侯湘岭；陈伟；王伟红；张博雅；王海涛；李海涛；石奇松
普通光镜观察尿红细胞形态对于区别肾小球疾病和非肾小球疾病具有重要价值,已有较多报道[1～4],其方法简便易行、不需特殊设备,但需要有经验的技师,仍有一定的误差.
作者：李刚 刊期： 2010年第02期
目的 研究血清尿酸(serum unne acid,SUA)含量与冠状动脉病变程度的关系,为冠心病的预防、治疗探索新思路.方法 选择河北省保定市第二医院心内科2006年10月～2008年10月期间住院并行冠状动脉造影的病例205例.记录患者性别、年龄等病史资料、实验室检查结果 、冠脉病变程度等临床指标.根据冠状动脉造影结果 分为冠心病组(CHD)154例和非冠心病组51例,比较两组间上述临床指标的差别.在CHD组中按血尿酸水平将冠心病组分为高尿酸组(96例)和正常尿酸组(58例)两个亚组,分析血尿酸水平与冠脉病变程度的关系.根据冠心病病变血管支数分为单支、双支、多支病变三个亚组,分别比较三亚组同血尿酸水平.结果 ①CHD组患者的血尿酸水平(486.94±162.96 μmol/L)明显高于非CHD组(305.69±99.58 μmol/L),差异具有统计学意义(P＜0.05).②高尿酸血症的检出率为54.1%(111/205),其中CHD组的尿酸异常率为62.34%(96/154),非CHD组的尿酸异常率为29.41%(15/51).CHD组尿酸异常率明显高于非CHD组,差异有统计学意义(P＜0.05).③血尿酸水平与性别、收缩压、TG成正相关,与HDL成负相关,r分别为0.339,0.244,0.156,-0.102,(P＜0.05).④单支、双支、多支病变三个亚组的血尿酸水平分别为387.07±100.14,474.43±133.62,581.30±180.21 μmol/L.血尿酸水平随着冠脉病变血管支数的增加而逐渐增高,且均高于非CHD组(305.69±99.58 μmol/L),三亚组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).三亚组的冠脉狭窄积分分别为6.93±4.48,16.54±11.13,33.67±17.85,随着冠脉病变支数的增加而逐渐增高,各亚组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).⑤对冠心痛进行Logistic曰归分析,年龄、血尿酸、低HDL为CHD的危险因素,OR值分别为1.102,1.012,0.397.结论 ①血尿酸水平与性别有关联,与牧缩压和TG成正相关,与HDL成负相关.②血尿酸水平随着冠心痛冠状动脉病变程度的加重而逐渐增加,是反映冠心病严重程度的一种重要生化指标.③在冠心痛的防治中,除控制传统危险因素外,对高尿酸血症也不容忽视.
作者：侯湘岭；陈伟；王伟红；张博雅；王海涛；李海涛；石奇松 刊期： 2010年第02期
目的 构建并筛选有效的、编码短发夹RNA(shRNA)的增殖诱导配体(APRIL)基因特异性真核表达裁体.方法 分别设计、合成4对寡核苷酸单链,经退火、连接得到APRIL-shRNA双链,定向克隆至带有H1启动子、绿色荧先蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和Neo基因的pGCsi-H1/Neo/GFP质粒裁体中,柏建4条含APRIL基因shRNA的pGCsi-H1/Neo/GFP-APRIL-shRNA真核表达裁体,转染高表达APRIL的结直肠癌细胞株SW480.G418筛选,荧光显微镜下现察转染效率,FQ-RT-PCR检测APRIL mRNA水平,Western印迹分析APRIL蛋白表达.结果 测序证实pGCsiH1/Neo/GFP-APRIL-shRNA(APRIL shRNA)构建成功,无碱基突变,4种不同shRNA质粒转染细胞后APRIL mRNA和蛋白表达差别有统计学显著性意义(P＜0.01).结论 成功地构建APRIL shRNA真核表达裁体,敲低效率85%以上,可用于后续的实验研究.
