学术投稿

丙型肝炎病毒RNA检测操作方法探讨

徐志峰;汪峻岭;李玉梅

关键词:核酸扩增, RNA, 操作方法
摘要:丙型肝炎病毒(RNA)的核酸扩增荧光定量检测,对临床丙型肝炎的诊断及抗病毒药物疗效观察,提供了有力的佐证,然而临床基因扩增实验室污染问题还时有报道[1,2].
现代检验医学杂志相关文献
  • 浅谈IS09001与血站质量管理

    随着社会对血液质量的要求不断提高,法规对采供血机构的约束力度日益增大,公众对血站管理的期望值进一步提升,通过一整套质量标准的引入,对血站所有工作环节进行全面质量管理就成为了保证血液质量,保障献血者权益,推进安全输血事业发展的必然趋势.

    作者:刁丽波 刊期: 2008年第01期

  • 结核生物蛋白芯片技术在临床诊断中的意义

    目的 利用芯片技术,建立结核LAM,16-kDa,38-kDa蛋白芯片检测结核分技杆菌的方法,以期为结核与肺外结核的早期诊断提供参考.方法 采用CCD原理结合视频采集方法,应用结棱蛋白膜芯片进行1 623例检测.结果 LAM,16-kDa,38-kDa蛋白芯片联合检测住院病人阳性率53.2%(396/744);门诊病人30.0%(264/879).结论 结核多种抗原的蛋白芯片检测系统联合运用三种抗原联合检测对结核病的诊治有积极的意义.

    作者:李洪敏;王巍;安慧茹;张志辉;夏湘宣;王台虎;陈武雄;刘京 刊期: 2008年第01期

  • 不育男性弓形虫感染与附属性腺功能测定

    目的 探讨弓形虫(toxoplasmosis)感染对男性附属性腺功能的影响.方法 应用化学法分别检测38例正常生育男性(正常对照组)和42例弓形虫感染不育男性(弓形虫感染组)的精浆中酸性磷酸酶(ACP)、果糖(Fru)和α-葡糖苷酶(α-Glu)含量.结果 弓形虫感染组中精浆ACP和α-Glu含量明显低于对照组,两组之间存在显著性差异(P<0.05),而Fru两组之问无显著性差异(P>0.05).结论 弓形虫感染对前列腺和附睾功能具有干扰作用,测定精浆中ACP,FrU和α-Glu含量可帮助判断弓形虫感染所致男性不育者的状态,指导临床对其进行有效的治疗.

    作者:万长春;汪泓;郝宝金 刊期: 2008年第01期

  • 血清胰岛素样生长因子1与S-100B蛋白检测在新生儿窒息和缺氧缺血性脑病患者中的研究

    目的 探讨血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)、血清S-100B蛋白检测在新生儿窒息和缺氧缺血性脑病(HIE)患者中的临床意义.方法 将40例窒息患儿、37例缺氧缺血患儿(HIE)和正常对照组30例采用放射免疫法、酶联免疫法分别检测IGF-1,S-100B蛋白.结果 ①IGF-1水平在窒息组、HIE组较对照组均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);②S-100B蛋白水平在窒息组、HIE组较对照组均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 IGF-1浓度水平与窒息患儿和HIE患者呈负相关,S-100B蛋白水平与窒息患儿和HIE患者呈正相关,两者的检测在对窒息患儿、HIE患儿的综合诊疗中起重要作用.

    作者:赵顺锋 刊期: 2008年第01期

  • 南京城区部分职业人员生化指标分析

    目的 了解南京城区职业人员空腹血糖、尿酸、血脂、转氨酶等五项生化指标水平,初步评估南京城区居民健康状态.方法 用全自动生化分析仪检测1 575例体检者空腹血糖、尿酸、血脂、转氨酶指标.结果 血糖随年龄增长其上升幅度女性约为每10 y 0.1~0.21 mmol/L,男性在-0.08~0.33 mmol/L间;胆固醇高峰在50~59 y组,≥60 y后下降,其中男性高峰在40~59 y,女性在50 y.三酰甘油从年轻组起阳性率就高达14%以上.谷丙转氨酶异常则主要集中于年轻组.男性各年龄组尿酸阳性率持续20%以上,女性60y后阳性率反超男性(30%).结论 南京城区职业人员血脂高峰较早,年轻人尤其男性自我保健意识差,三酰甘油、谷丙转氨酶争尿酸异常率高,应加强健康教育,预防疾病发生.

