一种相对简易的从人胃组织样品中扩增L-Myc基因片断的方法

杨春平

关键词：简易, 组织样品, 扩增, 基因片断, 基因的多态性, 分子流行病学, 多聚酶链反应, 体细胞突变, 肿瘤学, 医学学科, 序列分析, 基因片段, 遗传学, 转移, 运用, 生物

摘要：运用多聚酶链反应(PCR)从人各种细胞或组织中扩增特异的基因片段,然后进行多态性或突变序列分析,已成多种生物医学学科(如遗传学、分子流行病学及肿瘤学等)常用的研究手段.越来越多的研究表明原癌基因的多态性或体细胞突变与肿瘤的发生、转移或预后密切相关[2,4].

现代检验医学杂志相关文献

临床基础检验学实验教学的实践

临床基础检验学实验教学通过优化实验教学内容,改革实验教学模式,加强实验报告的书写和严格实验考核制度等几方面的实践,培养了学生动脑动手能力,理论联系实际的能力和初步的科研思维能力.

作者：孙宝清；李琴；许子华刊期： 2006年第02期
EB病毒EA/IgA抗体定量检测在鼻咽癌血清学诊断中的意义

目的采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定EB病毒抗早期抗原的IgA水平(EA/IgA)在鼻咽癌血清学诊断中的临床价值.方法用ELISA法定量检测血清EB病毒EA/IgA水平,其中鼻咽癌134例,头颈部其它恶性肿瘤56例,鼻咽部非癌疾病47例,健康对照组50例.结果被检血清中鼻咽癌组EA/IgA检测结果阳性率50%,平均值(-x)=53.27u/ml,特异性100%,健康对照组检测结果平均值(-x)=3.50u/ml.结论 EB病毒EA/IgA抗体定量检测对鼻咽癌具有高度的特异性(100%),是一项较好的临床诊断辅助指标.

作者：钟亮星；段辉；邓粤敏刊期： 2006年第02期
两种冠状动脉搭桥术对肾功能的影响

目的研究体外循环与微创冠状动脉搭桥术对肾功能的影响.方法适合冠状动脉搭桥术患者42例,随机分成C(体外循环,CCABG)组和O(微创术,OPCABG)组各21例.分别留取术前24 h(T0)、术中(T1)、术后24 h(T2)、术后48 h(T3)四个时段的尿液及血液标本,记录尿量,通过血、尿标本中的肌酐测定结果计算内生肌酐清除率(Ccr);同时检测尿微量白蛋白(ALB)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)浓度,计算尿蛋白或酶排量(蛋白或酶浓度与Cr之比).结果①Ccr:两组病人T1明显高于T0,T2、T3快速回降低于T0(P＜0.01).组间比较,T1Ccr水平C组明显高于O组,T2、T3Ccr水平C组明显低于O组(P＜0.05);②尿ALB/Cr:两组病人T1ALB/Cr值明显高于T0水平,T2、T3有不同程度的回落,但仍高于T0(P＜0.01).T1ALB/Cr,C组明显高于O组(P＜0.01);③尿RBP/Cr、NAG/Cr:T0两组病人尿RBP/Cr、NAG/Cr水平均高于正常值,并在T1-T3各时点持续上升高于T0(P＜0.01).两组T1、T2、T3各相应时点值比较,C组明显高于O组(P＜0.01,P＜0.05).结论微创术与非体外循环对肾小球和肾小管功能均有可逆的亚临床影响,对肾小管影响大于肾小球.微创术对肾功能的影响较小于体外循环的影响.

作者：许翔；李莉刊期： 2006年第02期
库尔特ACT.diffTM血细胞分析仪常见故障的查处

库尔特ACT.diffTM是美国贝克曼公司生产的可用于检测18项参数的血细胞分析仪,其检测准确性高、重复性好.我院使用该仪器已有两年余,随着就诊量的增加以及使用频繁,仪器也出现了一些故障.本文对常见故障的处理及有关经验总结分析报道如下.

