卢玲玲；潘晓微；潘晓夫
目的 建立了一种新的HPLC-PAD法测定盐酸大观霉素含量及其有关物质的分析方法.方法 采用ApolloC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以100mmol/L三氟乙酸为流动相,流速为1.0mL/min,柱温为30℃,柱后衍生氢氧化钠溶液浓度为21g/L,流速为0.5mL/min.脉冲安培检测器,工作电极为金电极(3mm),四电位工作模式.结果 盐酸大观霉素在0.15～150μg/mL(r=0.9999)内线性关系良好,杂质A在0.05～50μg/mL(r=0.9999)内线性关系良好,杂质B在0.5～50μg/mL(r=1.0000)内线性关系良好,杂质C在0.5～50μg/mL(r=l.0000)内线性关系良好.大观霉素、杂质A、杂质B和杂质C的检测限分别为1.5、1.0、2.0和3.0ng.大观霉素、杂质A、杂质B和杂质C的精密度分别为1.5％、1.1％、1.6％和1.8％.大观霉素的回收率为96.7％ ～102.5％.结论 该方法准确、灵敏,重复性和耐用性好,可用于盐酸大观霉素及其有关物质的实验室日常测定.
作者：王琰；姚尚辰；王明娟；邹文博；薛晶；李进；张力；刘春亮；胡昌勤 刊期： 2014年第06期
目的 合成丙二醇头孢曲嗪.方法 7-ACA与5-巯基-1,2,3-三唑钾盐反应制备得到头孢曲嗪中间体7-TACA,再与D-(-)-对羟基苯甘氨酸邓钾盐缩合,得到甲醇头孢曲嗪,纯化后制得丙二醇头孢曲嗪.结果 产品总收率32.4％,质量符合日本药典标准.结论 本工艺简单易行,为中试生产提供了依据.
作者：陈林；石克金；李江红；张静霞；曾志旋；曹胜华 刊期： 2014年第06期
以不同烷基取代丙酮和乙醛酸在酸性条件下缩合成3-烷基-4-氧代-2-戊烯酸,再通过选择性还原双键,二溴海因(DBDMH)作为溴代试剂对酮羰基a-位进行溴代,以及P2O5催化成呋喃酮环,共合成了14个3-位不同取代基的两个系列溴代呋喃酮,其结构经NMR和MS表征.初步生物活性测试结果显示A5、B5和G5对铜绿假单胞菌生物膜的形成具有较好的抑制作用,并且A5-G5系列的单溴代亚甲基呋喃酮的活性优于A4-G4系列的二溴亚甲基呋喃酮.
作者：徐星军；周群飞；林静；陈卫民 刊期： 2014年第06期
目的 建立1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶抑制剂的高通量筛选模型,从不同来源的样品中筛选该酶抑制剂,以期获得作用于该靶点的全新作用机制的抗结核药物先导物.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,克隆基因dxr构建重组表达质粒pET28a(+)::dxr; IPTG诱导表达并经Ni2+亲和层析柱纯化得到具有天然酶活性的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶;基于该酶促反应底物NADPH在340nm波长下具有光吸收的原理,建立和优化酶活测定体系,构建并评价酶抑制剂的高通量筛选模型;应用此模型进行酶抑制剂筛选并进行抑酶活性及抗菌活性评价.结果 成功得到具有天然酶活性的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶,构建了1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶抑制剂的高通量筛选模型并得到3个抑酶活性较高的阳性化合物,其中化合物IMB-DXR-B1为该酶的反竞争性抑制剂,其K值为6.2μmol/L,IC50为29.5μmol/L,该化合物对于结核分枝杆菌H37Rv的MIC为32μg/mL.结论 成功构建了稳定性好、灵敏度高的结核分枝杆菌1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶抑制剂的高通量筛选模型,筛选得到具有抗结核活性的1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶抑制剂,为获得全新作用靶点的新型抗结核药物奠定了基础.
