嵇金如；沈萍；应超群；郭丽华；喻玮；张静；吕继芳；郑焙文；肖永红
目的 体外诱导并获得结核分枝杆菌(MTB)对PA-824的耐药菌株.方法 选取MTB标准株H37Rv,在PA-824浓度二倍递增的含药培养基上进行传代培养,逐步诱导菌株对PA-824耐药,测定多种抗结核药物对PA-824耐药株的低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并对耐药株测序鉴定ddn和fgd1基因的突变情况.将耐药株在无药固体培养基上连续传代培养10代以观察耐药稳定性.结果 H37Rv经逐步诱导后得到5株MTB单克隆,它们对PA-824的MIC值是诱导前8倍以上,且对TBA-354同时发生交叉耐药.测序结果显示fgd1基因未发生突变,但5株均检测到ddn基因突变.耐药株在无药固体培养基上连续传代10代后,MIC值无明显变化.结论 通过二倍递增体外诱导可以获得对2种硝基咪唑类(nitroimidazoles)药物均耐药的MTB菌株;MTB对硝基咪唑类药物的耐药可能与ddn基因突变有关;MTB对硝基咪唑类药物的耐药稳定性较强,不易复敏.
作者：胡明豪；徐建；王彬；付雷；陆宇 刊期： 2017年第02期
目的 为满足从棒状链霉菌突变库中筛选棒酸高产菌株的需求,建立一种新的克拉维酸高产菌株筛选方法.方法 以克拉维酸生产菌株—棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)SC51为出发菌株,采用紫外-NTG联合诱变方法,以链霉素抗性作为筛选标记,从不断增加链霉素浓度的平板上,筛选链霉素抗性突变菌株,以此突变菌株为实验菌株,对碳源、氮源、前体三油酸甘油酯和发酵条件进行优化.结果 在链霉菌浓度60μg/mL的平板上筛选到链霉素抗性突变菌株SCM0943,效价达到2955μg/mL,且遗传性能稳定;优化的发酵条件下,摇瓶发酵120h,克拉维酸效价可达3437μg/mL,较出发菌株提高49.1％.结论 棒状链霉菌的链霉素耐受性与克拉维酸的产量存在正相关性,本试验结果对克拉维酸工业化生产具有很好的参考价值.
作者：宗工理；钟传青；王新圆；覃荣活；曹广祥 刊期： 2017年第02期
三环倍半萜albaflavenone和strepsesquitriol的结构相似,但是其亚甲基桥的位置不同.在链霉菌Streptomyces sp.SR107菌株中,异源表达两个双基因基因簇scp和wcp,均产生同一个化合物4p,5β-epoxy-2-epi-zizaan-6p-ol(4),表明albaflavenone(2)和strepsesquitriol(3)可能来源于同一前体epi-isozizaene(1).
作者：周媛；李善仁；赵贵石；朱敬；鲁春华；沈月毛 刊期： 2017年第02期
目的 了解临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌中可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs)存在情况.方法 在2008年11月至2009年7月从住院患者中分离19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌,通过分析3种基因gyrA、parC和mdfA序列对菌株进行分子鉴定.采用PCR方法检测4种可移动遗传元件遗传标记基因,分别为:泛宿主性接合性质粒遗传标记trbC、转座子Tn1548遗传标记tnpU、Ⅰ类整合子遗传标记qacE△1-sul1和插入序列共同区遗传标记ISCR1基因;对扩增阳性的4种遗传标记基因PCR产物采用双向测序,测序结果用Chromas软件直接作BLASTSearch比对分析.结果 本组19株gyrA、parC和mdfA基因PCR扩增均阳性,其基因序列经GenBank中的BLASTn程序进行同源性比较分析,证实19株均为肺炎克雷伯菌.19株中,4种可移动遗传元件遗传标记trbC、tnpU、qacE△1-sul1和ISCR1基因阳性率均为100.0％,经对该4种遗传标记基因PCR阳性产物进行测序比对,发现与GenBank中己发布的4种相对应基因trbC、tnpU、qacE△1-sul1和ISCR1序列完全相同(同源性均为100.0％),均得到确认.结论 可移动遗传元件在携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌中广泛存在.
