学术投稿

加样时间对ELISA快速一步法检测乙型肝炎血清标志物的影响

夏吉荣;王富兰

关键词:乙型肝炎标志物, 酶联免疫吸附试验, 加样时间
摘要:目前,实验室常规做乙型肝炎(HBV)血清标志物检测多采用快速酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunoadsordent Assay;ELISA)一步法,即样本和包被的相应抗体或抗原以及相应酶标抗体同时在30 min内反应完成,而多数实验室仍采用手工加样法,在此过程中如果样本量较大,同一批检样中加在前面的样本与加在后的样本时间相差较大,少则半小时,多则一个小时,这一时间差远超过了样本和酶标抗体同时反应的时间,这样的差异是否对检测结果有影响?为此我们作了相关的实验观察,现报告如下.
现代检验医学杂志相关文献
  • 用患者样本进行方法学对比及在两种葡萄糖测定法中的应用

    目的用患者样本分析葡萄糖氧化酶-氧电极法(简称电极法)和己糖激酶(HK)法测定血清葡萄糖(GLU)时的偏倚.方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件,每天取患者样本8份,分别用两种方法测定血清葡萄糖含量,共测定5 d,记录检验结果,去除离群点,计算线性方程和相关系数,并进行偏倚估计.结果在进行患者葡萄糖测定时,电极法(Y)和HK法(X)测定结果的回归方程为:Y=0.985 7X+0.089 67,r2=0.999 2;电极法和HK法测定结果的预期相对偏倚在GLU=15 mmol/L时为0.80%,GLU=9 mmol/L时为0.44%,GLU=6 mmol/L时为0.00%,GLU=3 mmol/L时为1.67%.结论电极法和HK法测定血清葡萄糖时,测定结果在低浓度时偏倚较大,在中、高浓度时偏倚较小,两法间有良好的相关性.

    作者:陈松劲;俞旭峰;张田新;李红胜 刊期: 2003年第02期

  • 酶免疫一步法检测HBsAg的前带现象及其对策

    酶免疫一步法(简称一步法)检测HBsAg因其操作简便、快速省时而被各实验室广泛应用.但在实践中笔者发现对于高滴度HBsAg的标本,该法存在着明显的前带现象,致使高滴度的HBsAg标本漏检.现报告如下:

    作者:毛新友 刊期: 2003年第02期

  • UF-100流式尿沉渣全自动分析仪常见故障分析和排除

    UF-100流式沉渣全自动分析仪系日本希森美康(Sysmex)公司产品,为当今世界上先进的全自动尿液沉渣分析仪,该仪器利用先进的流式细胞技术、电阻法、电导体、激光和荧光染色方法,检测尿液中各种有形成分(白细胞、红细胞、上皮细胞、酵母样细胞、细菌、各种管型、结晶、精子等)产生的不同散射光和荧光强度,经计算机多参数分析,得出图像和定量报告,有助于临床对病情的分析和尿液测定标准化,具有准确、快速、重复性好等优点.

    作者:金志刚;章满红;杨琼 刊期: 2003年第02期

  • 加样时间对ELISA快速一步法检测乙型肝炎血清标志物的影响

    目前,实验室常规做乙型肝炎(HBV)血清标志物检测多采用快速酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunoadsordent Assay;ELISA)一步法,即样本和包被的相应抗体或抗原以及相应酶标抗体同时在30 min内反应完成,而多数实验室仍采用手工加样法,在此过程中如果样本量较大,同一批检样中加在前面的样本与加在后的样本时间相差较大,少则半小时,多则一个小时,这一时间差远超过了样本和酶标抗体同时反应的时间,这样的差异是否对检测结果有影响?为此我们作了相关的实验观察,现报告如下.

    作者:夏吉荣;王富兰 刊期: 2003年第02期

  • 血细胞分析仪使用的室内质控探讨

    我院于2000年2月引进日本产Sysmex的SF-3000全自动五分类血细胞分析仪,极大的提高了工作效率和精密度,但先进的仪器需要全面的质量控制,才能得到合理使用和准确结果.

    作者:陶红 刊期: 2003年第02期

  • 微囊化(APA)猪甲状腺组织治疗甲状腺功能减退大鼠前后甲状腺功能的变化

    目的用非微囊化猪甲状腺组织治疗甲减大鼠作对照,观察微囊化(APA)猪甲状腺组织治疗甲减大鼠前、后大鼠甲状腺功能的变化情况.方法采用放免法.结果移植后两组的T3、T4水平升高,其中对照组更为明显,但9 w后明显下降,甚至低于移植前水平,实验组保持持续升高,超过40 w;移植后两组的TSH水平均明显下降,以实验组为显著,而且持续降低超过40 w,对照组持续时间较短,移植9 w后开始回升.移植后微胶囊回收率为100%,回收的微囊化甲状腺组织存活率达80%.结论微囊化猪甲状腺组织治疗甲状腺功能减退大鼠疗效显著,微囊化方法达到了免疫隔离的目的,延长了组织移植后的存活时间.