作者：步洪强；杨延辉；蒙建州；关艳；胡辛欣；肖春玲 刊期： 2014年第06期
鲍曼不动杆菌是世界公认的医院感染主要致病菌之一;而非鲍曼的不动杆菌(Non-baumannii Acinetobacter,NbA)也逐步成为医院和社区感染的病原菌之一.NbA的临床分离率、耐药率仍明显低于鲍曼不动杆菌,但己屡有多耐药的NbA导致严重医院感染的报道.因此,其临床重要性可能并未得到应有的重视.NbA是否会像其同属的鲍曼不动杆菌一样成为临床重要病原菌？目前已发现NbA存在一些明显的有别于鲍曼不动杆菌的耐药机制和特点.本文主要从产生水解酶、外排泵机制等方面综述NbA的耐药分子机制,并探讨相关研究中存在的问题.
作者：王穆群；张永 刊期： 2014年第06期
目的 了解2012年中国西南地区三家教学医院临床分离自无菌体液病原菌的分布及耐药状况,为感染的预防与控制提供依据.方法 运用WHONET5.5和SPSS16软件对3所西南地区三级甲等教学医院2012年无菌体液病原菌进行回顾性分析.结果 脑脊液中共分离病原菌266株,包括革兰阳性菌161株、革兰阴性菌90株和真菌15株.分离多的为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),其次为金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌.其他无菌体液标本(除脑脊液)中共分离病原菌720株,包括革兰阳性菌297株、革兰阴性菌411株和真菌12株.分离多的为CNS、大肠埃希菌和克雷伯菌属.脑脊液标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为39.1％和75.9％.其他无菌体液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为45.8％和78.9％.分离自无菌体液的肠球菌出现了对万古霉素和利奈唑胺耐药的现象,其中屎肠球菌对万古霉素的耐药率高达11.5％.在肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌属细菌对亚胺培南的耐药率较低,而肠杆菌属细菌对亚胺培南的耐药率则较高(为23.5％).非发酵菌对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,其中鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率已大于60％.结论 我国西南地区无菌体液病原菌构成与全国监测数据基本一致.无菌体液中MRSA检出率均低于全国监测水平,MRCNS检出率则较高.对万古霉素耐药的屎肠球菌分离率较高.非发酵菌特别是不动杆菌的耐药形势严峻.合理应用抗菌药物,加强医院感染控制应成为减少细菌耐药发生的重要策略.
作者：黄燕春；陈知行；谢轶；刘宝；费樱；杜艳；单斌；康梅 刊期： 2014年第06期
目的 探讨低频超声联合万古霉素对表皮葡萄球菌(S.epidermidis)RP62A生物被膜(biofilm,BF)的影响.方法 建立兔表皮葡萄球菌导管感染模型,设空白对照组,单独低频超声组,单独万古霉素组,低频超声联合万古霉素组.涂板菌落形成单位(colony-forming units,CFU)计数法计算导管细菌数;扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察BF结构的改变;皮肤、心脏、肝脏及肾脏病理组织切片检查组织的炎症反应.结果 单独低频超声对BF内细菌无杀灭作用,单独万古霉素能比较有效地杀灭BF内细菌,较空白对照组CFU减小,P＜0.01;低频超声联合万古霉素组效果更加明显.SEM显示低频超声对BF结构无影响;与各单独作用组相比,低频超声联合万古霉素能明显地破坏BF,使其结构变得更加疏松.皮肤病理组织切片显示低频超声联合万古霉素组,皮下隧道炎症明显减轻.结论 低频超声联合万古霉素能更显著地清除导管表皮葡萄球菌BF.
作者：李军帅；余加林；董莹；芦起；李禄全；耿化晓；李莎 刊期： 2014年第06期
研究醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物热分解机理以及动力学,为其储存与运输等过程的热条件的设定提供理论参考.利用非等温热重法对醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物热分解过程中溶剂热脱除过程进行了研究.根据醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物热重数据计算可得:醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物晶胞中,1个醋酸乌利司他分子结合大约2.5个乙醇分子.热分解试验结果表明:醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物在升温加热过程中,晶胞中所结合的溶剂分两个阶段进行脱离.第一个阶段失去0.4个乙醇分子,第二个阶段失去2.1个乙醇分子.基于不同热分解机理所对应的反应动力学机理函数,结合醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物非等温热分解试验数据,分析、推测了醋酸乌利司他乙醇溶剂化合物热分解过程机理:分别为成核和生长,n=3/2;成核和生长,n=2,并计算得到了每一个阶段所对应的热分解动力学方程.
