巨涛;宋波;刘文刚;岳新鹏;李鲁;刘增强
目的 研究尿α1-微球蛋白(α1-MG)和尿激肽原1(KNG1)水平在单纯性2型糖尿病与糖尿病肾病患者中的表达变化情况.方法 选取2016年9月~2017年3月在宁夏医科大学总医院住院的糖尿病肾病患者34例作为实验组(DN组)以及同时期单纯性2型糖尿病患者32例作为对照组(DM组),其中,DN组包括甲组(HbAlc< 10%) 19例和乙组(HbAlc≥10%)15例.测定尿α1 MG和尿KNG1及各项生化指标.结果 与DM组相比,尿α1 MG在DN组下降(t=9.972,P<0.01),尿KNG1在DN组升高(t=-3.356,P<0.01),差异均具有统计学意义;DN乙组尿α1-MG、血清GLU水平均高于DN甲组(t=-2.092,-3.464,均P<0.05),DN乙组血清Cr水平低于DN甲组,差异具有统计学意义(t=2.181,P<0.05);此外,在DN组,根据Pearson相关分析显示,尿α1-MG与HbAlc,尿KNG1呈正相关(r=0.33和0.355,均P<0.05),其它未见明显相关.结论 尿α1-MG和KNG1的表达在DN的发生发展中存在一定的变化规律,可为DN的临床诊断提供依据.
作者:于菲菲;庞白冰;杨华;廖国玲 刊期: 2017年第05期
目的 探讨骨髓中蛋白细胞周期激酶抑制剂1C(CDKN1C)的表达在骨髓增生异常综合征(MDS)和继发性急性髓系白血病(AML)患者中检测的临床意义.方法 选取125例MDS/AML患者作为研究对象,同时选取20例健康人群作为健康对照组,分析MDS/AML患者骨髓CD34+细胞中CDKN1C mRNA和蛋白表达水平,比较不同CDKN1C的表达水平MDS患者生存率,采用Cox回归分析MDS和AML患者生存率影响因素,并分析治疗方法对不同CDKN1C的表达水平MDS患者生存率的影响.结果 MDS/AML患者骨髓CD34+细胞中CDKN1C mRNA和蛋白表达水平显著高于健康对照组(t=5.324,7.326,P=0.002,0.000),且与BM计数呈正相关(r-2.014,P=0.004);CDKN1C高表达水平组患者的生存率显著低于CDKN1C低表达水平组和CDKN1C中表达水平组(P<0.05);Cox回归分析结果显示高龄、高BM计数、细胞遗传学风险差以及CDKN1C阳性显著影响MDS/AML患者生存率(95%CI=1.10~1.32,1.92~4.40,1.18~2.67,1.03~2.32,P=0.034~0.000);MDS/AML化疗的CDKN1C阳性表达组患者生存率显著低于CDKN1C阴性表达组患者(t=5.314,P=0.002).结论 MDS/AML患者骨髓中CDKN1C的表达显著增高,CDKN1C高表达显著影响化疗MDS/AML患者的生存率.
作者:付晓英;李光;靳延利 刊期: 2017年第05期
目的 了解深圳地区健康育龄妇女血清中抗苗勒氏管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)水平现况,并探讨其在多囊卵巢综合征(PCOS)和卵巢早衰(POF)诊疗中的价值.方法 收集2016年1月~2017年3月来深圳市宝安区人民医院体检的健康育龄妇女860例为对照组,并选择同期就诊的PCOS患者59例和POF患者61例,采用DXI800化学发光分析仪分别检测对照组、PCOS和POF组患者治疗前及治疗3个月后血清中AMH水平,并对检测结果进行统计分析.结果 健康育龄妇女血清中AMH水平为4.91±1.56 ng/ml,其中18~25岁组为5.38±1.27 ng/ml,31~35岁组和36~42岁组分别为4.53±1.40 ng/ml和3.95±1.16 ng/ml,明显低于18~25岁组,差异有统计学意义(t=3.082,5.066,均P<0.05),而26~30岁组为5.09±1.45 ng/ml,与18~25岁组之间差异无统计学意义(t=0.892,P>0.05).治疗前,PCOS患者血清中AMH水平为10.13±3.85 ng/ml,明显高于对照组,差异有统计学意义(t=13.924,P<0.01),而POF组和围POF组患者血清中AMH水平分别为1.04±0.37 ng/ml和2.39±0.87 ng/ml,明显低于对照组,差异有统计学意义(t=10.913,8.042,均P<0.05),且POF组低于围POF组,差异有统计学意义(t=2.875,P<0.05).治疗后,PCOS患者血清中AMH水平为5.22±1.58 ng/ml,明显低于治疗前,差异有统计学意义(t=11.106,P<0.05),而与对照组之间差异无统计学意义(t=1.036,P>0.05),POF组和围POF组患者血清中AMH分别为4.49±1.32ng/ml和4.54±1.47 ng/ml,明显高于治疗前,差异有统计学意义(t=9.608,7.253,均P<0.05),而与对照组之间差异均无统计学意义(t=1.209,0.918,均P>0.05).结论 治疗前,PCOS患者血清中AMH水平明显升高,POF和围POF患者血清中明显降低,而治疗后p-COS,POF和围POF患者血清中AMH水平均恢复正常.因此,AMH在PCOS和POF疾病诊疗中具有一定的应用价值,值得推广应用.
