邹玉涵；朱祖怀；闫佩毅；朱元；黄德魁；朱晴晖；金姝
目的 制备HBV-DNA荧光定量PCR检测质控物,评价其稳定性.方法 收集HBV-DNA阳性新鲜血清及HBV-DNA阴性新鲜血清,去除其他阳性指标(HAV-Ab,HCV-Ab,HIV-Ab和梅毒抗体)的标本后,分别充分混合,使用HBV-DNA阴性混合血清将HBV-DNA 阳性混合血清稀释至一定浓度后,灭活、分装,随机分为5组,即A,B,C,D和E组.A组:立即在佳条件下和常规条件下,应用HBV-DNA荧光实时定量PCR 检测试剂盒分别检测20次;B组:放置4℃冰箱48h后检测;C组:放置4℃冰箱48 h后,再置-20℃冷冻24h后复融检测;D组:在满足C组条件后,置-20℃冰箱冷冻24h后二次复融检测;E组:置-20℃保存12个月复融后检测.各组质控物均在常规条件下检测20次,分别计算各组均值的对数值、标准差和变异系数.结果 A,B,C,D,E组HBV-DNA质控物均值的对数值分别为4.611,4.590,4.600,4.638和4.571,经方差分析F=2.32＜F0.05(4,95)2.47,P＞0.05,均值的对数值之间差异无统计学显著性意义;标准差分别为0.211,0.198,0.221,0.191和0.214;变异系数分别为4.5%,4.3%,4.8%,4.1%和4.6%,标准差、变异系数之间差异很小.结论 HBV-DNA质控物制备简单,稳定性良好,适合临床检验中心进行室间质评(EQA)或现场EQA.
作者：邓演超；李全双；沈红艳；徐湛；任思坡 刊期： 2012年第05期
目的 分析迈瑞BS-420全自动生化分析仪测试项目间的试剂携带污染及其规避措施.方法 除脂肪酶为强盛生物试剂外,余均采用迈瑞试剂,根据方法学原理和试剂成分将常规生化检验项目分为六组,各组分别选择几对疑似污染物和被污染物,按照B,A,B,B,B的测试顺序测定(A为疑似污染物,B为被污染物),观察A对B的影响,B值在偏倚允许范围内为影响不显著,否则为影响显著,P值>0.05表示A测试对B测试的差异影响无统计学意义,P值<0.05表示A测试对B测试的影响差异有统计学意义.结果 CK(肌酸激酶,creatine kinase)(A)→Mg(镁,magnesium)(B)偏倚率50%,P<0.05;Lip(脂肪酶,Lipase)(A)→TBA(总胆汁酸,total bile acid)(B)偏倚率338%,P<0.05;TG(三酰甘油,triglyceride)(A)→Lip(B)偏倚率80%,P<0.05;余偏倚率均在4%以下,P值均＞0.05.结论 ①测试试剂中含有高浓度(10倍以上)的另一测试待测成分时对该一测试结果影响显著,6倍以下影响微小;②其余影响可以忽略不计.在日常工作中,合理设置测试顺序,经常注意保养维护仪器,保证各清洗功能良好,是保证分析结果可靠必不可少的一部分.
作者：宋国军；张军阳 刊期： 2012年第05期
目的 利用重组白念珠菌果糖二磷酸醛缩酶(fructose-bisphosphate aldolase,Fba1)抗原,建立测定人血清中抗白念珠菌Fba1 IgG抗体的ELISA法,评估其在侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)诊断中的应用价值.方法 收集经血培养确诊的各类IC患者(110例)、念珠菌定植者(50例)、细菌感染者(147例)及健康体检者(200例)血清,用重组Fba1包被ELISA微孔板,测定血清中的抗Fba1抗体,确定cut off 值并对方法的精密度和特异度进行考察.结果 以重组Fba1抗原建立的ELISA法精密度良好,批内变异系数(coefficient of variation,CV)=1.81%,批间CV=14.85%;阻断率=88.8%,证实此法对抗白念珠菌Fba1抗体具有特异性.依据ROC曲线,选择吸光度(absorbance,A)值0.61作为cut-off值.IC患者阳性率为74.5%(82/110),念珠菌定植患者阳性率为12% (6/50),二者差异有统计学意义(χ2=7.8,P<0.01);健康体检者及细菌感染患者的抗体检出与IC患者相比,差异有统计学意义(P均<0.001).结论 建立了检测抗白念珠菌Fba1抗体的ELISA法,在IC早期诊断中具有潜在应用价值.
