7例(30%)血清CA125水平升高,在进展期NHL患者中,12例(71%)血清CA 125水平升高.CA 125水平升高和疾病进展,病理类型,骨髓浸润,结外浸润,体能下降,B症状的出现,血清乳酸脱氢酶的升高有一定相关性.所有患者中,完全缓解率(CR)达63%,低度恶性NHL患者中,CA 125正常者,81%达到CR,CA 125升高者,29%达到CR(P<0.05).进展期NHL患者中,CA 125正常者,60%达到CR,CA 125升高者,58%达到CR(P>0.05).结论:血清CA 125是NHL患者的一项重要预后指标,CA 125水平升高和疾病进展,临床分期,病理类型,化疗反应率降低等密切相关.对于低度恶性NHL,CA 125正常的患者比CA 125升高的患者的缓解率高.

    作者:金波;侯科佐;于萍;赵明芳;张敬东;刘云鹏 刊期: 2006年第06期

  • 术前同步放化疗治疗局部晚期直肠癌的疗效分析

    目的:观察20例术前同步放化疗治疗局部晚期直肠癌疗效,以同期15例术前单纯放疗作为对照组,分析疗效及毒副反应.方法:20例局部晚期直肠癌给予术前放化疗(DT40~46GY/20~23次)加同步化疗(静滴5-FU和优福定口服剂),对照组为同期15例局部晚期直肠癌给予术前放疗(DT40~50GY/20~25次).结果:两组根治性切除率分别为75%(15/20)和46.7%(χ2=4.98,P=0.036),3年无瘤生存率分别为66.8%和55.4%(χ2=0.49,P=0.483).结论:术前同步放化疗可提高根治性切除率和生存时间,毒副反应可以耐受.

    作者:白新宽;张宁;王缮 刊期: 2006年第06期

  • 分化型甲状腺癌126例临床分析

    目的:研究分化型甲状腺癌适宜的切除范围和手术方式.方法:回顾性分析我院1993年1月-2000年7月治疗的分化型甲状腺癌126例,并对肿瘤残留和复发情况进行分析.结果:行单侧腺叶加峡部切除或全甲状腺切除术的5年复发率为6.76%,对侧腺叶的复发率为1.35%.局部肿块切除或腺叶部分切除的肿瘤残留率为61.54%,5年复发率为19.23%.局部肿块切除或腺叶部分切除术的患者再次手术后的复发率显著高于单侧腺叶加峡部切除或全甲状腺切除术患者(P<0.05).结论:单侧腺叶加峡部切除术或全甲状腺切除术应作为甲状腺癌首选手术治疗方式,局部肿块切除或腺叶部分切除术肿瘤残留率较高,再次手术是必要的.选择正确的手术方式可降低术后复发率.

    作者:李宝忠;李晓江;武要洪;李国萍 刊期: 2006年第06期

  • NT-3对腺样囊性癌细胞系ACC-M体外粘附能力的影响

    目的:研究NT-3对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M体外粘附能力的影响.方法:应用MTT比色法测定不同浓度NT-3对ACC-M细胞在重构基底膜Matrigel上的粘附率.结果:ACC-M细胞与2.5,5,10ng/ml浓度的NT-3共培养30min、90min和6h后的粘附率均明显比同期内未加NT-3组高;而与浓度为500ng/ml的NT-3共培养6h后的粘附率却明显降低.结论:NT-3对ACC-M细胞系体外粘附能力的影响存在浓度依赖性.一定浓度的NT-3能够促进ACC-M细胞系的体外粘附能力.

    作者:李志进;孙沫逸;王磊;陈伟;张圃;李建虎 刊期: 2006年第06期

  • PKCα、PKC βⅡ、PKC δ在甲状腺病变中的表达

    目的:对PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及乳头状甲状腺癌中的表达进行研究,以了解它们在甲状腺病变发生发展中的作用.方法:采用免疫组织化学检测方法分别检测PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在30例结节性甲状腺肿、20例甲状腺腺瘤、31例乳头状甲状腺癌的表达情况,并进行对比分析.结果:PKCα,PKCβⅡ,PKCδ的表达在结节性甲状腺肿组与甲状腺腺瘤组无差异(P>0.05);在乳头状甲状腺癌组明显高于结节性甲状腺肿组及甲状腺腺瘤组,即在良性病变组与恶性病变组存在显著性差异(P<0.05).结论:PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、乳头状甲状腺癌中均有表达;在甲状腺乳头状癌中有过度表达.

