学术投稿

人血红蛋白α,β基因在大肠埃希菌中的表达

李晓霞;彭文红;黎晓晖

关键词:血红蛋白, 大肠埃希菌, 基因表达
摘要:从人外周血红细胞中提取出总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到人血红蛋白的α和β基因片段,与pT7BLue质粒连接后,采用Sanger双脱氧终止法测序的结果与文献报道一致.将α,β基因克隆进pBV220原核表达载体中,宿主菌经热诱导,在1.6×105处有特异的蛋白带表达.表达量达总菌体蛋白的20-30%,并经Western-BLot验证.
现代检验医学杂志相关文献
  • DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析工作站特殊故障两例分析

    DiaSys R/S2003尿沉渣定量分析工作站是由美国临床检验标准委员会(NCCLS)推荐,美国食品药品管理局(FDA)认证的,集标准化、定量化、自动化于一体的尿沉渣定量分析仪器.该仪器自引进我科以来,在临床检测中发挥了重要作用,但也曾出现过两例较为特殊的故障,现介绍如下:

    作者:乔卿华;张卉 刊期: 2007年第05期

  • 利用实验室信息系统进行检验结果回报时间(TAT)分析

    目的 利用实验室信息系统(LIS)代替手工方法进行临床实验室标本检验结果回报时间(TAT)分析.方法 与上海杏和软件公司合作,利用信息系统中现有的申请时间、采样时间、接收时间、审核时间,设计相关统计程序,获得各样本TAT及其它相关数据.结果 通过该统计程序得到住院、门诊或急诊标本TAT满足规定目标值百分率,以及未满足目标值的标本清单,方便分析TAT延长的原因,为实验室持续性质量改进方案提供证据,从而进一步优化工作流程,提高实验室工作效率.

    作者:彭志英;宋昊岚;高宝秀;王林豪 刊期: 2007年第05期

  • 强直性脊柱炎患者血清基质金属蛋白酶-3,TNF-α,IL-15,CRP水平及意义的研究

    目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3),TNF-α,1L-15,CRP水平及意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定45例AS患者和31例健康对照组的血清MMP-3、白细胞介素15(IL-15)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及C-反应蛋白(CRP)水平,比较各个指标在AS组与对照组之间的差异,并分析AS组患者各指标间的相关性.结果 血清MMP-3,TNF-α,CRP水平在AS组患者显著高于健康对照组(P<0.001),IL-15水平两组比较也有显著性差异(P<0.05);在AS组仅有MMP-3与IL-15之间存在相关性.结论 MMP-3和IL-15在AS发病机制中起着重要作用,可以作为评估AS病情的二个有价值的血清学指标.

    作者:林宁;林新;邓之奎 刊期: 2007年第05期

  • 血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在评价肾小球滤过功能中的价值

    目的 探讨血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C,Cys C)在评价肾小球滤过功能中的诊断价值.方法 用免疫散射比浊法测定血清Cys C,酶法测定血清肌酐(Scr)、尿肌酐,计算内生肌酐清除率(Ccr),绘制ROC曲线,用ROC曲线评价Cys C作为肾小球滤过功能指标的价值.结果 当Ccr在60~80ml/min时,Scr与正常对照无差异(P>0.05),而Cys C与正常对照差异显著(P<0.001),而当Ccr<60 ml/min时,Scr,Cys C与正常对照及Ccr>80 ml/min组相比,差异显著(P<0.001),同时Cys C的ROC曲线下面积(0.968)也大于Scr曲线下的面积(0.948).结论 Cys C是发现肾功能损害较早的指标,其敏感性高于Scr,是检测肾小球滤过功能新的内源性标志物.