作者：王颖；陆静芬；李芳秋；史利宁；黄梅；王卫萍；邵海枫 刊期： 2012年第05期
microRNA(以下简称miRNA)是一类长约22个核苷酸的内源性非编码单链小RNA分子,通过与靶mRNA的3' UTR端(非翻译区)互补匹配,在转录水平对基因表达进行负向调控,导致mRNA翻译抑制或降解.在基因调控的研究中,大量使用miRNA,其主要的工具是miRNA的表达载体.miRNA真核表达载体广泛运用于各种生物体内基因的功能研究,该文就近年来miRNA载体构建方法给予综述,为各种基因功能的进一步研究奠定基石.
作者：周琼芝；王玉明；段勇 刊期： 2012年第05期
目的 检测IL-35在结核患者肺泡灌洗液中的表达.方法 80例诊断为进展期肺结核患者全部采用支气管镜检查,收集肺泡灌洗液和外周血,淋巴细胞分离液分离其中的单个核细胞,经50 μg灭活的结核杆菌提取物刺激36 h后,采用ELISA方法检测结核患者肺泡灌洗液中单个核细胞分泌细胞因子IL-35的水平,实时荧光定量PCR方法检测IL-35的两个亚单位IL-12a和EBI3的mRNA水平,Western blot检测IL-35的亚单位EBI3的蛋白表达水平;多色流式细胞术检测细胞调节性T淋巴细胞水平.结果 进展期结核患者肺泡灌洗液中单个核细胞培养上清中IL-35的水平是76.6±20.1 pg/ml,显著高于患者的外周血(t=23.07,P<0.01),Western blot能够检测到肺泡灌洗液单个核细胞培养上清中EBI3的条带,而外周血培养上清中未能检测到.IL-12a的mRNA水平较外周血增高约6倍(t=18.02,P<0.01),EBI3的水平较外周血增高约9倍(t=17.85,P<0.01).肺泡灌洗液中Treg细胞的比例(12.6%±3.3%)显著高于外周血(4.2%±1.8%),(t=12.24,P<0.01).肺泡灌洗液中Treg细胞表达EBI3的水平显著高于外周血Treg.结论 进展期肺结核患者肺泡灌洗液中单个核细胞(主要是Treg)分泌表达IL-35,IL-35可能在结核患者的细胞免疫中起到调节作用.
作者：丁春梅；张军；胡成进 刊期： 2012年第05期
目的 探讨影响糖化血红蛋白(HbA1c)测定的影响因素.方法 同时用4种临床常用真空抗凝管空腹采集38例糖尿病患者的静脉血,在HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪上测定不同保存条件、保存时间及用新鲜蒸馏水、生理盐水及5 g/dl葡萄糖水按1∶1稀释后的HbA1c水平.结果 EDTA-K2、肝素锂、枸橼酸钠1∶4和枸橼酸钠1∶9抗凝后的全血即时HbA1c水平分别为(8.37±2.43)%,(8.62±2.63)%,(8.78±2.53)%和(8.31±2.49)%,不同抗凝剂采血管间HbA1c水平无明显差异(P>0.05).4℃室温-20℃保存至72 h血中HbA1c水平差异无统计学显著性意义,但用新鲜蒸馏水、生理盐水及5 g/dl葡萄糖水按1∶1稀释后的HbA1c水平明显高于稀释前(P<0.05).结论 用患者近3日内的抗凝血检测HbA1c没有明显影响,临床一定要按规范程序采血,否则,标本稀释后检测HbA1c结果明显偏高.