    作者:王翠;唐建武 刊期: 2006年第06期

  • 彩超诊断肝癌侵犯下腔静脉及右心房1例

    患者,男性,40岁.8个月前出现右上腹疼痛,诊断为肝癌,行两次介入治疗,术后状况好转,近1周左胸壁疼痛,入院.查体:血压140/90mmHg,全身皮肤无黄染,颈部、锁骨上窝及腋均可触及肿大淋巴结.化验室AFP842·8ng/ml,肝功ALT79u/l,AST85u/l,AST/ACT为1.1,GGT187u/l,ALP280u/l.心电图:快速房颤低电压偶伴室内差传.CT:①肝癌,TAE术后,部分病灶复发;②肝硬化脾大腹水.

    作者:王毅 刊期: 2006年第06期

  • 原发性胆囊癌外科治疗(附34例分析)

    目的:探讨胆囊癌的临床特点和提高疗效的途径.方法:对我院8年来收治的34例胆囊癌患者临.床资料进行分析.结果:胆囊癌多见于中老年人,平均年龄64.61岁,34例患者中男12例,女22例,男女之比为1:1.83,胆囊癌合并胆囊结石者占65.71%,术前B超诊断符合率为82.14%.手术切除率为73.53%,根治性切除10例,根治率40%.1、3、5年生存率分别为58.82%、8.82%、2.94%.结论:B超、CT是常用的诊断方法,对易患胆囊癌高危人群应进行定期观察.手术方式及治疗效果取决于胆囊癌的分期.

    作者:史和平;张昌云;姚建龙;王保全;董山潮;侯峰强;吕毅 刊期: 2006年第06期

  • 采用普通钢针、静脉留置针及PICC化疗所致静脉炎的比较

    目的:比较普通钢针、静脉留置针及PICC这三种方式化疗所致静脉炎的发生率与严重性.方法:分析我科1年来271例患者行1352周期化疗所致的静脉炎.结果:三组两两间经秩和检验,P均<0.05,静脉炎级别构成的差异有统计学意义.普通钢针组静脉炎级别高,留置针组次之,PICC组静脉炎级别低.结论:采用PICC及静脉留置针化疗能明显减少或减轻静脉炎的发生.

    作者:宋玲琴;李小宁;王西京;强水云 刊期: 2006年第06期

  • 放疗前后宫颈癌细胞凋亡及Fas、p53及bcl-2的表达

    目的:探讨Fas、p53及bcl-2放疗前后的变化及与细胞凋亡的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术,分别检测40例宫颈鳞癌患者放疗前后同一位点凋亡阳性率及Fas、p53和bcl-2的表达.结果:放疗前后凋亡阳性率有显著性差异(P<0.01);放疗后Fas与p53表达明显升高(P<0.01),而bcl-2表达明显降低(P<0.01);放疗后p53与Fas及bcl-2表达有相关性(P<0.05).结论:Fas、p53及bcl-2对放射线诱导的宫颈癌细胞凋亡均具有重要调控作用.p53可能通过上调Fas在宫颈癌中的表达参与了放疗诱导的细胞凋亡过程.

    作者:朱青;韩苏夏;李明众;苏宝山;马瑾璐 刊期: 2006年第06期

  • 放疗加GP方案化疗治疗中晚期非小细胞肺癌疗效观察

    目的:观察放疗加GP方案化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的疗效及毒副反应.方法:60例符合条件的患者随机分为两组.对照组(单放组):采用单纯放疗;观察组(放化组):采用放疗加GP方案化疗,放疗常规大野DT 40Gy,后缩野到肿瘤区DT 24Gy.化疗吉西他滨1200mg,iv d1、8,顺铂20mg,iv 2次/周,共4周.治疗结束进行评价.结果:单放组总有效率80.00%,完全缓解率23.33%,放化组总有效率93.33%,完全缓解率53.33%.放化组完全缓解率显著高于单放组(P<0.05),总有效率两组无显著性差异(P>0.05).毒副反应以消化道反应、骨髓抑制及放射性肺炎为主.放化组消化道反应及骨髓抑制发生率高于单放组,放射性肺炎发生率两组无差异.结论:放疗加GP方案化疗治疗中晚期非小细胞肺癌近期疗效优于单纯放疗.毒副反应有所增加,但病人可以耐受.

