田甜；王金良
目的 运用PCR-RFLP快速准确鉴定临床常见致病性念珠菌.方法 收集四川省人民医院2008年11月～12月临床分离的念珠菌169例,提取念珠菌DNA,采用PCR扩增核糖体DNA内部转录间隔区(ITS1-5.8S-ITS2),扩增产物运用Sty I和MspI酶切分析,确定临床常见致病性念珠菌种类.结果 白色念珠菌、都柏林念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌均扩增出长度约500 bp的DNA片段,光滑念珠菌扩增出长度约881 bp的DNA片段.扩增产物经Msp I酶切后产生四种不同的带型,其中白色念珠菌和都柏林念珠菌带型一致.将白色念珠菌和都柏林念珠菌用Sty I酶切进行鉴定.PCR-RFLP分析显示,169株临床分离念珠菌中,111株为白色念珠菌,32株为热带念珠菌,19株为光滑念珠菌,7株为克柔念珠菌.结论 PCR-RFLP方法能准确快速检测和鉴定出临床常见的致病性念珠菌,为念珠菌病分子诊断奠定了基础.
作者：杨永长；刘华；喻华；肖代雯；姜伟；杜琼；黄文芳 刊期： 2014年第01期
目的 评价核酸吸附材料及配套系列核酸分离试剂,与国外同类试剂盒及传统方法提取核酸结果的比较,探讨其替代国外同类产品的可行性.方法 将核酸吸附法、传统法及国外三种试剂盒分为5组(A,B,C,D,E)进行比较,每组分别从细胞、细菌、血液、植物中提取DNA和RNA,采用紫外分光光度法检测浓度,以吸光度A值检测样品纯度,凝胶电泳法检测核酸完整性.结果 DNA含量:A组14.073±0.033 μg/ml,B组4.31±0.041 μg/ml,C组14.325±0.030 μg/ml,D组13.876±0.023 μg/ml,E组12.654±0.012 μg/ml,A组与B组相比差异有统计学意义(t=11.175,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=0.014,P=0.989;t=-0.525,P=0.627;t=0.453,P=0.674).RNA含量:A组287.740±0.036 μg/ml,B组32.121±0.055 μg/ml,C组285.12±0.027 μg/ml,D组276.10±0.034 μg/ml,E组264.36±0.071 μg/ml,A组与B组相比差异有统计学意义(t=29.284,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=-0.22,P=0.836;t=-0.825,P=0.456;t=0.474,P=0.66).DNA纯度;A组1.828±0.016,B组1.201±0.013,C组1.836±0.022,D组1.819±0.014,E组1.796±0.025,A组与B组相比差异有统计学意义(t=7.448,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=-0.099,P=0.926;t=0.111,P=0.917;t=-0.833,P=0.452).RNA纯度:A组1.952±0.021,B组1.331±0.017,C组1.950±0.018,D组1.947±0.026,E组1.879±0.034,A组B组相比差异有统计学意义(t=8.755,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=0.024,P=0.982;t=0.061,P=0.954;t=1.434,P=0.225).A组和C,D,E组提取的核酸无降解,完整性好.B组核酸出现降解现象,完整性差.结论 核酸吸附分离法较传统法简单快速,提取的核酸纯度高、产量高,不使用酚-氯仿有机溶剂,与国外同类试剂盒效果相当,为替代国外同类产品及实现技术原始创新奠定了实验基础.
作者：饶国洲；石建峰；李昂；魏虹；苟建重；周洪；李晓红 刊期： 2014年第01期
目的 评估心肌损伤标志物肌酸激酶-MB(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白-T(cTnT)和肌钙蛋白-I(cTnI)四个检测项目的性能.方法 收集2012年4月全国临床实验室心肌损伤标志物的室间质量评价(EQA)和室内质量控制(IQC)数据,用EQA数据评估偏倚,IQC数据(变异系数,CV)评估不精密度水平,引入我国目前的EQA评价标准和基于生物学变异的质量规范,并通过公式σ=(TEa-bias)/CV计算各检测项目的西格玛(d)度量值.结果 参加实验室数量CK-MB 165家,Mb 239家,cTnI 199家和cTnT 75家,对于不精密度水平的评估,无论何种质量规范,cTnI项目的合格率都比其他项目低.对于σ度量值,CK-MB,Mb和cTnT项目大部分实验室的d水平均在3～6之间,且σ＞6的实验室均大于20％.而cTnI项目约有50％的实验室的σ水平在0～3之间,且σ＞6的实验室比例小,只有7.98％.结论 6σ质量理论可以反映检测项目的性能.心肌损伤标志物中CK-MB,Mb和cTnT项目检测水平较好,cTnI项目的检测水平还有待提高.
