符义富；傅尧；游丽萍；曾以周；周炳荣；杨卫东
目的 建立Alu-PCR DNA指纹分析方法,研究癌组织DNA指纹改变在临床非小细胞肺癌患者手术预后中的意义.方法 收集24例临床确诊非小细胞肺癌患者手术切除之新鲜肿瘤组织和距离肿瘤边缘5 cm以上之正常肺组织,以及7例非肿瘤肺组织和10例正常体检者的外周血白细胞.用酚/氯仿抽提法提取其DNA,以Alu特异性引物,扩增Alu序列之间的基因组,得到肿瘤和正常组织的DNA指纹,井对患者手术后随访,现察DNA指纹的改变在患者预后中的意义.结果 实验中7例正常肺组织(非肿瘤)和10例正常体检者外周白细胞,用AIu-PCR方法所产生的DNA指纹条带呈单态性,作为指纹分析中的正常对照;24例肺癌临床标本中,有12例肿瘤组织DNA指纹与正常组织指纹有差别,占50%,表现为DNA条带的缺失、增加和条带强度的差异.未能获得能提示患者预后情况的特异性的指纹条带;DNA指纹有改变的患者(10例)术后1年死亡率(80%)显著高于DNA指纹未改变者(9倒)术后1年死亡率(22.2%)(x2=6.343,P=0.023).结论 采用Alu-PCR方法所得到的临床非小细胞肺癌肿瘤组织的DNA指纹改变是多样性的,未能发现提示预后的特异性的指纹条带;Alu-PCR指纹分析提示,DNA指纹有改变的患者预后比没有改变的患者预后差.
作者：史燕顺；潘世扬 刊期： 2008年第06期
库尔特ACT 5diff OV血液分析仪具有分析速度快、结果准确和重复性好[1]等特点,因此在国内外用户很多,但其配套的进口试剂消耗量大,存在试剂浪费现象,使每人份检测成本相对较高.笔者对该仪器的工作原理、各部分性能等进行详细的研究,通过调整仪器设置参数,始终保持仪器在佳状态下,探索出一种提高试剂的利用率、降低检测成本的方法,现介绍如下:
作者：孙志强；王舒莹 刊期： 2008年第06期
目的 探讨冠心病患者血清脂联素(APN)和超敏C-反应蛋白(hs-CRP)改变的临床意义.方法 对148例疑诊冠心病的患者进行冠状动脉造影检查,根据造影结果分为冠心病组和非冠心病组,分别对其血清进行脂联素和超敏C反应蛋白的测定,并对结果进行分析.结果 冠心病患者血清APN水平(7.42±2.63 mg/L)显著低于对照组(13.12±2.87mg/L),而hs-CRP(9.62±3.12 mg/L)显著高于对照组(1.42±0.44 mg/L),两者之间呈负相关(r=-0.38,P<0.05).结论 检测hs-CRP和APN对冠心病的辅助诊断、疗效观察及预后判断具有重要价值.
作者：戴丽萍 刊期： 2008年第06期
目的 探讨抗核抗体(ANA)核型及滴度与免疫球蛋白和补体的关系.方法 采用散射比浊法对328例抗核抗体阳性患者血清进行免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM)和补体(包括C3,C4)检测,取120例抗核抗体阴性体检者为对照组.针对不同抗核抗体核型及滴度进行分组,分别研究各组免疫球蛋白和补体浓度情况.结果 抗核抗体滴度≥1∶100时,IgG,IgA显著升高(P<0.01),抗核抗体滴度≥1∶3200时,IgM显著升高(P<0.01),抗核抗体阳性各组中,当抗核抗体滴度≥1∶1000时,C3,C4水平显著降低(P<0.01).根据受检者血清中抗核抗体核型进行分组,各组间IgG,IgA,C3,C4水平比较,差异有统计学意义(P<0.01).各核型组IgG,IgA均比对照组显著增高(P<0.01),而C3,C47,有在胞荣型、核颗粒型、核均质型等靶抗原分布较广的核型组显著降低(P<0.01).结论 免疫球蛋白与补体的含量与ANA核型及滴度有一定的关系.
作者：曹华军；程艳杰；李桂新；徐裕海；杨光晗 刊期： 2008年第06期
目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1 A盒(HMGB1 A box)与LBPK95A的融合基因.方法 经加端-PCR获得HMGB1 A盒与LBPK95A的融合基因.该基因克隆到pGEX-4T-2载体中转化TOP10感受态细胞,测序鏊定.将A-LBP质粒转化E.coli BL21,30℃诱导表达4 h,超声裂解后经GSTrap FF蛋白纯化柱纯化,进行SDS-PAGE分析.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1 A盒与LBPK95A的融合基因.SDS-PAGE分析表明,A-LBP融合蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的28%,GSTrap FF纯化后获得目的蛋白.结论 成功表达和纯化了HMGB1 A盒与LBPK95A的融合蛋白.