作者：丁伟峰；王峰；王惠民；孙宝兰；丛辉；孙长江；鞠少卿；王跃国 刊期： 2010年第02期
目的 探讨ELISA法检测HBsAg的室内质控方法 .方法 用ELISA法检测0.5 ng/ml的HBsAg质控血清,采用Shewhart-cusum联合质控图制作质控图,结果 检测浓度为0.5 ng/ml的HBsAg质控品的s/co均值为1.879,s为0.205,告警限k为均值士1s,分剐是1.674和2.084,失控限h为均值±2.7s,分别是2.433和1.325.结论 Shewhartcusum联合质控图对于容易出现随机误差和系统误差的定性ELISA方法 较为适用,并且准确区分随机误差和系统误差有助于临床实验室采取相应的措施有针对性的进行改正.
作者：夏勇；吴宗华；谭佩仪；林丽英 刊期： 2010年第02期
目的 测定甲状腺机能亢进症(以下简称甲亢)患者和正常对照个体的血浆N端脑钠肤激素原(NT-proBNP)水平,探讨NT-proBNP在甲亢患者中的变化.方法 门诊和住院的30例甲亢患者作为甲亢组,另选取31例健康体检者作为正常对照组.测定受检者血清游离T3(FT3)、游离T4(FT4)及NT-proBNP水平.结果 甲亢组和正常对照组NT-proBNP水平分别为121.52 pg/ml(21.05～909pg/ml),44.43 pg/ml(16.39～77.47 pg/ml),甲亢组明显高于正常对照组,两组比较差异有统计学意义(t=6.643,P＜0.01),线性相关分析示甲亢组中NT-proBNP与Fr3,FT4有正相关性(r=0.479,P=0.002;r=0.642,P=0.000).结论 血清NT-proBNP水平显著受甲状腺激素(TH)影响,其测定对甲亢辅助诊断和疗效现察具有一定的临床价值.
作者：赵雅；兰雅娴；王禹；田英 刊期： 2010年第02期
目的 现察恶性肿瘤化疗时各项反映骨髓造血情况的血液学参数,探讨临床化疗时常用的监测指标.方法 选取62例已确诊的术后化疗的恶性肿瘤患者,采用Sysmex XE-2100全自动细胞分析仅检测化疗过程中血液学相关指标,对化疗前后的检测结果 运用成组秩和检验的统计学方法 进行分析,并跟踪9例化疗患者观察其血液学指标动态变化情况.结果 恶性肿瘤患者化疗前WBC,PLT,IPF及IRF的中位数分别为:5.98×109/L,209×109/L,9.6%,7.6%,化疗后分则是:2.12×109/L,89×109/L.18.9%,13.6%.恶性肿瘤患者化疗后的WBC,PLT显著低于化疗前(P＜0.05),化疗后的IPF%,IRF%显著高于化疗前(P＜0.05).动态跟踪9例恶性肿瘤患者化疗过程,发现IPF及IRF先于WBC和PLT升高.结论 IPF和IRF可作为评价肿瘤病人化疗过程中骨髓造血状态的指标.
作者：弥艾莉；杨雪；朱新勤；韩秀华；江虹 刊期： 2010年第02期
目的 将日本血吸虫原肌球蛋白基因(tropomyosin)克隆到原核表达载体pET-28a(+)裁体上,在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中表达其产物,并对其进行免疫原性分析.方法 从日本血吸虫的Expressed Sequence Tag(EST)文库中筛选出包含tropomyosin全长基因的EST,然后用高保真酶PCR扩增,构建到pET-280(+)裁体上,终在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IFTG)诱导表达.表达的his-tropomyosin融合蛋白用镍螯舍树脂蛋白纯化柱(Ni-NTA resin)亲和层析纯化,得到纯度较高的tropomyosin后,通过Western Blotting技术,用感染日本血吸虫的兔血清作为天然抗体来研究tropomyosi的免疫原性.结果 pET-28a(+)-tropomyosin重组质粒在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中成功表达,使用SDS-PAGE分析得到实际Mr约为40 000的his-tropomyosin融合蛋白,Ni-NTA resin的纯化效果很明显,获得的相对纯的目的 蛋白经过Western BIotting方法 检潮显示:tropomyosin融合蛋白能够与感染日本血吸虫6 w的兔血清有较强的免疫反应.结论 Tropomyosin能够在BL-21(DE3)型大肠埃希菌中高效表达,且抗原免疫原性强,日本血吸虫感染的兔血清能够识别体外表达的tropomyosin,具有与天然的tropomyosin相同的免疫原性.
