学术投稿

应用PCR-SSCP方法检测非小细胞肺癌患者血浆p53基因突变

于正洪;林勍;林勇;刘畅

关键词:PCR-SSCP, 非小细胞肺癌(NSCLC), 循环核酸, p53基因突变
摘要:目的探讨应用聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性分析(SSCP)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆循环核酸p53基因突变检测的可行性,研究NSCLC患者血浆p53基因突变对NSCLC发生、发展和预后估计的意义.方法应用PCR扩增p53基因外显子5~8,并用SSCP分析产物突变情况,再与各生物参数进行相关研究.结果 10例健康人血浆循环核酸p53基因突变检测结果均为阴性,60例NSCLC患者血浆中p53基因5~8外显子突变测定的结果显示有28例出现突变,占47%(28/60).p53基因突变率与术后肿瘤残留、对治疗的反应显著相关(P<0.05),与临床分期、年龄、性别、病理分型无关(P>0.05).结论血浆循环核酸p53基因突变对NSCLC的早期诊断、病情监测、预后评估都具有指导意义.PCR-SSCP分析简便、可靠,可作为检测大量标本的突变的可行性方法.
现代检验医学杂志相关文献
  • Dimension Rx1生化分析仪常见操作报警的原因及处理

    美国DADE公司的Dimension Rx1全自动生化分析仪,应用了现代机械和电子信息新的技术,自动化程度高、操作简易、具有独特的屏幕界面和完善的信息交流系统,可用标准品、因数、定标曲线进行测量,能作质控数据统计,全自动绘画质控图,无二次污染,系统在运行中不断进行检测和控制,若有不正常情况会发出信号,提示操作者正确按键和使用.我院于1999年引进了该仪器,经五年多的使用,在室内室间质控中都取得了好成绩.现将常见的操作报警的原因及处理方法分析总结,望有助于同行使用该仪器.

    作者:林霞 刊期: 2006年第02期

  • 日立7060全自动生化分析仪一般故障的分析及处理

    随着医学检验的快速发展,生化分析仪在医院检验科的生化项目分析中是不可缺少的必备仪器,而日立系统全自动生化分析仪以其性能稳定、精密度高、功能齐全、使用方便深受用户喜爱,在我国拥有大量用户.要保持仪器有良好的性能,正确使用和维护仪器十分重要,曾有作者对其作过详细介绍[1,2].但对于仪器维护人员如何尽快排除仪器出现的故障,减少对工作的影响也显得非常重要.为此,本人对日立7060生化分析仪的故障及处理方法介绍给同仁,以便对他们的工作有所帮助.

    作者:饶万楷 刊期: 2006年第02期

  • 库尔特ACT.diffTM血细胞分析仪常见故障的查处

    库尔特ACT.diffTM是美国贝克曼公司生产的可用于检测18项参数的血细胞分析仪,其检测准确性高、重复性好.我院使用该仪器已有两年余,随着就诊量的增加以及使用频繁,仪器也出现了一些故障.本文对常见故障的处理及有关经验总结分析报道如下.

    作者:金晓娟;李早荣 刊期: 2006年第02期

  • 两种铕标试剂测定甲胎蛋白结果的比较分析

    时间分辨荧光免疫分析法(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)以其有较高的检测灵灵敏度已成为有发展前途的非同位素标记免疫技术之一[1].我室检测甲胎蛋白使用此方法,因使用进口试剂,价格较贵,欲选择国产试剂代替之.为此运用两种铕标试剂对同一批样本进行甲胎蛋白检测,结果报告如下:

    作者:方有兵;沈际佳;管世鹤;陈月英 刊期: 2006年第02期

  • 临床生物化学室内质控探讨

    室内质控是实验室质量保证体系中的重要组成部分,其目的是为了保证每个患者样本测定结果的可靠性,测定结果的可靠性包括两方面的含义:一是精密度高,即测定结果的重复性好,实验室每天测定的结果变化很小,主要是消除或减少随机误差造成的影响,这主要靠健全的室内质控体系来保障;另一方面是准确度,即测定结果正确,接近真值,主要是消除或减少系统误差的影响,这可以通过选用好的测定方法,进行正确校准及参加室间质控活动来保证.以上两点并不是孤立的,精密是准确的基础,没有高精密度的测定结果,就无从谈准确度,因此实验室要想获得可靠的结果,建立一套健全的室内质控系统是一切质量工作的基础.

    作者:王象勇;纪冰 刊期: 2006年第02期

  • Beckman CX9全自动生化分析仪CX4故障排除体会

    Beckman全自动生化分析仪以其简便的操作,测定快速、准确和重复性好等特点,广泛用于临床,我院自1998年配备其Beckman CX9以来,至今已有7个年头,在使用过程中,仪器也曾经出现一些故障,在处理过程中,发现很好的利用仪器自带的诊断系统可以分析和解决一些问题,现将点滴体会总结如下,仅供同行参考.