    作者:栾桂红;徐维家;宋光;吴美慧;马小军;杨桂英;冷峰 刊期: 2003年第02期

  • 真菌直接检查方法的改进

    氢氧化钾法直接制片检查鳞屑和头发中的真菌菌丝和孢子的方法简便、迅速,被广泛采用.

    作者:朱玲;胡斌;赵兰香 刊期: 2003年第02期

  • 革兰氏阴性杆菌去阻遏持续高产AmpC酶的检测

    目的探讨酶提取物三维试验法检测革兰氏阴性杆菌去阻遏持续高产AmpC酶(包括染色体型和质粒型)在该院的临床应用价值及分布.方法在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠埃希菌ATCC25922,在平皿中央贴一头孢西丁纸片,并在距纸片5 mm处由里向外切割一道狭缝,将酶提取物加入狭缝内.结果由于AmpC酶水解头孢西丁,在狭缝与抑菌圈交接处出现扩大的长菌区域.使用该法检测标准产酶株大肠埃希菌CT7和临床分离的72株可疑菌,标准株结果准确无误,分离的可疑菌有8株持续高产AmpC酶试验阳性.结论酶提取物三维试验法是一种简单易行,适用于临床试验室快速检测持续高产AmpC酶的有效方法.

    作者:周吕蒙;周讯;余小平;肖剑萍 刊期: 2003年第02期

  • 血液分析仪红细胞指数质控方法的探讨

    目的探讨血液分析仪红细胞指数的质控方法.方法利用L-J质控空图和某全血质控物提供的有关数据,推理论证红细胞指数[MCV、MCH、MCHC]在控时对其有关测定参数值的新的质控要求.结果红细胞指数有关测定参数值的质控范围应分别为HGB:-x±1.7 s,HCT:-x±1.06 s,RBC:-x±1.06s.超出此范围判定为失控.结论执行该质控判定标准可以实现对红细胞指数实施质控的目的.

    作者:袁应选;阎红;王璇;赵扬 刊期: 2003年第02期

  • 惰性液体包裹待测样本现象及解决方法

    美国泰尔康RA-1000型全自动生化分析仪使用惰性液体防止交叉污染,我们在使用该仪器的过程中碰到如下现象:某些项目的结果常不明原因的很低甚至接近或等于零,而仪器未有任何提示或报警.在不做任何处理的情况下用样本复查有时偶可正常测出,但往往结果仍然偏低.该现象多发生于样品用量较少的项目,如血清总蛋白、白蛋白等.

    作者:罗进才;叶长钦;彭兰芬;江利敏 刊期: 2003年第02期

  • PCR产物液相杂交检测的优化

    目的为了使液相杂交检测更加灵敏、特异、快速.方法通过改进杂交液的成分,选择佳的探针浓度,使5′端标记生物素的PCR扩增产物与5′端标记地高辛的探针在PCR反应管中进行液相杂交,杂交条件为:94℃10 s冷却到37℃10 s即完成杂交.杂交后产物通过链霉亲和素被固定在微孔表面,同时在含高浓度DMSO的杂交液中将非特异结合的探针解离,然后对被固定的特异杂交产物进行ELISA检测.结果液相杂交的条件优化:杂交液中二甲基亚砜(DMSO)浓度为300ml@L-1,探针浓度为0.5μmol@L-1,杂交温度为37℃.对60~600 bp的PCR产物的杂交特异性无明显差异,可以检测到1×104copy的PCR产物,对100例乙型肝炎患者的血清进行检测,HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清检出HBV DNA阳性率为100%(30/30);HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清检出HBVDNA阳性率为78.6%(22/28);HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清检出HBV DNA阳性率为66.7%(16/24),其余为阴性.结论该液相杂交法操作简单、快速、灵敏、特异,适合临床实验室使用.

    作者:刘宇琴;钟咏梅;郭晏海 刊期: 2003年第02期

  • 急性早幼粒细胞白血病细胞形态学分型的研究

    目的解决急性早幼粒细胞白血病(M3)目前国内因粗细颗粒混杂而造成的分型困难.方法以粗颗粒型早幼粒细胞的百分率进行分型,规定:粗颗粒型早幼粒细胞>70%为M3a(粗颗粒型);30%<粗颗粒型早幼粒细胞≤70%为M3b(混合颗粒型);粗颗粒型早幼粒细胞≤30%为M3c(细颗粒型).结果三种亚型在性别、年龄分布上,以及在临床症状、血象、骨髓象上均有不同的表现与特征.结论对于临床治疗和判断预后具有指导意义,并有利于今后以同一分型标准进行学术交流.