    作者:刘小平;陈谦;邓怀慈 刊期: 2006年第06期

  • 乳腺X线立体穿刺钢丝定位活检术的临床应用

    目的:探讨乳腺X线立体穿刺钢丝定位活检术在不能触及乳腺病灶中的临床应用价值.方法:对58例钼靶X片上有可疑病灶而无临床体征的患者,通过X线立体定位穿刺,放入钢丝标记,指导外科切除活检,组织病理学检查明确诊断.结果:58例不能触及乳腺病灶一次定位切检成功,经病理检查证实恶性病变20例,良性病变38例.结论:乳腺X线立体穿刺钢丝定位活检术对不能触及乳腺病灶的定位定性诊断有重要价值,是诊断无体征早期乳腺癌的理想诊断技术.

    作者:何文亮;马捷;周冬仙;麦沛成;周文斌 刊期: 2006年第06期

  • 人胶质瘤相关基因表达变化的基因芯片分析

    目的:运用基因芯片技术建立恶性胶质瘤和其对应的癌旁组织的基因表达图谱,分析其差异表达基因,从基因表达水平上揭示胶质瘤的生物学行为.方法:采用上海生物工程有限公司提供的含13824个基因位点的人类基因表达谱芯片(SBC-R-HC-100-20)对WHOⅢ级和WHOⅣ级的胶质瘤和相应的瘤周组织进行检测.结果:筛选出包括与DNA结合、转录和转录因子、蛋白质翻译、细胞周期、转移等相关的表达差异的基因共275个,其中143个表达上调,132个表达下调.结论:恶性胶质瘤的发生过程中存在许多基因表达的改变.基因芯片技术应用于恶性胶质瘤演化相关基因研究,可以方便快速地缩小研究范围,有效地筛选出目的基因进行深入研究.

    作者:程迎新;唐文渊 刊期: 2006年第06期

  • Survivin、p53、Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

    目的:探讨Survivin基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,以及与P53,Bcl-2蛋白表达的相互关系.方法:应用免疫组织化学法(SP)检测80例NSCLC肿瘤组织、20例肺良性病变组织中Survivin蛋白、P53蛋白、Bcl-2蛋白表达情况,并将结果进行了相关分析.结果:Survivin蛋白在肺良性病变组织中不表达,在61.3%(49/80)的NSCLC组织中有表达,且Survivin的表达与肺癌患者的TNM分期有关,但与肺癌的细胞类型、分化程度及淋巴结转移无明显关系;肺癌组织p53蛋白阳性表达率55.0%(44/80),与肺癌的TNM分期及淋巴结转移有关,肺良性病变组织中无p53蛋白表达;肺癌组织Bcl-2蛋白阳性表达率50.0%(40/80)明显高于肺良性病变组织的10.0%(2/20),其中鳞癌组织的表达率62.2%,明显高于腺癌组织的表达率34.3%(P<0.05);肺癌组织中P53,Bcl-2蛋白与Survivin蛋白表达显著相关(P<0.05).结论:Survivin蛋白在肺癌组织中表达上调,提示该基因对NSCLC的发生发展起重要作用.Survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点;Survivin蛋白表达与肺癌的TNM分期密切相关,提示可作为判断病情和评价预后的指标.Sur-vivin蛋白的表达与p53蛋白、Bcl-2蛋白的表达均呈正相关,三者在肺癌的发生中可能起协同作用.

    作者:石敏;王静;俞森洋 刊期: 2006年第06期

现代肿瘤医学杂志

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主管:陕西省科学技术协会

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