郑铁生;王亚娜;宗爱萍
目的探讨线粒体天门冬氨酸转氨酶同工酶(m-AST)在急性心肌梗死(AMI)患者血清的变化及其临床意义.方法用全自动生化分析仪测定了19例AMI患者血清m-AST活性,同时观察其它4种心肌酶AST、CK、CK-MB、LDH动态变化.结果AMI患者,发病6 h血清m-AST即升高,与对照组相比有极显著差异,P<0.001.12 h迅速升高,24 h达峰值(256.5±69.5 IU/L),此后,逐渐下降,120 h时基本正常,与对照组相比无显著差异,P>0.05.m-AST升高的幅度差别较大,6h m-AST升高幅度略低于CK-MB、AST;12 h迅速升高,是正常的16.2倍;48 h达高,是正常的21.9倍;随后迅速下降,120 h时是正常的1.3倍,升高曲线与CK-MB相当,比AST、CK及LDH敏感.与AST、CK、CK-MB、LDH的异常检出率进行比较,发病6 h异常检出率依次为CK-MB>CK>AST>m-AST>LDH,24 h内不断上升,其中以m-AST与CK-MB异常检出率高,达100%,CK、AST次之,为89.5%和84.2%,LDH较低,为73.6%.48 h后检出率逐渐下降,下降速度是AST3.9倍,是CK2.7倍,CK-MB 1.2倍,LDH 5.1倍.结论检测并动态观察m-AST酶活性,可作为诊断AMI并评价疗效、判断预后的一项新的生化指标.
作者:阴斌霞;王华;王香玲;赵丽华;柴丽华;岳天海;何谦;樊晓燕;王幼利 刊期: 2005年第06期
当今网织红细胞(下称网红)计数虽已有先进的自动分析技术的应用,但迄今国内仍以显微镜目测法为主.目测计数原用缩小视野法,费工费时,计数精确性差,用Miller窥盘[1]后有了改善,但仍感不便,且市场上不易购得.本文设计一种改进的窥盘,改变原Miller窥盘大小方格比例和小方格位置,用电脑绘图,打印于透明投影胶片上,制成两方格面积比为10 : 1、小方格居中的改良Miller窥盘,制作简易,经济实用,效果好.
作者:陈高远;周文良;陈秀华 刊期: 2005年第06期
在使用SYNCHRON LX20全自动生化分析仪器时,常出现SUB DEPL、IR HI、SAMP REF DRIFT等异常分析值[1],正确分析和处理这些异常分析值,有针对性的对标本进行处理和重新检测显得尤其重要,现将结果后面标识的各种情况分析及处理介绍如下:
作者:李永臣;单淑萍;袁凯 刊期: 2005年第06期
外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),主要为淋巴细胞和单核细胞,其中绝大多数为淋巴细胞.主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)结构十分复杂,其多样性由基因性和多肽性两方面构成.多基因性指复合体由多个位置相邻的基因座位所组成,编码产物具有相同或相似的功能.根据结构和功能,组成MHC的基因传统上分为MHC-Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类.MHC-Ⅰ类分子几乎存在于所有有核细胞,外周血白细胞表达MHC-Ⅰ类抗原量多,且外周血比较容易检测,因此研究MHC分子的表达主要研究外周血单个核细胞表面的表达.
作者:李向东 刊期: 2005年第06期
目的采用荧光产物增强逆转录酶活性分析(STF-PERT),建立逆转录酶活性荧光定量方法,用于临床标本和献血员中逆转录病毒的检测.方法用荧光产物增强逆转录酶活性分析方法检测500份献血员血液样本;同时测定此方法的敏感性.结果将AMV逆转录酶经连续梯度稀释后,经PCR循环反应,得到与理论值完全相符合的PCR荧光值曲线.500份献血员样本有19份逆转录酶(RT)活性阳性,阳性率为3.8%;用常规筛选方法检测,有1份HIV可疑结果,2份HCv阳性,5份HBV阳性,共8份,筛检率为1.6%.结论常规的献血员血样筛选方法,并不能完全包含所有被检测献血员血样中的逆转录病毒;STF-PERT对及时发现逆转录病毒感染,提高临床输血安全性有着十分重要的意义.
作者:岳乔红;苏明权;杨柳;王宝燕;周萍;李银太;郝晓柯 刊期: 2005年第06期
1故障现象仪器在自动清洗时,提示空白计数错误,WBC空白计数值高出正常值十多倍.
作者:秦峰 刊期: 2005年第06期
目的探讨抗β2-GP1抗体与狼疮性肾炎(LN)的相关性.方法采用ELISA法测定随机抽取活动期LN患者33例血清中抗β2-GP1,同时检测患者血清IgG、Cs及Cr.结果与正常对照组及其它肾炎组相比,LN组抗β2-GP1水平明显升高(P<0.01),阳性率高达54.55%,显示抗β2-GP1与LN有较强的相关性.结论抗β2-GP1可作为LN早期诊断的重要指标.