作者:袁利;程明刚;刘香萍;徐羽中;李小永 刊期: 2017年第05期
目的 观察高三酰甘油相关疾病患者血清2-己基-环丙烷辛酸甲酯(CPOA2H)水平变化并探讨其临床意义.方法 选取2013年3月~2015年12月陕西省人民医院收治的临床资料完整的单纯肥胖症女性患者53例(肥胖组)、肥胖症经3个月低卡路里食物饮食者62例(肥胖低卡路里饮食组)、慢性肾病患者46例(慢性肾病组)、健康体检者60例(对照组).气相色谱-质谱法(GC-MS)检测血清脂肪酸和CPOA2H含量.结果 四组年龄、体重指数(BMI)、C反应蛋白(CRP)、总胆固醇(TC)、总三酰甘油(TAG)差异具有统计学意义(F=6.85~25.36,均P<0.05);肥胖组多数饱和脂肪酸(14∶0,16∶0)和单不饱和脂肪酸(14∶1,16∶1,18∶1,20∶1)均显著高于对照组(F=3.251~7.351,P<0.05);慢性肾病组多不饱和脂肪酸(18:2n-6,20:4n-6)显著低于对照组(F=4.351~6.251,P<0.05);四组血清CPOA2H水平差异具有统计学意义(F=19.95,P=0.005);对照组(r=0.63,P=0.033)和慢性肾病组(r=0.61,P=0.044)血清CPOA2H浓度与TAG正相关,肥胖组和肥胖低卡路里饮食组血清CPOA2H浓度与TC(r=0.70,P=0.011;r=0.48,P=0.021),TAG呈正相关(r=0.75,P=0.024;r=0.72,P=0.018).结论 高三酰甘油的肥胖症和慢性肾病患者血清CPOA2H升高,血清CPOA2H与TAG正相关,与BMI无关.
作者:艾文婷;杜洁;陈新军;姜保周;李秀红 刊期: 2017年第05期
目的 探讨血清标本在-20℃保存下生化检验结果变化及混匀对其影响.方法 收集的24例患者的新鲜血清进行常规生化检测后,分别置于四组编号相同容量为1 ml的样本管中,一组25℃保存24 h,一组4℃冰箱保存24 h,两组置于-20℃保存24 h(一组未混匀检测,一组混匀后检测),并将四组血清样本的生化结果与初始结果进行比较.结果 25℃室温保存24 h后,ALT,AST,TBIL和DBIL四项生化指标的平均水平均低于初始结果(t=2.130,2.308,2.134,3.286,P=0.042,0.029,0.042,0.003),其余生化指标结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05);4℃冰箱保存24 h后,TBIL,DBIL的水平低于初始水平(t=2.103,2.089,P=0.045,0.046),其余生化指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);-20℃冰箱保存24 h的两组血清样本中,未进行混匀的样本血清生化结果与初始结果比较,差异均有统计学意义(t=-4.218~11.710,均P<0.05),而混匀的血清样本的生化结果与初始结果比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 血清样本化学成分的均一性在4℃冰箱中不会有所改变,可将不能及时检测的血清样本置于其中保存,而-20℃冰箱保存的血清样本的上下层化学成分浓度差异显著,上高下低,而检测前进行充分混匀可保证其生化检测结果的准确性.
