刘加元；李耀胜；程驰
目的观察磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和c-Jun蛋白在增生性瘢痕组织中的表达特征及其影响瘢痕形成和成熟的机制. 方法取16例住院的增生性瘢痕患者的瘢痕组织,并将其分为生长活跃期组(形成时间在1年以内,含1年者)、生长稳定期组,每组各8例;另取正常皮肤8例.所有取材均未经任何治疗.用免疫组织化学方法和常规病理技术检测磷酸化P38MAPK和c-Jun 两种蛋白,在增生性瘢痕组织和正常皮肤组织中的表达和分布规律. 结果正常皮肤组织中,磷酸化P38MAPK主要分布于表皮基底层细胞的胞浆和胞核内,c-Jun蛋白则主要定位于表皮细胞和内皮细胞中,两种蛋白的阳性细胞率分别为21.3%±3.6%和33.4%±3.5%.在处于生长活跃期的增生性瘢痕组织中,磷酸化P38MAPK和c-Jun的阳性信号主要定位于表皮细胞和部分成纤维细胞内,阳性细胞率分别上升至69.5%±3.3%和59.6%±4.3%,明显高于正常皮肤组织(P＜0.01);而在成熟稳定的增生性瘢痕中,两种蛋白表达有所下降,但仍高于正常皮肤组织. 结论增生性瘢痕的形成和成熟可能与激活P38MAPK信号传递通路,影响c-Jun蛋白表达有关.
作者：陈伟；付小兵；孙同柱；杨银辉；赵志力；盛志勇 刊期： 2003年第05期
目的探讨自体骨-前交叉韧带(ACL)-骨、同种异体骨-ACL-骨移植的形态学、组织学及超微结构的变化特点. 方法将日本大耳白兔和新西兰兔各60只随机分成自体骨-ACL-骨移植组和二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植组,每组分别有两种兔各30只,对照组为自体正常侧ACL.术中及术后均不使用免疫抑制剂.术后4、12周分别切取ACL作大体、组织学和电镜检测. 结果自体移植组重塑型速率要快于二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植组.4周时自体移植组和冷冻异体移植组前交叉韧带的胶原纤维中大直径纤维(≥80 nm)分别为6%、24%,小直径纤维(＜80 nm)分别为94%、76%.12周时前交叉韧带的胶原纤维中大直径纤维(≥80 nm)分别为0%、2%,小直径纤维(＜80 nm)分别为100%、98%,电镜下可见自体、冷冻异体移植组重塑过程均相似.光镜下两者有相似的组织学愈合过程. 结论自体骨-ACL-骨移植和二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植,具有相似重塑型过程和组织学愈合过程,自体移植组重塑形速率要快于二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植组.
作者：张长春；周建生；潘公平；胡汝麒 刊期： 2003年第05期
目的寻求使处于生长停滞期的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖寿命延长的方法. 方法将体外转录质粒pcDNA3-hTERT用BamHI酶切使之线性化,经T7 RNA聚合酶催化以转录合成hTERT mRNA.用脂质体法将hTERT mRNA导入处于生长停滞期的HUVEC.检测hTERT mRNA导入后细胞端粒酶活性表达与细胞生长增殖情况. 结果导入hTERT mRNA后,细胞有端粒酶活性的暂时表达,增殖寿命较单纯用脂质体处理的对照细胞延长了7代. 结论 hTERT mRNA导入细胞能可控地、瞬时地重建细胞端粒酶活性,可望广泛应用于人体细胞增殖寿命延长的尝试.