作者：黄支密；夏守慧；周芸；杨伟平；李洁；糜祖煌 刊期： 2017年第02期
目的 建立HPLC-MS法测定大鼠血浆中巴豆苷浓度的方法,并研究单次尾静脉给药后巴豆苷在大鼠体内的药动学特征.方法 血浆样品用甲醇沉淀蛋白处理,色谱分离用甲醇和含0.1％甲酸的水为流动相梯度洗脱,流速为1 mL/min.定量分析在Triple Quad LC-MS上采用电喷雾离子化电离源、正离子多重反应离子监测的方式进行.将建立的方法应用于大鼠尾静脉注射巴豆苷的药动学研究.结果 大鼠血浆中巴豆苷线性范围为1～5400ng/mL(r=0.997),定量下限为1ng/mL;批内、批间的精密度和准确度符合生物样品的检测要求;提取回收率的平均值为72.47％;尾静脉给予大鼠6mg/kg巴豆苷,巴豆苷Cmax为(3.39±1.80)μg/mL;AUC0-t为(4.23±18.26)μg/(mL·min);t1/2z为(46.50±19.63)min.结论 本实验建立的HPLC-MS法专属性强,简便、快速和准确,可用于大鼠血浆中巴豆苷浓度的测定.
作者：彦培傲；彭成；张岚；潘媛；李玉芝；张若琪 刊期： 2017年第02期
目的 研究环丙沙星对小鼠肝细胞的自噬作用及基因表达.方法 小鼠随机分为对照组和实验组,实验组小鼠给药环丙沙星1周,采用自噬溶酶体荧光探针检测小鼠肝细胞自噬溶酶体,利用全基因组表达谱基因芯片技术筛选差异基因.结果 自噬溶酶体荧光探针检测到实验组小鼠肝细胞荧光强度降低,全基因组表达谱芯片技术发现Akrlb7/Pfkfb3调节果糖及甘露糖代谢信号通路有统计学显著差异(P＜0.05).结论 环丙沙星(13.5g/kg)抑制小鼠肝细胞自噬,Pfkfb3基因可能是环丙沙星给药后影响自噬以及糖代谢的靶点之一,并且可能是通过AMPK/mTORCl途径影响自噬.
作者：周萍；樊静；梁韡；袁小艳；廖黎；张舒 刊期： 2017年第02期
为进一步研发新型抗结核药物提供参考.通过Science Direct、Wiley和Springer Link等数据库进行文献检索,将近几年文献报道的新型抗结核靶点进行归纳和总结,并对有潜力的抗结核药物做简单的讨论.新型抗结核候选药物的潜力靶点包括参与DNA合成、铁代谢、能量产生、膜转运和细胞壁生物合成等靶点.抗结核靶点的开发思路为研发更多新型抗结核药物提供了参考.
作者：耿叶慧；李子强；张瑜 刊期： 2017年第02期
目的 开发一种高纯度非达霉素的制备工艺.方法 采用DAC50高压制备色谱系统,优化了制备工艺.结果 选用Kromasil C8作为色谱填料,洗脱剂为50％乙腈加0.1％甲酸,上样量为1.4～1.6g粗品,纯化后产品纯度≥99.5％,单杂≤0.10％,纯化收率在85％左右.结论 该工艺简单高效,适用于工业化规模生产.
作者：应雪肖；任会军；陈峰；王玲萍 刊期： 2017年第02期
目的 为新型抗生素的研究提供有价值的菌种资源.方法 采用改良的琼脂扩散法从越南槐内生真菌中筛选拮抗白念珠菌的活性菌株并测定其对念珠菌属真菌的抑菌谱;以改良的微量肉汤稀释法测定其代谢产物的抗菌活性;根据形态和分子特征鉴定该菌株的分类学地位.结果 菌株GRPH-0活菌块对白念珠菌的抑菌圈直径比阳性对照大,并且对参试念珠菌属真菌均具有不同程度的抑制作用,具有较广的抑菌谱;其代谢产物对白念珠菌及其多重耐药临床分离株的小抑菌浓度均为4μg/mL,仅为阳性对照的16倍;初步鉴定该菌株为疣孢漆斑菌.结论 菌株GRPH-0鉴定为疣孢漆斑菌,对参试病原真菌均显示强的抗真菌活性,具有较大的开发应用潜力.