作者：雷绒绒；朱亮；沙作良；杨立斌；王彦飞 刊期： 2014年第06期
目的 基于临床前药效学(PD)和临床药动学(PK)的实验数据资料,进行给药方案的Monte carlo模拟,确定氟罗沙星的佳给药剂量,从而优化其临床给药方案.方法 结合氟罗沙星的药敏实验及临床药动学等PK/PD相关实验数据资料,以口服氟罗沙星片200、300和400mg每日1次(Qd),3种给药方案,治疗近几年来河南地区常见的临床分离致病菌.进行Monte carlo模拟,将获得的累积反应分数(CFR)做给药方案的比较.结果 以CFR＞90％的给药方案为佳给药方案,对于大肠埃希菌和淋球菌引起的感染,仅需口服200mg(Qd);对硝酸盐阴性杆菌、肠杆菌属和哈夫尼亚菌属引起的感染,口服300mg(Qd);对于表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、志贺菌属、肺炎克雷伯菌、柠檬酸杆菌属、普通变形菌、肺炎链球菌、沙门菌属和金黄色葡萄球菌(MSSA)引起的感染,口服400mg(Qd)可获得预期满意的临床疗效并能有效预防细菌耐药性产生.结论 临床中针对不同耐药菌感染的给药方案治疗所需要的给药剂量存在着明显差异,使用氟罗沙星要根据致病菌从而选择合适的剂量.
作者：吴干斌；张军；周建华；李晓天 刊期： 2014年第06期
目的 根据青霉素菌渣成分及青霉素的理化性质,试验研究了青霉素菌渣灭活技术.方法 探讨加入盐酸的体积、酸化温度、反应时间及菌体投加量,考察不同情况下青霉素效价去除率.结果 得出适的处理条件.结论 处理后的菌渣毒性消失,保留青霉素菌渣营养成分,使其进一步利用得以实现.
作者：周波；项铁男 刊期： 2014年第06期
研究用超临界CO从发酵菌丝中萃取霉酚酸(MPA)的工艺,采用响应面-小星点设计,考察了夹带剂乙醇浓度(55％～95％)、萃取时间(30～150min)、萃取压力(20～40MPa)、萃取温度(40～80℃)对MPA萃取回收率(RR)和提取物中MPA含量(CMPA)的影响.响应面分析表明,RR与CMPA均与该4因素符合二次模型,萃取时间的一次方、二次方和萃取压力均高度影响RR,而乙醇浓度的一次方和二次方、萃取时间的二次方以及乙醇浓度和萃取温度的交互作用都对CMPA有极显著影响.根据所得二次响应面模型预测佳工艺条件,综合考虑RR和CMPA,确定MPA的超临界CO2萃取工艺为:以95％乙醇为夹带剂、萃取压力20MPa、萃取温度40℃、萃取150min.采用该工艺进行3次验证试验,RR为95.58％±1.12％,CMPA为70.54％±1.04％,与预测值96.16％和70.53％相符.
作者：夏胜男；程波；邓君 刊期： 2014年第06期
目的 应用反义RNA沉默技术,构建针对murA基因的超敏工程菌.方法 将不同murA基因片段插入带有pairedtermini结构的反义表达载体pHN678中,获得重组质粒,导入大肠埃希菌宿主诱导表达.通过生长表型考察不同反义片段对murA沉默效果的影响,并用靶向MurA抑制剂磷霉素验证反义工程菌E.coli DH5α/pHNM2的敏感性及靶向性.结果 反义片段murA1和murA2具有较好的沉默效果,E.coli DH5α/pHNM2对MurA抑制剂磷霉素具有靶标特异性和敏感性.结论 成功获得靶向murA反义工程菌Ecoli DH5 α/pHNM2,并有望进一步应用于MurA特异性抑制剂高通量筛选模型的构建.