    作者:苏艳丹;赵滢;左薇薇;卯健;詹淑芬 刊期: 2007年第05期

  • 除菌过滤系统完整性检测在生物制药行业生产中的应用

    生物制药行业生产过程中如何有效的保证除菌过滤系统的完整性,是生产人员所要面对的重要问题之一.该所在血液制剂、抗毒素等制品生产过程中使用的除菌过滤器、滤芯均为PALL公司生产的卫生级不锈钢滤器和除菌级滤芯.在使用前、后对过滤系统的安全性检测主要以完整性检测仪来完成.通过多年在血液制剂、抗毒素生产中对除菌过滤系统使用前、后进行完整检测908次、904次,结果表明合格率分别为99.56%,99.89%.虽然PALL公司在产品出厂前均做了完整性检测,但是由于在出厂后的运输、储存以及安装过程中有可能对除菌级滤芯造成损伤,所以在使用前、后必须对除菌过滤系统做完整性检测.这是FDA,CGMP的要求,也是保证生产质量的重要手段.

    作者:张金;蒋烈;徐骥;胡红英;张文孝;曹飞 刊期: 2007年第05期

  • 血型不合夫妇产前血型抗体筛查回顾性分析

    目的 检测血型不合夫妇的产前血型抗体水平,探讨O型血孕妇血型免疫抗体与新生儿溶血病(hemolytic diseaseof newbom,HDN)发病的相关性.方法 选择夫妇ABO血型不合者485例,采用血型血清学方法进行相关检测及归纳分析.结果 485例ABO血型不合调查中,孕晚期IgG抗A(B)效价≥64的HDN发病率为8.61%远高于效价≤32的发病率(1.56%).孕期抗体效价升高2个以上滴度的HDN发病率(40.29%)远高于抗体滴度无升高或下降者(3.56%).结论 夫妇血型不合应及时检测产前血型抗体,可预防HDN发生及减轻胎儿受害程度,相关结果对临床诊治具有指导作用.

    作者:吴润香;张银辉;毕燕玲;黄维加;朱新建;李振华 刊期: 2007年第05期

  • A2B亚型一例及其家系调查

    献血者李某,女,32 y,妊娠二次,生育一女,现年6 y.该献血者既往有流产史,无输血史和其它病史.于2006年6月26日在我站流动采血车上初次献血,血型初步检定为B型Rh(D)阳性,后在血液检验时发现ABO血型正反定型不符合,进一步做血型血清学检查及家系调查,确定为较少的A2B亚型,且该献血者血清中含有低效价的抗-A1,现报告中下:

    作者:洪汾;彭增齐;刁丽波 刊期: 2007年第05期

  • CD3AK细胞对恶性肿瘤患者免疫功能的影响

    目的 观察恶性肿瘤患者在化疗/放疗期间或间歇期辅以CD3AK细胞治疗前后免疫功能变化.方法 采用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)法测定NK细胞数量及T细胞亚群,MTT法检测细胞杀伤活性.结果 经CD3AK细胞辅助治疗后,患者NK细胞数量,CD3+,CD4+,CD4+/CD8+比值明显升高(P<0.01),外周血单个核细胞杀伤活性增强(P<0.05).结论 临床应用CD3AK细胞配合化疗/放疗治疗后,可提高患者免疫功能,且无明显副作用,是肿瘤患者一种较理想的辅助治疗方法.

    作者:韩秀蕊;杨娣娣;魏绪仓;龙延斌;王鸿;邢佩霓;李梅生 刊期: 2007年第05期

  • 2-(4羟基偶氮苯)苯甲酸测定血清清蛋白方法的研究

    目的 利用2-(4羟基偶氮苯)苯甲酸(HABA)为反应底物测定血清清蛋白.方法 采用终点法测定,并进行一系列方法学评价实验.结果 线性可至70 g/L,全自动分析批内CV=1.1%,批间CV=2.2%,平均回收率100.6%,参考值35.76~55.82 g/L,用BCG法(T)与HABA法(X)测定50份标本,进行比较,r=0.993,y=0.894X+4.30.结论 该法具有简便、快速,特异性强,标本用量少,干扰性小等优点.