    作者:石坚;兰时安 刊期: 2006年第02期

  • 难治性贫血与巨幼细胞性贫血骨髓细胞形态学比较分析

    目的比较巨幼细胞性贫血和难治性贫血的细胞形态学特征.方法对41例骨髓增生异常综合征-难治性贫血(MDS-RA)与52例巨幼细胞性贫血(MA)进行形态学比较分析,结果 MA红系巨变100%,其它病态造血或有或无.MDS-RA与MA病态造血有相似之处,MA的形态学诊断主要以红系巨变为主:MDS-RA要对病态造血情况进行综合分析,以防误诊.

    作者:陈石;施兵 刊期: 2006年第02期

  • 非血液检测因素引起的血液报废原因分析

    血液作为一种安全有效的治疗手段用于临床,每年救治数以万计人的生命.由于其来源特殊,因而资源宝贵,但这些宝贵资源,每年除了通过正常血液检测,剔除不合格血液进行报废外,还存在一些非血液检测因素引起的血液报废,从而造成血液、试剂和人力的浪费.为节约血源,做到科学合理用血,减少血液报废,笔者对2001~2004年西安地区非血液检测因素引起的血液报废原因进行了统计分析,现将情况报告如下:

    作者:曹晓莉;宋春胜;肖进 刊期: 2006年第02期

  • 1400例糖尿病患者血清胰岛相关抗体检测的临床意义

    目的观察胰岛细胞抗体(ICA)、胰岛素自身抗体(IAA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)在1型、2型糖尿病(DM)和正常人群中阳性检出率,并探讨其临床意义.方法用ELISA法检测血清ICA、IAA、GAD-Ab.结果 1、2型DM患者和正常人群血清中,ICA阳性率分别为39.0%,12.6%,3.8%;IAA阳性率分别为31.9%,16.3%,2.9%;GAD-Ab阳性率分别为55.5%,16.8%,0.4%.结论结果提示ICA、IAA、GAD-Ab与1型DM的发病高度相关;这些抗体的出现预示β细胞功能受损,有助于从2型DM中及早发现成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA),以利临床早期应用胰岛素治疗,从而延缓胰岛β细胞功能的衰竭.

    作者:胡兰萍;顾萍;赵明 刊期: 2006年第02期

  • 血清锌含量与环氧化酶-2的表达和胃癌发病有关

    目的研究锌与胃癌的发病关系.方法用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测锌的含量,同时用免疫组化链霉卵-生物素-辣根过氧化酶复合物法(SP法)观察Cox-2的表达.结果发现胃癌病人血清中锌与健康对照组相比有所不同,胃癌组Zn2+、Mn2+低于健康对照组(P<0.05),Cox-2阳性组锌的含量明显低于Cox-2阴性组(P<0.05).结论血清锌降低对胃癌发病是个关键的因素.

    作者:刘通海;桑圣刚;李永勋;郑长江 刊期: 2006年第02期

  • 一种相对简易的从人胃组织样品中扩增L-Myc基因片断的方法

    运用多聚酶链反应(PCR)从人各种细胞或组织中扩增特异的基因片段,然后进行多态性或突变序列分析,已成多种生物医学学科(如遗传学、分子流行病学及肿瘤学等)常用的研究手段.越来越多的研究表明原癌基因的多态性或体细胞突变与肿瘤的发生、转移或预后密切相关[2,4].

    作者:杨春平 刊期: 2006年第02期

  • 应用PCR-SSCP方法检测非小细胞肺癌患者血浆p53基因突变

    目的探讨应用聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性分析(SSCP)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆循环核酸p53基因突变检测的可行性,研究NSCLC患者血浆p53基因突变对NSCLC发生、发展和预后估计的意义.方法应用PCR扩增p53基因外显子5~8,并用SSCP分析产物突变情况,再与各生物参数进行相关研究.结果 10例健康人血浆循环核酸p53基因突变检测结果均为阴性,60例NSCLC患者血浆中p53基因5~8外显子突变测定的结果显示有28例出现突变,占47%(28/60).p53基因突变率与术后肿瘤残留、对治疗的反应显著相关(P<0.05),与临床分期、年龄、性别、病理分型无关(P>0.05).结论血浆循环核酸p53基因突变对NSCLC的早期诊断、病情监测、预后评估都具有指导意义.PCR-SSCP分析简便、可靠,可作为检测大量标本的突变的可行性方法.

    作者:于正洪;林勍;林勇;刘畅 刊期: 2006年第02期

  • 酶标仪程序设置及应用

    ELISA(酶联免疫吸附实验)以其灵敏度高、特异性强、标本用量少、检测费用低等优点,已成为基层实验室的常规检测方法.酶标比色仪作为ELISA的主要仪器,其设置、使用、维护得当与否耨对实验结果有很大影响.在对基层实验室的检查中,笔者发现许多实验室技术人员由于对酶标仪程序设置不熟悉,不能按需要自行设置比色程序,往往只能使用购机时由专业人员设置的一个程序,造成一个检测项目的多个厂家的试剂盒,甚至多个检测项目共用一个程序比色,直接影响到检测结果的准确性.

