学术投稿

SYBR green实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA方法的建立

栾琪;孙静;孙林潮;李春英;高天文

关键词:血管内皮生长因子, 瘢痕疙瘩, 血管瘤, 恶性黑色素瘤, SYBR GREEN实时荧光定量PCR
摘要:目的:建立SYBR green实时荧光定量PCR检测VEGF mRNA水平的方法,并初步应用于美容相关疾患.方法:构建内参GAPDH质粒,倍比稀释VEGF和GAPDH标准品,建立PCR标准曲线,同时绘制熔解曲线,后应用SYBR Green实时荧光定量PCR检测正常皮肤、烧伤瘢痕、恶性黑素瘤细胞株A2058和WM793 cDNA的VEGF mRNA水平.结果:VEGF,GAPDH的标准曲线,符合线性要求,相关系数r均为1,熔解曲线峰值单一,产物特异度好,四组样本的SYBR green荧光定量PCR结果提示瘢痕组织、A2058,WM793的VEGF mRNA水平明显高于正常皮肤.结论:本研究成功建立了VEGF mRNA水平的SYBR green荧光定量PCR检测方法.
中国美容医学杂志相关文献
  • 低温快速成型个性化组织工程活性支架的制备及性能分析

    目的:以PLGA/TCP为原料应用低温冰型快速成型技术制备山羊颅骨缺损模型的个性化组织工程支架,复合rhBMP-2,分析其性能.方法:制造山羊颅骨缺损模型,三维CT重建,荻取NET运行控制文件.将PLGA与TCP按7:3的比例配成匀浆,加入低温快速成型机.在NET文件的指导下挤出三维PLGA/TCP支架,经冷冻干燥,进行净化、消毒后,负压抽吸复合rhBMP-2形成活性支架.对活性支架孔隙率测定、电镜扫描、力学性能分析.结果:体温快速成型制备的PLGA/TCP支架材料圆形略有弧度,与颅骨缺损模型的形态非常吻合.支架结构的孔隙率为89.6%.扫描电镜观察材料密布大孔及微孔结构,大孔平均360μm,微孔为3~5μm,孔间相互贯通.复合rhBMP-2的PLGA/TCP支架在大孔及微孔中都吸附着大量微粒.支架材料的抗压强度0.68MPa,弹性模量17.87MPa.结论:低温快速成型制造的PLGA/TCP个性化支架属仿生设计,孔隙率符合人工骨支架的生理要求,生物力学强度略低于人松质骨,但强度不影响植入手术.负压抽吸法促进rhBMP-2与支架的充分复合制备成活性支架.

    作者:雷华;余东;唐晓军;张志勇;俞冰;牛峰;归来 刊期: 2008年第07期

  • 大鼠颅骨矢状缝牵引成骨的体外研究

    目的:探讨建立幼年SD大鼠颅骨器官体外培养的方法,研究外源性张力对颅骨矢状缝成骨活动的影响.方法:取19日龄的SD大鼠颅顶骨矢状缝组织块,试验组加0.4 g力,对照组不加力.经器官培养后进行组织学观察和免疫组织化学检查,并检查胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)等mRNA的变化情况.结果:试验细骨缝内成骨细胞活跃,IGF-1阳性染色位于颅缝内成骨细胞,实验组IGF-1 mRNA表达量高于对照组. 结论:大鼠颅骨骨缝器官可在体外培养中成功存活并生长.外源机械张力可以扩宽骨缝,刺激成骨活动,可显著增加IGF-1的合成.

    作者:吴镝;王新刚;赵振民 刊期: 2008年第07期

  • 口内入路三点定位弧线截骨矫治下颌角肥大

    目的:介绍一种口内入路三点定位弧线形截骨矫治下颌角肥大的新方法.方法:68例下颌角肥大矫治术,均经口内入路.充分游离下颌角周围软组织.把下颌骨升支前缘向下的延长线与下颌骨下缘的交点设为A点;咬合平面的平行线与下颌骨升支后缘的交点设为B点;原下颌角设为C点;新的下颌角设为D点.在A、B的连线上设置一条垂线,经过C点.在垂线上距C点约1~2cm处,确定D点.用摆动锯在A、D、B三点之间弧线截骨.结果:68例术后,无面神经损伤、口唇麻木、骨折、不对称等.满意率约占97%.结论:三点定位弧线形截骨法与口内外入路其它去除下颌角的方法比较.优点多,安全性大,效果好.值得推广.