    作者:李云;郭书侠 刊期: 2007年第05期

  • 东芝TBA-120FR全自动生化分析仪检测系统性能证实

    目的 东芝TBA-120FR全自动生化分析仪检测系统分析特性进行证实.方法 用上海复星长征公司的水平Ⅰ、水平Ⅱ控制血清对丙氨酸氨基转移酶(ALT)等11个项目的精密度、准确度线性范围进行验证.结果 ALT,AST,TP,ALB,AKP,GGT,Glu,Urea,Cr,CH,TG项目的准确度均在厂商规定的限值内,精密度高,线性检验呈直线相关.结论 东芝TBA-120FR全自动生化分析仪检测系统实验性能符合实验室的各项性能指标.

    作者:权宁刚;陈文娟;周琨 刊期: 2007年第05期

  • AEROSET全自动生化分析仪的异常结果及故障处理

    我科引进AEROSET全自动生化分析仪一年以来在工作中发现一些异常结果及故障,有针对性的了解仪器性能并对其进行处理.现将异常结果及故障分析如下,供同行参考.

    作者:张刘兵;彭爱平;李永臣 刊期: 2007年第05期

  • 118例免疫性不孕患者抗精子抗体的检测分析

    目的 探讨免疫性不孕患者抗精子抗体在不孕症患者中的发生情况,提高免疫性不孕的诊断和治疗.方法 用ELISA法对834名不孕患者中的118例进行了检测.结果 抗精子抗体阳性者占不孕症患者的9.71%.结论 抗精子抗体是导致免疫性不孕的重要因素.

    作者:谭红霞 刊期: 2007年第05期

  • 深圳地区正常新生儿尿NAG参考值范围调查

    目的 调查新生儿人群尿液样本NAG参考范围.方法 收集产科正常新生儿的尿液样本200份,用比色法测定尿液中NAG,Cr,计算NAG U/mmol·Cr值,用百分位数法计算参考范围.结果 200例新生儿尿样NAG/Cr值呈偏态分布,P95为11.9 U/mmol·Cr.结论 深圳地区新生儿尿液NAG的参考范围是:<11.9 U/mmol·Cr.

    作者:陈睿 刊期: 2007年第05期

  • MODULAR模块式一体化分析仪常见报警及排除

    我科于2004年4月份购进德国生产MODULAR模块式一体化(ISE电解质、P生化、E免疫)全自动分析仪.该仪器采用全封闭进口试剂,具有工作稳定,试剂用量少,检测快速,高效等优点.机内有完善的自检和故障报警系统、完备的质量控制系统,确保结果稳定、可靠.

    作者:王新元;祝峰 刊期: 2007年第05期

  • 深低温保存血小板的功能变化及新特性的研究

    目的 明确血小板冰冻保存后功能指标的变化并对冰冻血小板新亚群的产生和其新特性进行初步探讨.方法 对冰冻保存前后的单采血小板进行回收率、黏附率、聚集强度和血小板第3因子(PF3)活性进行检测,同时采用流式细胞术比较分析不同保存条件下单采血小板膜表面功能分子表达变化的差异.结果 冰冻保存后的回收率(%)为70.94±15.48,黏附率(%)为34.03±10.07,聚集强度(%)为53.82±12.73,PF3活性为(17.81±1.68)s.冰冻血小板CD62p再表达率(%)为51.8±7.7,根据表达和再表达CD62p能力不同可分为三个亚群,新鲜血小板CD62p再表达率(%)为98.4±0.6.结论 冰冻保存后的单采血小板仍具有良好的功能活性,且血小板通过冰冻保存后产生了新亚群.新亚群膜表面功能分子的变化可能与即刻止血功能增强有关.