作者：屈艺；王正荣；黄翔；魏大鹏；杨春蕾；解慧琪；杨志明 刊期： 2003年第05期
目的探索尿道黏膜上皮细胞体外培养的技术和方法,为进一步采用组织工程技术构建尿道黏膜组织奠定基础,并为尿道黏膜的生理、药理、毒理学及微生态研究提供实验模型. 方法取刚离乳的雄性新西兰幼兔尿道黏膜组织,分别以DispaseⅡ消化液和混合消化液消化成单细胞悬液,以差速贴壁法排除成纤维细胞,接种后以L929细胞为滋养层细胞进行培养,定期换液,细胞生长、增殖至80%～90%融合时传代.细胞进行常规HE染色、流式细胞仪检测,以扫描电镜、透射电镜观察其超微结构.再分别设立实验组(n=20)、阳性对照组(正常尿道黏膜组织石蜡切片,n=20)及阴性对照组(成纤维细胞铺片,n=20)行免疫组织化学染色. 结果原代培养10天左右细胞逐渐生长融合成片,如铺路石状,细胞大小均一.上皮细胞为二倍体细胞,生长期内均为单一的上皮细胞,无成纤维细胞混杂生长,细胞可传11～13代,成活50～60天. 结论新西兰幼兔尿道黏膜上皮细胞可在体外进行培养,在一定时间内保持增殖活力,为构建组织工程化尿道奠定了基础,且为尿道黏膜的体外研究提供了实验模型.
作者：翟弘峰；李森恺；刘红；李养群；徐军 刊期： 2003年第05期
目的探讨复合富血小板血浆(PRP)的陶瓷人工骨对管状骨骨缺损的修复作用. 方法新西兰大白兔24只,体重2.5～3.0 kg,雌雄不限.随机选择一侧桡骨作实验侧,连同骨膜切除桡骨中上段1 cm,造成节段性骨缺损,填入复合PRP的人工骨;另一侧为对照侧,仅填入人工骨.分别在术后第2、4、8和12周通过大体观察、X线片、组织学及计算机图像分析等手段观察两侧桡骨愈合情况. 结果术后第2周,实验侧和对照侧的新生纤维组织和骨组织均主要集中在截骨端,实验侧新生组织略多于对照侧.第4、8周,实验侧人工骨表面及孔隙内被大量新生骨组织覆盖和填充,人工骨与宿主骨桥接紧密;对照侧的新生骨组织主要限于人工骨两端,且相对实验侧较幼稚.第12周,实验侧骨缺损完全修复,人工骨表面被皮质骨完全覆盖;对照侧仅于两侧截骨端区域出现板层骨,人工骨表面未见连续性骨痂形成. 结论复合PRP的人工骨可用于管状骨缺损的修复,并有明显加速骨愈合的作用.
作者：张长青；袁霆；曾炳芳；陶海荣；邵雷；徐铮宇；宋文奇；张晔；朱珍宏；眭述平 刊期： 2003年第05期
目的研究距骨颈骨折新的手术治疗方法. 方法 1996年4月～2001年3月,采用足内侧途径加内踝截骨显露距骨颈骨折,利用可吸收螺钉对骨折行内固定治疗9例移位的距骨颈骨折.术后膝下石膏管型固定6～12周,骨折有明显愈合迹象后,患者每日定时在短石膏靴外进行一定范围内活动. 结果 9例均获随访15～60个月,平均28个月,骨愈合时间20～42周.按AOFAS足部评分标准,功能优良率77.8%(7/9).术后1例伤口表浅皮肤感染并皮缘部分坏死,为HawkinsⅢ型.术后随访2例并发距骨体缺血性坏死,1例为HawkinsⅡ型,系5周即扶拐负重,评分为中;1例HawkinsⅢ型,经保守治疗无效后行踝关节融合术,评分为差. 结论以足内侧途径为入路,应用可吸收拉力螺钉固定治疗距骨颈骨折是一种新手术方法,辅以严格的术后处理可获得良好的临床治疗效果,值得推广使用.
作者：刘立峰；蔡锦方；梁进 刊期： 2003年第05期
我们从1993年9月～2001年10月,使用经皮穿刺髓核切吸技术治疗腰椎间盘突出症682例,其中有295例获5～8年随访,疗效满意,报告如下.
作者：银和平；彭云生；王永东；张连生 刊期： 2003年第05期
1980年1月～2000年11月我们对53例桡神经损伤实施肌腱移位术,重建伸腕、伸指及伸拇功能,效果满意,报告如下.