作者：肖亚玲；王薇；王治国 刊期： 2014年第01期
目的 比较ELISA法和化学发光法检测血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体对RA患者的诊断价值和临床适用性.方法 收集南京军区南京总医院住院患者和体检健康者血清151例,同时使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学发光法检测待测样本中抗CCP抗体含量,评价两种方法检测结果的相关性及对临床诊断的有效性.结果 两方法检测RA组血清抗CCP抗体含量均显著高于非RA组(P均＜0.01);ELISA和化学发光法的敏感度、特异度和诊断一致性分别为78.6％,89.5％,85.4％和76.8％,94.7％,88.1％;两方法间比较r=0.885,P=0.07＞0.05,方法间无显著性差异;ELISA和化学发光法ROC曲线下面积分别是0.97和0.933.结论 血清抗CCP抗体检测对RA患者具有较高的诊断价值,ELISA和化学发光法检测抗CCP抗体符合率良好,方法学之间无统计学差异.
作者：刘国瑞；常林；郑田；严孝岭；王艾丽；虞伟 刊期： 2014年第01期
OLYMPUS AU54OO是日本OLYMPUS公司生产的全自动生化仪,采用双加样、双圈比色杯模式,具有速度快、精密度高等优点,每小时完成4 100个测试(包括电解质).在使用过程中,也经常会出现结果报警和仪器报警的状况.我们通过实践中不断摸索,翻阅仪器说明书,并查阅一些文献资料[1～3],积累了一点经验,现总结如下.1 检验数据报警 ①检验数据“*”报警:可能试剂变质;可能清洗头堵塞,比色杯漫水;可能光源老化(一般340 nm波长检测的项目报警).②检验数据“@!”报警:一般出现在多点定标的项目.当检验项目吸光度超出该项目定标品大值的吸光度时,传到LIS的结果为1或2.此时需稀释标本后重测.③某日磷项目质控在控,但标本检测结果出现负值或很高的值:此情况系试剂瓶装载过满,试剂盘快速转动时产生气泡所致.
作者：孙亚楠；张帆；孙旦晖 刊期： 2014年第01期
目的 了解尿液分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子的分布情况及其结构特征.方法 收集2010年1月～2012年12月泌尿系感染患者尿液分离的288株大肠埃希菌和71株肺炎克雷伯菌.PCR方法扩增细菌的Ⅰ类整合酶和Ⅰ类整合子基因盒.Ⅰ类整合子基因盒的扩增产物分别用Hinf I和RasI进行酶切,相同类型酶切图谱的PCR产物随机挑取一例进行测序.测序结果在GenBank中用blastn进行核酸序列同源性分析.结果 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的Ⅰ类整合酶阳性率分别为51.7％和54.9％,基因盒的阳性率分别为35.4％和29.6％.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别含有9种和7种不同类型的基因盒.基因盒携带的耐药基因主要含有耐氨基糖苷类、甲氧苄啶和氯霉素.结论 Ⅰ类整合子在尿液分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌广泛存在,对细菌的耐药性播散有重要作用.
作者：魏云凤；于奇；吴奎海 刊期： 2014年第01期
目的 探讨乙型肝炎患者抗核抗体与免疫性肝病抗体检测的临床意义.方法 用间接免疫荧光与免疫印迹法检测内江市第二人民医院2012年9月～2013年1月慢性乙型肝炎(CHB) 95例和同期正常对照67例抗核抗体(ANA),nRNP/sm,sm,dsDNA,核糖体P蛋白,SSA,SSB和RO52,以及自身免疫性肝病相关自身抗体:抗平滑肌抗体(ASMA),抗肝肾微粒体抗体(LKM)与抗线粒体抗体M2.用定量PCR检测HBV-DNA与HBV基因分型;自动生化仪检测血清ALT与AST,放射免疫法检测肝脏纤维化指标.结果 ①CHB组ANA的阳性率为23.2％,与正常对照组(3.0％)比较差异具有统计学意义(x2 =6.85,P=0.001),以低滴度为主,核型以核颗粒型为主.②CHB组肝病相关抗体主要为ASMA,LKM和M2,对照组未发现此类抗体.③自身抗体阳性的CHB组(CHB自抗阳性)ALT,AST,病毒载量与HBV基因型分别为116.2 IU/L,86.3IU/L和4.8 IU/ml,HBV B型21/25,C型3/25,与自身抗体阴性的CHB组(CHB自抗阴性)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).④CHB自抗阳性组血清Ⅳ型前胶原,层黏连蛋白LN,透明质酸酶HA与CHB自抗阴性组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 乙型肝炎患者血清中存在抗核抗体与自身免疫性肝病抗体,这些自身抗体的存在与HBV含量与基因型没有关联,ANA与肝病相关抗体检测对乙型肝炎患者预后与转归有一定意义,可能是诱发乙肝后肝硬化的病因之一.