    作者:兰振兴;高兰香;江洋;唐凯森;何斌 刊期: 2008年第07期

  • 足部软组织缺损的修复

    足部高压电击伤及严重创伤常致深部组织损伤,引起足部严重软组织缺损.我院自1999年3月~2008年2月修复足背软组织缺损23例(26只足)效果满意.

    作者:王硕;李翔;李圣利 刊期: 2008年第07期

  • 正畸修复联合牵引成年患者龈下折裂牙

    目的:观察透明软托临时义齿配合改良Nance弓牵引龈下折裂牙的方法及疗效.方法:采用改良Nance弓牵引6颗已做完善根管治疗的成年患者龈下折裂牙,整个牵引过程避免在其它牙齿上粘结托槽;整个牵引和保持过程同时配合使用透明软托临时义齿,很好的解决了前牙缺失和邻牙粘贴矫治器带来的美观问题.结果:6颗断根牙经过平均8~10周牵引和12周的保持后,经修复科医师会诊判断均达到桩冠修复的要求.结论:透明软托义齿配合改良Nance弓牵引龈下折裂牙不仅可以保存自然牙根达到良好的修复效果,而且很好的解决了长达几个月的正畸牵引和保持过程中成年患者对美观的要求.

    作者:吕琦;伊松;陈伟挺;胡荣党 刊期: 2008年第07期

  • 睾丸支持细胞介导局部免疫耐受的进展

    机体的某些特殊部位在植入异体组织后不会发生排斥反应,且这些移植组织可长期存活,如眼、睾丸、脑等特殊区域,这些区域称为免疫豁免区[1].免疫豁免区的组织若移植到其他部位,能抵抗排斥反应而存活,诱导局部产生免疫耐受.睾丸是天然的免疫豁免区,研究证实睾丸支持细胞(Sertolicells,SC)是维持其免疫豁免功能的主要细胞[1],共同移植SC可延长同、异体移植物的存活时间,因而,SC的免疫豁免特性倍受关注.现就SC共移植在同、异体移植方面的进展综述如下.

    作者:韩妲丽;邢新;王晓云 刊期: 2008年第07期

  • 碱性成纤维细胞生长因子及地塞米松防治皮瓣缺血坏死的研究现状与进展

    皮瓣的转移和移植在组织缺损修复和功能重建上发挥着不可替代的重要作用,是修复重建外科和整形再造外科常运用的治疗手段之一.多年来尽管皮瓣的设计和手术技巧在不断改善,但皮瓣缺血乃至坏死始终是一个常见的临床问题.

    作者:蔺洁;仇树林 刊期: 2008年第07期

  • 高分子聚合材料表面润湿性对成纤维细胞贴附能力的影响

    目的:研究高分子聚合体表面润湿性对成纤维细胞初期贴附能力的影响.方法:使用薄膜等离子体聚合法在圆形盖玻片表面生成六甲基二硅氧烷(Hexamethyldisiloxane,HMDSO)薄膜聚合体,然后用低温氧等离子体轰击聚合体表面,根据轰击时间的不同形成一系列的不同润湿性表面,将成纤维细胞系L929接种于不同润湿性表面,现察6h,12h时细胞的贴附率,并观察细胞的形态.结果:随着氧等离子体轰击时间的增加,HMDSO聚合体表面接触角从106°下降为0°,显示表面由高度憎水变为高度亲水.成纤维细胞在亲水表面较憎水表面有更高的早期贴附率,细胞伸展更充分.结论:高分子聚合体的表面润湿性对成纤维细胞的早期贴附和伸展有显著的影响.亲水性表面更有利于细胞的早期贴附和伸展.

    作者:魏建华;封兴华;张浚睿;刘宝林;Masao YOSHINARI 刊期: 2008年第07期

  • 红-蓝光治疗仪联合治疗寻常痤疮疗效观察

    目的:观察红-蓝光联合治疗痤疮患者的临床疗效.方法:将64例痤疮患者随机分成2个治疗组:①单纯蓝光照射组(n=36);②红蓝光混合照射组(n=28).采取连续4周,每周2次发光二极管为基础的痤疮治疗仪照射.轻度患者治疗一个疗程,中、重度痤疮患者连续治疗1~3个疗程.结果:经过系统治疗后,痤疮皮损均有所减轻.两组总有效率无显著差别(分别为80.5%及89.3%,P=0.514).显效率比较,红蓝光混合照射可达35.7%,远远高于单纯蓝光照射组(8.3%)(P=0.008).重度痤疮较中度痤疮有更为明显的反应,且副作用很小,使用蓝光对炎症反应可产生效果,配合红光疗效优于单独使用,无明显的副作用.结论:红-蓝光联合治疗痤疮可获得理想疗效,适合治疗轻,重度痤疮患者.