作者：李素秋；殷瑜；戈梅；陈代杰；钱秀萍 刊期： 2014年第06期
目的 制备伊达比星脂质体,建立伊达比星脂质体包封率的测定方法.方法 采用薄膜分散-超声合并挤压法制备伊达比星脂质体,通过葡聚糖凝胶柱色谱分离游离药物和脂质体,用HPLC测定伊达比星含量,计算包封率.结果 伊达比星脂质体平均包封率为65.42％,载药量为7.70％.凝胶柱色谱柱回收率99.76％,伊达比星在0.05～30.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999).结论 薄膜分散-超声合并挤压法适用于制备伊达比星脂质体,分析方法准确可靠可以用于伊达比星脂质体包封率的测定.
作者：王玲玲；邓盛齐；尹婕；任静 刊期： 2014年第06期
乙酰辅酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACCase)在微生物生长和脂肪酸合成代谢中发挥着重要作用.本文系统介绍了微生物ACCase的分类、结构与功能、代谢作用和抑制剂研究等方面的进展.微生物ACCase类型主要分为真核型(同质型)和原核型(异质型)两大类,分别以酿酒酵母ACCase和大肠埃希菌ACCase为代表.结构与功能研究主要集中在对异质型ACCase的BC和CT亚基的晶体学、作用位点等方面.许多研究表明ACCase在微生物的生长和脂肪酸合成中发挥着关键作用,ACCase活性减弱和丧失会导致菌体生长减缓或无法存活,脂肪酸的合成也明显减弱.面对临床上越来越多的抗药菌,以微生物ACCase及其亚基作为抗生素筛选靶标,成为筛选和合成新抗生素的重要方向,目前己取得一定进展.
作者：董惠钧；陈芳；姜俊云；延辉 刊期： 2014年第06期
目的 分离鉴定链霉菌I06A-02832发酵液中具血管内皮细胞生长因子受体-2酪氨酸激酶(VEGFR2-CD)抑制活性的次生代谢产物.方法 采用大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、HPLC等分离手段对次生代谢产物进行分离纯化;通过质谱(MS)、核磁共振波谱(NMR)对其结构进行鉴定,以ELISA法检测其次生代谢产物对VEGFR2-CD的拮抗活性.结果 分离得到两个环二肽类次生代谢产物:2832B和2832C;化合物2832B的化学结构与环(脯氨酸-酪氨酸)一致,化合物2832C的化学结构与环(苯丙氨酸-甘氨酸)一致,均对VEGFR2-CD表现出一定的抑制活性.结论 化合物2832B和2832C是具有VEGFR2-CD活性的环二肽类次生代谢产物,本研究首次报道它们具有VEGFR2-CD抑制活性.
作者：蒋忠科；张洋；郭连宏；姜蓉；孙承航 刊期： 2014年第06期
目的 研究整合子参与铜绿假单胞菌耐药的分子机制.方法 收集2008年1月至2011年12月我院临床分离的200株铜绿假单胞菌,采用K-B法进行体外药敏试验,采用聚合酶链式反应进行整合子整合酶基因的检测;整合子可变区扩增、克隆、测序,分析整合子基因结构.结果 59.0％的医院感染铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子阳性,未检测出Ⅱ、Ⅲ类整合子;编码对氨基糖苷类、磺胺类抗菌药物和氯霉素耐药的基因整合子阳性组多药耐药菌均明显高于阴性组.结论 Ⅰ类整合子在医院感染铜绿假单胞菌中广泛分布,可通过质粒在不同菌属间水平传播,在耐药基因传播中起重要作用,应引起临床足够的重视.
作者：卢玲玲；潘晓微；潘晓夫 刊期： 2014年第06期
中国抗生素杂志
主管:中国医药集团总公司
主办：中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所,中国医学科学院医药生物技术研究所