作者:单玉蓉;周红;陈巧林 刊期: 2005年第06期
瑞典Boule Medical AB公司生产的AC-920EO+全自动血细胞分析仪,性能良好,操作方便.笔者就多年的使用经验,探索和总结了该仪器部分常见故障及排除,供使用该仪器的同行参考.
作者:张体永;杨夕 刊期: 2005年第06期
目的探讨血CysC作为肾小球滤过率指标在慢性肾功能衰竭中的应用价值.方法将81例住院病人分为肾功能正常组及慢性肾功能衰竭Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,测定各组病人的血、尿肌奸、血CysC和β2-MG,并与正常对照组比较.结果各期肾衰病人血清CysC、β2-MG及Ccr与肾功能正常组比较有显著性差异(P<0.01),而各组病人CysC和β2-MG与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);血Cr与血β2-MG和CysC的相关系数r分别为0.704 3和0.831 5,Ccr与血β2-MG和CysC的相关系数r分别为-0.672 3和-0.798 2.结论血CysC作为肾小球滤过率指标更为适合.
作者:张耀祖 刊期: 2005年第06期
目的探讨不同检测系统测定孕酮(PRGE)结果的可比性.方法取Bayer、德普和自制不同水平的质控物,以及35例不同浓度的患者新鲜血清,在四个不同的化学发光检测系统(强生VITROS ECI、拜尔ACS180、拜尔CENTAUR、德普immulite-1000及其配套的校准物、试剂、质控物等,分别命名为检测系统1~4)上进行PRGE检测,并对数据进行相关的统计学分析.结果经随机区组设计资料的方差分析,不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清PRGE测定结果在各检测系统的组间总体差异均有显著性(P<0.001);各检测系统PRGE测定结果的可靠性系数a接近1,各检洲系统间的相关系数均大于0.975.以检测系统1作为目标检测系统,对其它检测系统作临床可接受性能评价,检测系统2和3临床均接受,检测系统4临床部分接受.结论4个检测系统测定PRGE结果的精密度符合临床要求,临床可接受性能评价除检测系统4外均有可比性.
作者:冯妙芙;黄宪章;徐宁;庄俊华;张秀明;梁伟雄 刊期: 2005年第06期
AVL COMPACT2型血气分析仪,是一台微型全自动血气分析仪,该仪器具有精密度高、操作简单、方便、标本用量少等特点.我院引进已有多年,临床反应良好.但笔者在实际工作中遇见了该仪器经常出现的几个故障,并探索了一些解决办法,现作如下介绍.
作者:罗书久;唐中 刊期: 2005年第06期
蛋白指纹技术(protein fingerprinting)是表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,缩写SELDI-TOF-MS,简称SELDI-TOF或SELDI)的俗称,它指的就像每个人的指纹不同于他人一样,每种疾病在发生发展过程中所形成的特定蛋白组或其降解产物也不一样,所以对此各种特异性蛋白指纹图谱的识别和判断,就可达到对各类疾病进行准确诊断的目的.
作者:汪隆海 刊期: 2005年第06期
目的探讨义务献血前ALT初筛的意义和分析成本效益.方法用干式生化法进行ALT初筛,并与微板速率法检测结果相比较,同时核算初筛的成本和效益.结果干式生化法与微板速率法检测结果无显著性差异(t=1.108,0.20<P<0.50).初筛组和未初筛组的ALT异常血液报废率分别为0.078%和3.97%,两者有显著性差异(u=22.95,P<0.001).结论实行ALT初筛可大大降低血液报废率和避免浪费血源,具有良好的社会效益和经济效益.
作者:邬旭群;鲍自谦;陈云龙 刊期: 2005年第06期
使用日本光电公司生产的血细胞分析仪MEK-4200,购买原装试剂成本高,其稀释液用量大,为解决依赖进口试剂价格昂贵、运输不便等问题,查阅了大量资料[1~4],自配了稀释液,经几次改动,经过一段时间使用,效果良好.其实验评价报告如下:
作者:郝万鹏;沈萍 刊期: 2005年第06期
人类100年以前发现了血型,在20世纪用不同的形式术语表达.1980年国际输血协会建立了一个工作组,采用基于遗传的数字术语对红细胞表面抗原进行分类.1990年工作组出版了专著,用数字术语描述了242个红细胞抗原.
作者:刘孟黎;牛姗姗 刊期: 2005年第06期
目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9~2.0);产量稳定(平均10~15 μg/1×106细胞,1~5μg/mg组织,2.5~5μg/ml全血,50~100 μg/1×109细菌,10~20μg/1×108酵母菌);时间短(20~45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.
作者:饶国洲;李昂;景娟;姚天华;石建锋 刊期: 2005年第06期
新型隐球菌墨汁染色检测法,一直以来以其操作简便、成本低而延用,尤其在疑为中枢神经系统隐球菌感染的脑脊液标本检测时.但在实际应用中,墨汁染色法受杂质及细胞成分干扰大,检出率低,特别在中枢感染的初期及恢复期,隐球菌数量较少,易漏检.现介绍一种简便快速的特殊染色法,提高隐球菌的检出率,供同行参考.