    作者:邵春阳;张春妮;刘小传;汪俊军;李克 刊期: 2008年第01期

  • 南京地区湿疹和荨麻疹儿童过敏原体外检测简析

    目的 了解南京地区湿疹和荨麻疹儿童过敏原种类与分布特点,以指导临床防治.方法 采用德国Mediwiss免疫印适定量法过敏原体外检测系统,对471名患有湿疹和荨麻疹学龄前儿童进行血清中14种过敏原特异性IgE抗体的检测.结果 阳性率高的过敏原是尘螨,为78.3%,其次为猫狗皮屑和牛羊肉.吸入性过敏原3-6 y组阳性率较高,食入性过敏原6 mo~3 Y组阳性率较高.结论 对南京地区湿疹和荨麻疹患儿,尘螨、猫狗皮屑和牛羊肉是常见的过敏原.与3 y以上患儿比较,3 y以下患儿食物组过敏原阳性率较高,3 y以上者则吸入性过敏原阳性率为高.

    作者:陈红兵;张广毓;刘海平 刊期: 2008年第01期

  • TRFIA与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物结果的比较

    目的 探讨时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)定量检测乙型肝炎血清学标志物(HBV M)与酶联免疫吸附试验(ELISA)定性检测HBV M的关系及其临床意义.方法 采用TRFIA和ELISA法分别检测161份血清标本HBV M.结果 对于高浓度的HBV M血清,两种方法检出率有较高的一致性,但是对于稍高于临界值的血清,TRFIA检出率明显高于ELISA.结论 TRFIA检测HBV M比ELISA法敏感.

    作者:黄宪章;石文;庄俊华;丁海明;潘婉仪 刊期: 2008年第01期

  • COBAS Taqman HBV DNA的方法学验证

    目的 评估COBAS Taqman HBV DNA分析系统的性能及临床应用.方法 依据美国国家临床实验室标准化委更会(NCCLS)制订的临床化学方法评价方案(evaluation protocols),通过精密度、携带率、线性评价、仪器同比对、参考范围确认等试验,对COBAS Taqman HBVDNA分析系统的性能参数进行了评估.结果 COBAS Taqman分析系统批内变异6.9%~8.6%,批间变异10.5%~18.7%,总变异10.8%~20.2%,线性范围6.0~101 IU/ml,回收率98.7%~104.5%.仪器间比对相关性较好(r2=0.998).结论 COBAS Taqman HBV DNA分析系统性能指标符合要求,操作简便、快捷,动力学范围广,是目前理想的HBV DNA检测方法.通过此次验证,建立了一套简便的核酸检测方法学评价方案,有利于临床实验室标准化操作的实施.

    作者:秦绪珍;孙江燕;韩建华;李永哲;崔巍;倪安平 刊期: 2008年第01期

  • 核转录因子EBF3 mRNA在肝癌和食管癌组织中表达水平的研究

    目的 研究核转录因子EBF3 mRNA在肝癌和食管癌组织中表达水平及其在肿瘤发生中的意义.方法 肝及食管组织分别以β2微球蛋白(β2M)和18S rRNA为内参,实时荧光定量RT-PCR方法 检测肝癌及食管癌及其远端组织中EBF3 mRNA的含量.结果 18例肝癌和配对远端肝组织中EBF3 mRNA与岛β2 mRNA的对数比值分别为0.52士0.17和0.28士0.23,差异有统计学意义(t=3.56,P=0.001 1).12例食管癌和配对远端食管组织中EBF3 mRNA与18S rRNA的对数比值分别为0.58士0.054和0.22士0.24,差异有统计学意义(t=5.07,P=0.000 0).结论 EBF3mRNA在肝癌和食管癌组织中表达显著增高.核转录因子EBF3可能与肝和食管肿瘤的发生有关.