作者：姚裕群；甘建华；黄荣韶；李良波 刊期： 2017年第02期
目的 研究紫外光照下稀土Tb3+/那氟沙星荧光体系对抗生素药物的分析检测优势.方法 稀土离子Tb3+与那氟沙星相互作用形成有机配合物,激发出491、546、586和622nm处Tb3+的特征荧光,在紫外光照下,体系的荧光强度明显增强,文中探讨了荧光增强机理和佳发光条件.结果 该分析方法测得稀土Tb3+荧光强度和那氟沙星浓度间具有良好的线性关系:I=53.77+22.49C,线性范围为2.0×10-6～2.0×10-5mol/L,检出限为2.78× 10-7mol/L.结论 由此可见紫外光照下Tb3+/那氟沙星荧光体系对那氟沙星成功进行了分析检测,并且灵敏度更高,线性关系较好,检出限更低.
作者：沈宝洁；刘金彦 刊期： 2017年第02期
目的 合成奥达特罗重要中间体1-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-2-丙胺盐酸盐并进行工艺改进,为其工业化生产奠定基础.方法 以4-甲氧基苯基丙酮为原料,经过羟烷基化反应、Ritter反应、醇解、成盐得到产物1-(4-甲氧基苯基)-2-甲基-2-丙胺盐酸盐.结果 产物结构经LC-MS、1H NMR确认,总收率为76％,产物HPLC纯度达到99.7％.结论 优化后的工艺路线,反应条件更温和,操作简单,产品纯度高,有利于工业化生产.
作者：祝淳君；董宏波；郑登宇；卫金强；杜伟宏；罗红兵；曹胜华 刊期： 2017年第02期
鲍曼不动杆菌是主要的医院获得性病原菌之一.临床分离的鲍曼不动杆菌不仅对抗菌药物具有耐药性,而且对控制感染的消毒剂或杀菌剂具有耐药性.耐药表型的特点对于抗菌药物的治疗和感染控制是一个巨大的挑战.虽然消毒剂与抗菌药物相比往往具有不同作用方式和较高的使用浓度,但是鲍曼不动杆菌已经发展了多种机制来抵抗消毒剂的作用.因此,鲍曼不动杆菌对消毒剂的耐药一旦获得,对感染的控制是一个不利的影响.此外,已经观察到鲍曼不动杆菌对消毒剂和抗菌药物耐药性之间的联系,这是由于诸如外排泵或抗菌药物和消毒剂耐药基因共存而造成.由消毒剂和抗生素抗性的共同选择作用还有待进一步研究,但需要一个策略来优化消毒剂的使用效能和减少消毒剂耐药性的发展.本文主要就鲍曼不动杆菌消毒剂的耐药机制进行综述.