作者：曹晶晶；彭俊华；殷瑞鹏；朱晓红；王正；常亚丽 刊期： 2012年第05期
目的 研制HPV(6/11),(16/18)型核酸质控品应用于实时荧光PCR检测分析的室内质量控制.方法 采用HPV(6/11)型和HPV(16/18)型荧光定量PCR诊断试剂盒,对患者的分泌物进行FQ-PCR检测.提取双阳性分泌物,经适当灭活后,将HPV(6/11),(16/18)型核酸模式的阳性混合标本经过回收、防腐、调剂及分装等流程,制成中、高值各3个批次的质控品,完成校准和比对试验.分别进行不少于6个月的室内质控检测,观察其稳定性,确定其靶值,计算s,CV,绘制质控图.结果 各批次质控品前6个月的HPV(6/11),(16/18)型核酸质控品相对稳定(P<0.05),质控物高低值的变异范围分别为1.99%和2.61%(CV<5%),批间差CV<10%,稳定性好.结论 HPV型模式的阳性混合标本制备定量检测的HPV(6/11),(16/18)型核酸质控品的稳定性好,可用于HPV(6/11),(16/18)型核酸荧光定量的PCR诊断的室内质量控制,测定结果能反应标本的真实性,有一定的临床实用价值.
作者：裴兵 刊期： 2012年第05期
目的 了解各种轻型珠蛋白生成障碍性贫血育龄妇女全血中Cu2+,Zn2+,Ca2+,Mg2+,Fe2+5种金属元素含量,为评价轻型珠蛋白生成障碍性贫血育龄妇女营养状况及孕前合理补充金属元素提供依据.方法 对2010年6月～2012年3月经基因诊断的52例静止型、68例标准型α珠蛋白生成障碍性贫血、42例β珠蛋白生成障碍性贫血杂合子育龄妇女以及80例健康育龄妇女全血的Cu2+,Zn2+,Ca2+,Mg2+,Fe2+含量通过原子吸收光谱法进行检测和统计学分析.结果 各珠蛋白生成障碍性贫血组间全血Fe2+含量差异无统计学意义(P>0.05),但均明显低于健康对照组(P<0.05);全血Cu2+,Ca2+,Mg2+各组间含量差异无统计学意义(P>0.05);全血Zn2+含量除标准型α珠蛋白生成障碍性贫血和β珠蛋白生成障碍性贫血杂合子组明显低于健康对照组(P<0.05)外,其余各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 轻型珠蛋白生成障碍性贫血育龄妇女相比于正常妇女更容易缺铁和缺锌,应加强全血Fe2+和Zn2+的营养监测与干预.
作者：冯瑶；黄钰君；赵旦；伍绍国 刊期： 2012年第05期
目的 探讨无锡地区乙型肝炎病毒基因型对阿德福韦酯抗病毒治疗效果的影响.方法 选取2010年5月～2012年4月无锡市第五人民医院就诊的148例慢性乙型肝炎患者.采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV DNA,时间分辨荧光免疫检测HBeAg,采用PCR荧光探针法检测HBV基因型.慢性乙型肝炎患者分为两组:B基因型组82例,C基因型组66例,分别给予阿德福韦酯抗病毒治疗,观察用药12,24,48周时HBV-DNA阴转率和HBeAg血清学转换率.结果 148例慢性乙型肝炎病毒感染者检出B基因型82例(55.4%),C基因型66例(44.6%),未发现混合型.阿德福韦酯抗病毒治疗12,24周时,B基因型组和C基因型组血清HBV DNA阴转率11.0%,10.6%和34.1%,31.8%,两组差异均无统计学意义(χ2=1.35,2.07,P>0.05);治疗48周时B基因型组、C基因型组血清HBV DNA阴转率42.7%和33.3%,差异有统计学意义(χ2=5.78,P<0.05).B基因型与C基因型者血清HBeAg转换率比较差异无统计学意义.结论 阿德福韦酯抗病毒治疗慢性乙型肝炎,感染B基因型者治疗效果优于感染C基因型者;血清HBeAg转换率与HBV基因型无明显关系.