    作者:毛丽萍;景容容;金小云;王惠民 刊期: 2008年第01期

  • 一氧化氮在急诊医学的进展及应用

    一氧化氮(nitric oxide,NO)又称内皮细胞衍生舒张因子(endothelium-derived relaxing factor,EDRF),广泛分布于生物体各组织中,是一种新型生物信使分子及神经递质,日益受到各领域研究者的广泛重视和探索.

    作者:刘庚勋;李正贤 刊期: 2008年第01期

  • BECKMAN CX5△全自动生化仪测试项目交叉污染的处理体会

    该文总结了BECKMAN CX5△全自动生化仪测试项目交叉污染的各种处理方法,包括冲洗样品针和试剂针内部;调整针的水平位置,清洗冲洗组件及冲洗站管道;更换胶擦;清洁针头冲洗液塑料瓶并更换过滤器;检查水质,更换滤芯;冲洗样品针及试剂针进气管道;用CCWA专用清洁液清洗管道等.

    作者:张延玮 刊期: 2008年第01期

  • IRISiQ200全自动尿沉渣分析仪修饰功能的临床应用

    目的 探讨IRISiQ200全自动尿沉渣分析仪修饰功能的应用价值.方法 随机留取门诊和住院病人新鲜尿液标本116例,首先用IQ-200系统进行测定,然后对可疑的成分图象进行人工修饰,以不离心标本镜检定量方法 作为参考标准进行修饰前后对比分析.结果 IQ-200系统检测结果:修饰前尿红细胞与不离心标本镜检定量方法符合率86.2%,白细胞为87.1%,上皮细胞为84%;人工修饰后结果:尿红细胞符合率92.2%,白细胞为92.0%,上皮细胞为96%.结论 人工修饰功能提高了与不离心标本镜检定量方法 的符合率,降低了显微镜复查率,因此IQ-200系统修饰功能具有较好的应用价值.

    作者:王丹玲;张延京;赵亚静;赵明 刊期: 2008年第01期

  • 血浆同型半胱氨酸水平与冠心病发病的关系研究

    目的 探讨血浆同型半胱氨酸(HCY)水平与冠心病(CHD)的关系.方法 采用循环酶法分别测定CHD患者(117例)度对照组(50例)血浆中HCY水平.结果 CHD组血浆HCY水平明显高于对照组(P<0.01);不同临床类型患者,HCY水平AMI>UAP>SAP>对照组,其中sAP组与对照组比较差异显著(P<0.05),UAP,AMI组与对照组比较均有非常显著性差异(P<0.01),SAP与UAP,AMI组比较也存在显著性差异,分别为P<0.05和P<0.01;0,1,2,3支血管病变者血浆HCY浓度呈逐级增高趋势,0支病变组与其它各病变组间比较相差显著(P<0.01),1支与3支病变组或2支与3支病变组问有非常显著性差异(P<0.01),1支与2支病变组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 CHD患者血浆HCY水平明显增高,冠状动脉病变支数越多,血浆HCY水平越高,提示HCY水平变化与CHD的发生、发展密切相关,是CHD的一个危险因素.

    作者:王延伟;高明;舒凯;李民 刊期: 2008年第01期

  • 德灵特定蛋白分析仪比色皿清洗剂的研制与应用

    目的 研制适用于德灵特定蛋白分析仪比色皿的清洗荆.方法 筛选临床检验界比较常用酸、加酶清洗剂、加具有较好渗透、乳化、分散和洗涤性能的非离子表面活性剂的碱性清洗剂,将用过的比色皿浸泡于所研制的清洗剂中,上机检测.结果 加非离子表面活性剂的碱性清洗剂效果好,与酸、加酶清洗剂具有显著性差异(P<0.01).结论 加非离子表面活性剂的碱性清洗剂达到试验要求,可用于比色皿的清洗.