作者：蔺飞；贾旭；凌保东 刊期： 2017年第02期
目的 探讨克拉霉素对烟雾暴露哮喘小鼠肺组织中组蛋白去乙酰化酶2及糖皮质激素受体α表达的影响.方法 将40只SPF级BALB/c雌性小鼠按随机数字表法随机分为对照组(Control group),哮喘组(OVA group),哮喘+烟雾暴露组(SEA group),哮喘+烟雾暴露+克拉霉素干预组(CAM group),每组10只.通过卵蛋白致敏激发建立哮喘模型,哮喘小鼠烟雾暴露建立烟雾暴露哮喘小鼠,给予烟雾暴露小鼠克拉霉素干预.小鼠肺组织切片HE染色,组织病理学观察不同组小鼠肺组织病理变化及炎症评分(UNNDERWOOD标准);Elisa法检测小鼠支气管肺泡灌洗液中白介素(IL-4)及CXCL8炎症介质的表达水平;采用组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)活性检测试剂盒检测不同组小鼠肺组织中组蛋白去乙酰化酶2活性;Western blot法检测小鼠肺组织组蛋白去乙酰化酶2及糖皮质激素受体α蛋白表达.结果 肺组织病理切片示哮喘组及烟雾暴露哮喘组小鼠肺组织炎症显著,克拉霉素干预组小鼠肺组织炎症减轻,病理炎症评分克拉霉素干预组炎症评分(1.833±.0373)低于烟雾暴露哮喘组(4.917±0.187)(P=0.031);克拉霉素干预组小鼠肺组织灌洗液中IL-4(60.78411±11.8858)及CXCL8(313.421±96.5448)低于烟雾暴露哮喘组(P=0.042,P=0.027);与烟雾暴露哮喘组(124.444±16.960)相比,克拉霉素干预组小鼠肺组织中HDAC2(266.889±28.205)活性提高(P=0.035),同时时HDAC2及GRα表达升高(P=0.041,P=0.035).结论 克拉霉素可降低烟雾暴露哮喘小鼠肺组织炎症反应,改善小鼠肺组织中组蛋白去乙酰化酶2及糖皮质激素受体α的表达.
作者：刘春；邓述恺 刊期： 2017年第02期
目的 评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对我院血流感染样本中醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合菌的鉴定及同源性分析中的应用.方法 收集2011年4月-2015年4月我院非重复血流感染标本,对VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定仪初步鉴定为醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合菌的菌株,开展基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,用MALDI-Biotyper软件和ERIC-PCR进行同源性分析,并用16S rRNA及recA基因测序技术进行验证.结果 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对20株VITEK 2无法鉴定到种的醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合菌展开了有效的鉴定,其中9株为医院不动杆菌(Acinetobacternosocominalis),11株为皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii),两种细菌的质谱图中均含有特异性的峰图,能有效地将两类细菌进行区分.同源性分析结果将菌株分为2大簇(Ⅰ型11株,Ⅱ型9株),Ⅱ型又分为3小簇(Ⅱa4株,Ⅱb3株,Ⅱc2株).Ⅰ型、Ⅱ型分布在我院4个病区.结论 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合菌鉴定方面具有精准、快速的优点,可以鉴别出皮特不动杆菌和医院不动杆菌,MALDI-Biotyper软件进行同源性分析十分便捷.
作者：嵇金如；沈萍；应超群；郭丽华；喻玮；张静；吕继芳；郑焙文；肖永红 刊期： 2017年第02期
目的 建立固相萃取-高效液相色谱法同时测定牛奶中4种四环素类抗生素(土霉素、四环素、金霉素及强力霉素)的方法.方法 样品经0.lmol/L EDTA-Mcllvaine缓冲溶液提取,亲水亲脂(简称HLB)固相萃取小柱净化,0.1％甲酸-甲醇洗脱.采用Venusil XBP C18色谱柱,草酸-乙腈-甲醇为流动相,外标法峰面积定量.结果 4种抗生素在0.05～1.00mg/L浓度范围内线性良好(R2＞0.9990),土霉素、四环素、金霉素和强力霉素的检出限分别为0.50、0.46、0.49和0.52μg/L.4种四环素类抗生素在牛奶样品中的加标回收率为84.92％～96.04％,相对标准偏差为0.61％～3.76％(n=5).采用该检测方法对市售的78种不同乳品进行了检测,其中两个样品分别检出强力霉素含量为2.729mg/L,四环素含量为2.346mg/L.结论 该方法快速准确,灵敏度高,重现性好,适合牛奶中四环素类抗生素残留的定量分析.
作者：陈小燕；牛玉玲；朱敏；刘万毅 刊期： 2017年第02期
中国抗生素杂志
主管:中国医药集团总公司
主办：中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,中国医学科学院医药生物技术研究所