作者:崔福义;杨维 刊期: 2017年第05期
目的 研究癫痫患儿经单独使用丙戊酸(VPA)治疗前后血液中氨基酸变化情况,进一步分析血液氨基酸变化的原因,以便进一步为临床监测VPA肝毒性提供实验室依据.方法 疾病组选自2015年6月~2017年2月在北京儿童医院进行VPA治疗监测的癫痫患儿178例,对照组选自同时期的年龄和性别匹配的表观健康儿童178例.收集研究对象的临床基线资料和肝肾功能指标结果.利用荧光偏振免疫法监测患儿VPA的血药浓度,使用液相色谱-串联质谱技术检测患儿血液中氨基酸的浓度.比较疾病组VPA治疗前后以及对照组之间氨基酸的水平差异.结果 与对照组比较,VPA治疗前、后患儿的尿素和肌酐水平的差异无统计学意义(F=0.187~0.970,P>0.05).但肝酶谱的变化较大,与对照组和VPA治疗前相比,VPA治疗后癫痫患儿的ALT,AST和γ-GT水平显著增高(F=3.547~16.181,P<0.05).与对照组和VPA治疗前相比,经VPA治疗后的癫痫患儿血液中Cys,Gln,Glu,Gly,Leu和Lys的差异有统计学意义(F=3.489~71.896,P<0.05),Cys,Gln,Glu,Gly和Lys明显升高,而Leu水平明显降低.结论 ALT,AST和γ-GT的升高预示着VPA或其代谢产物具有一定的致肝损伤的作用.在VPA肝毒性作用的早期,患儿血氨基酸水平已经发生了明显的变化,因此血氨基酸可能是反映VPA肝毒性比较敏感的指标.定期检查VPA治疗后患儿的血氨基酸谱的变化情况,可能对临床监测VPA导致的肝毒性具有一定意义.
作者:李秭瑶;刘悦;王冬至;曹妍;李启亮;宋文琪 刊期: 2017年第05期
目的 血清IL-23表达水平在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者中的检测及其临床意义.方法 选取在延安大学附属医院就诊的50例PCOS患者为观察组,同时选取50例健康女性为正常对照组.采用生化分析仪检测血清超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)的水平;血细胞计数仪检测白细胞(white blood cell,WBC)的含量;ELISA法检测血清IL-23的表达水平.结果 观察组患者血清WBC水平分别为8 056.1±2 473.6mm3,显著高于对照组的6 286.2±1 071.4 mm3,差异有统计学意义(t=4.642,P<0.001),而hs-CRP在两组则无明显差异(观察组为4.2±3.7 mg/L,对照组为3.9±3.2 mg/L,t=0.434,P=0.665);PCOS患者血清IL-23水平为59.6±40.1pg/ml,显著高于健康女性人群(29.7±20.5 pg/ml),差异有统计学意义(t=4.695,P<0.001);PCOS患者血清IL-23诊断的佳cutoff值为31.05 pg/ml,其中敏感度74.0%,特异度62.0%,AUC值0.729(95%CI范围0.630~0.827,P<0.001).结论 PCOS患者血清IL-23水平显著上升,两者呈显著的正相关,可作为PCOS诊断的生物标志物之一.