作者：汪永强；周振忠；李婷；袁平宗 刊期： 2014年第01期
目的 分析陕西省汉族孕龄妇女亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) C677T,A1298C和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR) A66G等叶酸代谢过程中相关酶基因多态性的分布特征.方法 以陕西省1 508例孕龄期汉族女性为对象,采用Taqman-MGB技术检测MTHFR C677T,A1298C和MTRR A66G基因型和等位基因频率,统计分析基因多态性的分布特征并与其它地区的数据进行比较.结果 陕西省汉族女性的MTHFR C677T纯合和杂合突变基因型频率分别为22.6％和16.5％,突变等位基因频率为30.9％,MTHFR A1298C纯合和杂合突变基因型频率分别为3.6％和60.5％,突变等位基因频率为33.8％,与已报道的其它地区相比,差异均有统计学意义(P＜0.01);MTRR A66G纯合突变基因型频率为6.1％,杂合突变基因型频率为39.5％,突变等位基因频率为25.9％,低于海南省(P＜0.01),与河南、山东和湖北省相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 陕西省汉族女性的MTHFR基因多态性分布与已报道的其它地区存在差异;MTRR基因多态性分布与河南、山东和湖北省相同,但不同于海南省.
作者：王飞霞；丁丽丽；邹爱民；陈宝兰 刊期： 2014年第01期
医学检验本科生的临床实践过程对于培养合格检验师是十分重要的.中南大学湘雅医院检验科运用多种方法将对医学检验本科学生临床实习教学加以改进,探讨如何培养适合临床需要的检验人才,以期在临床实习阶段把学生培养成为具有一定临床综合思维能力和创新能力的优秀检验人才,效果显著.
作者：王堃；易斌 刊期： 2014年第01期
急性胰腺炎是常见的急腹症之一,其重症患者的病死率较高.因其病理变化不同,导致临床表现差异大,给急性胰腺炎的诊断带来一定的困难.传统实验室检查项目是测定淀粉酶和脂肪酶,但两者均有局限性.近年来新型诊断标志物的研究取得进展.该文对此作一综述,并重点介绍新标志物-胰蛋白酶原-3.
作者：田甜；王金良 刊期： 2014年第01期
目的 探讨小空针低负压针吸细胞学对附睾肿瘤诊断的价值,并对其细胞学形态特征进行分析.方法 回顾性分析208例小空针低负压针吸细胞学检查附睾疾病且经组织病理活检、免疫组织化学及免疫学分型证实的临床资料.结果208例附睾肿块中,针吸细胞学直接诊断202例,诊断符合率97.12％,误诊率2.88％.结论 小空针低负压针吸细胞学检查附睾疾病的技术操作简便、对患者创伤小,获取标本满意,能够明显提高附睾疾病诊断的准确性,对临床早期诊断治疗具有重要的应用价值.
作者：肖波；陈万新 刊期： 2014年第01期
结核性胸腔积液是由结核分枝杆菌感染胸膜,使破裂的干酪样组织进入胸膜腔间隙所产生.目前对结核性胸腔积液的诊断主要通过抗酸染色和结核分枝杆菌的培养,但存在着阳性率低,培养周期长等问题.该文将从病原学、免疫学、分子诊断学和生物化学等领域,对实验室诊断胸腔积液的方法进行总结,评估新兴技术的可行性,为结核性胸腔积液的早期鉴别诊断提供临床参考.