作者：贺宽耀；陈惠；崔书建；韩泽广；刘锋 刊期： 2010年第02期
目的 了解引起呼吸道感染的流感嗜血杆菌主要生物型及其对常用抗生素的耐药性.方法 收集上海市第七人民医院2005年1月～2009年4月146株流感嗜血杆菌临床分离株,采用API NH细菌鉴定并进行生物学分型,头孢硝噻吩纸片法进行β-内酰胺酶试验,微量稀释法进行药物敏感试验.结果 流感嗜血杆菌Ⅰ型分离率高为39.0%,其次为Ⅰ型29.5%.Ⅰ型27.4%,Ⅳ～Ⅶ型4.1%.产β-内酰胺酶菌株占49.3%,其中Ⅱ型、Ⅲ型产酶率高分别为66.7%和62.8%,Ⅰ型产酶率仅为17.5%,其它生物型中未检出.流感嗜血杆菌对氨苄西林、复方磺胺耐药率高,分别为46.6%,41.1%,对阿莫西林/克拉维酸、左氧氟沙星、头孢噻肟耐药率为0.结论 呼吸道流感嗜血杆菌感染的主要生物型是Ⅰ型,菌株产β-内酰胺酶严重,含酶抑制剂抗生素、氟喹诺酮类、三代头孢菌素可作为产酶菌株的首选药物.
作者：陈碧英；马晨芸；陈佩宏；段爱华 刊期： 2010年第02期
目的 调查西安地区志贺氏菌属对氟喹诺酮类药物的耐药情况,并研究其基因突变.方法 对收集西安地区2004年1月～2009年11月三所三级甲等医院粪便分离的98株志贺氏菌属,经法国生物-梅里埃公司VITEK-32细菌鉴定系统鏊定,Kirby-Bauer法测定菌株对左氧氟沙星、环丙沙星2种喹诺酮类药物药敏试验,PCR扩增gyrA基因和parC基因并进行酶切分析,选取部分PCR扩增产物进行测序.结果 志贺氏菌属对左氧氟沙星耐药率为26.5%(26/98);对环丙沙星耐药率为43.9%(43/98),对2种氟喹诺酮类药物均耐药的有12株,占12.2%.对gyrA基因.对药株有93%(40/43)不能被Hinf I酶切,敏感株100%(55/55)被Hinf I酶切;对parC基因,耐药株69.8%(30/43)不能被Hinf I酶切,敏感株有69.2%(9/13)被Hinf Ⅰ酶切.测序结果 :耐药株中的gyrA和parC基因存在突变,敏感株中则不存在突变.结论 西安地区志贺氏菌属对氟喹诺酮类药物耐药情况严重,其耐药与gyrA和parC基因突变有关.
作者：张养民；张志明 刊期： 2010年第02期
目的 探讨甲壳素对大肠埃希菌生物被膜形成的作用.方法 以空白导管(对照组)和包被甲壳素的导管(实验组)为裁体,构建7 d的大肠埃希菌生物被膜模型,然后对每组细菌计数、测定结晶紫染色后的吸光度值、扫描电镜(SEM)观察.结果 对照组和实验组的细菌计数值(×107 cfu/ml)是2.29和2.15;吸先度值是0.137和0.138.扫描电镜下,对照组的细菌分布较均匀、密集;实验组的细菌分布不均匀、密集.结论 甲壳素对形成7 d的大肠埃希茼生物被膜不具有抑制作用.