作者：金晓娟；李早荣刊期： 2006年第02期
使用UF-100仪器的质量控制

尿液沉渣分析从传统的手工镜检法发展到今天,无论是检测手段还是检测结果的精确度灵敏度等都有很大的发展变化.尿沉渣分析仪目前大体上有两类:一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析得出相应的技术资料与实验结果;另一类就是目前较为先进的流式细胞术分析仪.我科近年购置的UF-100就是采用了流式细胞术的尿沉渣分析仪,它主要采用了流式细胞和电阻抗的原理,通过捕获和检测到光电信号从而区分得出尿液中的有形成分,它具有操作流程简便,工作效率高,精确度高,互染率低等特点,同时还可对尿中的红细胞的形态进行鉴别.因此,目前来说UF-100是比较先进的一种尿沉渣分析仪.笔者经过长时间的工作实践知道,惟有作好UF-100的质量控制,方能发挥出仪器的先进性能和作用,从而为临床提供一份及时、准确、真实的诊疗信息.现从以下几个方面来探讨一下如何作好UF-100的质量控制.

作者：余大海；薛冰蓉；徐鹏；周玉莲刊期： 2006年第02期
日立7060全自动生化分析仪一般故障的分析及处理

随着医学检验的快速发展,生化分析仪在医院检验科的生化项目分析中是不可缺少的必备仪器,而日立系统全自动生化分析仪以其性能稳定、精密度高、功能齐全、使用方便深受用户喜爱,在我国拥有大量用户.要保持仪器有良好的性能,正确使用和维护仪器十分重要,曾有作者对其作过详细介绍[1,2].但对于仪器维护人员如何尽快排除仪器出现的故障,减少对工作的影响也显得非常重要.为此,本人对日立7060生化分析仪的故障及处理方法介绍给同仁,以便对他们的工作有所帮助.

作者：饶万楷刊期： 2006年第02期
相关分子标志物检测在pre-DIC诊断中的意义

弥散性血管内凝血(DIC)是一种获得性、出血性综合征,是许多病因引起的复杂病理过程的中间环节.早期诊断DIC才能及时控制病情的进展,因此,有学者提出DIC前状态(pre-DIC)的概念[1].目前,对pre-DIC的诊断多集中在分子标记物检测方面.

作者：王珂；李雪梅刊期： 2006年第02期
Beckman Coulter ACCESS全自动微粒子化学分析仪的故障处理及应用体会

我科2004年4月购进美国Beckman Coulter ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析仪,该设备运用先进的方法学,高质量的且具有专利的包装试剂,全英文操作界面,操作流程合理,检测速度快,结果具有高灵敏、高准确性、高特异性、重复性好等特点,运行一年来得到临床科室的认可.现将使用过程中常见的故障及处理、一些应用经验总结如下,以供同行参考.

作者：丁小红刊期： 2006年第02期
一种稳定的氧化剂法测定血清胆红素

1883年Ehrlich发明偶氮反应,1913年VanDen Bergh把重氮试剂用于测定血清胆红素,生成偶氮胆红素,建立了重氮试剂法[1].近一个世纪以来,国内外学者先后摸索并成功地推出了许多胆红素的测定方法,主要有重氮法(M-E法、改良J-G法)和单一试剂法[2].重氮法受溶血、脂浊的干扰,使检测结果出现偏差.国外文献以应用胆红素氧化酶法为多[3],近年来应用干片法、分光光度法及血氧血气仪法检测[4～6].我们研究应用化学氧化剂高碘酸法测定血清胆红素,报道如下:

作者：高晓燕；胡望平；胡盈莹；郑为强；冯福英；周长邵刊期： 2006年第02期
Dimension Rx1生化分析仪常见操作报警的原因及处理

美国DADE公司的Dimension Rx1全自动生化分析仪,应用了现代机械和电子信息新的技术,自动化程度高、操作简易、具有独特的屏幕界面和完善的信息交流系统,可用标准品、因数、定标曲线进行测量,能作质控数据统计,全自动绘画质控图,无二次污染,系统在运行中不断进行检测和控制,若有不正常情况会发出信号,提示操作者正确按键和使用.我院于1999年引进了该仪器,经五年多的使用,在室内室间质控中都取得了好成绩.现将常见的操作报警的原因及处理方法分析总结,望有助于同行使用该仪器.