作者：姜南艳；于文彬；苏明权；沈建军；李立文；郝晓柯；张惠中 刊期： 2008年第06期
平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)是血细胞分析仪检测的参数之一,常与平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)一起作为贫血的鉴别诊断指标,参考范围为320～360 g/L,MCHC增高常见于遗传性球形红细胞增多症.
作者：钟万芬；乐家新 刊期： 2008年第06期
目的 探讨3-(4,5)-2-噻唑-(2,5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)药敏试验法在指导临床胃癌化疗中的作用.方法 应用MTT法检测40例胃癌新鲜标本肿瘤细胞对20种化疗药物的敏感度.结果 对胃癌细胞抑制率强的药物为PTX,ADM,BCNU,eADM,Ara-C;对胃癌细胞抑制率较弱的化疗药物为CTX,OPT,VP-16,ICTX,PYM.结论 MTT药物敏感试验对于提高胃癌化疗效果,减少用药盲目性具有重要意义.
作者：李胜水；李双标；张风梅；刘岩；许华 刊期： 2008年第06期
目的 为了准确、简便地鉴定临床泌尿生殖道支原体.方法 根据泌尿生殖道支原体生物学特性,研制一种双相培养基,利用液相培养基颜色改变和固相培养基上菌落形态鉴定泌尿生殖道支原体.结果 用该方法检测2株标准支原体结果正确;检测156例临床泌尿生殖道标本中支原体与IST2检测结果的符合率为97.4%.结论 运用双相培养基能提高检测泌尿生殖道支原体的特异度和敏感度.
作者：张银旺；荣媛 刊期： 2008年第06期
目的 研究生物安全柜在动态条件下柜内空气细菌污染情况及其影响因素分析.方法 采用平板自然沉降法对生物安全柜内消毒净化的空气及柜外周边区消毒空气,在静止和工作状态下每隔10 min进行空气采样并计数细菌数.设对照组、干预组(限制人员活动)、未干预组.分别取有代表性的从操作开始10,20,40,60 min四组的空气细菌数进行对比分析,经t,F检验,分析生物安全柜内空气细菌菌落数随时间变化的趋势.结果 在静止柜内空气细菌总数在不同时间段与周边区空气相比均明显降低,差别有统计学显著性意义(P均<0.01);在工作状态下柜内空气细菌总数不论是在干预组还是未干预组与静止状态下相比差别均无统计学显著性意义(P均>0.05);未干预组柜内空气细菌总数虽与干预组相比有所增加,但差别均无统计学显著性意义(P均>0.05);在工作状态下不论是在干预组还是未干预组柜内空气细菌总数均显著低于周边区,而周边区空气细菌总数随采样次数的增加有增加的趋势,而生物安全柜内空气却无此趋势.干预组还是未干预组柜内空气细菌总数在各时间段经方差分析差别均无统计学显著性意义(P均>0.05).空气中细菌以葡萄球菌属、草绿色链球菌检出率高.结论 生物安全柜在动态条件下可有效保证柜内空气细菌的洁净并保持稳定,人员活动并不影响柜内空气的洁净.
作者：宋庆璋；刘瑞东；马志国 刊期： 2008年第06期
目的 研究激活的富血小板血浆凝固时间(activated platelet rich plasma coagulation time,简称APRPCT)对特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)出血的预示作用及意义,探讨该实验方法与临床实验室常用的血小板计数(PLT)、血浆凝血酶原时间测定(PT)、活化部分凝血活酶时间测定(APTT)、血浆凝血酶时间测定(TT)、血浆纤维蛋白原测定(Fib)间的相关性.方法 根据APRPCT实验原理,优选浓度为2 g/L的硅微粒作为APRPCT激活试剂,制备质控血浆监测APRPCT实验的过程和质量,以2 g/L的硅微粒检测正常对照组及ITP组的APRPCT,统计分析两组间的APRPCT有无显著性差异.结果 浓度为2 g/L的硅微粒测定APRPCT,正常对照组较ITP组明显延长,两组之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 APRPCT能同时反映血小板数量和质量的变化,其预示出血倾向的特异性明显优于血小板计数,可作为ITP患者的出血预示指标.
作者：刘更夫；尹义军；吴琴；毕红琳；胡胜 刊期： 2008年第06期
研究了无机含氧酸NaIO4氧化有机物的化学发光行为,发现H3PO4介质中,NaIO4氧化H2O2会产生弱的化学发光,某些本身具有荧光的物质或多羟基酚类物质存在于这个化学发光反应体系中时,能不同程度地增强体系的发光强度.实验还观察到,一些在体系中反应但不产生发光信号或发光信号很弱物质的试液在沸水浴中加热5～10 min,或在试液中加入少量Cu2+或Fe2+并在适当温度下水浴加热5～8 min后,反应会伴随着强烈的发光信号.据此,建立了NaIO4-H3PO4-H2O2-有机物化学发光新体系,结合流动注射技术建立了利用该体系进行药物分析的化学发光新分析法.方法的线性范围在1.0×10-9～5.0×10-6g/ml之间,检出限高可达4.7×10-10g/ml,方法的相对标准偏差(RSD)在2.5%～3.7%(n=11)之间.