    作者:程飚;李勤;刘宏伟;江萨;陈葵;陈纯 刊期: 2008年第07期

  • 贵金属烤瓷用于前牙二次修复的临床体会

    金属烤瓷牙自二十世纪50年代问世以来,已成为应用广泛的固定修复体之一.它具有形态逼真色泽自然稳定,组织相容性好,抗压耐磨等优点,所以近些年临床上制作了大量的金属烤瓷冠,但因基层牙医的不规范操作,或使用镍铬金属等导致的牙龈染色,要求重新修复的患者越来越多,我科自2004年3月~2007年3月应用贵金属二次修复前牙64颗,现报道如下.

    作者:张利;尹春红 刊期: 2008年第07期

  • 增生性瘢痕与瘢痕疙瘩致病相关基因的研究进展

    增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是皮肤损伤后细胞外基质(Extracellular matrix,EMC)分泌过度和降解减少导致胶原等成分异常沉积所致的病理状态.黄种人和黑种人发病率较高,达4%~16%[1].

    作者:王惠东;杨松林 刊期: 2008年第07期

  • 结膜入路下睑袋整形术197例分析

    下睑袋是由于下睑皮肤松弛,眶内脂肪膨出,眼轮匝肌肥厚或松弛导致的下睑局部膨隆下垂.目前,下睑袋整形术分为三种:即眼轮匝肌皮瓣法、皮下分离法、结膜入路法.自2005年7月~2008年1月,我们对于下睑袋隆起位于中下1/3无需切除皮肤的中青年就医者,采用结膜入路法下睑袋整形术,取得了满意的效果.现报道如下.

    作者:黄和平;王斌;付时章;黄林玲;萧庆昌 刊期: 2008年第07期

  • 烤瓷贴面修复前牙牙体缺损临床效果观察

    近年来瓷贴面修复技术由于其美观,耐磨,抗着色,以及组织相容性好和磨牙量少等优点被广泛应用于口腔临床牙齿的美容修复[1],众多临床报道显示,瓷贴面用于修复各种原因引起的变色牙、畸形牙和过小牙;以及用于修复前牙间隙均取得了令人满意的修复效果.尤其是在变色牙的美容修复方面更是占有不可替代的重要地位.本研究对瓷贴面的另一类适应证,即前牙牙体缺损的临床修复效果进行观察研究,选择不同类型前牙牙体缺损65例,其临床修复效果报道如下.

    作者:尹宝平;张翔晋 刊期: 2008年第07期

  • 强脉冲光(540nm)治疗面部毛细血管扩张59例

    毛细血管扩张是影响面部美容的常见问题,也是皮肤光老化的重要表现之一.临床观察发现激光或强脉冲光治疗面部血管性病变有效且副作用较少[1].目前,常用于治疗毛细血管扩张所选择的波长包括560nm、570nm、590nm的强脉冲光和532nm、585nm、595nm的激光等[2-4],均取得一定疗效,但尚未见540nm强脉冲光治疗面部毛细血管扩张报道.近,我们采用飞顿Ⅱ号多功能治疗仪540nm强脉冲光对59例该类患者进行治疗,取得了满意效果,现总结如下.

    作者:刘丽红;刘崇;樊昕;岳丹霞;杨蓉娅 刊期: 2008年第07期

  • 客观测量正常皮肤和紫外线照射后皮肤颜色的变化——比较Chromamter CM2500d和Maxmeter BX18的异同

    目的:比较两种仪器Chromamcter CM2500d和Maxmeter MX18在客观测量正常皮肤颜色及紫外线照射后皮肤颜色时的异同.方法:Chromameter CM2500d的输出结果为L*a*,Maxmeter MX18的输出结果为M和E.其中L*和M反映皮肤黑素的变化,而a*和E则反映皮肤红斑的变化.测量正常皮肤曝光和非曝光部位的皮肤颜色,比较两种仪器的异同;分别以小红斑剂量(MED)、即时黑化量(IPD)和小持续黑化量(MPPD)的紫外线照射皮肤及反复多次紫外线照射皮肤,比较种仪器在测量不同形式紫外线照射后皮肤颜色变化的异同.结果:在测量正常皮肤颜色时,两种仪器的检测指标具有很好的相关性;当紫外线照射后,反映色素变化的指标L*比M更易受皮肤红斑的影响;在测量IPD和MPPD产生的色素以及色素变化规律时两者具有很好的相关性;a*与E作为反映红斑的指标,在测量MED诱导的红斑时两者有很好的相关性,但反复紫外线照射红斑产生过强时,两者的相关性却明显的下降.在记录红斑随时间的变化过程中,两者始终保持较好的相关性.结论:两种仪器在不同情况下测量皮肤颜色时相关性不同,要根据具体情况分析检测结果.