作者:李丽春;张红莉;南刚 刊期: 2017年第05期
目的 探讨核转录因子(NF-κB)及肿瘤坏死因子(TNF-a)在儿童肺炎支原体肺炎(MPP)中表达水平及其辅助诊断价值.方法 纳入高邮市中医医院、常州市儿童医院、宝应县妇幼保健院2016年01月~2017年01月收治的MPP患儿150例,根据症状将其分为喘息组(75例)及非喘息组(75例),同期匹配正常健康儿童(75例)作为对照组,收集不同组别儿童血液样本并提取血清后,通过实时荧光定量PCR检测比较三组人群血清中NF-κB及TNF-α的表达量差异.应用ROC曲线及AUC(95%CI)寻找其作为诊断指标的佳临界值,同时评估其诊断效能.结果 MPP喘息组患儿血清中NF-κB及TNF-α的相对表达量分别为3.09±0.15和2.14±0.11,两者较正常对照组均升高,差异有统计学意义(t=11.03,6.987,均P<0.05).MPP非喘息组患儿血清NF-κB及TNF-α的相对表达量分别为2.28±0.11和1.61±0.08,两者较正常对照组均升高,差异有统计学意义(t=6.873,7.406,均P<0.05).喘息组患儿血清中NF-κB及TNF-α的相对表达量较非喘息组明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05).NF-κB诊断MPP的佳临界值为1.895,其敏感度为71.33%,特异度为91.89%,AUC为0.8265,95%CI为0.772 8~0.880 2;TNF-α诊断MPP的佳临界值为1.450,其敏感度为63.00%,特异度为90.54%,AUC为0.818 3,95%CI为0.765 1~0.871 6.结论 MPP患儿血清中NF-κB,TNF-α的表达量均较正常对照组升高,血清NF-κB及TNF-α可作为儿童MPP的辅助诊断指标.
作者:李勇;潘秋亚;朱寿华 刊期: 2017年第05期
目的 探讨血清β2-肾上腺素受体(β2-AR) mRNA和组织神经生长因子(NGF) mRNA水平的检测在儿童支气管哮喘气道重塑中的应用价值.方法 收集2015年3月~2017年3月在咸阳市第一人民医院儿科门诊就诊或住院的33例发生气道重塑的支气管哮喘患儿的血液及临床资料,并选取29例呼吸系统炎症疾病患儿作为对照组,采用实时荧光定量PCR(Real-time-PCR,RT-PCR)技术检测患儿治疗前后血清β2-AR mRNA和NGF mRNA的表达.比较分析血清β2-ARmRNA和NGF mRNA的变化与哮喘重塑发生之间的关系.采用高分辨螺旋CT,测量受试者气道的内径(L)、外径(D),通过公式T=(D-L)/2计算气道壁的厚度(T),测量气道腔面积(AI)、气道总横截面积(AO),通过以上指标评价哮喘气道重塑的发生.采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价血清β2-AR mRNA和NGF mRNA的临床意义.结果 与对照组比较,治疗后组的血清β2-AR mRNA水平下调和NGF mRNA水平上调,其差异均有统计学意义(t=37.27,36.53,均P<0.01).与治疗前组比较,治疗后组的血清β2-AR mRNA和NGF mRNA水平下调,其差异均有统计学意义(t=7.95,12.67,均P<0.01).治疗后组血清β2-AR mRNA和NGF mRNA水平呈现负相关性(r=-0.697,P<0.01),该组两标志物分别与气道内径(L),气道壁的厚度(T)及气道腔面积(AI)有明显相关性(r=0.775,-0.780,0.793,均P<0.01),(r=-0.750,0.763,-0.779,均P<0.01).治疗前组血清β2-AR mRNA和NGF mRNA水平呈现负相关性(r=-0.703,P<0.01),该组两标志物分别与气道内径(L),气道壁的厚度(T)及气道腔面积(AI)有明显相关性(r=0.782,-0.797,0.803,均P<0.01),(r=-0.772,0.787,-0.809,均P<0.01).血清β2-AR mRNA和NGF mRNA在治疗后表达量的AUC分别为0.767(95%CI:0.658~0.876,P=0.000);0.744(95%CI:0.632~0.856,P=0.000).根据SPSS统计结果计算出β2-AR和NGF在佳临界值处诊断重塑的敏感度和特异度分别为93.9%和96.2%,92.9%和95.7%.结论 检测血清β2-AR mRNA和NGF mRNA水平可应用于儿童支气管哮喘气道重塑疗效的评价,估计病情的发展状况,并为哮喘患儿的早期干预治疗、有效控制气道炎症及逆转哮喘病程进展提供依据.