作者：聂峰；翟宝清；吴迎春 刊期： 2008年第06期
目的 构建P53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体,并探讨其在人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞中的表达.方法 应用分子克隆技术,将mdm2cDNA序列反向插入到含有P53基因序列pDOR-Neo中的P53基因序列下游,构成含有P53基因与反义mdm2基因融合基因的逆转录病毒表达载体.经酶切分析鉴定后命名为pDOR-Neo-p53-F mdm2并将重组载体通过脂质体转染Mc3细胞,通过G418筛选转染阳性细胞,并采用Western blot方法检测P53蛋白表达.结果 酶切鉴定证实重组载体含有P53与反义mdm2 cDNA片段,实验结果表明:转染后P53蛋白(1.35±0.14)较对照组P53蛋白(6.26±0.11)含量显著减低(P<0.01),转染空载体P53蛋白(6.24±0.12)与对照组比较无统计学差异(P>0.05).结论 P53与反义mdm2基因融合体真核表达载体构建成功,并表达野生型P53蛋白和封闭mdm2基因,为今后进一步研究打下了基础.
作者：饶国洲；李晓红；李昂；郅克谦；张引成 刊期： 2008年第06期
目的 评价SYBR Green I实时荧光定量多重PCR结合熔解曲线分析快速筛查葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因的可行性,利用此筛查方法了解深圳地区葡萄球菌中大环内酯类耐药基因的分布情况.方法 选取经测序鉴定携带有大环内酯类耐药基因ermA,ermB,ermC,msrA的葡萄球菌,用一个包括这四种耐药基因引物的SYBR Gteen I多重实时荧光定量PCR检测,经荧光定量曲线和熔解温度曲线(Tm值)确证和反应条件优化后建立针对大环内酯类常见耐药基因的初筛体系;随机选取临床136株葡萄球菌,利用此初筛体系对136株葡萄球菌是否携带常见大环内酯类耐药基因进行检测,并对检测结果和表型、电泳、测序结果进行比较,从而对此方法进行评价.对携带有大环内酯类耐药基因的细菌进行基因型别的鉴定,以了解大环内酯类耐药基因的分布情况.结果 此SYBR Green I实时荧光定量多重PCR初筛体系检测葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因与表型检测比较达到94.8%(129/136)的一致性,与琼脂糖凝胶电泳结果和测序结果比较达到100%的一致性.136株葡萄球菌检出msrA,ermA,ermB,ermC四种耐药基因,耐药基因总检出率为75.7%(103/136),并发现多株携带多种大环内酯类耐药基因的葡萄球菌.结论 SYBR Green I实时荧光定量多重PCR可以快速准确地筛查葡萄球菌是否携带有常见的大环内酯类耐药基因;深圳地区葡萄球菌大环内酯类耐药率较高,主要耐药基因是ermC 56.6%(77/136),msrA24.2%(33/136),ermA12.5%(17/136).
作者：夏成静；黄烈；陆学东；刘键；杨来智；张海燕 刊期： 2008年第06期
目的 探讨环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)、类风湿因子(RF)和抗RA33抗体对类风湿性关节炎(RA)的临床应用价值.方法 88例RA患者和50例其他自身免疫病患者分别采用ELISA法检测抗CCP和抗RA33抗体,免疫荧光法检测抗AKA抗体,速率散射比浊法检测类风湿因子(RF),观察各指标对RA的诊断价值.结果 患者抗CCP抗体、抗AKA抗体、抗RA33抗体和RF的敏感度分别为68.2%,28.4%,39.8%和71.6%,特异度为92.0%,100%,94.0%和70.0%;抗CCP抗体的检测阳性率高于抗AKA抗体和抗RA33抗体(P<0.01),与RF无统计学显著性差异(P=0.622).三种抗体对RF阴性组RA诊断的阳性率为63.0%,37%,44.4%,与RF阳性组RA阳性率70.5%,24.6%,37.7%相比较,两组差异无统计学意义(P>0.05).结论 抗CCP,抗AKA,抗RA33抗体均是RA诊断的特异性指标,对诊断RF阴性RA具有较高敏感度和特异度,将上述抗体与RF进行联合检测,有助于RA的早期诊断.