作者：周强；阚世廉；宫可同；费起礼 刊期： 2003年第05期
目的探讨软骨细胞体外培养过程中凋亡发生以及caspase-3的表达. 方法采用Annexin Ⅴ和TUNEL法检测第1～4代软骨细胞在体外正常培养体系中第3天和第7天的凋亡率;RT-PCR和Western blot分析caspase-3表达水平;ELISA检测caspase-3蛋白酶活性. 结果第1～4代软骨细胞在体外培养过程中均存在不同程度的凋亡现象,各代次软骨细胞第7天的凋亡率15.7%±0.3%,明显高于第3天的8.9%±0.6%,有统计学意义(P＜0.01).caspase-3 mRNA和蛋白质在整个培养过程中都有表达,随着时间延长表达上调,第7天的表达水平高于第3天.体外培养7天后caspase-3被激活,可检测到分子量为20 ku的裂解片段.caspase-3蛋白酶活性随着培养时间延长也逐渐增高,与细胞凋亡程度基本一致. 结论软骨细胞在体外培养过程中存在凋亡,caspase-3参与了凋亡事件并发挥着重要作用.
作者：肖娟；曹谊林；范华骅；邹萍；崔磊；刘伟；高峰；陆华中 刊期： 2003年第05期
我科自2000年1月～2002年6月采用掌背动脉逆行岛状皮瓣修复手指皮肤缺损21例,效果满意,报告如下.
作者：刘加元；李耀胜；程驰 刊期： 2003年第05期
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人血管内皮细胞(EC)增生的影响及其机制,明确bFGF对烟曲霉素衍生物(TNP-470)及地塞米松(Dex)作用的影响. 方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用MTT法测定EC生长活性,免疫组织化学方法检测EC中核因子(NF-κB)和ki-67的表达. 结果 bFGF有显著促进EC增生的作用,可使核内NF-κB和ki-67表达增强;TNP-470及Dex可抑制EC增生,使核内NF-κB和ki-67表达减少;bFGF逆转二者的抑制效应. 结论 bFGF能促进EC增生,其机制可能是通过激活NF-κB,使细胞由静止期进入增殖期,促进DNA合成,细胞分裂增殖.TNP-470及Dex可抑制NF-κB活化,bFGF可逆转二者的抑制效应.
作者：吕威力；董玉兰 刊期： 2003年第05期
1987年～2000年,我院共收治颈外侧区淋巴结活检致副神经损伤5例,现就特点、治疗及术后随访进行总结.
作者：严旭；庞锡琴；邵擎东；江伦发；魏延云；陈德松 刊期： 2003年第05期
目的研究电刺激对失神经支配骨骼肌萎缩的影响. 方法选用SD大鼠16只,建立双侧下肢失神经支配腓肠肌的实验模型, 电刺激右侧腓肠肌为实验侧,左侧不作电刺激为对照侧,术后2、4周分别观察肌肉的组织学, 超微结构, 纤颤电位波幅及Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性变化. 结果实验侧术后2、4周肢体肌细胞直径及截面积较对照侧下降速度明显减慢;电刺激能延缓肌细胞的线粒体, 肌质网退变,但对肌肉纤颤电位波幅无明显影响;实验侧术后2、4周Na+-K+-ATP酶活性下降速度比对照侧分别慢15.59%和27.38%;实验侧术后2、4周Ca2+-ATP酶活性下降速度较对照侧分别慢4.83%和21.64%. 结论电刺激对失神经支配骨骼肌的组织学、电生理及酶组织化学的各项指标均有保护作用,是延缓肌肉萎缩的有效方法.