    作者:王宝燕;张建耕;袁爱莲;李风琴 刊期: 2007年第05期

  • 西安市无偿献血者ALT检测结果分析

    《中华人民共和国献血法》颁布实施至今近10年.全国各地的无偿献血工作都得到了长足的发展和推进,为临床的医疗急救用血提供了可靠的保证.然而,无偿献血者所献血液经检测不合格而废弃的情况不容忽视,它既造成血液资源的浪费,又对社会及献血者产生一定的负面影响.

    作者:杨青;段勇 刊期: 2007年第05期

  • 半乳甘露聚糖检测对侵袭性曲霉病早期诊断的研究

    目的 评价酶联免疫吸附法(ELISA)连续检测血清半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)抗原对侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)早期诊断和疗效监测中的价值.方法 92例白血病和造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplants,HSCT)患者纳入实验研究,共测定标本290份.采用ELISA方法检测血清中的GM,检测浓度可达到0.5 ng/ml.结果 以1.5为阳性界值,GM检测的敏感性为60%,特异性100%,诊断符合率88%;以0.8为阳性界值,敏感性为90%,特异性95%,诊断符合率94%.连续监测时GM可早于真菌培养方法2~20d预测曲霉感染.在GM阳性患者中,对13例病人进行抗曲霉治疗,10例有效,3例无效死亡.抗曲霉治疗前GM水平呈缓慢上升趋势,保持在较高水平,抗真菌治疗有效病人的GM含量呈下降趋势,无效死亡病人呈上升趋势.结论 血清GM检测是对白血病和HSCT患者IA的早期诊断和疗效评价的有用指标.

    作者:金欣;尹秀云;陈建魁;于农;左向华;朱晓华;黄媛;佟雅丽;杜宇 刊期: 2007年第05期

  • 初筛实验室抗-HIV临界值质控血清的制备及应用

    目的 掌握抗-HIV弱阳性外部对照质控血清(临界值质控血清)的制备方法.方法 用抗-HIV抗体阴性的血清倍比稀释试剂盒中的抗-HIV阳性对照血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各稀释度血清,计算s/A值.依据所需外部对照质控血清的抗-HIV强弱来确定某一稀释度为配制稀释度,按配制稀释度的年需求量来配制抗-HIV弱阳性外部对照质控血清.结果 采用倍比稀释法可获得均匀、无菌、稳定的抗-HIV弱阳性外部对照质控血清.结论 倍比稀释法是制备抗-HIV弱阳性外部对照质控血清质控物经济方便、快捷、可靠的方法.

    作者:何芳;马真真 刊期: 2007年第05期

  • 尿透明质酸检测在膀胱移行细胞癌诊断中的价值

    透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种结缔组织中存在的结构简单的糖胺聚糖,其临床应用主要集中在与肝脏疾病,特别是肝纤维化的关系上.近年来一些研究表明HA与膀胱肿瘤关系密切,本文通过测定膀胱移行细胞癌患者尿液中HA水平,与尿脱落细胞学结果对比分析,以评价其在膀胱癌诊断中的价值,现将有关结果报道如下.

    作者:陈凤丽;欧阳雁;雷金娥 刊期: 2007年第05期

  • 不同质量精液精子低渗膨胀试验测定时间的相关性研究

    目的 探讨不同质量的精液精子,在精子低渗膨胀试验(hypo-osmotic swellingtest,HOST)中,在不同的孵育时间观察精子膜的总膨胀率,旨在寻求一种客现反映精子低渗膨胀试验的测定时间.方法 用中性红染色测定精子活率,用低渗膨胀液测定不同时间段精子总膨胀率.结果 不同活率精子与不同时间段的精子低渗膨胀试验的总膨胀率之间存在不同的差异.结论 在HOST试验中,孵育20 min能比较客现地反映精子的膨胀率,死精子在HOST试验中存在一定比例的膨胀,并随孵育时间的延长精子膜膨胀率有显著性差异.

    作者:王铭超;张丽娟;张淑兰 刊期: 2007年第05期

现代检验医学杂志

现代检验医学杂志

主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院