作者：胡全树；王彦荣；张丽娟；赵建宏 刊期： 2010年第02期
目的 研究原发性胆汁性肝硬化患者外用血单个核细胞TNFSF9的表达及其临床意义.方法 以40例健康人群作为对照,采用定量逆转录PCR检测40例原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞TNFSF9的表迭水平,血清中sTNFSF9的水平,并进一步分析其与Mayo评分的相关性.结果 原发挂胆汁挂肝硬化患者外周血TNFSF9的表达在蛋白水平(1 107.00±436.12)显著高于健康对照组(122.70±62.81);TNFSF9 mRNA水平(4.96±0.39)也较健康对照组(1.04±0.22)高,且均与Mayo评分呈负相关(rs=-0.327,P=0.041;rs=-0.400,P=0.013).结论 TNFSF9可能参与了原发性胆汁性肝硬化的发病机制,是潜在的治疗靶点之一.
作者：王淇泓；周晔；胡志德；王爱华；竺蓓；邓安梅；仲人前 刊期： 2010年第02期
粪便常规检查对于肠道疾病和寄生虫病有很大的诊断意义,目前仍是我国绝大多数医院住院患者初诊必须检查的三大常规项目之一.粪便常规检查主要包括粪便的外观检查和显微镜检查,外观检查主要包括粪便的颜色、性状检查,显微镜检查主要包括粪便的红白细胞及寄生虫检查.
作者：包广杰；兰忠诚 刊期： 2010年第02期
目的 通过检测急性白血病(Acute Leukemia,AL)患者外周血中T细胞亚群来了解初发患者的免疫功能,同时结合细胞遗传学的变化进一步探讨白血病发生、发展及转归与细胞免疲的关系.方法 采用多参数流式细胞术分析172例初发急性白血病患者T细胞亚群,以CD4/CD8＜1为比例倒置;常规染色体核型结合荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测分析有元核型异常.结果 所有患者中共有118例(68.6%)出现CD4/CD8比例倒置,CD4/CD8平均表达率在患者组为0.99±0.6,在对照组为1.9±0.5,两者差异有明显统计学意义(P=0.005);根据遗传学特征将急非淋(ANLL)和急淋(ALL)分成3组:预后良好组、预后中等组、预后较差组,CD4/CD8在预后良好组和预后中等组差异无明显统计学意义(P=0.629),预后良好组和预后较差组,以及预后中等组和预后较差组差异均有明显统计学意义(P=0.000,P=0.005);CD4/cD8比值在不同年龄组差异无明显统计学意义(P=0.591).结论 CD4/cD8比例倒置直接导致免疫功能的紊乱,影响机体的肿瘤免疫效应.细胞遗传学检查被认为是AL重要的预后相关指标,伴染色体核型高度异质性的患者免疫监视功能更为低下,该类患者肿瘤细胞更易适脱免疫监视而加速肿瘤的发生与发展,如能充分了解患者淋巴细胞亚群和功能,以进一步了解患者免疫状态,对临床个体化治疗有积极地指导作用.
作者：李辉；吴雨洁；仇海荣；胡荣连；潘世扬 刊期： 2010年第02期
我科于2004年购进Elecsys2010电化学发光全自动免疫分析仅.该机测试速度快、准确度高、重复性好、检测线性范围宽;脂血、溶血、高胆红素等均不影响测定结果,为临床标本检测甲状腺功能、性激素、肿瘤标志物等指标提供了很好的方法.
作者：芮桥安 刊期： 2010年第02期
目的 为推动国内新生儿苯丙嗣尿症(PKU)筛查技术的发展和新生儿PKU筛查的普及,自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统,并对自建系统进行基本的分析性能进行评价.方法 参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件和相关文献,以labsystems配套检测系统作为可溯源参比系统,对自建系统的精密度、灵敏度、线性进行评价,并用临床样本进行比对试验和偏倚评估,回归相关系数大于0.975,偏倚以中国卫生部临检中心苯丙氨酸室间质评的1/4允许系统误差(靶值±30%)作为检测系统可比性的临床接受标准;通过检测1 353例正常新生儿样本,建立参考值,并对引用参考值进行确认.结果 自建检测系统分析内、分析间不精密度均小于15%;检测灵敏度为0.55 mg/dl;在1.00～15.00 mg/dl内,回归系数r=0.999 1;与参比系统比对试验回归方程为Y(自建)=1.007 8X(参比)-0.041 6,r=0.998 7,相对偏倚小于7.50%.参考值可以直接引用2.00 mg/dl作为切值判断.结论 自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的基本性能可以满足临床需要,值得推广应用.