作者：徐建广；屠永全；顾玉东；李继峰 刊期： 2003年第05期
目的探讨胚胎面突外胚间充质细胞在体外的生长特性、表型特征及在无分化抑制剂-白血病抑制因子(LIF)的DMEM/F12培养基中向平滑肌细胞自分化的过程. 方法取孕50天人胚面突,用消化法培养获得外胚间充质细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和生长情况,免疫组织化学鉴定细胞分化表型.用无LIF的DMEM/F12培养基培养,2天后进行抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体免疫组织化学检测,通过RT-PCR在mRNA水平检测α-SMA的表达,透射电镜观察细胞超微结构. 结果培养的细胞呈单层生长,成纤维状,长梭形,有2～4个突起,抗人自然杀伤细胞标志、波形丝蛋白、S-100蛋白、神经元特异性烯醇化酶、肌红蛋白及Ⅷ因子染色阳性,抗神经胶质纤维酸性蛋白、神经纤维细丝蛋白、α-SMA、角蛋白染色阴性.去除LIF 2天后,抗α-SMA免疫组织化学检测呈阳性,RT-PCR显示细胞在RNA水平表达平滑肌细胞特异的α-SMA,透射电镜可见超微结构与平滑肌细胞相类似. 结论所获得的外胚间充质细胞具有干细胞特性.在无分化抑制剂存在时,面突外胚间充质细胞呈明显向平滑肌细胞的自然分化.
作者：邓蔓菁；金岩；史俊南；刘源；赵宇 刊期： 2003年第05期
目的探讨异体巩膜移植替代睑板重建眼睑的临床效果. 方法 1986年5月～2001年1月对45例部分眼睑缺损患者,采用异体巩膜替代睑板行眼睑重建.其中男31例,女14例.上睑18例,下睑27例;累及上或下眼睑内眦部9例,外眦部7例.眼外伤22例,眼睑肿瘤23例.眼睑缺损不超过眼睑总长度的1/2.术后观察重建眼睑的外观、功能及并发症. 结果 45例移植异体巩膜行眼睑重建均获成功.术后随访11～38个月,平均19.7个月.重建的眼睑完整,双侧眼睑长度及高度差值均小于2 mm.眼睑开闭及上提功能基本正常,对视功能无影响. 结论异体巩膜是替代睑板行眼睑重建的理想材料.
作者：郭波；郭祥文；罗清礼 刊期： 2003年第05期
手指中节或拇指近节指骨1/3以远处离断再植为末节断指再植术.由于末节断指的血管较细小,吻合困难,需精细的吻合技术,其静脉不易吻合成功.我们自1997年～2002年,对末节断指吻合指动脉再植27例,取得较好效果,报告如下.
作者：韦阁；蒙云飘；覃刚；蒙宾 刊期： 2003年第05期
目的探讨珊瑚多孔羟基磷灰石(CHAP)、纤维蛋白(FS)及金葡液(SAI)复合物修复骨缺损的作用,以及作为人工骨移植替代材料的可行性. 方法采用新西兰大白兔54只在双侧桡骨制备骨缺损模型后分成实验组、对照组及空白组.将CHAP-FS-SAI复合物植入骨缺损处作为实验组,自体骨植入作为对照组,空白组不植入任何物质;术后2、4、8和12周分别取2只兔行大体标本观察、组织学、X线片观察及生物力学测试,比较各组修复骨缺损的能力. 结果实验组术后2周见植入物与骨端形成紧密的纤维性连接,镜下可见CHAP周围大量成纤维细胞、软骨细胞及毛细血管增生;对照组有少量骨痂形成,有软骨细胞、骨母细胞及破骨细胞.4、8周两组均见大量骨痂形成,镜下见软骨细胞钙化,组织骨和板层骨.12周实验组及对照组均见大量成熟的骨细胞及板层骨;实验组见植入物完全骨化,塑形完全,CHAP未完全降解.空白组12周骨缺损区为纤维瘢痕组织填充,镜下主要为大量成纤维细胞.X线片2周实验组与对照组有骨痂影,4周骨痂影增多.8周实验组骨缺损消失,CHAP分散在骨痂中;对照组骨折线消失,髓腔开始形成.12周实验组和对照组骨皮质连续,髓腔复通,塑形完全.空白组12周骨缺损区无骨性连接.生物力学测试大扭矩及抗扭刚度在术后4、8、12周实验组与对照组均无差异(P＞0.05),但术后2周,实验组高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 CHAP-FS-SAI复合物具有较强的成骨能力和良好的生物相容性,能作为自体骨移植的一种替代物修复骨缺损.