作者:王萍;张熊 刊期: 2017年第05期
目的 探究程序性细胞死亡配体1(PD-L1)在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达情况及意义.方法 收集2013年2月~2015年12月于长海医院确诊的23例PBC患者和23例健康对照者外周血,用密度梯度离心法分离出PBMC后进行培养,以实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测PBMC中PD-L1的mRNA表达状况,以酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测培养液中TNF-α,TGF-β,IL-23和IL-17等细胞因子的表达量,两组之间的变量比较采用两独立样本t检验,以Pearson相关系数表示两变量之间的关系.结果 实验组与对照组PD-L1的mRNA表达水平为0.23±0.08 vs 1.27±0.40(t=12.23,P<0.000 1),差异具有统计学意义.Pearson相关性分析显示PD-L1与IL-23成负相关(r=-0.531,P=0.009),差异具有统计学意义.结论 PD-L1可能参与了PBC疾病形成过程,是该病预测和治疗潜在的生物标志物.
作者:李腾达;陈燕;谷明莉;黄元兰;张薇薇;孙懿;郭杰;刘云;徐贵霞;钱琤;邓安梅 刊期: 2017年第05期
目的 探讨血浆纤维蛋白单体水平对下肢骨折术后静脉血栓栓塞症(VTE)的预测价值.方法 回顾性分析2016年1~12月期间行下肢骨折内固定术的126例患者的临床资料,包括围手术期的血浆凝血酶原时间(PT),活化的部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),纤维蛋白原(Fib),D-二聚体(DD)和纤维蛋白单体(FM),并根据下肢彩色多普勒超声检查和随访结果分为VTE组(n=19)和无VTE组(n=107).比较患者手术前后各凝血纤溶指标的变化,通过受试者工作曲线下的面积(AUC)评价各指标对术后VTE形成的预测价值.结果 ①所有患者术后的APTT,Fib,DD和FM均显著升高,差异均有统计学意义(F=3.550~-9.223,均P<0.05),其中FM在术后第1天开始即显著升高,后逐渐降低.②两组术前的APTT,Fib,DD和FM比较,差异无统计学意义(F=0.652~1.120,均P>0.05).与无VTE组相比,VTE组的术后第1,5天的FM均显著升高,差异均有统计学意义(t=2.548~2.883,P<0.05).③在术后第3天的APTT,Fib,DD和FM四个指标中,FM的AUC和Youden指数大,分别为0.713(95%CI:0.620~0.823)与0.399.结论 下肢骨折术后存在凝血与纤溶系统的活化,术后第3天的血浆FM水平对术后VTE的形成具有较高的预测价值,效果优于DD.
作者:李虎 刊期: 2017年第05期
目的 探讨子宫颈癌、子宫癌和卵巢癌患者血浆D-二聚体水平检测的临床意义.方法 收集2013年10月~2015年7月在云霄县中医院和漳州开发区第一医院就诊的子宫颈癌患者35例,子宫癌患者32例,卵巢癌患者30例,测定血浆D-二聚体水平,分别与子宫颈炎、子宫肌瘤、卵巢囊肿患者和健康对照比较,并分析D-二-聚体水平与国际妇产科联盟(FIGO)分期的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析D-二聚体对3种恶性肿瘤的诊断价值.结果 子宫颈癌组D-二聚体水平高于子宫颈炎组,子宫癌组高于子宫肌瘤组,卵巢癌组高于卵巢囊肿组,差异均具有统计学意义(t=5.91~7.17,均P<0.01).子宫颈癌、子宫癌与卵巢癌之间差异无统计学意义(F=0.10,P>0.05).子宫颈炎组、子宫肌瘤组和卵巢囊肿组之间差异无统计学意义(F=2.47,P>0.05),事后检验,子宫颈炎组高于子宫肌瘤组,差异具有统计学意义(P<0.05).与健康对照组比较,子宫颈癌组、子宫癌组、卵巢癌组、子宫颈炎组和卵巢囊肿组明显增高,差异具有统计学意义(t=2.43~7.53,P<0.01~0.05),子宫肌瘤组与健康对照组差异无统计学意义(t=1.04,P>0.05).子宫颈癌、子宫癌和卵巢癌不同FIGO分期患者,血浆D-二聚体水平不同(F=15.06~19.02,P均<0.01),与分期的升级呈正相关(r=0.625~0.855,P均<0.01).D-二聚体诊断三种肿瘤的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.964,0.980和0.983,灵敏度为82.9%,90.6%和86.7%,特异度均为100%,具有较高诊断价值.结论 子宫颈癌、子宫癌和卵巢癌均存在血栓形成和纤溶亢进,血浆D-二聚体水平可以作为诊断的参考指标.