作者：杨小娟；吴国荣 刊期： 2012年第05期
目的 评估化学发光法检测低水平乙型肝炎病毒表面抗原性能及临床价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测西安市中心医院2010年5月~2012年6月间门诊及住院的8 408例患者的乙型肝炎病毒表面抗原患者,初筛出少见模式标本438例,再次对初筛标本进行化学发光法检测,化学发光检测过程中采用乙型肝炎表面抗原低水平标准物质进行质量控制和性能评估,检出的低水平乙型肝炎表面抗原标本再进行中和确认试验.结果 438例初筛标本经化学发光法分23次不同批次检测出27例低水平HBsAg分布于4种乙型肝炎模式中,其中包含21例原ELISA检测为HBsAg阴性标本.测定中标准物质阳性符合率和阴性参考品符合率均为100%,化学发光法与ELISA法两者符合率为94.7%,化学发光法和ELISA法检测HBsAg的低灵敏度分别为0.1 μg/L,0.4 μg/L.结论 化学发光法产品性能指标符合临床要求.灵敏度高、特异性好的化学发光法联合酶联免疫吸附试验有助于低水平HBsAg的检出,对低水平HBsAg的人群的诊断、治疗、流行病学研究有重要意义.
作者：计玉仙；张志明；姜小建；肖改娥；马莹；舒放；姜立茹；王鑫；李雅 刊期： 2012年第05期
目的 观察分析73例病毒性肝炎引发肝硬化并发全血细胞减少患者的骨髓象变化情况并探讨其临床意义.方法 利用瑞氏染色法(Wright's staining)对73例肝硬化并发全血细胞减少患者的骨髓进行染色,在光学显微镜下进行骨髓有核细胞增生分级及分类计数.结果 在73例病毒性肝炎后肝硬化并发全血细胞减少患者的骨髓象中,骨髓增生极度活跃的5例,增生明显活跃的16例,增生活跃的44例,增生减低的8例;骨髓细胞分类主要表现为红细胞系的增生、粒细胞系和巨核细胞系的成熟障碍.结论 骨髓象分析是造血系统疾病的重要检测指标之一,病毒性肝炎所引发的肝硬化并发全血细胞减少患者的骨髓细胞学检查结果对于排除患者造血系统疾病及进一步临床诊疗具有极为重要的指导价值.
作者：李潇潇；洪炜；马海梅；孟昭扬；安晓霞；张贺秋；葛艳玲 刊期： 2012年第05期
目的 探讨多药耐药基因GST-πmRNA在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测53例新鲜胃癌组织标本(实验组)和15例正常胃黏膜组织(对照组)中GST-π基因的表达,并分析其表达与胃癌病理特征之间的关系.结果 ①53例胃癌组织中GST-πmRNA的表达(0.56±0.27)要高于15例正常胃黏膜组织的表达(0.18±0.13) (t=5.30,P<0.001).②GST-πmRNA的表达与胃癌的分化程度之间差异具有统计学意义(t=2.67,P=0.01),而与患者性别、肿瘤部位、大小之间、是否淋巴结转移差异无统计学显著性意义.结论 ①GST-πmRNA的高表达可能是胃癌产生多药耐药的机制之一;②GST-π的检测对临床制定化疗方案有一定指导意义.
作者：胡秀学；刘跃；王鹏；何月；李鑫；高波；杜娟 刊期： 2012年第05期
目的 探讨一种乳腺癌患者石蜡包埋组织乳腺癌组织DNA提取方法并进行验证.方法 选择无自溶、退变或组织结构不清、大片出血的70例10 ml/dl甲醛固定石蜡包埋乳腺癌组织,在避免交叉污染的情况下,经过TES溶液水浴脱蜡后,先后用PBS缓冲液(pH7.2)及无水、95 ml/dl,75 ml/dl浓度梯度的乙醇60℃温浴4 h;加入含蛋白酶K的裂解液56℃消化72 h后,酚氯仿法抽提DNA.通过聚合酶链反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度仪测定A260nm/A280nm值,分析所提取DNA的质量.结果 62例(88.57%)石蜡组织标本DNA获得成功提取,所得DNA样本A260nm/A280nm比值为1.78±0.16,采用此条件处理的样本可获得足够数量的完整DNA,抽提率高,可满足后续临床研究需要.结论 改进的石蜡包埋组织提取DNA方法简单、经济,是较理想的非试剂盒法石蜡包埋组织DNA提取方法.