作者：林霞刊期： 2006年第02期
介绍一种检查脑脊液中新型隐球菌的方法

检查脑脊液中的新型隐球菌传统法一直使用印度墨汁染色,但如遇到脑脊液有红细胞,印度墨汁染色视野背景就显得不佳,并且印度墨汁不易购到.现介绍一种快速简便容易判断的方法.

作者：王永亨刊期： 2006年第02期
单管多重PCR快速检测STD病原菌

目的建立一种同时检测解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)、淋病奈瑟菌(NG)三种病原体DNA的方法并用于临床标本检测.方法建立单管多重PCR体系,其结果与常规PCR法比较.结果可以一次性检测出解脲支原体、沙眼衣原体和淋病奈瑟菌.结论该法特异性好,单管多重PCR体系检测3种STD病原菌DNA的灵敏度低为0.43 fg,与单独的PCR检测的灵敏度相同,将它做成体外基因诊断试剂盒能快速特异性指导单种和多重感染.

作者：唐文志；周玉球；张永良；黄小兰；谭星蓉；黄小燕；李宇雄刊期： 2006年第02期
三种方法四种试剂自动化检测HBV血清标志物结果的对比研究

目的评价三种方法四种试剂自动化检测HBV血清标志物结果的差异.方法选择AxSYM、Alisei、SYM-Bio自动免疫分析仪分别采用三种方法四种试剂对636例筛选的血清标本进行HBsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBe、Anti-HBc等五项血清标志物检测,并以AxSYM结果为参照,对项目结果不符及项目结果不一致进行分析.结果对636例筛选的血清标本,Alisei KHB、Alisei Murex、SYM-Bio与AxSYM比较,其总的项目结果不符率和总的项目结果不一致率分别为12.4%和3.5%,11.1%和2.6%,7.5%和8.6%,各项目结果不符率以Alisei KHB、Alisei Murex的Anti-HBe和SYM-Bio的HBeAg/Anti-HBc高,分别为5.0%,5.8%和2.2%;各项目结果不一致率以Alisei KHB、Alisei Murex的Anti-HBs和SYM-Bio的Anti-HBe高,分别为2.3%,1.6%和3.2%.结论仪器、方法、试剂不同可导致血清标志物结果的差异,各项目的报告单位、判断标准有待进一步规范,应建立完善的检测血清标志物量值溯源体系.

作者：成军；孙长贵；谢珏；唐兴洲；王旭明；王国政；孙关忠刊期： 2006年第02期
壳聚糖固定谷氨酸脱氢酶的研究

壳聚糖是自然界唯一的碱性多糖,是从虾蟹壳蛋白中提取的一种氨基多糖(2氨基-1,4-β葡聚糖),呈网状结构,由于其来源丰富,化学性质稳定,耐热和具有良好的机械性能,是固定化酶的良好载体,在医药及工业上具有广阔的应用前景,以戊二醛固定谷氨酸脱氢酶探讨其应用前景.

作者：苏长兰刊期： 2006年第02期
胰岛素样生长因子-1在胎儿生长中的重要作用

目的检测孕产妇、新生儿胰岛素样生长因子-1(Insulin-1ike growth factor-Ⅰ,IGF-1),探讨小于胎龄儿及宫内发育迟缓儿的发病机制.方法采用放射免疫法检测血清中IGF-1.比较小于胎龄儿与足月胎龄儿,早产孕妇和正常足月孕妇IGF-1含量,了解不同体重、不同胎龄、不同胎盘成熟胎儿及其孕妇母体的IGF-1水平差异.结果 IGF-1随胎龄、胎重的增加而增高.表明IGF-1在胎儿生长发育中的重要调节作用.早期改善母体营养,达到改善胎儿宫内营养状况.结论在孕早、中期及时检测IGF-1含量,预防胎儿宫内发育迟缓,产前提高胎儿整体健康水平.