作者:方美华;陈丽珠;冯建捷 刊期: 2017年第05期
目的 检测闭合性颅脑损伤患者血清中S100-β蛋白水平,分析其对该病诊断及预后评估的临床价值.方法 采用免疫定量分析法检测31例健康对照组、40例重型颅脑损伤患者和34例轻型颅脑损伤患者入院时S100-β蛋白水平、受试者工作特征曲线(ROC)、预后GOS相关性分析,探讨其对闭合性颅脑损伤的辅助诊断效能.结果 对照组、轻型及重型闭合性颅脑损伤组S100-β蛋白水平分别为0.137±0.025,0.192±0.038和0.276±0.097ng/ml.与对照组相比,轻型(F=0.126,P=0.008)及重型闭合性颅脑损伤组(F=38.17,P=0.001)血清S100-β蛋白水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).轻型与重型颅脑损伤组间血清S100-β水平差异有统计学意义(P<0.05).血清S100-β蛋白鉴别对照组与轻型颅脑损伤组的AUC为0.870(95% CI:0.776~0.964,P<0.01);S100-p蛋白鉴别健康对照组与重型颅脑损伤组的AUC为0.914(95% CI:0.850~0.978,P<0.01).颅脑损伤患者血清S100-β蛋白水平与预后GOS评分呈负相关(r=-0.792,P<0.01).结论 S100-β蛋白在轻型及重型闭合性颅脑损伤患者血清中显著升高,且与预后GOS评分呈负相关,可用于颅脑损伤的辅助诊断及预后评估.
作者:朱娜;陈博;张小艳;奚逢瑜;张利侠 刊期: 2017年第05期
目的 探讨自动血细胞分析参数对骨髓增生异常综合征(MDS)和再生障碍性贫血(AA)的鉴别诊断价值.方法 收集北京大学深圳医院2002年12月~2011年2月确诊为MDS或AA患者的病案资料,对符合纳入标准的病例诊断当次检查的自动血细胞分析参数资料进行统计学分析,找出差异有统计学意义的血细胞分析参数,并以ROC曲线评价这些指标对MDS和AA的鉴别诊断价值.结果 33例MDS和36例AA患者被纳入研究.根据可供评估的资料,MDS患者组与AA患者组比较,平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)(328.58±17.24 g/L vs 342.47±18.75 g/L,n=33/36)显著减低(P=0.002 1),而单核细胞百分比(MONO%)(11.48±9.99 vs 6.94±2.50,n=32/34)、血小板分布宽度(PDW%)(13.51±4.24 vs 10.62±3.68,n=20/22)和血小板比容(PCT%) (0.11±0.10 vs 0.04±0.07,n=11/15)显著增高(P值分别为0.0202,0.0231和0.0356),其余指标两者比较差异无统计学意义.在适cut-off值条件下,以上四个指标鉴别诊断MDS和AA的ROC曲线下面积分别为0.706(95%可信区间:0.584~0.809),0.666(0.540~0.778),0.668(0.506~0.805)和0.745(0.538~0.894);MONO%和MCHC对鉴别诊断MDS和AA有较高的特异度和阳性预测值,分别为97.06%,88.89%和93.3%,80.0%.结论 MONO%和MCHC可作为鉴别诊断MDS和AA的简单易行指标.
作者:聂群;陈卓诚;聂李平;周宇;张红宇;李建新 刊期: 2017年第05期
目的 构建人肿瘤坏死因子(hTNF-α)表达质粒,并对其进行鉴定,优化hTNF-α蛋白表达条件使之在大肠埃希菌中实现高效表达.方法 应用PCR扩增技术获得hTNF-α基因片段并进行相应的鉴定,将鉴定后的hTNF-α基因克隆到pET24a载体中,获得pET24a-hTNF-α表达质粒.将此质粒转化入大肠埃希菌BL21 (DE3)中,并对其表达条件进行优化.结果 成功构建了pET24a-hTNF-α质粒,PCR和酶切技术进行鉴定,结果显示与目的片段一致.将此质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,得到佳表达条件为:M9+LB培养基,37℃,0.5 mmol/LIPTG,pH值=7.5,诱导时间为5h.优化后的菌体干重增高了2.56倍,hTNF-α产率增加3.68倍,hTNF-α表达率从9.38%增加到32.74%,增高了3.49倍.结论 优化了pET24a-hTNF-α质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达条件,使hTNF-α蛋白得到高效表达.