    作者:刘瑞锁;王克强;赵辉;晋红梅;杨凤霞 刊期: 2003年第02期

  • 论ALT、AST的样品体积分数(SVF)

    在酶活性的测定中,SVF直接决定着酶活性计算用F值的大小,F值与酶活性计算公式如下:

    作者:赖鑫 刊期: 2003年第02期

  • 血细胞异常直方图与镜检对比分析

    血细胞分析仪打印的细胞直方图是通过仪器测得细胞体积大小绘制成一个光滑的对数正态曲线图,若是图形异常,说明是偏离正态分布,即细胞体积存在着不均一性或是某系细胞出现形态异常.

    作者:杨有利 刊期: 2003年第02期

  • 蛋白电泳扫描积分在肾脏疾病中的临床应用

    目的探讨REP高压快速蛋白电泳扫描积分对肾脏疾病的诊断和鉴别诊断价值.方法对经临床确诊的178例各类肾脏疾病患者进行REP高压快速蛋白电泳,并对各区带进行扫描,计算各种肾脏疾病的区带扫描积分均值,与正常对照组(20例)比较;同时探讨电泳扫描积分与蛋白质浓度或各区带百分数之间的相关性.结果电泳扫描积分与蛋白质浓度成正相关(相关系数r=0.993 1);在各种肾脏疾病中,各区带扫描积分均值与对照组比较都有不同程度的增高或降低,尤其是肾病综合征患者,其ALB区带明显减少,α1、α2、β区带显著增加(P值均小于0.01);肾病综合征与其它肾脏疾病相比,其区带积分均值也有明显的差异(P<0.01);在肾炎和肾功衰患者中,其α1、α2区带的积分均值与对照组比较也有增加趋势(P<0.05).在区带的百分数上也有类似的变化.结论REP高压快速电泳扫描积分对肾脏疾病的诊断和鉴别诊断具有一定的临床价值.

    作者:陶华林;曾付兰;吴泽才 刊期: 2003年第02期

  • 使用糖酵解抑制剂测定血糖的效果评价

    目的评价糖酵解抑制剂对血糖测定的效果.方法使用葡萄糖氧化酶法测定糖酵解抑制剂抗凝的血浆标本及血清标本中葡萄糖的浓度,对其稳定性、准确性等进行比较.结果血清中24 h后血糖比1 h后血糖下降41.68±27.4,而加糖酵解抑制剂的血浆中血糖仅下降4.19±26.2.结论使用糖酵解抑制剂进行血糖测定,可使血糖浓度在25℃条件下稳定24 h.

    作者:许琳 刊期: 2003年第02期

  • 微板核酸杂交-酶联显色检测性病沙眼衣原体DNA

    目的建立微板核酸杂交-ELISA方法,检测性病沙眼衣原体.方法采用PCR、核酸杂交和ELISA三大生物技术相结合,建立微板核酸杂交ELISA法,并用此法分别同McCoy细胞培养和免疫学方法检测307份性传播疾病标本进行比较.结果微板核酸杂交-ELISA法检测的阳性率为40.39%(122/307),高于细胞培养的9.77%(30/307)和免疫诊断的12.05%(37/307).结论微板核酸杂交-ELISA技术检测性病沙眼衣原体灵敏度高、特异性好、简便快速.因此,该方法具有很强的实用价值和发展前景.

    作者:任碧琼;田碧文 刊期: 2003年第02期

  • 基因检测及面临的问题

    随着疾病相关基因的不断定位和克隆,分子生物学技术的不断进步,基因检测由于其独有的对疾病的预见性,使得其正从研究走向临床应用,尤其是应用在对症状前检测,易患性检测和产前检测方面.

    作者:罗福薇;孙顺昌 刊期: 2003年第02期

  • 胶体金免疫试带法与ELISA法检测HBsAg的互补性

    本文对胶体金免疫试带法与ELISA法检测HBsAg作了比较,结果显示两种方法具有很强的互补性,同时应用可及大地提高检测HBsAg的准确度.

    作者:杨明胜;吴英 刊期: 2003年第02期

  • 介绍一种周围神经纤维和髓鞘的染色法

    神经纤维和髓鞘的染色法很多,一般均为单一染色.我们经反复试验在镀银后再进行丽春红套染色,显色对比度好,能清晰地分辨神经纤维和髓鞘.同时一些细微组织的成分结构(如神经内膜、神经束膜等)亦明显被衬托出来,为神经病理学的诊断提供了方便.

    作者:李晨薇 刊期: 2003年第02期

现代检验医学杂志

现代检验医学杂志

主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院