作者：黄翔；陈晋 刊期： 2014年第01期
目的 评价自制甲氨蝶呤质控血清在均相酶免疫法测定血药浓度中的应用.方法 取注射用甲氨蝶呤5 mg,注射用水溶解后加入血清基质液,制备浓度分别为0.44,1.10,1.54 μmol/L的甲氨蝶呤质控血清,考察方法准确性、重复性、质控的稳定性以及临床应用.结果 自制低、中、高浓度的甲氨蝶呤质控血清检测结果为靶值的97.7％～99.1％,方法重复性RSD小于2％,-30℃保存90天含量变化小于2％.结论 自制甲氨蝶呤质控血清操作方法简单、成本低、结果准确可靠,-30℃保存90天可以作为实验室日常质控应用.
作者：马爱玲；赵宁民；赵红卫；张伟；秦玉花 刊期： 2014年第01期
目的 获得具有免疫反应性的人胱蛋白酶抑制剂C(Cys C)重组蛋白.方法 从Hela细胞提取总RNA,采用RTPCR扩增获得人Cys C基因片段,与质粒pET30a连接构建重组表达载体,转化大肠埃希菌Ecoli BL21 (DE3)并加入IPTG诱导表达,表达产物经凝胶层析复性和亲和层析纯化后,用间接ELISA检测纯化后的Cys C重组蛋白对重组Cys C免疫小鼠血清的免疫反应性.结果 成功构建了重组表达载体pET30a-CysC,诱导表达出约19 ku的重组蛋白,经复性纯化后获得纯度达90％以上的目的蛋白,与重组Cys C免疫小鼠血清具有良好的免疫反应性.结论 在原核系统成功表达了人Cys C重组蛋白,而且具有良好的免疫反应性.
作者：杜惠芬；付宝权；李克生；连晓雯；王春芽；徐杨；柴丹丹 刊期： 2014年第01期
目的 检测血浆和外周血单个核细胞(PBMC)中EB病毒(epstein-barr virus,EBV)与人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)DNA含量,以期为两种病原体的早期诊断与监测提供敏感、准确、及时的实验室结果,并为两种病原体感染的实验室诊断筛选出适宜的标本类型.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time-PCR)分别对270份血浆和外周血单个核细胞中EB病毒和HCMV病毒进行核酸检测并分析.结果 270份血浆和外周血单个核细胞中EBVDNA检出率分别是30％和96.7％,血浆和外周血单个核细胞两种类型标本检测EBV DNA的联合检出率为100％;血浆和外周血单个核细胞两种类型标本对HCMV DNA检出率分别是40％和86.7％,两种类型标本对HCMV DNA的联合检出率为100％.结论 外周血单个核细胞标本对EB病毒和HCMV的检出率明显高于血浆标本,血浆和单个核细胞两种类型标本对EBV DNA和HCMV DNA的联合检出率为100％.临床医生在疑似EBV和HCMV感染患者的诊疗中要选择适宜的标本类型,首选外周血单个核细胞标本进行检测,条件允许的情况下与血浆标本联合检测,以提高检测的敏感性和准确性.
作者：郭建巍；高毓蕊；田占月；陈昌国；王珍光；李文军；赵强元 刊期： 2014年第01期
目的 评价血清同型半胱氨酸(Hcy)水平在早期预防冠心病(CHD)发生的诊断价值.方法 选择240例冠心病患者作为实验组和210例健康人作为对照组,分别检测血清Hcy含量,比较分析实验组与对照组,实验组中不同年龄、不同性别的Hcy含量的水平差异,评价Hcy在早期预防冠心病发生中的临床应用.结果 实验组血清Hcy水平(20.1±7.9 μmol/L)高于对照组(13.1±3.6 μmol/L);实验组中60岁以上人员血清Hcy水平(20.5±7.8 μmol/L)高于60岁以下人员(17.9±8.6 μmol/L),男性人员血清Hcy水平(20.5±8.5 μmol/L)高于女性人员(17.8±6.7 μmol/L),各组间差异具有统计学显著性意义(t=11.81,2.543,2.697,P均＜0.01).结论 高Hcy血症是冠心病发生的高危因素,尤其是老年男性,定期监测血清Hcy水平并进行干预,对冠心病的早期预防具有较好的指导意义.