作者:靳占奎;王曦;杨乐;徐翠香;张丽洁 刊期: 2017年第05期
目的 探讨血浆钙连接蛋白B(S100B)和血浆血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)水平在缺血性脑卒中疾病中的临床应用价值.方法 收集85例于2014年1~10月在西安交通大学第一附属医院神经内科住院治疗的缺血性脑卒中患者的血液及临床资料,并从正常人群中随机抽取38例志愿者作为对照组.采用ELISA法检测所有研究对象的血浆S100B水平,使用Sysmex CA-7000全自动血凝仪检测其血浆vWF:Ag水平.采用GELOGIC9型彩色多普勒超声诊断仪分析所有研究对象的颈动脉内径及内中膜厚度.将脑卒中症患者分为完全卒中(CS)组、不完全卒中(NCS)组,与对照组比较,观察血浆S100B和vWF:Ag水平变化与缺血性脑卒中疾病之间的关系.结果 血浆vWF:Ag(%)在CS组、NCS组和对照组的水平为176.8±56.3,128.9±37.6,93.7±30.1,血浆S100B水平(μg/L)为2.8±1.3,1.9±0.9,1.3±0.7.在CS组、NCS组和对照组中,各研究对象的颈动脉内径(mm)为(6.27±0.32,6.52±0.57,6.78±0.73,内中膜厚度(mm)为0.88±0.09,0.71±0.07,0.52±0.06.两病例组血浆vWF:Ag和S100B水平与对照组比较均增高,其差异均有统计学意义(F=125.9,89.3,均P<0.01);CS组与NCS组vWF:Ag和S100B比较显著增高,差异均有统计学意义(F=125.9,89.3,P<0.01).CS组血浆vWF:Ag和S100B水平呈正相关(r=0.836,P<0.01),CS组的血浆vWF:Ag水平分别与颈动脉内径及内中膜厚度具有相关性(r=-0.853,0.923,P<0.01).CS组的血浆S100B水平分别与颈动脉内径及内中膜厚度具有相关性(r=-0.820,0.833,P<0.01).结论检测vWF:Ag和S100B水平可预测缺血性脑卒中疾病发生的危险程度,估计病情的发展状况.
作者:邓凯;许薇;李燕 刊期: 2017年第05期
目的 探讨肝损伤患者血清中去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的H2亚基(sH2a)水平和肝损伤进程的相关性.方法 纳入苏州九龙医院210例血清样本,其中70例肝损伤组患者,包括肝硬化、病毒性肝炎、脂肪肝,同时纳入140例对照组样本,包括高脂、溶血、黄疸、自身免疫性疾病、健康人.检测上述人群血清sH2a蛋白水平,对ELISA结果和临床诊断结果进行统计学分析.结果 ①140例对照组和70例肝损伤组的血清样本sH2a蛋白水平分别为105.92±53.41 ng/ml和69.25±27.45 ng/ml,差异有统计学显著性意义(F=14.375,t=5.397,P=0.000).②sH2a蛋白水平诊断肝损伤的敏感度为68.57% (95% CI:56.37%~79.15%),特异度为82.86% (95% CI:75.58%~88.70%),总符合率为78.10%(95%CI:71.88%~83.49%),KAPPA系数:0.510 6(95%CI:0.387 7~0.633 6).结论 血清sH2a ELISA检测试剂盒的符合率达到临床预期要求,可以作为新的血清标志物达到辅助诊断肝损伤相关疾病的效果.