    作者:岳玉林 刊期: 2008年第01期

  • 人源M2二联体靶抗原BP-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定

    目的 克隆表达抗线粒体抗体二亚型(AMA-M2)的二个靶抗原侧链2-氧酸脱氢酶复合体E2(BCOADC-E2)、丙酮酸脱氢酶复合体E2(PDC-E2)及其连接形成的二联体BP-E2融合蛋白,用于人原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期临床诊断.方法 根据BCOADC-E2,PDC-E2的cDNA序列设计引物,从正常人的琳巴细胞中提取RNA,通过RT-PCR方法 扩增得到相应的基因片段,经测定序列验证后插入表达栽体pET28a(+),构建重组表达裁体pET28a(+)-BCOADC-E2,pET28a(+)-PDC-E2,pET28a(+)-BP-E2,转化大肠杆茵BL21(DE3)后诱导表达蛋白质.表达蛋白经SDS-PAGE,Western-blot等鉴定.结果 经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明,成功地构建了三种重组质粒.IPTG诱导表达后,获得三种融合蛋白.经免疫学鉴定,重组抗原片段具有AMA-M2的免疫原性.结论 重组表达的BP-E2融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验室诊断.

    作者:周晔;姚定康;陈燕;蒋天舒;蒋廷旺;吴传勇;陈波;仲人前;邓安梅 刊期: 2008年第01期

  • 尿液干化学试带法检验的质量控制

    尿液检验是临床检验中的一个重要组成部分.随着尿液检验自动化仪器的发展,大大提高了尿常规检验的精确性和敏感性,而且也为临床快速诊断提供了可靠的实验依据.

    作者:段金霞;冯涛聚;苏文凡 刊期: 2008年第01期

  • Glypican3 N端融合基因构建及鉴定

    目的 构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican3,GPC3)N端融合基因.方法 采用RT-PCR技术,从人肝癌细胞株HepG2 mRNA中扩增GPC3 N端基因片段,经双酶切后,T4DNA连接酶将此片段定向连接至质粒pcDNA3.1,并转化大肠埃希菌DH5a,增菌培养后提取质粒并PCR扩增、酶切鉴定及序列测定.结果 GPC3 N端基因片段正确插入质粒pcDNA3.1,片段大小及序列正确.结论 成功构建重组质粒pcDNA3.1-GPC3N.

    作者:周玉宏;倪润洲;肖明兵;刘海鸥 刊期: 2008年第01期

  • PLS-F200B型微量速测血浆黏度计的性能观察与维护改进

    PLS-F200B型微量速测血浆黏度计(一种毛细管黏度计),适用于血浆(牛顿流体)黏度的检测.现将两年来对其一些性能的观察和日常维护方面的一点改进,介绍如下.

    作者:陈则清 刊期: 2008年第01期

  • 流式细胞术检测特发性血小板减少性紫癜患者血小板微粒

    目的 建立CD61与Annexin V双染法检测外周血中循环血小板微粒的方法,探讨血小板微粒在特发性血小板减少性紫癜患者中的临床意义.方法 使用流式细胞术检测了12例特发性血小板减少性紫癜患者和15例健康对照者外周血中血小板微粒的含量.采用CD61与Annexin V双染法,CD61弱阳性并且Annexin V强阳性者定义为血小板微粒,分析血小板微粒的百分含量.结果 CD61与Annexin V双染法能够清楚地区分出富血小板血浆中血小板微粒.特发性血小板减少性紫癜患者血小板微粒为12.3%士5.4%,健康对照组为1.1%士0.3%,P<0.05,差异显著.结论 CD61与AnnexinV双染法能够准确检出外周血中循环的血小板微粒.血小板微粒检测在特发性血小板减少性紫癜患者中有一定的临床意义.

    作者:何敖林;陈军浩;方莹 刊期: 2008年第01期

  • DIANA配血仪的故障分析与排除

    随着现代输血事业的发展,输血问题越来越受到人们的重视.我院自2000年以来引进西班牙DIANA公司生产的全自动配血仪,该仪器包括全自动操作系统和微柱凝胶技术:自动化操作系统具有完善软件功能,可自动化识别样品条码、试剂条形码、试剂卡条形码,由机械臂完成加样,离心判读全过程,从样品到报告全自动无人介入系统,大限度减轻工作压力,提高工作效率;微柱凝胶技术是利用微粒过滤来分离红细胞和凝聚的红细胞,从而形成不同的反应图谱,通过对图谱的判读来完成血型鉴定、抗体筛查、交叉配血结果.

    作者:吕小英;庄丽碧;王厚照 刊期: 2008年第01期

现代检验医学杂志

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主管:陕西省卫生厅

主办:陕西省临床检验中心,陕西省人民医院