    作者:王俊 刊期: 2006年第02期

  • 临床实验室分析前质量控制的探讨

    近年来,各种现代化的先进仪器在医院检验科得到广泛应用,检验人员的素质普遍提高,检验科的科学化管理体系正在建立和完善.管理体系建立的目的是规范工作流程,保证检验质量.合理的工作流程是全面质量控制的前提,将质量控制的具体措施落实到工作的每个环节是全面质量控制的根本保证.目前对实验过程中的质量控制都比较重视,但对实验室分析前的质量控制由于涉及环节多,还有许多影响因素未被重视.国际标准化组织颁布的ISO/IEC15189文件<医学实验室质量和能力专用要求>有详细的规定和要求,为了探索符合我院工作实际的质量管理流程和质量保证措施,我们对实验室分析前质量控制的规范化管理进行探讨.

    作者:郭瑞林 刊期: 2006年第02期

  • Beckman Coulter ACCESS全自动微粒子化学分析仪的故障处理及应用体会

    我科2004年4月购进美国Beckman Coulter ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析仪,该设备运用先进的方法学,高质量的且具有专利的包装试剂,全英文操作界面,操作流程合理,检测速度快,结果具有高灵敏、高准确性、高特异性、重复性好等特点,运行一年来得到临床科室的认可.现将使用过程中常见的故障及处理、一些应用经验总结如下,以供同行参考.

    作者:丁小红 刊期: 2006年第02期

  • 使用UF-100仪器的质量控制

    尿液沉渣分析从传统的手工镜检法发展到今天,无论是检测手段还是检测结果的精确度灵敏度等都有很大的发展变化.尿沉渣分析仪目前大体上有两类:一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析得出相应的技术资料与实验结果;另一类就是目前较为先进的流式细胞术分析仪.我科近年购置的UF-100就是采用了流式细胞术的尿沉渣分析仪,它主要采用了流式细胞和电阻抗的原理,通过捕获和检测到光电信号从而区分得出尿液中的有形成分,它具有操作流程简便,工作效率高,精确度高,互染率低等特点,同时还可对尿中的红细胞的形态进行鉴别.因此,目前来说UF-100是比较先进的一种尿沉渣分析仪.笔者经过长时间的工作实践知道,惟有作好UF-100的质量控制,方能发挥出仪器的先进性能和作用,从而为临床提供一份及时、准确、真实的诊疗信息.现从以下几个方面来探讨一下如何作好UF-100的质量控制.

    作者:余大海;薛冰蓉;徐鹏;周玉莲 刊期: 2006年第02期

  • UF-100全自动尿沉渣分析仪常见故障及对策

    日产Sysmex UF-100全自动尿沉渣分析仪采用流式细胞技术、电阻法、电导体、激光和荧光染色方法,检测尿液中的各种有形成分,使尿检定量化、标准化,为临床的诊断与治疗提供了有力的佐证.该仪器具有快速、稳定、准确、重复性好等特点.笔者通过二年多实际操作,对该仪器在日常工作中常见的故障、原因及如何处理积累了一些经验,以期与同道共同探讨.

    作者:陈治水;袁蓉 刊期: 2006年第02期

  • 人巨细胞病毒多肽抗原的免疫原性分析

    目的分析人巨细胞病毒多肽抗原的免疫原性强弱,寻求与早期诊断相关的抗原成分.方法应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术对比分析细胞抗原与病毒抗原的差异,确定病毒多肽抗原的存在,利用不同时期免疫动物的多克隆抗体分析病毒多肽抗原的免疫原性.结果 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和多克隆抗体免疫印迹结果表明分子量为65kD和72kD的人巨细胞病毒多肽抗原免疫原性较强,分子量为51kD和58kD的病毒多肽抗原免疫原性较弱,分子量为150kD的抗原免疫原性弱.结论 65kD和72kD的人巨细胞病毒多肽抗原可以应用于病毒感染的临床确诊.

    作者:张银辉;陆学东;杨来智;黄烈;林广诚 刊期: 2006年第02期

  • 眼部白色念珠菌感染的快速诊断方法

    目的介绍一种白色念珠菌的快速检测方法.方法以白色念珠菌标准株为阳性对照,普通酵母菌标准株为阴性对照,采用荧光标记的抗白色念珠菌的单克隆抗体直接免疫荧光法进行测定角膜溃疡病人标本涂片.结果阳性对照、及白色念珠菌感染病人标本中有边缘着绿色,中间为暗红色的阳性菌.普通酵母菌及非白色念珠菌感染对照组酵母细胞染红色.结论该方法快速、简便、特异性强,结果判断直观,并可广泛的推广应用.

    作者:刘先宁;朱秀平 刊期: 2006年第02期

  • 7600-020全自动生化分析仪杯空白报警的故障分析与排除

    日立7600-020全自动生化分析仪由日本日立株式会社生产,它具有自动化程度高、灵敏度高、稳定性好、操作简便等优点,是大中型医院较为理想的一种常规生化分析仪器.笔者在长期的使用和维护过程中,对杯空白报警的故障分析及排除有几点体会,现报道如下,仅供同道参考.

    作者:信朝霞 刊期: 2006年第02期

现代检验医学杂志

现代检验医学杂志

主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院