作者：张一华；张志萍刊期： 2006年第02期
Beckman CX9全自动生化分析仪CX4故障排除体会

Beckman全自动生化分析仪以其简便的操作,测定快速、准确和重复性好等特点,广泛用于临床,我院自1998年配备其Beckman CX9以来,至今已有7个年头,在使用过程中,仪器也曾经出现一些故障,在处理过程中,发现很好的利用仪器自带的诊断系统可以分析和解决一些问题,现将点滴体会总结如下,仅供同行参考.

作者：石坚；兰时安刊期： 2006年第02期
磷试剂对酶法测定尿酸有携带污染

生化分析仪在长期使用过程中其冲洗能力下降,比色皿老化后吸附功力增加,检测项目次序安排不当等因素的影响,均可造成试剂间的交叉污染而致测定结果偏高或偏低.我科新购一批磷试剂,在仪器上把磷的测定设置在紧靠尿酸测定的前面,结果发现尿酸测定结果明显偏低.当在仪器上改变测定顺序后(中间间隔3个其它项目)结果恢复正常.经排查是磷试剂的交叉污染所致,现报道如下:

作者：罗书久；唐中刊期： 2006年第02期
检验科预防医院感染对策

随着科学技术的不断发展,检验医学从可测项目范围到技术先进程度得到了空前的发展,临床实验室(检验科)在临床诊疗过程中的作用也越来越重要[1].但同时由于检验科每个实验室每天都要接触大量的临床标本,包括血液、尿液、粪便、痰液、胸腹水、穿刺液、胆汁等,其工作人员不仅需要与患者手拉手地采集标本,还要通过多次工序对上述临床标本进行处理,这大大增加了工作人员感染的可能性[2].姚齐龙等通过调查研究发现检验科各实验室作为医学实验室是医院感染高危科室之一[4].因此加强管理,在检验科开展预防医院感染的工作已是刻不容缓.

作者：赵智凝；周强；孙艳丹刊期： 2006年第02期
采用Excel绘制多水平质控的控制图

随着自动化技术的不断完善,检验试剂商品化且质量稳步提升,检验结果的室内、室间质量控制已经普遍重视,特别是多水平质控物和Westgard多规则控制技术的广泛使用.对大型生化分析仪、免疫分析仪、化学发光仪以及完善的实验室管理系统(LIS)都具有自动绘制多水平质控的控制图功能并根据预设多规则控制程序自动报警.但是,许多检测项目,因分析仪功能、分析方法、实验室条件等限制因素无法自动绘制质控图,只能靠手工绘图.手工绘图时,其步骤繁琐,不能直观判断且不易保存.为克服手工绘图的缺点,现采用大家熟悉的EXCEL绘图,简介如下:

作者：罗士来；庄晓青；魏江梅刊期： 2006年第02期
荧光原位杂交技术在R-显带后玻片上的应用

目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)在R-显带后玻片上的应用.方法对17例初诊为M3患者,应用PML/RARa探针在R显带标本玻片上直接进行荧光原位杂交检测.结果 6例显带质量差的标本中5例确认为PML/RARa阳性,1例阴性;2例疑似复杂易位的标本均确证为累及第三条染色体的t(15;17)复杂易位,并精确定位;9例核型检出t(15;17)的标本均证实分子水平上存在PML/RARa融合基因.结论 R显带联合FISH方法在复杂变异易位的鉴定方面与传统的核型分析和直接FISH检测相比具有明显的优势.对于未知异常染色体的检出将具有更广泛的应用前景.

作者：薄丽津；李承文；秦爽；刘世和刊期： 2006年第02期