作者：谭玉华；刘海平；张正武；卢顺舵；吴木清；彭中华；朱延彬；吴道贫 刊期： 2010年第02期
目的 建立不同程度家兔非酒精性脂肪肝模型,观察血生化指标及CT与非酒精性脂肪肝程度的关系.方法 选用32只新西兰家兔,随机分为对照组(n=8)和模型组三组(每组n=8),采用高腊高糖饲料建立不同程度脂肪肝模型,分别于4,6,8 w行家兔血清TG,TC,AST,ALT及CT检查,并进行病理学检查.结果 高脂高糖饲料哏养4 w后可形成轻度的脂肪肝并出现血脂的升高,血清TG和TC水平及肝/竖眷肌密度比率存在组间差异,血清TG和TC与肝/竖眷肌密度比率呈负相关.结论 血生化、CT检查对脂肪肝有一定的诊断价值.
作者：李明霞；任伯绪；王昌富 刊期： 2010年第02期
慢性HBV感染者低浓度HBsAg持续存在已引起临床实验室及分子生物学专家的重视和关注,该文就低浓度HB-sAg人群的临床特点、分子生物学及流行病学新研究进展进行综述.
作者：成军；孙长贵；陈瑜 刊期： 2010年第02期
目的 了解广州地区大肠埃希菌株qnrB基因的存在情况及其与细菌耐药的关系.方法 收集广州地区临床分离的300株大肠埃希茼,PCR法对300株茼进行qnrB基因检测,K-B法进行药敏试验检测,X2检验进行统计学分析,P＜0.05被认为有差异.接合试验验证qnrB的转移性.结果 300株大肠埃希菌有16株检出qnrB基因,检出丰为5.33%,阳性菌对两种喹诺嗣药物均耐药且有14株同时为ESBLs阳性.结论 大肠埃希茼中存在qnrB基因的流行,携带qnrB基因的16株细菌对左氧氟沙星和环丙沙星均耐药,且多数与ESBLs基因共存.
作者：陈文科；周强；张文 刊期： 2010年第02期
目的 检测粪肠球菌对氟喹诺酮类药物的敏感性,探讨Ⅱ型拓扑异构酶基因突变与耐氟喹诺酮类药物的关系.方法 用二倍琼脂稀释法检测6种氟喹诺酮类药物对60株粪肠球菌临床分离株的体外抗菌活性,随机筛选出11株对环丙沙星不同程度耐药菌,PCR扩增gyrA,gyrB,parC,parE基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR),产物测序后分析.结果 6种药物的相对抗粪肠球菌活性(MIC50,MIC90)从强到弱为:妥舒沙星＞加替沙星,司帕沙星＞左氧氟沙星＞氧氟沙星,环丙沙星;以妥舒沙星抗菌活性强,氧氟沙星和环丙沙星抗菌活性差;序列比较发现,有9株耐药株Ⅱ型拓扑异构酶基因发生突变,突变发生在gyrA基因(6株)和parC基因(9株),其中编码gyrA的Ser83→Ile,Arg和编码parC的Ser80→Ile,Arg的密码子表现出高频突变,gyrB和parE编码的氨基酸序列没有改变;未发现gyrA突变单独存在,同时具gyrA和parC突变的MIC值是仅具parC突变菌株MIC值的4倍以上.结论 氟喹诺酮类抗菌药新品种妥舒沙星、加替沙星和司帕沙星的抗粪肠球菌活性较老一代药物更强;粪肠球菌对老一代氟喹诺酮类药物存在不同程度的耐药;gyrA基因83,87位突变及parC基因80,84位突变都可引起粪肠球菌对氟喹诺酮类药物产生耐药,但以parC基因80住突变为主;低耐药株往往是parC基因单位点突变,高耐药株同时合并有gyrA基因双位点突变.
作者：唐曼娟；杨祚升；蔡恒玲 刊期： 2010年第02期
痛风性关节炎是由于嘌呤代谢紊乱而造成血尿酸升高所引起的一组病证,是骨与关节的常见病.
作者：刘伯让；扬喆；薛彩霞 刊期： 2010年第02期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