作者：滕毅；苏秋丽；王惠萱；贾雄飞；姜昌丽；田亚平 刊期： 2014年第01期
目的 探讨实验室检测突发性耳聋患者血清CRP和NO的含量评价红花黄色素联合长春西汀治疗该病的疗效.方法 将突发性耳聋患者74例(78耳)随机分为观察组37例(39耳)和对照组37例(39耳),常规治疗的基础上,观察组应用红花黄色素与长春西汀注射液,对照组单纯加用长春西汀注射液,疗程10天,观察疗效及不良反应.用免疫透射比浊法和硝酸还原酶法检测观察组、对照组治疗总有效和无效患者血清CRP和NOx的含量.结果 观察组治疗总有效与无效患者CRP和NOx的含量比较均差异有统计学意义(t=15.69,t=11.12,均P＜0.05).对照组治疗总有效与无效患者比较差异无统计学意义(t=0.95,t=1.35,均P＞0.05).观察组治疗总有效患者CRP含量明显比对照组治疗总有效患者降低,NOx含量明显升高,两者对应比较均差异有统计学意义(t=22.37,t=8.98,均P＜0.05).结论 红花黄色素联合长春西汀治疗突发性耳聋疗效更好,检测患者血清CRP和NOx可评估疗效.
作者：刘蕊；石磊；张良；田刚 刊期： 2014年第01期
目的 建立盐酸万古霉素在健康人体的药代快速分析方法.方法 20名中国健康受试者,男女各半,分别给予盐酸万古霉素1.0g静脉滴注,用HPLC法测定血药浓度;用DAS 2.1.1药代动力学程序计算药代动力学参数.结果 盐酸万古霉素的主要药代动力学参数:Cmax为(52.16±4.21)mg/L; t1/2β为(3.255±0.27)h;AUC00-∞为(148.116±18.25)h· mg/L;AUC0-t为(133.8±20.13)h·mg/L.结论 该方法适合快速分析的盐酸万古霉素药代动力学HPLC方法.
作者：任晓娟；陶霞 刊期： 2014年第01期
目的 探讨联合检测甲胎蛋白(AFP)、同型半胱氨酸(HCY)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)在原发性肝细胞癌(HCC)中的诊断价值.方法 共收集226例血清标本,其中原发性肝细胞癌(HCC)组患者血清99例,慢性肝病(慢肝)组70例,健康对照(对照)组57例;采用微粒子酶联免疫法、循环酶法和酶动力学法分别测定血清AFP,HCY和GGT浓度;SPSS统计学方法分析AFP,HCY和GGT及联合检测对HCC的诊断价值.结果 HCC组血清AFP,HCY和GGT的浓度明显高于慢肝组和对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).血清AFP,HCY和GGT诊断HCC受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)为AFP(0.823)＞HCY(0.803)＞GGT(0.775),诊断效能AFP＞ HCY＞ GGT.各指标单项检测时敏感度及准确度HCY＞ GGT＞ AFP,特异度AFP＞ HCY＞ GGT.AFP联合HCY与GGT,敏感度及特异度AFP+ HCY＞AFP+ GGT.三项指标联合检测敏感度明显升高(90.90％),但特异度下降明显(62.20％).结论 AFP,HCY和GGT两两联合和三项联合检测,优于AFP单项指标检测,可以显著提高HCC的阳性检出率.
作者：王颖；姜菲菲；王蕊；娄金丽 刊期： 2014年第01期
目的 了解IgM捕捉ELISA法在梅毒诊断中的临床应用价值.方法 采用IgM捕获ELISA(MacELISA)法和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)对2011年1月～2013年7月廊坊市第四人民医院临床确认的154例梅毒患者进行平行检测,以43例同期就诊的非梅毒患者作为对照组.结果 ①MacELISA法对二期梅毒和一期梅毒的检测阳性率分别为96.6％和90.9％,合并检测阳性率为94.1％(48/51),对潜伏梅毒的检测阳性率为31.4％,显著低于一期梅毒和二期梅毒(x2=13.75,P＜0.01).②MacELISA法与TPPA法对一期梅毒和二期梅毒的检测敏感度比较,差异无统计学意义(P＞0.05),对潜伏梅毒的检测敏感度比较,差异有统计学显著性意义(P＜0.01).两种方法的检测特异度均为100％.结论 MacELISA法检测梅毒螺旋体IgM抗体,敏感度高、特异度好、操作简单、成本低,可作为早期梅毒较为理想的检测方法.
作者：李冬梅；宋雪冬；宋任浩 刊期： 2014年第01期
现代检验医学杂志
主管:陕西省卫生厅
主办：陕西省临床检验中心,陕西省人民医院