作者：康毓芝；王永兴；杨宝珍；韩恩善 刊期： 2012年第05期
目的 分析两种不同原理的凝血仪检测PT和INR值的差异.方法 以Sysmex1500凝血仪为比对方法,Stago compact凝血仪为实验方法,检测50例体检健康者和患者新鲜血浆的PT和INR值,判断两个检测系统间测定结果的可比性.结果 两种不同原理的凝血仪PT值在11～16 s范围内,PT值的相对偏倚(SE%)分别为6.2%和7.3%,INR值在1.5处的相对偏倚为4.3%,＜1/2允许误差;但在医学决定水平20 s处PT值的相对偏倚(SE%)为7.8%,INR值在3.0处的相对偏倚为14.4%,＞1/2允许误差,偏倚不能接受.结论 实验室应定期对凝血仪的分析性能进行评估并建立不同原理凝血仪的参考值范围,好对来自临床不同科室的样本固定仪器检测,以免两仪器间的结果不同而误导临床诊断治疗.
作者：李芒会；李亚娥 刊期： 2012年第05期
目的 评价两种血清降钙素原定量检测系统性能,为实验室合理选择降钙素原检测系统提供依据.方法 参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件EP9-A2收集血清标本测定批内精密度、线性、相关系数.结果 检测系统A和检测系统B的低中高值测定结果的批内精密度分别为1.01%～4.44%和1.11%～8.77%之间;PCT测定结果相关系数为0.997 7.结论 两种检测系统降钙素原的检测结果具有较高的稳定性和相关性,但存在一定的偏差,临床实验室可根据需要选择不同的检测系统.
作者：汪丽儿 刊期： 2012年第05期
目的 比较糖化清蛋白(GA)和糖化血红蛋白(HbA1c)在糖尿病早期诊断中的应用价值.方法 选择324例疑似糖尿病患者,应用WHO诊断标准并通过绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),分析比较HbA1c和GA的诊断糖尿病佳切点及敏感度和特异度.结果 GA的ROC曲线佳切点为17.02%,敏感度63.2%,特异度95.6%,曲线下面积0.856;HbA1c的ROC曲线佳切点为6.48%,敏感度60.5%,特异度83.7%,曲线下面积0.772.结论 GA可作为一个准确反映糖尿病患者近期血糖代谢情况的指标,对早期诊断糖尿病、指导糖尿病的治疗有较大意义.
作者：刘常同；黄萍 刊期： 2012年第05期
目的 探讨成人2型糖尿病患者中无症状性菌尿(asymptomatic bacteriuria,ASB)的患病率及相关危险因素.方法 前瞻性入选2010年9月～2011年12月在北京天坛医院门诊就诊的114名成人2型糖尿病患者,平均年龄57.7±10.21岁,采集年龄、体质指数(BMI)、糖尿病病程、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖、尿细菌计数、肾小球过滤率(Ccr)和24 h尿蛋白定量等资料.114例患者分为2组,ASB阳性组(n=30)和ASB阴性组(n=84).计量资料采用t检验进行比较,计数资料采用χ2检验比较,多因素分析采用Logistic多元回归分析.结果 入选病例中,ASB的患病率是26.32%(30/114),ASB常见病原菌为大肠埃希菌.单因素分析结果显示,两组间年龄(56.4±10.3岁 vs 60.3±9.6岁,t=-1.74,P=0.080),BMI(24.6±3.4 kg/m2 vs 25.0±4.0 kg/m2,t=-0.50,P=0.723),Ccr(87.03±37.8 ml/min vs 77.6±31.5 ml/min,t=1.18,P=0.242)及24 h尿蛋白定量(420.3±104.2 mg vs 452.7±101.3 mg,t=1.41,P=0.171)差异均无统计学意义.