作者：韦正超；蔡道章；张峻峰；金文涛 刊期： 2003年第05期
目的综述有关骨形态发生蛋白(BMPs)诱导成骨的信号传导机制,深入了解BMPs基础及应用研究的理论依据. 方法查阅近期相关文献,了解BMPs相关蛋白(Smads)及其相关转录因子在BMPs诱导成骨的信号传导中的作用. 结果 BMPs的信号传导过程是:BMPs首先与Ⅱ型受体和Ⅰ型受体结合,Ⅰ型受体磷酸化Smads,Smads进入核内与转录因子相互作用影响相关蛋白的转录.Smads可分为受体调节Smads(R-Smads:Smad1、2、3、5、8和9)、共同介导者Smad(Co-Smad:Smad4)和抑制性Smads (I-Smads:Smad6、7).Smad1、Smad5和Smad8,可能还有Smad9涉及BMPs的信号传导.多种激酶如局部粘连激酶(FAK)、Ras-细胞外信号调节激酶(ERK)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和Akt丝/苏氨酸激酶与Smads的信号传导有关.与Smad1和Smad5相关的转录因子有核心结合蛋白A1(CBFA1)、Smad相互作用蛋白1(SIP1)、鸟氨酸脱羧酶拮抗酶(OAZ)、激活蛋白-1(AP-1)、蟾蜍腹侧形成同源框蛋白-2(Xvent-2)、生长抑素(Ski)、抗增殖蛋白(Tob)、同源结构域转录因子-8(Hoxc-8)等.CBFA1与转化生长因子-β和BMP-2信号传导有关,能与Smad1、2、3、5相互作用,在骨形成中起重要作用.锁骨、颅骨发育不良被认为是CBFA1的杂合型突变引起的.CBFA1基因敲除的小鼠缺乏膜内和软骨内成骨,软骨的成熟及分化也受到了严重干扰. 结论 Smads及其相关转录因子尤其是Smad1、5、8和CBFA1在BMPs诱导成骨的信号传导中起重要作用.
作者：徐小良；戴克戎；汤亭亭 刊期： 2003年第05期
1 病历介绍患者男,22岁.因高处坠落致左腕、左肘部肿痛2小时入院.检查:左腕部肿胀、压痛,可触及骨擦感,左肘关节肿胀,可闻及骨擦音,关节活动受限.桡动脉搏动良好,手部皮肤感觉正常.X线片显示左桡骨远端经关节面粉碎性骨折,尺骨鹰嘴及冠状突骨折,桡骨小头粉碎骨折.
作者：张增方；孙伟；杜建春；朱朝晖；张鑫 刊期： 2003年第05期
目的探讨体外筛选及鉴定人角朊干细胞(KSC)的方法. 方法利用KSC对细胞外基质的快速黏附性,选择不同时间黏附的细胞分为5、20和60分钟3组,并以不进行筛选的细胞作对照组.体外培养扩增后,以KSC的相对特异性标识分子β1整合素、角蛋白19(Ck19)的单克隆抗体,免疫组织化学方法对各组细胞进行鉴定,利用图像分析系统测平均灰度值.并用流式细胞仪、透射电镜对各组细胞进行检测. 结果各组细胞在10～14天均有克隆形成,组间比较5分钟组细胞生长较慢,但形成克隆较大,细胞体积较小.免疫组织化学β1整合素、Ck19在各组都有表达,各组平均灰度值统计学分析显示,β1整合素在5分钟组的表达与另3组间有统计学意义(P<0.05),Ck19的表达在5分钟组与20分钟组间无差异(P>0.05),60分钟组与对照组间差异不显著,而前两组与后两组之间比较有统计学意义(P<0.05).流式细胞仪检测提示5分钟组细胞大部分处于G1期,与其它3组有区别.透射电镜显示5分钟组细胞体小,核浆比大,细胞器不成熟. 结论利用细胞外基质筛选的5分钟组细胞处于幼稚状态,并有强克隆形成能力,符合预期的KSC特点,可利用KSC对细胞外基质的快速黏附性对其纯化筛选,同时利用β1整合素、Ck19的单抗加以鉴定.
作者：董蕊；金岩；刘源 刊期： 2003年第05期
中国修复重建外科杂志
主管:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
主办：中国康复医学会,四川大学