作者：段发兰；李毅；成国娟；胡筱梅 刊期： 2008年第06期
目的 评价免疫层析法在流感疑似患者中进行床旁检测(Point of Care Test,POCT)的临床价值.方法 收集2008年1～3月北京地区4家医院共计1044例流感疑似患者的一侧鼻拭子标本,在临床诊室内采用免疫层析法进行甲型及乙型流感病毒抗原的快速检测,同时采集另一侧鼻拭子标本进行细胞培养检测.结果 免疫层析法检测甲型及乙型流感病毒的阳性率分别为17.5%和14.2%,细胞培养甲型及乙型流感病毒的阳性率分别为16.3%和18.3%;相对于细胞培养鉴定,免疫层析法床旁检测甲型流感病毒的敏感度、特异度、总符合率、阳性及阴性预测值分别为96.5%,97.8%,97.6%,89.6%和100%,乙型流感病毒的敏感度、特异度、总符合率、阳性及阴性预测值分别为77.5%,100%,95.9%,99.3%和95.2%.结论 免疫层析法检测能对流感患者进行早期快速诊断,为临床提供及时的病原学诊断.
作者：张英；崔京涛；吴叶丽；倪安平 刊期： 2008年第06期
目的 观察聚醇醚碘的杀菌效果及稳定性.方法 采用悬液定量杀菌试验及37℃保存试验进行了实验观察研究.结果 以含有效碘300 mg/L的聚醇醚碘对悬演内金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌作用1 min,杀灭对数值均>5.00;对白色念珠菌作用1 min,杀灭对数值均>4.00;以原液涂擦皮肤表面作用1 min,对自然菌的杀灭对数值均>1.00;将该消毒液原包装于37℃恒温保存3个月,有效碘含量下降率为2.82%.结论 该消毒液杀菌效果良好,性能稳定.
作者：刘小娥；王继红；苏宝凤；苍金荣 刊期： 2008年第06期
我科于2006年2月引进一台北京天石医疗用品制作所生产的ZMX988B型全自动酶标洗板机,该仪器操作简单,使用方便,功能齐全,洗涤效果干净,检测结果准确可靠,维护也十分简单.我们在长期使用过程中遇到以下常见故障现象,并总结出有效的预防排除方法,供同行参考:
作者：王鹏 刊期： 2008年第06期
日本希森美康公司生产的Sysmex KX-21三分类全自动血细胞分析仪,因为它从设计上把液路系统和气路系统分开减少了故障的发生率,并且利用高压电灼烧产生的空气锤进行排阻降低了阻孔的产生,但它仍然会出现一些同题.近期出现一次较特殊的故障,现将其故障表现及处理过程作一介绍,以供同专业人员参考.
作者：陈言伟；宋爱玲；郭虹霞；王朝鑫 刊期： 2008年第06期
目的 应用EP10-A2初步评价北京博晖BH2100型铅镉微量元素分析仪的检测性能.方法 依照EP10-A2实验方案,每天用仪器配套的高(203μg/L)、中(104μg/L)、低(51μg/L)三种国家二级标准物质进行铅检测,计算铅的偏差、总不精密度、斜率、携带污染、非线性、漂移,并进行t检验.结果 高值、中值和低值偏差分别为2.4,1.47,-0.07μg/L;总不精密度:高值4.12%,中值9.24%,低值10.12%;线性:1.459,携带污染率:1.522,非线性:0.008,漂移:-0.083.结论 BH2100型铅镉元素分析仪全血铅测定的偏差、总不精密度均在允许范围;在一定的范围内有良好的线性关系,携带污染率较低,稳定性较好,各项指标均能满足临床要求.
作者：林莲英；徐建华；黄宪章；庄俊华；陈信；欧财文；郑智明；王云秀 刊期： 2008年第06期
目的 探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)联合检测对肺癌的诊断价值.方法 采用电化学发光法对78例肺癌(其中鳞癌30例,腺癌28例,小细胞癌20例)、45例肺部良性病患者和36例健康人血清进行分析.结果 肺癌患者血清4种肿瘤标志物含量明显高于肺部良性疾病组(P<0.05)和健康对照组(P<0.01).肺癌组经病理分型后,NSE在小细胞肺癌中的水平明显高于其他类型的肺癌(P<0.05);CYFRA21-1的水平在鳞癌中升高尤为明显(P<0.05);CEA的水平在腺癌中显著升高(P<0.05).4种肿瘤标志物单项检测时,特异度较高(82.22%～95.56%),但敏感度不是很高(38.46%～56.41%).联合检测后,可提高肺癌的阳性检出率(64.10%).结论 CEA,CA125,NSE和CYFRA21-1对肺癌有一定的辅助诊断价值,且CEA,NSE和CYFRA21-1对不同组织类型肺癌均有一定诊断价值,联合检测可提高对肺癌的阳性诊断.
作者：黄芳；耿燕；李婷婷；张西英 刊期： 2008年第06期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