作者:尹栩芳;樊一笋;汪琪;饶品彬;石立立 刊期: 2017年第05期
目的 探讨血清过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ) mRNA、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA检测在诊断颅内动脉瘤破裂中的临床应用价值.方法 通过RT-PCR技术检测87例颅内动脉瘤患者血清PPAR-γ mRNA,MMP-9 mRNA的表达,其中破裂组57例,未破裂组30例,并设立对照组,比较以上指标的变化.结果 破裂组、未破裂组和对照组血清PPAR-γ mRNA的表达量分别为0.23±0.03,0.59±0.11和0.87±0.15;血清MMP-9 mRNA在三组中的表达量分别为0.93±0.17,0.63±0.13和0.25±0.05.破裂组血清PPAR-γ mRNA表达量与对照组比较明显下调(t=23.79,P<0.01),而血清MMP-9 mRNA表达量则明显上调,差异有统计学意义(t=25.63,P<0.01);血清PPAR-γ mRNA的表达在破裂组的表达量低于未破裂组,而MMP-9 mRNA表达量高于未破裂组,差异有统计学意义(t=15.32,16.27,P<0.01).建立受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价两标志物的临床意义,以破裂组和未破裂组为因变量,血清PPAR-γmRNA,MMP-9 mRNA表达量的AUC分别为0.858(95%CI:0.775~0.940,P=0.000);0.842(95%CI:0.756~0.929,P=0.000).以对照组和未破裂组为因变量,血清PPAR-γ mRNA,MMP-9 mRNA表达量的AUC分别为0.827(95%CI:0.734~0.920,P=0.000);0.818(95%CI:0.722~0.914,P=0.000).结论 血清PPAR-γ mRNA,MMP-9 mRNA的检测可应用于颅内动脉瘤发生及病程进展的评价,并为颅内动脉瘤破裂的预测提供依据.
作者:巨涛;宋波;刘文刚;岳新鹏;李鲁;刘增强 刊期: 2017年第05期
目的 探讨血清胱抑素C(Cys C)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及尿白细胞介素-18(IL-18)对ICU重症儿童急性肾损伤(AKI)的早期诊断价值.方法 选取2015年6月~2017年2月入住西电集团医院ICU的重症患儿114例作为研究对象,根据患儿是否继发AKI,将其分为AKI组(64例)和非AKI组(50例),同时从同期健康体检者中选取50例作为对照组.检测各组受试者血肌酐(Scr)、尿素(BUN)、血清Cys C,NGAL及IL-18水平;采用Pearson分析法分析AKI组患儿各指标间相互关系;通过AKI患儿工作特征曲线(ROC)分析血清Cys C,NGAL及尿IL-18在AKI诊断中的价值.结果 AKI组患儿Scr,BUN,血清Cys C,NGAL及尿IL-18水平均明显高于非AKI组和对照组,差异均具有统计学意义(t=3.137~28.642,t1=7.653~33.672,均P<0.05);血清Cys-C,NGAL水平与Ser水平呈正相关(Beta=0.273,0.514,均P<0.05),尿IL-18水平与血清清蛋白(Alb)呈负相关(Beta=-0.342,P<0.05);血清Cys C,NGAL及尿IL-18 ROC曲线下面积(ACU)分别为0.872(95% CI:0.831~0.936),0.823(95% CI:0.641~0.925)和0.714(95%CI:0.598~0.833).结论 血清Cys C及NGAL水平升高早于Ser,可作为ICU重症儿童AKI早期临床诊断的可靠指标.
作者:白香妮;张英 刊期: 2017年第05期
目的 检测TNILP1基因的单核苷酸多态性(SNP),并分析各种基因型与系统性红斑狼疮(SLE)的关联性.方法 收集2013~2016年期间北京大学297例符合美国风湿病学诊断标准的SLE患者,和无相关症状的351例健康体检对照者的血液标本,用非标记探针法高分辨率熔解曲线的方法,检测TNIP1基因rs7708392 (G/C)位点的多态性.结果 TNIP1基因rs7708392位点的多种基因型在非标记探针法高分辨熔解曲线中分辨出来.SLE患者GG,GC,CC三种基因型出现的频率依次为36.0%,51.5%和12.5%,对照组则分别为32.5%,46.7%和20.8%,经卡方检验,两组别基因频率的差异有统计学意义(x2=7.940,P=0.019).次要等位基因(C)的出现与关节炎发病率(P=0.013,OR=0.65,95% CI=0.47~0.92)和异常的核抗体(P=0.022,OR=0.68,95% CI=0.49~0.95)相关.TNIP1基因SNP与SLE其他的诊断标准没有关联.结论 在中国人群中,TNIP1基因rs7708392多态性与SLE的疾病风险,SLE诊断指标中的关节炎和抗核抗体相关.
作者:白丽霞;李璐 刊期: 2017年第05期