两组间HbA1c[(7.7±1.4)% vs (8.4±1.6)%,t=-2.15,P=0.032],糖尿病病程(7.1±8.2 年 vs 11.4±8.5年,t=2.33,P=0.022),空腹血糖(9.5±3.8 mmol/L vs 12.2±5.6 mmol/L,t=-2.73,P=0.007)和尿细菌计数(1 470.4±1 690/μl vs 2 765.4±2 458/μl,χ2=-2.96,P=0.038)差异有统计学意义.以糖尿病是否并发ASB为二分类因变量,入选年龄,BMI,糖尿病病程,HbA1c,空腹血糖,尿细菌计数,Ccr和24 h尿蛋白定量为自变量进行多元Logistic回归分析,结果显示,成人2型糖尿病患者并发ASB的危险因素包括:糖尿病病程[OR=1.23(1.11,1.36),P=0.013],HbA1c[OR=1.54(1.41,1.71),P=0.011]、空腹血糖[OR=1.36(1.24,1.49),P=0.017]、尿细菌计数根据不同计数值分段分析[OR=1.78(1.69,1.90),OR=1.83(1.73,1.97),OR=2.01(1.82,2.11),OR=2.23(2.06,2.26),OR=2.32(2.10,2.43),P均＜0.001]差异有统计学意义.结论 糖尿病病程、高HbA1c、高血糖、尿细菌计数可能是成人2型糖尿病并发ASB的危险因素.
作者：赵轶雯；史振伟 刊期： 2012年第05期
目的 对家兔多次间断大量采血方法进行优化,以提高采血的成功率.方法 家兔50只,均为雄性,每只体重3～3.5 kg,随机分为常规组和优化组,每组25只,每间隔1周采血1次,共采血4次,每次采血量30 ml,取血部位为耳中央动脉.常规组运用30 ml注射器采血,取耳中央动脉采血.优化组利用30 ml注射器去掉针头与7号头皮针连接的自制采血器采血,其余方法相同.计录采血成功的次数,计算两组采血成功率,行卡方检验,运用SPSS14.0软件进行统计学分析.结果 常规组和优化组的家兔分别采血100次,常规组仅12次采血量可达30 ml,采血成功率为12%,其余采血量5～20 ml不等;优化组有98次采血量可达到30 ml,成功率为98%,两组数据行卡方检验,优化组与常规组比较差异有统计学意义(χ2=145.96,P＜0.01).同时,优化组采血时间缩短且很少有刺穿家兔血管情况发生.结论 运用自制采血器采血的成功率明显优于直接运用注射器采血.
作者：王庆美；任思坡；耿跃春 刊期： 2012年第05期
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者检测抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)的意义.方法 选取COPD急性加重期患者80例,COPD急性缓解期患者75例,以及100例健康人群.PT和TT检测采用全自动血凝仪,FDP检测采用ELISA法,AT-Ⅲ采用免疫浊度法测定.结果 对照组和COPD各分期组间的PT和TT指标差异无统计学显著性意义(P>0.05),COPD急性加重期患者的FDP水平与缓解期患者相比差异无统计学显著性意义(P>0.05).而两组AT-Ⅲ水平比较差异有统计学显著性意义(P<0.05).结论 AT-Ⅲ可作为COPD急性加重期患者凝血功能是否异常的常规检测指标之一.
作者：廖洪利；蒋小丽；田刚 刊期： 2012年第05期
由于血型抗原、抗体的复杂性,以及多次妊娠、母婴血型不合等因素导致发生新生儿溶血病可引起流产、早产、胎儿水肿、死胎、新生儿贫血、黄疸、胆红素脑病,严重影响新生儿生存质量.ABO血型系统引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病时有报道,但Rh血型系统和其他血型系统引起的新生儿溶血性疾病较少.近我们发现抗-E抗体引起的重症新生儿溶血病一例,随后进行换血治疗,效果显著,现报告如下.
作者：李凤春；夏爱军；张秋会；张献清 刊期： 2012年第05期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