    作者:田燕;刘玮;信许亚;张萍 刊期: 2008年第07期

  • 粘结面润湿度对牙本质粘结界面纳米渗漏的影响

    目的:观察、比较不同粘结面润湿度对4种全酸蚀粘结剂(OptiBond Solo(OB)、Single Bond (SB)、One-Step (OS)、Prime&Bond NT(PB))牙本质粘结界面纳米渗漏的影响.方法:选取36颗无龋坏人磨牙,用600目碳化硅砂纸在流水冲洗下预备出统一的牙本质粘结面玷污层.分别用4种全酸蚀粘结剂在不同粘结面润湿度条件下进行粘结处理.每颗牙齿垂直于粘结面切割出4个4mm×0.9mm×4mm粘结试件,避光贮存于氨化硝酸银溶液中24h,在TEM下现察、比较牙本质粘结界面纳米渗漏.结果:不同的粘结面润湿度条件下,4种全酸蚀粘结剂牙本质粘结界面中均可以观察到不同程度的纳米渗漏.结论:粘结面润湿度对含不同有机溶剂粘结剂的牙本质粘结界面纳米渗漏的影响程度不同.

    作者:赵三军;陈吉华;沈丽娟 刊期: 2008年第07期

  • 藻酸双酯钠局部注射治疗睑黄瘤43例

    睑黄瘤是脂质沉积症的一种皮肤外在表现,可伴有高脂血症,部分患者有家族史,多见于中老年女性,好发于上眼睑内侧,皮损较持久,呈进行性多发,睑黄瘤无痛痒及其他任何不适但严重影响患者容貌美.笔者近几年来采用局部注射藻酸双酯钠的方法治疗睑黄瘤,取得了一些治疗经验,现报道如下.

    作者:杨靖;谭升顺;祁站涛 刊期: 2008年第07期

  • 外伤性鼻骨塌陷自体骨移植行隆鼻术

    自1996~2005年,笔者对15例外伤性鼻骨塌陷患者,采用自体髂骨、肋骨移植隆鼻术,效果满意,现报道如下.1 资料和方法1.1 临床资料:15例患者(男性11例,女性4例),年龄22~35岁,平均25岁,其中4例同时行其他部位整形.

    作者:张作欣;张璐 刊期: 2008年第07期

  • 横切加内眦韧带固定法内眦赘皮矫正术

    目的:探讨一种简单有效且能减轻切口瘢痕增生的内眦赘皮矫正方法.方法:采用横切口,将内眦韧带固定于鼻背筋膜,切除上下方多余皮肤后缝合.结果:本组受术者共30例,28例受术者经6~36个月随访,睑裂变长,内眦间距缩短、眼型自然美观,切口瘢痕不明显,对手术效果满意.结论:该方法操作简单、创伤小,手术效果确切,术后切口瘢痕不明显.

    作者:李欢诚;黎冻;韦洁 刊期: 2008年第07期

  • 三维CT血管造影(3D-CTA)在体表血管畸形诊断及治疗中的应用

    目的:探讨三维计算机断层摄影血管造影(Three-Dimensional Computed Tomography Angiography,3D-CTA)检查在体表血管畸形诊断及治疗中的应用.方法:对33例临床初步诊断血管畸形且病变范围较大的患者行3D-CTA检查,并以结果指导治疗方案的制定和实施.结果:33例患者3D-CTA诊断为静脉畸形,其中21例经病理检查证实,所得影像显示清楚.其中28例由于病变范围较大采用铜针治疗,治疗后局部肿块缩小或消失、变硬,有效率100%.结论:3D-CTA是一种微创、分辨率高的血管造影技术,可显示病灶的层次及与毗邻组织的关系,在体表血管畸形的诊断中具有重要的价值,并能指导治疗的制定和实施.

    作者:殷国前;杨健祥;孙智勇;王刚;李伟雄;梁志梅 刊期: 2008年第07期

中国美容医学杂志

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