作者:杜本丽 刊期: 2005年第06期
目的探讨检测标本中血红蛋白(Hb)浓度对PCR扩增管中Taq酶活性的影响及消除影响的方法;探讨胰酶消化痰液的应用价值;比较淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、十二烷基硫酸钠(SDS)溶血液处理全血标本对检测结果敏感性的影响;观察SDS在结核分枝杆菌DNA(TB DNA)提取液中存在的价值及对Taq酶的影响.方法将经梯度稀释的Hb标准品与结核分枝杆菌(TB)定值质控品混匀制备成待检标本进行PCR检测;将定值Hb标准品与TB质控品混匀制备成待检标本,观察提取时100℃煮沸时间对Hb抑制Taq酶能力的影响;将结核患者的痰液分成两管,分别用4 g/dl NaOH消化、1 g/dl胰酶消化、1 g/dl胰酶消化+4 g/dl NaOH处理,比较PCR检测结果的敏感性;将结核患者的外周抗凝血分别用淋巴细胞分离液、红细胞裂解液、SDS溶血剂处理,比较PCR检测结果的敏感性;用10 g/LSDS、1%(v/v)Triton、1 g/LSDS的1%(v/v)Triton、0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton提取液对相同的TB质控品进行TB DNA提取,观察PCR检测结果敏感性;56份痰液、34份全血按痰液、全血标本的方法处理,进行PCR扩增,比较检测结果的阳性率.结果当Hb≥10-5g/L时,Hb对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强;提取时100℃煮沸40 min与煮沸10 min的对照管结果完全一致;痰液标本处理方法的敏感性顺序为:胰酶消化+NaOH处理>胰酶消化>NaOH消化;全血标本处理方法的敏感性顺序为:红细胞裂解液法=淋巴细胞分离法>SDS溶血法;提取方法PCR检测结果敏感性顺序为:0.5 g/L SDS的1%(v/v)Triton>1%(v/v)Triton>1 g/L SDS的1%(v/v)Triton>10 g/L SDS,SDS对Taq酶的抑制作用随其浓度的增加而增强.56份痰标本按上述方法处理的阳性率分别为57.1%(32/56),82.1%(46/56),91.0%(51/56),通过配对资料卡方检验,胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理与NaOH消化法之间具有显著性差异(P<0.005),胰酶消化和胰酶消化+NaOH处理之间差异无显著性(0.1<P<0.25);34份全血标本按上述方法处理的阳性率分别为79.4%(27/34),79.4%(27/34),47.0%(16/34),通过配对资料卡方检验,红细胞裂解液法和淋巴细胞分离法与SDS溶血法之间具有显著性差异(0.005<P<0.01).结论检测TB DNA标本的预处理有必要规范化.
作者:周步全;朱建峰;王迎春;王义凤;董川 刊期: 2005年第06期
目的建立适合临床常规使用的自动化凝胶电泳系统.方法用自制点样条、透明的胶片及其自己设计的电泳缓冲液,制成自动化凝胶电泳试剂盒,同时,应用丙酮沉淀法和考马斯亮兰G250染色等技术,使此试剂盒用于脑脊液蛋白电泳,并分析常见神经系统疾病的脑脊液蛋白.结果丽春红S染色灵敏度为2.25 g/L,氨基黑10B的灵敏度为0.28 g/L,考马斯亮兰G250的灵敏度为0.14g/L.应用丙酮沉淀法和考马斯亮兰G250染色等技术,电泳测定脑脊液蛋白,其参考值范围为前清蛋白2.29%~8.77%,清蛋白39.90%~63.66%,a10.93%~6.33%,a22.20%~12.48%,β 18.23%~28.61%,γ 4.75%~15.72%;各区带批内变异系数(CV)为前清蛋白13.7%,清蛋白带4.34%,a1带7.76%,α2带6.88%,β带3.70%和γ带6.51%;平均批间变异系数(CV)为前清蛋白18.47%,清蛋白带5.54%,α1带13.31%,a2带14.14%,β带10.49%和γ带14.01%.结论自制凝胶电泳试剂盒将为脑-神经系统疾患的诊断和鉴别诊断提供一种有用的辅助手段.
作者:李勇;胡望平;朱忠勇 刊期: 2005年第06期
随着ELISA技术在基层检验领域的普及应用,洗板问题带来的误差日益引起检验工作者的重视,为解决这一问题,绝大多数单位配备了洗板机.但在实际应用中,经调查发现,90%的检测单位的洗板机仅用于整批检测的洗板,而非整批(不足8或12孔)的检测则采用手工洗板,致使洗板机不能得到良好应用,同时,手工洗板也给检验结果带来很大误差.笔者采用试验废弃的反应条,经过处理后,作为配平条使用的方法,经过长期实验室应用,效果尚好,特介绍如下.
作者:尹保杰;王晓丽;魏喜典;邵定国;魏聪白 刊期: 2005年第06期